專(zhuān)利名稱(chēng)：一種二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡，是一種檢測(cè)丙戊酸鈉的檢測(cè)器具，屬于丙戊酸鈉血藥濃度監(jiān)測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
丙戊酸鈉是臨床常用的廣譜抗癲癇藥物，尤其對(duì)單純失神發(fā)作、全身性強(qiáng)直-陳攣發(fā)作、肌陳攣發(fā)作療效顯著，對(duì)單純部分性發(fā)作、復(fù)雜部分性發(fā)作也有良好療效，有效血藥濃度范圍為50-100 μ g/mL。但丙戊酸鈉體內(nèi)過(guò)程和療效個(gè)體差異大，劑量與血藥濃度的相關(guān)性不穩(wěn)定，且血藥濃度過(guò)高易引起惡心、嘔吐及肝功能損害等不良反應(yīng)，因而通過(guò)監(jiān)測(cè)血藥濃度來(lái)調(diào)整劑量，是確保療效和用藥安全的必要手段。測(cè)定體內(nèi)丙戊酸鈉血藥濃度最常用的方法為熒光偏振免疫法，也有采用填充柱氣相色譜法，前者需用專(zhuān)用的試劑盒，價(jià)格昂貴，也不能分離和排除丙戊酸代謝產(chǎn)物和內(nèi)源性雜質(zhì)的干擾，后者分離效果欠佳、靈敏度低，測(cè)定低濃度樣品誤差較大，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。 而且這些方法普遍存在操作繁瑣，對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備要求高，需要專(zhuān)門(mén)技術(shù)人員操作等缺點(diǎn)。為此，本實(shí)用新型擬發(fā)明一種基于丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物抗原性的免疫學(xué)檢測(cè)方法，采取免疫學(xué)競(jìng)爭(zhēng)法的原理，結(jié)合膠體金標(biāo)記技術(shù)和免疫層析法設(shè)計(jì)的一種快速檢測(cè)試劑，可快速特異地檢測(cè)血清中的丙戊酸鈉含量。反應(yīng)是利用丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物抗原性而建立的一種蛋白檢測(cè)方法，具有特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可避免其它檢測(cè)方法的假陽(yáng)性導(dǎo)致的誤檢問(wèn)題。同時(shí)檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)單快速，無(wú)需特殊的儀器設(shè)備，結(jié)果準(zhǔn)確，準(zhǔn)確率大于95%。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于提供一種能檢測(cè)丙戊酸鈉的檢測(cè)器具，應(yīng)用免疫學(xué)的方法直接檢測(cè)患者血清的丙戊酸鈉含量，克服現(xiàn)有血藥監(jiān)測(cè)技術(shù)的缺陷，建立基于免疫學(xué)特異性的檢測(cè)方法。本實(shí)用新型的技術(shù)方案一種二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡，其為在長(zhǎng)條扁平薄殼狀的檢測(cè)卡外殼1中設(shè)置測(cè)試條2，檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔3和加樣孔4 ；測(cè)試條2是由支承背板5上通過(guò)不干膠在其上依次粘貼樣品墊8、膠體金膜7、硝酸纖維素膜6、和吸水膜9所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端疊置粘貼吸水膜9，另一端疊置粘貼樣品墊8，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜7 ；膠體金膜為含抗丙戊酸鈉抗體膠體金標(biāo)記的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有兩條檢測(cè)帶和一條質(zhì)控帶，依次是含丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶10 (靈敏度50 μ g/mL)和檢測(cè)帶11 (靈敏度100 μ g/mL)，含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶12，測(cè)試條置入檢測(cè)卡外殼內(nèi)，樣品墊正對(duì)加樣孔，硝酸纖維素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔。采用上述丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡，檢測(cè)樣品是癲癇患者的血清樣品。樣品的處理方法是[0009]在患者連續(xù)服藥一周以后，于早晨服藥前抽取靜脈血2mL，3000r/min離心lOmin， 分離血清，立即處理或于-20°C下48h以?xún)?nèi)保存。當(dāng)檢測(cè)帶10、檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶12同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡帶，表示被檢測(cè)樣品中丙戊酸鈉含量低于50yg/mL;當(dāng)檢測(cè)帶10不顯示顏色，檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測(cè)樣品中丙戊酸鈉含量高于50 μ g/mL且低于100 μ g/mL ；當(dāng)檢測(cè)帶10、檢測(cè)帶11均不顯示顏色，只有質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測(cè)樣品中丙戊酸鈉含量高于100 μ g/mL ；當(dāng)檢測(cè)帶10、檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶12均不顯色，則表明測(cè)試條已失效。本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)是能檢測(cè)癲癇患者血清中含有的丙戊酸鈉，易于制備且節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用，使用方便，檢測(cè)快速，靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。

圖1 二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡外殼及測(cè)試條在外殼內(nèi)的安置圖。1、外殼，2、測(cè)試條，3、檢測(cè)窗孔，4、加樣孔。圖2測(cè)試條的硝酸纖維素膜上顯示印跡示意圖。6、硝酸纖維素膜，10、靈敏度為 50 μ g/mL的檢測(cè)帶，11、靈敏度為100 μ g/mL的檢測(cè)帶，12、質(zhì)控帶。圖3 二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡的檢測(cè)試條結(jié)構(gòu)示意圖。5、支承背板，6、硝酸纖維素膜，7、膠體金膜，8、樣品墊，9、吸水膜。
具體實(shí)施方式
本實(shí)用新型結(jié)合具體實(shí)施例參見(jiàn)附圖進(jìn)一步說(shuō)明如下實(shí)施例1一種二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡，它是在檢測(cè)卡外殼1中設(shè)置測(cè)試條2，檢測(cè)卡外殼1的結(jié)構(gòu)及測(cè)試條2的設(shè)置參見(jiàn)附圖1，檢測(cè)卡外殼1為長(zhǎng)條扁平薄殼狀外殼，長(zhǎng)70mm， 寬20mm，厚5mm，薄殼壁厚1mm，由工程塑料制成。檢測(cè)卡外殼1由殼蓋與殼座兩半聯(lián)接構(gòu)成，在檢測(cè)卡外殼1殼蓋上有檢測(cè)窗孔3和加樣孔4。測(cè)試條2放置在檢測(cè)卡外殼1的殼座內(nèi)。測(cè)試條2是多層結(jié)構(gòu)的窄條薄片，片長(zhǎng)約60mm，片寬約4mm，厚度約2. 5mm。測(cè)試條2是多層結(jié)構(gòu)底層是支承背板5，為聚氯乙烯塑料薄片，厚約0. 5mm,長(zhǎng)60mm，寬4mm ；支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，硝酸纖維素膜厚0. 5mm,長(zhǎng)20_25mm，寬4mm。硝酸纖維素膜6上有三條間隔開(kāi)的橫向顯示印跡帶，參見(jiàn)附圖2，三條顯示印跡帶中，其中兩條是靈敏度為50 μ g/mL的檢測(cè)帶10及靈敏度為100 μ g/mL的檢測(cè)帶11，含不同濃度丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物；另一條是質(zhì)控帶12，含抗兔抗體或抗鼠抗體。支承背板5 —端部上疊置粘貼吸水膜9，支承背板5另一端部上疊置粘貼樣品墊8，吸水膜9內(nèi)端與樣品墊8內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜6 —端搭接，在樣品墊8與硝酸纖維素膜6的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜7，膠體金膜7是含抗丙戊酸鈉單克隆抗體或多克隆抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜。膠體金膜7厚0. 5-0. 8mm,長(zhǎng)5_，寬4_。樣品墊8厚0. 5-0. 8mm,長(zhǎng)20_， 寬4mm。吸水膜9厚0. 5-0. 8mm,長(zhǎng)16_20mm，寬4mm。膠體金膜7、樣品墊8及吸水膜9與硝酸纖維素膜搭接長(zhǎng)度為l_2mm。吸水膜9材料是吸水紙，樣品墊8材料是吸水玻璃纖維膜。本實(shí)用新型二合一丙戊酸鈉檢測(cè)卡用于癲癇患者血清中丙戊酸鈉的檢測(cè)。實(shí)施例2樣品的處理方法是在患者連續(xù)服藥一周以后，于早晨服藥前抽取靜脈血2mL，3000r/min離心lOmin， 分離血清，立即處理或于-20°C下48h以?xún)?nèi)保存。使用二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，先將待檢測(cè)的樣品液從加樣孔4中滴注入二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡測(cè)試條2的樣品墊8上，由于虹吸作用原理，帶動(dòng)待檢測(cè)的樣品液及膠體金膜7所含的抗丙戊酸鈉單克隆抗體或多克隆抗體膠體金標(biāo)記物一起向硝酸纖維素膜6擴(kuò)散，5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。檢測(cè)卡的主要反應(yīng)是免疫學(xué)的抗原和抗體反應(yīng)，在硝酸纖維素膜上遷移的膠體金標(biāo)記的抗體，在測(cè)試帶上分別與含丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，以及質(zhì)控帶抗兔抗體或抗鼠抗體反應(yīng)，形成棕紅色條帶。若樣品中有待檢丙戊酸鈉存在，當(dāng)樣品加入后即與抗體發(fā)生反應(yīng)，而不會(huì)與檢測(cè)帶所含的丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物反應(yīng)，從而不顯色。主要反應(yīng)的結(jié)果有以下4種情況當(dāng)檢測(cè)帶10、檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶12同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡帶，表示被檢測(cè)樣品中丙戊酸鈉含量低于50yg/mL;當(dāng)檢測(cè)帶10不顯示顏色，檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測(cè)樣品中丙戊酸鈉含量高于50 μ g/mL且低于100 μ g/mL ；當(dāng)檢測(cè)帶10、檢測(cè)帶11均不顯示顏色，只有質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測(cè)樣品中丙戊酸鈉含量高于100 μ g/mL ；當(dāng)檢測(cè)帶10、檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶12均不顯色，則表明測(cè)試條已失效。
權(quán)利要求1. 一種二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡，其特征在于在長(zhǎng)條扁平薄殼狀的檢測(cè)卡外殼 (1)中設(shè)置測(cè)試條(2)，檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔(3)和加樣孔(4);測(cè)試條(2)是由支承背板(5)上通過(guò)不干膠在其上依次粘貼樣品墊(8)、膠體金膜(7)、硝酸纖維素膜(6)、和吸水膜(9)所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜(6)，支承背板一端疊置粘貼吸水膜 (9)，另一端疊置粘貼樣品墊(8)，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜搭接， 在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜(7);硝酸纖維素膜上有兩條檢測(cè)帶和一條質(zhì)控帶，依次是檢測(cè)帶(10)，靈敏度50 μ g/mL，檢測(cè)帶(11 )，靈敏度 100 μ g/mL,及質(zhì)控帶(12)，測(cè)試條置入檢測(cè)卡外殼內(nèi)，樣品墊正對(duì)加樣孔，硝酸纖維素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔。
專(zhuān)利摘要一種二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡，屬于丙戊酸鈉血藥濃度監(jiān)測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。本實(shí)用新型二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡外殼內(nèi)有測(cè)試條，測(cè)試條由支承背板上依次粘貼樣品墊、膠體金膜、硝酸纖維素膜和吸水膜所組成；膠體金膜為含抗丙戊酸鈉抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有三條印跡帶，其中兩條為含丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶，靈敏度分別為50μg/mL、100μg/mL，另一條為含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶。本實(shí)用新型優(yōu)點(diǎn)是應(yīng)用免疫學(xué)的方法直接檢測(cè)癲癇患者血清中丙戊酸鈉的含量。本實(shí)用新型二合一丙戊酸鈉快速檢測(cè)卡易于制備，使用方便快速，結(jié)果準(zhǔn)確。
文檔編號(hào)G01N33/577GK202002932SQ20112002553
公開(kāi)日2011年10月5日 申請(qǐng)日期2011年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月26日
發(fā)明者吳文曄, 周堅(jiān), 熊曉芳 申請(qǐng)人:無(wú)錫安迪生物工程有限公司