專利名稱：基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體地說涉及一種基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法。
背景技術(shù)：
食用植物油既是人體重要的能源和營養(yǎng)源 ，同時也是食品工業(yè)的重要基礎(chǔ)原料。目前市場上銷售的食用植物油主要有大豆油、菜籽油、茶油、花生油、棕櫚油、米糠油等。食用植物油因其種類不同、營養(yǎng)價值以及油料分布不均等因素的影響，不同的食用植物油價格差異很大。一些生產(chǎn)經(jīng)營者為了獲取暴利，在高價植物油中摻入廉價植物油，如在芝麻油中摻入菜油、棉籽油、大豆油、葵花油；在菜油中摻入棕櫚油、棉籽油；在橄欖油、茶油中加入花生油、大豆油、棉籽油、菜籽油等。將售價高的食用植物油中摻入價格低的同種油脂或不同種油脂的互摻摻偽檢驗，一直是油脂工作者關(guān)注的問題。由于油脂摻偽的種類多、類別復(fù)雜，給油脂摻偽分析檢驗帶來困難，主要體現(xiàn)在以下幾個方面①油脂產(chǎn)品種類多，具商業(yè)價值的有數(shù)十種油脂組成成分及結(jié)構(gòu)特征受地域、環(huán)境、品種等的影響變化很大，尤其是近十幾年來，品種改良工作發(fā)展很快，同一種類的新品種與老品種的油脂組成成分具有較大的差異；③摻偽思路與手段千差萬別，造成分析難度大，測定結(jié)果通用性差。正是由于上述原因，到目前為止，還沒有關(guān)于食用植物油互摻摻假判別的標(biāo)準(zhǔn)與通用技術(shù)方法，導(dǎo)致食用植物油互摻摻假的現(xiàn)象時有發(fā)生，這嚴(yán)重影響了食用植物油生產(chǎn)經(jīng)營者的利益和消費(fèi)者的利益。因此，科學(xué)有效的食用植物油互摻摻假快速甄別檢測方法和控制標(biāo)準(zhǔn)的建立已成為當(dāng)今食用植物油產(chǎn)業(yè)中急需解決的重要課題。為于維護(hù)食用植物油合法生產(chǎn)經(jīng)營者和消費(fèi)者的利益，國內(nèi)外應(yīng)運(yùn)而生了經(jīng)典理化特性分析方法，色譜與光譜等現(xiàn)代儀器分析方法，以及化學(xué)計量法等對食用油脂互摻摻假進(jìn)行定性以及定量的鑒別，但是采用理化特性分析以及色譜與光譜等方法分析油脂摻假，大多局限于收集每種油脂單一的樣品，而沒有系統(tǒng)的分析每種油脂所有不同產(chǎn)地和品種的樣品，不具備普遍的適用性；而化學(xué)計量法是對所有植物油脂量化的理化特性，借助計算機(jī)進(jìn)行大量地迭代解析，系統(tǒng)地識別所有的植物油脂，但是，化學(xué)計量法要求具有準(zhǔn)確的方法獲取油脂量化的理化特性以及大量的油脂樣品建立數(shù)學(xué)模型及其驗證。標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜又稱對照指紋圖譜，是一個代表一批不同產(chǎn)地或不同品質(zhì)等樣品指紋圖譜共同特征的圖譜。在指紋圖譜數(shù)據(jù)處理中，可以將標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜作為參照圖譜，將待測試圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜匹配，從而進(jìn)行相似度評價測試樣品的質(zhì)量。標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜被廣泛使用在中藥質(zhì)量控制和檢測等方面，并且形成了中藥標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的一系列體系。但是，目前沒有關(guān)于基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的食用油摻假檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，該方法運(yùn)用氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)(GC-MS技術(shù))獲取純茶籽油樣品的標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸指紋圖譜，借助待測茶籽油樣品脂肪酸指紋圖譜與純茶籽油樣品的標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸指紋圖譜的相似度，定性的判別所檢測茶籽油樣品的摻假情況。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，該方法包括下述順序的步驟a、茶籽油純油樣品的收集收集不同產(chǎn)地、不同品種的茶籽油純油樣品若干個；一般采集10-20個為宜；茶籽油純油樣品的制備可采用浸出法或壓榨法。b、甲酯化處理與氣質(zhì)連用分析對茶籽油純油樣品進(jìn)行甲酯化處理，通過氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)采集茶籽油純油樣品的原始脂肪酸指紋圖譜；C、共有峰的確定與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的確定設(shè)定所有茶籽油純油樣品中代表各脂肪酸的各峰的共有率大于70%作為共有峰，計算出茶籽油純油樣品每一個共有峰的平均峰面 積、平均保留時間以及對應(yīng)平均強(qiáng)度信號值；根據(jù)茶籽油純油樣品每一個共有峰的平均峰 面積、平均保留時間以及對應(yīng)的平均強(qiáng)度信號值，采用EXCEL軟件繪制純茶籽油的脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；d、相似度的計算與摻假判別通過氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)采集待檢測茶籽油樣品的原始脂肪酸指紋圖譜，采用夾角余弦法計算檢測茶籽油樣品中脂肪酸組成與茶籽油脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度，當(dāng)相似度小于O. 9990，則判斷茶籽油樣品摻入了其他食用植物油。上述甲酯化處理采用酸堿結(jié)合法，其工藝過程為取IOOmg茶籽油置于IOml的具塞試管中，加入ImlUmoI/LKOH-甲醇溶液，在40°C水浴中反復(fù)振搖30min，靜置15min，置入70°C水浴中將其蒸干，加入5%體積濃度H2SO4-甲醇溶液2ml，在70°C水浴中振搖60min，加入2ml正己烷，靜置lOmin，取上清液于2ml的具塞試管中，加入l_2g無水硫酸鈉，備用。上述氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)(GC-MS)的分析條件為島津GCMS-2010、HB-88毛細(xì)管柱(100. OmXO. 32mmX0. 25 μ m), He純度99. 999%、進(jìn)樣口溫度250°C、柱溫初始溫度 120°C，保持 lmin，10°C /min 升溫至 175°C，保持 10min、5°C /min 升溫至 210°C，保持5min、5°C /min升溫至230°C,保持15min、柱流速I. 04ml/min、分流比:10:O、離子源溫度200°C、接口溫度220°C、質(zhì)核比掃描范圍50 700m/z、進(jìn)樣量:1μ I。上述利用夾角余弦法計算相似度(夾角余弦)的公式如下
權(quán)利要求
1.一種基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，其特征在于該方法包括下述順序的步驟 a、茶籽油純油樣品的收集收集不同產(chǎn)地、不同品種的茶籽油純油樣品； b、甲酯化處理與氣質(zhì)連用分析對茶籽油純油樣品進(jìn)行甲酯化處理，通過氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)采集茶籽油純油樣品的原始脂肪酸指紋圖譜； C、共有峰的確定與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的確定設(shè)定所有茶籽油純油樣品中代表各脂肪酸的各峰的共有率大于70%作為共有峰，計算出茶籽油純油樣品每一個共有峰的平均峰面積、平均保留時間以及對應(yīng)平均強(qiáng)度信號值；根據(jù)茶籽油純油樣品每一個共有峰的平均峰面積、平均保留時間以及對應(yīng)的平均強(qiáng)度信號值，繪制純茶籽油的脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜； d、相似度的計算與摻假判別通過氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)采集待檢測茶籽油樣品的原始脂肪酸指紋圖譜，采用夾角余弦法計算檢測茶籽油樣品中脂肪酸組成與茶籽油脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度，當(dāng)相似度小于O. 9990，則判斷茶籽油樣品摻入了其他食用植物油。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，其特征在于所述a步驟中茶籽油純油樣品的制備采用浸出法或壓榨法。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，其特征在于所述b步驟中甲酯化處理采用酸堿結(jié)合法，其工藝過程為取IOOmg茶籽油置于IOml的具塞試管中，加入ImlUmoI/LKOH-甲醇溶液，在40°C水浴中反復(fù)振搖30min，靜置15min，置入70°C水浴中將其蒸干，加入5%體積濃度的H2SO4-甲醇溶液2ml，在70°C水浴中振搖60min,加入2ml正己燒,靜置IOmin,取上清液于2ml的具塞試管中，加入l_2g無水硫酸鈉，備用。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，其特征在于所述b步驟中氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)的分析條件為島津GCMS-2010、HB-88毛細(xì)管柱、He純度99. 999%、進(jìn)樣口溫度250°C、柱溫初始溫度120°C，保持lmin，10°C /min升溫至 175°C，保持 10min、5°C /min 升溫至 210°C，保持 5min、5°C /min 升溫至 230°C，保持15min、柱流速:1.04ml/min、分流比:10:0、離子源溫度:200°C、接口溫度:220°C、質(zhì)核比掃描范圍50 700m/z、進(jìn)樣量1 μ I。
全文摘要
一種基于脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的茶籽油摻假檢測方法，是一種運(yùn)用氣相色譜與質(zhì)譜連用技術(shù)(GC-MS技術(shù))獲取純茶籽油樣品的標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸指紋圖譜，借助待測茶籽油樣品脂肪酸指紋圖譜與純茶籽油樣品的標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸指紋圖譜的相似度，定性地判別所檢測茶籽油樣品的摻假情況。
文檔編號G01N30/88GK102830195SQ201210319379
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月3日
發(fā)明者吳衛(wèi)國, 彭思敏, 唐芳 申請人:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)