一種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒及其制備方法
【專利摘要】一種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒及其制備，將水溶液樣本放置室溫，充分解凍；加入-20度同等體積的混合溶液-基本裂解液QL4，在50度水浴中反應5分鐘；離心，收集上清液；QL4物質組成及體積比為：50-100％甲醇，體積比1-7％的甲酸，此試劑盒制備方法簡單、成本較低。
【專利說明】一種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒及其制備
【技術領域】
[0001]本技術屬于分析化學應用領域，具體涉及表面激光解析質譜領域。
【背景技術】
[0002]表面激光解析質譜是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質譜，其中以基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALD1-T0F-MS)為最重要的實例，此項發(fā)明獲得過諾貝爾化學獎。主要由兩部分組成:基質輔助激光解吸電離離子源(MALDI)和飛行時間質量分析器(TOF)。MALDI的原理是用激光照射樣品與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量傳遞給生物分子，在電離過程中將質子轉移到生物分子或從生物分子得到質子，而使生物分子電離的過程。因此它是一種軟電離技術，適用于混合物及生物大分子的測定。TOF的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據(jù)到達檢測器的飛行時間不同而被檢測即測定離子的質荷比(M/Z)與離子的飛行時間成正比，檢測離子。MALD1-T0F-MS具有靈敏度高、準確度高及分辨率高等特點，為生命科學等領域提供了一種強有力的分析測試手段。
[0003]然而，以基質輔助激光解析電離飛行時間質譜為首的所有基于表面激光解析的質譜都需要將樣品制備在特制靶板上面，其操作是將樣品分散在基質分子中并形成晶體。當用激光照射晶體時，基質從激光中吸收能量，樣品解吸附，基質-樣品之間發(fā)生電荷轉移使得樣品分子電離，電離的樣品在電場作用下飛過真空的飛行管，根據(jù)到達檢測器的飛行時間不同而被檢測，即通過離子的質量電荷之比(M/Z)與離子的飛行時間成正比來分析離子，并測得樣品分子的分子量。焦點問題就在于通用的基質分子的分子量在1000-3000da，造成了過量的背景質譜峰。這就決定了所有此類基于表面激光解析的質譜分析只能適用于大分子檢測，比如蛋白質，長鏈多肽，核酸，高分子材料等等，而不能應用于小分子檢測(分子量小于100da)，或者說基于表面激光解析的質譜分析的高靈敏度/高通量等獨特的優(yōu)勢無法施展在小分子分析檢測上面.而分子量小于100da的小分子卻是對人類最重要的最具應用價值的一類化學產(chǎn)品，例如95%以上的藥物小分子，所有的氨基酸，維生素等等和人類生活健康相關的化學物質。
[0004]目前現(xiàn)有技術針對小分子檢測和篩選還停留在光譜法檢測，例如熒光發(fā)光檢測或者衍生出可以熒光檢測的底物，但此類檢測要求目標小分子分子結構具有光活性集團，另一弊端就是往往光度法靈敏度較低，檢測不到微量的小分子濃度。液相質譜(LC-MS)及氣相質譜(GC-MS)的已經(jīng)開始應用在小分子的檢測和高通量篩選。但需要消耗大量的人力和溶劑耗材，而且一個樣品從制備到質譜分析再到出結果需要相當長一個過程，根據(jù)要求不同，分析一個樣品從樣品制備到拿到結果需要30-60分鐘，遠遠不能滿足現(xiàn)代生物醫(yī)藥發(fā)展的高通量篩選要求。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]發(fā)明目的:找到一種制備方法簡單、成本較低的樣品制備方法，節(jié)省開支與時間。
[0006]技術方案:一種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒，由常規(guī)水容易樣品、基本裂解液QL4組成；QL4物質組成及體積比為:50-100%甲醇，體積比1-7%的甲酸。
[0007]—種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒的制備，具體步驟如下:將水溶液樣本放置室溫，充分解凍；加入-20度同等體積的混合溶液-基本裂解液QL4，在50度水浴中反應5分鐘；離心，收集上清液；QL4物質組成及體積比為:50-100%甲醇，體積比1-7%的甲酸。
[0008]優(yōu)選方案:QL4物質組成及體積比為:100%甲醇，體積比I %的甲酸。
[0009]有益效果:1、制備方法簡單；2、成本較低。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010]圖1檢測到小分子藥物在水溶液中的質譜圖；
[0011]圖2同時檢測多種不同類別和分子結構的小分子質譜圖
【具體實施方式】
[0012]常規(guī)水溶液樣品制備試劑盒基本裂解液QL4及樣品制備方法
[0013]將水溶液樣本放置室溫，充分解凍；加入-20度同等體積的混合溶液-基本裂解液QL4，在50度水浴中反應5分鐘；離心，收集上清液；QL4物質組成及體積比為:50-100%甲醇，體積比1-7%的甲酸。
[0014]如圖1所示為將藥物分析中檢測到某種小分子藥物成分的質譜圖，檢測線達到納摩爾級別，靈敏度超過MALDI和ESI，同時通量可達到每日9000個樣品的分析處理能力。
[0015]本技術發(fā)明還可以同時檢測多種不同類別和分子結構的小分子。如圖2所示。
【權利要求】
1.一種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒，其特征在于，由常規(guī)水容易樣品、基本裂解液QL4組成；QL4物質組成及體積比為:50-100%甲醇，體積比1-7%的甲酸。
2.權利要求1所述的一種應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒的制備，其特征在于，具體步驟如下:將水溶液樣本放置室溫，充分解凍；力口入-20度同等體積的混合溶液-基本裂解液QL4，在50度水浴中反應5分鐘；離心，收集上清液；QL4物質組成及體積比為:50-100%甲醇，體積比1-7%的甲酸。
3.根據(jù)權利要求1所述的應用于小分子定性定量分析檢測和高通量篩選常規(guī)水容易樣品試劑盒的制備，其特征在于，QL4物質組成及體積比為:100%甲醇，體積比1%的甲酸。
【文檔編號】G01N30/72GK104237425SQ201410453831
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月9日 優(yōu)先權日:2014年9月9日
【發(fā)明者】成曉亮, 鄭可嘉 申請人:武漢品生科技有限公司