專(zhuān)利名稱(chēng)：檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的試劑盒。
背景技術(shù)：
3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)是喹乙醇、乙酰甲喹和喹烯酮在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的代謝物。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)喹噁啉類(lèi)原形藥物及代謝物存在著明顯的安全性問(wèn)題，具有明顯的致畸、致癌、致突變、光敏和腎上腺皮質(zhì)損害等毒副作用，嚴(yán)重危害了人和動(dòng)物的健康。國(guó)際上有關(guān)喹噁啉類(lèi)藥物的最高殘留限量規(guī)定非常嚴(yán)格。歐盟規(guī)定卡巴氧和喹乙醇以及其代謝產(chǎn)物在動(dòng)物性食品中不得檢出而且規(guī)定這兩種獸藥禁止銷(xiāo)售。我國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào)規(guī)定,喹乙醇最高殘留限量為喹乙醇+3-甲基喹卩惡啉-2-羧酸4ug/kg(肌肉),50ug/kg(肝臟)，2mg/kg (飼料)。目前國(guó)內(nèi)外研究主要有色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)和免疫分析技術(shù)等。TLC法的特異性較差，靈敏度也相對(duì)較差，所需標(biāo)準(zhǔn)品濃度較高，潛在的污染性較高，HPLC法所需儀器設(shè)備投資大，操作技術(shù)要求高，凈化柱消耗較多，檢測(cè)成本較高，免疫親和柱特異性較好，但需結(jié)合HPLC儀和熒光光度計(jì)才能定量檢測(cè)，檢測(cè)技術(shù)要求和成本較高，而ELISA法相比而言，操作簡(jiǎn)便，快捷，污染較小，靈敏度也較高，適合批量樣品的普檢和篩選，特別是研制成功的試劑盒，給檢測(cè)人員帶來(lái)很大的方便，同時(shí)，也節(jié)省了成本，符合目前國(guó)際上檢測(cè)領(lǐng)域的發(fā)展方向。免疫膠體金層析技術(shù)不需任何儀器設(shè)備和試劑，特別適合于基層單位大批量時(shí)間緊的檢測(cè)和大面積普查，因此酶免疫法在飼料安全分析中應(yīng)用廣泛。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的試劑盒。本發(fā)明提供的檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗喹乙醇代謝物單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞5A2分泌的單克隆抗體。所述抗喹乙醇代謝物單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞5A2(簡(jiǎn)稱(chēng)雜交瘤細(xì)胞5A2)已于2012年2月15日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱(chēng)CGMCC，地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào))，保藏號(hào)為CGMCC No. 5778。所述試劑盒可為如下I)至4)中的任意一種I)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物、所述單克隆抗體和酶標(biāo)記抗抗體的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原；2)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物、所述單克隆抗體和抗抗體的試劑盒；其中，所述抗抗體作為包被原；3)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物和所述單克隆抗體的試劑盒；其中，所述單克隆抗體作為包被原；4)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物和所述單克隆抗體的酶標(biāo)記物的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗喹乙醇代謝物單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞5A2分泌的單克隆抗體；所述抗喹乙醇代謝物單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞5A2的保藏號(hào)為 CGMCC No. 5778。
2.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其特征在于所述試劑盒為如下I)至4)中的任意一種 1)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物、所述單克隆抗體和酶標(biāo)記抗抗體的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原； 2)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物、所述單克隆抗體和抗抗體的試劑盒；其中，所述抗抗體作為包被原； 3)包括式(I)所示化合物的酶標(biāo)記物和所述單克隆抗體的試劑盒；其中，所述單克隆抗體作為包被原； 4)包括式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物和所述單克隆抗體的酶標(biāo)記物的試劑盒；其中，所述偶聯(lián)物作為包被原；
3.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于所述載體蛋白為卵清蛋白或牛血清白蛋白。
4.如權(quán)利要求I至3中任一所述的試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括洗滌液、樣品濃縮液、底物顯色液和終止液中的至少一種。
5.權(quán)利要求I至4中任一所述試劑盒在檢測(cè)喹乙醇代謝物中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求I至4中任一所述試劑盒在檢測(cè)待測(cè)樣本是否含有喹乙醇代謝物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的試劑盒。本發(fā)明提供的檢測(cè)3-甲基喹噁啉-2-羧酸的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括抗保藏號(hào)為CGMCC No.5778的喹乙醇代謝物單克隆抗體雜交瘤5A2分泌的單克隆抗體。本發(fā)明提供的試劑盒包括所述單克隆抗體和式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯(lián)物。本發(fā)明試劑盒具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、精密度高、成本低、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短、適合各種單位使用、儲(chǔ)存簡(jiǎn)單、保質(zhì)期長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)；能同時(shí)快速檢測(cè)大批量樣品，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)。本發(fā)明提供的酶聯(lián)免疫試劑盒，適用于測(cè)定飼料、動(dòng)物組織或排泄物中喹乙醇代謝物的殘留量。本發(fā)明的抗體、試劑盒及檢測(cè)方法在喹乙醇代謝物的檢測(cè)中將發(fā)揮重大作用。式(I)。
文檔編號(hào)G01N33/577GK102621322SQ20121008905
公開(kāi)日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月29日
發(fā)明者何丹婷, 李淑芳, 江海洋, 潘靜茹, 王世恩, 王照鵬 申請(qǐng)人:北京維德維康生物技術(shù)有限公司