專(zhuān)利名稱(chēng)：穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高效液相色譜方法，特別涉及一種中藥成分的含量測(cè)定技術(shù)。
背景技術(shù)：
扶正解毒散是根據(jù)《中華人民共和國(guó)獸藥典》2010版二部扶正解毒散項(xiàng)下規(guī)定，由黃芪、板藍(lán)根和淫羊藿三味中藥按一定比例組合超微粉碎而成的成方制劑，具有扶正祛邪、清熱解毒的功效。主治雞法氏囊病。但是其項(xiàng)下質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并未規(guī)定各有效成分的鑒別方法和含量測(cè)定方法。為了完善扶正解毒散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)，本發(fā)明對(duì)扶正解毒散中黃芪的成分毛蕊異黃酮葡萄糖苷進(jìn)行含量測(cè)定方法的探索，并確定一種穩(wěn)定的扶正 解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法。。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在解決扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定問(wèn)題，以解決獸藥典中未規(guī)定毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法。具體方法技術(shù)方案如下
一種高效液相色譜法測(cè)定扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的方法，其色譜條件
為
a.填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；
b.流動(dòng)相為混合比例為20:80的乙腈和O.2%甲酸溶液；
c.紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。d.所用流動(dòng)相流速為lml/min ； e.進(jìn)樣體積為10 μ I。1.毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制
a.標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密稱(chēng)取毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品O. 01042g,置于200ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容至200ml。b.用甲醇稀釋不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液精密量取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液5ml，加甲醇定容至10ml，混勻后，再精密量取5ml至另一容量瓶中，加甲醇定容至10ml，按照此方法倍比稀釋?zhuān)瞥蓾舛确謩e為 52.1 μ g/ml、26. 05 μ g/ml、13. 03 μ g/ml、6. 51 μ g/ml、3. 26 μ g/ml的毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液。C.以不同濃度的毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液響應(yīng)的峰面積對(duì)濃度作圖，得到毛蕊異黃酮葡萄糖苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。見(jiàn)附圖
。2.供試品的制備
取扶正解毒散約lg，精密稱(chēng)定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱(chēng)定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。3.精密度試驗(yàn)
取供試品溶液，精密吸取10 μ I進(jìn)樣，重復(fù)5次，記錄峰面積，計(jì)算該方法精密度。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表。
權(quán)利要求
1.一種穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于步驟如下(1)采用高效液相色譜法測(cè)定；(2)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-O.2% 甲酸溶液(20:80)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm，理論板數(shù)按毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;(3)對(duì)照品溶液的制備取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每 Iml含50 μ g的溶液，即得；(4)供試品溶液的制備取本品粉末約lg，精密稱(chēng)定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇 50ml，稱(chēng)定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)， 精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度， 搖勻，即得；(5)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定， 即得。
2.如權(quán)利要求1所述，穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于采用高效液相色譜法。
3.如權(quán)利要求1所述，扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于以乙腈-O. 2 %甲酸溶液(20:80 )為流動(dòng)相。
4.如權(quán)利要求1所述，穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為對(duì)照品。
5.如權(quán)利要求1所述，穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于所用檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器。
6.穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于檢測(cè)波長(zhǎng)為 260nm。
7.穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，其特征在于所用溶劑為甲醇。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種穩(wěn)定的扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法，以乙腈-0.2％甲酸溶液(20:80)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)260nm，以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為對(duì)照品，用甲醇回流、過(guò)濾、蒸干、溶解處理樣品，采用高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器檢測(cè)扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量。此方法線(xiàn)性關(guān)系良好、精密度、重現(xiàn)性良好，可作為扶正解毒散中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測(cè)定方法，簡(jiǎn)單、快速、易操作。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102998393SQ20121052872
公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月11日
發(fā)明者于瑞, 劉瑞麗, 劉海新, 劉琴, 王林 申請(qǐng)人:河南省康星藥業(yè)股份有限公司