專利名稱：一種汞元素的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于納米技術(shù)和分析檢測領(lǐng)域，涉及納米材料中的DNA為模板銀納米顆粒的制備方法及應(yīng)用以DNA為模板的銀納米顆粒檢測汞元素的方法。
背景技術(shù)：
銀納米顆粒作為一種新興的納米材料，繼金納米顆粒之后，成為又一個(gè)研究熱點(diǎn)。 與金納米顆粒類似，銀納米顆粒在390-420nm間具有特征的等離子共振吸收峰。此外，銀納米顆粒具有更高的消光系數(shù)，這使得它應(yīng)用于比色檢測靈敏度更好，基于銀納米顆粒的比色檢測方法已被應(yīng)用到DNA，金屬離子，蛋白質(zhì)等。同時(shí)銀納米顆粒具有拉曼增強(qiáng)的性質(zhì)，作為拉曼信號物而被廣泛的應(yīng)用于設(shè)計(jì)以拉曼光譜為信號輸出的探針。最近，M. Dickson等提出了以DNA為模板合成銀納米團(tuán)簇的方法，銀納米團(tuán)簇是一些粒徑較小(約幾個(gè)納米)的銀納米顆粒堆積在一起形成的特殊結(jié)構(gòu)，而正因?yàn)榱捷^小，產(chǎn)生納米尺寸效應(yīng)，具有離散的電子能級，電子容易被激發(fā)因而這一類團(tuán)簇往往具有較強(qiáng)的熒光，該工作發(fā)表在 JACS 上(((DNA-Templated Ag Nanocluster Formation)), J. Am. Chem. Soc. 2004，126，5207-5212)。接下來，該組繼續(xù)研究發(fā)現(xiàn)銀納米簇的熒光是跟模板DNA鏈的序列密切相關(guān)的，通過改變序列，可以調(diào)控發(fā)射的波長達(dá)到近紅外區(qū)域 (《Oligonucleotide-Stablized Ag Nanocluster Fluorophores》，J. Am. Chem. Soc. 2008， 130,5038-5039)。此后，一系列利用具有熒光的銀納米簇進(jìn)行分析檢測的工作得到了發(fā)表， 包括DNA，金屬離子，以及單堿基多態(tài)性分析等。當(dāng)粒徑增大時(shí)，利用DNA為模板將會形成不具有熒光的銀納米顆粒，它們對與DNA 相連的熒光基團(tuán)的熒光將會起到較大的猝滅作用。汞是一種具有很強(qiáng)毒性的重金屬，并且由于其分布廣泛，容易形成各種形態(tài)的污染物?？諝?，土壤以及水遭受污染后均可引發(fā)汞中毒。在各種形態(tài)的汞之中，具有水溶性的二價(jià)汞離子是最常見的，同時(shí)又具有強(qiáng)烈的毒性。二價(jià)汞離子可導(dǎo)致嚴(yán)重的健康問題，包括肌肉震顫，視覺損害，聽力損害，以及損傷大腦進(jìn)而對神經(jīng)系統(tǒng)造成危害等；于此同時(shí)二價(jià)汞離子也是一種環(huán)境污染物，廣泛存在于工業(yè)廢水中?；谝陨显颍陙磲槍θ绺哽`敏，高選擇性檢測汞離子做了大量的研究。傳統(tǒng)的一些檢測方法主要依賴于各種儀器，如 原子吸收和發(fā)射光譜，電感耦合等離子質(zhì)譜，冷蒸氣原子熒光光譜等，這些方法雖然檢測效果好，但需要昂貴復(fù)雜的儀器，且成本較高，難以實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測。近年來關(guān)于汞離子檢測的研究非常熱門，出現(xiàn)了應(yīng)用前沿技術(shù)的方法，基于電化學(xué)和光學(xué)傳感器、有機(jī)小分子探針、 共聚物、核酸、蛋白質(zhì)和酶、無機(jī)納米材料等一系列檢測汞離子手段。由于汞容易揮發(fā)，因而汞蒸氣便成為了檢測單質(zhì)汞的最常見目標(biāo)物，針對汞蒸氣的檢測，目前常用的方法是通過發(fā)生器產(chǎn)生汞蒸氣然后與儀器聯(lián)用進(jìn)行測量，最常用的氣體發(fā)生方法有冷蒸氣發(fā)生法以及流動(dòng)注射法，而檢測器則可以使用原子吸收，原子熒光。另外色譜原子吸收聯(lián)用技術(shù)，電感耦合等離子共振質(zhì)譜也被用來進(jìn)行汞蒸氣的測定。目前看來，通常銀納米顆粒多用于比色檢測，而本發(fā)明應(yīng)用它的淬滅效應(yīng)來設(shè)計(jì)檢測方法，且以DNA為模板的銀納米顆粒的淬滅特性進(jìn)行分析檢測的工作，目前基本上沒有出現(xiàn)，是一個(gè)新的研究領(lǐng)域。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，為了克服現(xiàn)有檢測汞元素技術(shù)的不足，結(jié)合納米材料的一些優(yōu)勢，提出了一種利用汞對以DNA為模板的銀納米顆粒形成的影響，來檢測汞元素的新方法。本發(fā)明的汞元素的檢測方法方便簡單，無需昂貴儀器，花費(fèi)低廉，且能得到優(yōu)異的檢測結(jié)果，具有實(shí)際應(yīng)用前景并且可應(yīng)用到其他目標(biāo)物的檢測。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是一種汞元素的檢測方法，以標(biāo)記有熒光素的DNA為模板的銀納米顆粒的合成過程為基礎(chǔ)，在形成銀納米顆粒之前加入汞元素，汞離子和銀離子在還原劑的作用下形成銀汞合金而影響了銀納米顆粒的生成，熒光素的熒光得到保留，實(shí)現(xiàn)汞離子的檢測。具體為在PBS緩沖溶液中加入標(biāo)記了熒光素的DNA溶液，震蕩混勻；然后加入硝酸銀溶液，震蕩混勻，靜置，使銀離子與DNA充分作用，吸附到DNA上；再加入汞離子或者通入汞蒸氣，搖勻；最后加入硼氫化鈉溶液，銀、汞離子在硼氫化鈉的還原下生成游離的銀汞合金從而保留熒光素的熒光，測量熒光素在490nm-600nm的熒光，實(shí)現(xiàn)汞離子的檢測。所述PBS緩沖溶液的pH為7. 2-7. 4。所述硝酸銀溶液與標(biāo)記了熒光素的DNA溶液加入的摩爾比例為1 0.9-11。所述標(biāo)記了熒光素的DNA溶液的濃度為4. 8 μ M/L-5. 2 μ M/L，所述硝酸銀溶液的濃度為0. 8mM/L-l. 2mM/L，所述硼氫化鈉溶液的濃度為8mM/L-12mM/L，硼氫化鈉溶液的加 AM^J 1 μ L-5 μ L0所述熒光素優(yōu)選為FAM。銀納米顆粒的合成為現(xiàn)有方法，本發(fā)明所述銀納米顆粒的合成過程優(yōu)選為(1)將5 μ M/L標(biāo)記了熒光素的DNA溶液與ImM/L硝酸銀溶液按1 0. 9-1. 1的摩爾比例混合搖勻，靜置10分鐘，得混合溶液；(2)取pH = 7. 410mM/L的PBS緩沖溶液480 μ L加入到容積為ImL的熒光池中； 接著加入IOyL上述混合溶液搖勻；(3)加入10mM/L的硼氫化鈉溶液2 μ L還原，搖晃后放置20分鐘(可以看到溶液的顏色有變黃，說明生成了銀納米顆粒)，即可。本發(fā)明所述的一種汞元素的檢測方法，優(yōu)選在上述銀納米顆粒的合成過程的步驟 (3)之前加入硝酸汞溶液或者通入汞蒸氣，搖勻，放置10分鐘，此時(shí)再加入硼氫化鈉溶液時(shí)，銀、汞離子在硼氫化鈉的還原下生成游離的銀汞合金從而保留熒光素的熒光，實(shí)現(xiàn)汞離子的檢測。以下對本發(fā)明做進(jìn)一步說明本發(fā)明的原理是在PBS緩沖溶液中加入標(biāo)記了的熒光素的DNA，向上述溶液中加入硝酸銀溶液，震蕩混勻，靜置，使銀離子與DNA充分作用；向上述溶液中加入硼氫化鈉，銀離子在DNA被還原上形成銀納米顆粒，熒光素的熒光被淬滅。若在加入硼氫化鈉前向溶液中通入一定量的汞離子作用一段時(shí)間，則銀、汞離子會在硼氫化鈉的還原下生成游離的銀汞合金從而保留熒光素的熒光，因此可用于檢測汞離子，同時(shí)也可用于檢測汞蒸氣。
本發(fā)明進(jìn)行汞離子檢測所用到的PBS緩沖溶液為10mM/L，pH = 7. 2-7. 4的緩沖溶液，優(yōu)選PH = 7. 4，溫度為常溫；PBS緩沖液中Na2HPO4的濃度為4. 3mmol/L, KH2PO4的濃度為 1. 4mmol/L。本發(fā)明所述的標(biāo)記了熒光素的DNA溶液可以是一段含有一定堿基數(shù)量的現(xiàn)有DNA 或者合成DNA，優(yōu)選含20-45個(gè)堿基的DNA，更優(yōu)選含23個(gè)堿基的DNA，其中堿基中以C的含量較多的堿基為最好，本發(fā)明實(shí)施例中所用的DNA序列為5' -FAM-CCCCTAACCCTAACCCTAA CCCC-3'，其中FAM是標(biāo)記的熒光素，此段序列是從生工生物工程(上海)有限公司購買得到。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)勢在于本發(fā)明為一種基于DNA為模板的銀納米顆粒來進(jìn)行汞離子和汞蒸氣的檢測方法， 它不再依賴于復(fù)雜昂貴的儀器，而且與新興的納米材料進(jìn)行了較好的結(jié)合，發(fā)展出了一種有效的應(yīng)用手段。同時(shí)從結(jié)果上看，本發(fā)明具有很好的靈敏度與選擇性(見實(shí)施例2-6)，且操作方法簡單。


圖1-1為實(shí)施例1中制得的以DNA為模板的銀納米顆粒透射電鏡圖；圖1-2為實(shí)施例1中制得的在Hg2+存在的情況下還原后的透射電鏡圖。圖2為實(shí)施例2中采用標(biāo)記了熒光素的DNA為模板合成銀納米顆粒對熒光的淬滅以及在不同加入不同金屬離子的情況下，對熒光影響的光譜；圖3-1為實(shí)施例3中合成銀納米顆粒的吸收圖譜，以及在不同加入不同金屬離子的情況下，對吸收圖譜的影響的情況；圖3-2為實(shí)施例3中合成銀納米顆粒溶液的照片，以及在不同加入不同金屬離子的情況下溶液的照片。圖4為實(shí)施例4中考察是否以DNA為模板合成的銀納米顆粒對熒光素的熒光的猝滅情況；圖5為實(shí)施例5中在不同濃度的汞離子存在下采用標(biāo)記了熒光素的DNA為模板合成銀納米顆粒時(shí)對熒光素?zé)晒獾谋Ａ羟闆r的光譜；圖6為實(shí)施例6中在不同濃度的汞蒸氣存在下采用標(biāo)記了熒光素的DNA為模板合成銀納米顆粒時(shí)對熒光素?zé)晒獾谋Ａ羟闆r的光譜。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖對本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說明本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和過程，旨在易于理解本發(fā)明的技術(shù)方案特征，對本發(fā)明的保護(hù)范圍不構(gòu)成任何限制。凡采用等同變換或者是等效替換而形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明權(quán)利保護(hù)范圍之內(nèi)。實(shí)施例1制備以DNA為模板的銀納米顆粒配制制備銀納米顆粒所需的溶液將含23個(gè)堿基的DNA原液加水稀釋得5 μ M/ L的溶液，配制ImM/L的硝酸銀(AgN03)溶液，配制10mM/L的硼氫化鈉(NaBH4)溶液，配制 10mM/L的PBS緩沖液(pH = 7. 4)待用；
向1. 5mL的離心管內(nèi)加入490 μ L的PBS緩沖溶液(10mM/L)；取配制好的5 μ M/L 的DNA溶液5 μ L加入，搖勻；取配制好的ImM/L的硝酸銀溶液5 μ L加入，搖勻，放置10分鐘(使得銀離子與DNA充分作用)；加入10mM/L的硼氫化鈉溶液1 μ L還原，并劇烈震蕩離心管。由于銀離子與DNA上的堿基作用進(jìn)而吸附到了 DNA上，故形成了以DNA為模板的銀納米顆粒，另一份平行樣中還原前再加入5 μ L ImM/L的汞離子。透射電鏡圖分析從圖1-1可以看出，沒有汞離子存在時(shí)，形成了均一，分散，直徑在5nm左右的銀納米顆粒，而汞離子存在的情況下，由圖1-2，不再有分散的納米顆粒，取而代之的是較大的銀汞合金聚集體，說明汞離子的確能影響銀納米顆粒的形成。實(shí)施例2本檢測方法對各種金屬離子的選擇性熒光實(shí)驗(yàn)將含標(biāo)記了熒光素的DNA溶液(5yM/L)與硝酸銀溶液(ImM/L)按1 1的比例混合搖勻，靜置10分鐘；取PBS緩沖溶液(10mM/L，pH = 7. 4)480 μ L加入到容積為ImL的熒光池中；接著加入10 μ L上述混合溶液搖勻；加入10 μ L的不同金屬離子溶液(lmM/L)， 使得各種金屬離子濃度為20 μ M搖勻，放置10分鐘；最后加入2 μ L硼氫化鈉溶液(IOmM/ L)還原，搖晃后放置20分鐘，使得反應(yīng)進(jìn)行充分，測試并分別記錄其熒光發(fā)射光譜，得到不同金屬離子的加入對熒光素的熒光的影響。熒光譜圖分析從圖2的熒光譜圖中可以看出，當(dāng)未加入金屬離子的情況下，熒光素的熒光會被銀納米顆粒淬滅(90%以上)，若加入金屬離子，則加汞離子的情況下熒光會得到較大程度的保留，而其余金屬離子則幾乎與未加入時(shí)情況相差不大，由此可以說明本方法對汞離子具有特異性響應(yīng)，這也是應(yīng)用其進(jìn)行汞離子檢測的一個(gè)基礎(chǔ)。實(shí)施例3各種金屬離子對以DNA為模板的銀納米形成的影響實(shí)驗(yàn)將含23 個(gè)堿基(5 ‘ -FAM-CCCCTAACCCTAACCCTAACCCC-3 ‘)的標(biāo)記了熒光素的 DNA溶液(5 μ M/L)與硝酸銀溶液(ImM/L)按1 1的比例混合搖勻，靜置10分鐘；取PBS 緩沖溶液(10mM/L，pH = 7. 4)480 μ L加入到容積為ImL的吸收池中；接著加入10 μ L上述混合溶液搖勻；加入10 μ L的不同金屬離子溶液(ImM/L)，使得各種金屬離子濃度為20 μ M 搖勻，放置10分鐘；最后加入2 μ L硼氫化鈉溶液(10mM/L)還原，搖晃后放置20分鐘，使得反應(yīng)進(jìn)行充分，測試并分別記錄其吸收光譜，得到不同金屬離子的加入對銀納米顆粒吸收光譜的影響。吸收譜圖分析從圖3-1的吸收譜圖中可以看出，當(dāng)未加入任何金屬離子時(shí)，經(jīng)過硼氫化鈉還原后，在390nm處出現(xiàn)了一個(gè)明顯的吸收峰(這個(gè)峰是屬于銀納米顆粒的特征吸收峰)，說明形成了銀納米顆粒；而在汞離子存在的情況下進(jìn)行還原后，390nm處的吸收強(qiáng)度明顯降低，說明汞離子的存在會干擾銀納米顆粒的形成；但其他金屬離子的加入吸收光譜并不會產(chǎn)生太大的變化，由此更進(jìn)一步的證明了應(yīng)用本方法檢測汞離子的有效性。照片圖分析圖3-2的照片中可以看出銀納米顆粒溶液的顏色呈亮黃色，而在汞離子存在的情況下，溶液的顏色為藍(lán)灰色，而其余的金屬離子對溶液的顏色影響不大(圖片中從左到右依次為空白，含有 Hg2+，Cd2+，Ni2+，Mg2+，Co2+，Ba2+，F(xiàn)e3+，Zn2+，Pb2+，Ca2+，Mg2+)。實(shí)施例4考察是否以DNA為模板形成的銀納米顆粒熒光淬滅能力實(shí)驗(yàn)(1)取PBS緩沖溶液(10mM/L, pH = 7. 4)480 μ L加入到容積為ImL的熒光池中； 將5μ L含標(biāo)記了熒光素的DNA溶液(5μΜ/ 加入熒光池中，搖勻，測試其熒光光譜；(2)向(1)中的溶液加入5μ L硝酸銀溶液(ImM/L)后，搖勻靜置10分鐘，測試其熒光光譜；(3)向⑵中的溶液加入1 μ L硼氫化鈉溶液(10mM/L)進(jìn)行還原，反應(yīng)20分鐘，測試其熒光光譜；(4)取PBS緩沖溶液(10mM/L, pH = 7. 4)480 μ L加入到容積為ImL的熒光池中； 將5yL硝酸銀溶液(lmM/L)加入熒光池中，搖勻，加入1 μ L硼氫化鈉溶液(10mM/L)進(jìn)行還原，形成銀納米顆粒(5)向(4)中加入5 μ L含標(biāo)記了熒光素的DNA溶液(5 μ M/L)，搖勻，等待20分鐘， 測試其熒光光譜；熒光譜圖分析從圖4的熒光譜圖中可以看出，測量樣品DNA，SP (1)在516nm處的熒光強(qiáng)度約為900左右，加入了硝酸銀之后下降到700 (這是由于銀離子對熒光素的熒光有一定的淬滅作用)，用硼氫化鈉還原后，熒光急劇淬滅。而沒有以DNA為模板的銀納米顆粒產(chǎn)生的熒光淬滅，S卩(5)的熒光強(qiáng)度基本等同于DNA加入硝酸銀后，S卩(2)的情況，由此可以說明只有當(dāng)銀納米顆粒以DNA為模板形成的時(shí)候，才能對熒光素的熒光產(chǎn)生較大的淬滅(由于這種情況下銀納米顆粒在DNA鏈上，與熒光素距離很近)。實(shí)施例5本檢測方法對Hg2+進(jìn)行檢測的響應(yīng)實(shí)驗(yàn)將含標(biāo)記了熒光素的DNA溶液(5 μ M/L)與硝酸銀溶液(lmM/L)按1 1的比例混合搖勻，靜置10分鐘；取PBS緩沖溶液(10mM/L，pH = 7. 4)480 μ L加入到容積為ImL的熒光池中；接著加入10 μ L上述混合溶液搖勻；加入IOyL的不同濃度的硝酸汞溶液，搖勻， 放置10分鐘；最后加入2 μ L硼氫化鈉溶液(10mM/L)還原，搖晃后放置20分鐘，使得反應(yīng)進(jìn)行充分，測試并分別記錄其熒光光譜光譜，得到不同濃度汞離子的加入對熒光的保留情況。熒光譜圖分析從圖5的熒光譜圖中可以看出，隨著汞離子濃度的增大，516nm處熒光峰的強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，在汞離子濃度為IOOnM的時(shí)候，就有一定的響應(yīng)，一直到6 μ M時(shí)， 再升高濃度，熒光的保留程度不再上升。實(shí)施例6本檢測方法對汞蒸氣進(jìn)行檢測的響應(yīng)實(shí)驗(yàn)將含標(biāo)記了熒光素的DNA溶液(5yM/L)與硝酸銀溶液(lmM/L)按1 1的比例混合搖勻，靜置10分鐘；取PBS緩沖溶液(10mM/L，pH = 7. 4) 5mL加入到容積為50mL的離心管中；接著加入100 μ L上述混合溶液搖勻；將硝酸汞溶液加入到汞蒸氣的發(fā)生器中，啟動(dòng)發(fā)生器，將汞蒸氣導(dǎo)入50mL的離心管中，通氣約5分鐘(使得汞蒸氣吸收基本完全)；取下離心管，關(guān)閉發(fā)生裝置，將導(dǎo)氣管插入尾氣吸收裝置中；將離心管搖勻靜置10分鐘后，取 500 μ L離心管中的液體加入到ImL的熒光池中，加入2 μ L硼氫化鈉溶液(10mM/L)還原，搖晃后放置20分鐘，使得反應(yīng)進(jìn)行充分，測試并記錄其熒光光譜光譜，得到不同濃度汞蒸氣的加入對熒光的保留情況。熒光譜圖分析從圖6的熒光譜圖中可以看出，隨著汞蒸氣濃度的增大，516nm處熒光峰的強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，在汞離子濃度為250nM的時(shí)候，就有一定的響應(yīng)，一直到10 μ M時(shí)， 再升高濃度，熒光的保留程度不再上升。對比圖5，圖6發(fā)現(xiàn)，在同樣的條件下，等濃度汞離子對熒光素?zé)晒獾谋Ａ舫潭缺裙魵饴愿?，且汞離子的最低響應(yīng)濃度更小(由于蒸氣發(fā)生程度與吸收過程并不能達(dá)到100% )，但兩者都能對熒光素的熒光產(chǎn)生很好的保留效果。
權(quán)利要求
1.一種汞元素的檢測方法，其特征是，以標(biāo)記有熒光素的DNA為模板的銀納米顆粒的合成過程為基礎(chǔ)，在形成銀納米顆粒之前加入汞元素，汞離子和銀離子在還原劑的作用下形成銀汞合金而影響了銀納米顆粒的生成，熒光素的熒光得到保留，實(shí)現(xiàn)汞離子的檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，在PBS緩沖溶液中加入標(biāo)記了熒光素的DNA溶液，震蕩混勻；然后加入硝酸銀溶液，震蕩混勻，靜置，使銀離子與DNA 充分作用，吸附到DNA上；再加入汞離子或者通入汞蒸氣，搖勻；最后加入硼氫化鈉溶液， 銀、汞離子在硼氫化鈉的還原下生成游離的銀汞合金從而保留熒光素的熒光，測量熒光素在490nm-600nm的熒光，實(shí)現(xiàn)汞離子的檢測。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，所述PBS緩沖溶液的pH 為 7. 2-7. 4。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，所述硝酸銀溶液與標(biāo)記了熒光素的DNA溶液加入的摩爾比例為1 0.9-1.1。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，所述標(biāo)記了熒光素的DNA 溶液的濃度為4. 8 μ M/L-5. 2 μ M/L，所述硝酸銀溶液的濃度為0. 8mM/L_l. 2mM/L,所述硼氫化鈉溶液的濃度為8mM/L-12mM/L，硼氫化鈉溶液的加入量為1 μ L-5 μ L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，所述銀納米顆粒的合成過程為(1)將5yM/L標(biāo)記了熒光素的DNA溶液與ImM/L硝酸銀溶液按1 0.9-1. 1的摩爾比例混合搖勻，靜置10分鐘，得混合溶液；(2)取pH= 7. 410mM/L的PBS緩沖溶液480 μ L加入到容積為ImL的熒光池中；接著加入IOyL上述混合溶液搖勻；(3)加入10mM/L的硼氫化鈉溶液2yL還原，搖晃后放置20分鐘，即可。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，在步驟C3)之前加入硝酸汞溶液或者通入汞蒸氣，搖勻，放置10分鐘。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7之一所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，所述標(biāo)記了熒光素的DNA溶液中的DNA為含20-45個(gè)堿基的DNA。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種汞元素的檢測方法，其特征是，所述標(biāo)記了熒光素的DNA 溶液中的DNA的堿基序列為5' -FAM-CCCCTAACCCTAACCCTAACCCC-3‘。
全文摘要
本發(fā)明屬于納米技術(shù)和分析檢測領(lǐng)域，提供了一種基于干擾銀納米顆粒形成的汞元素檢測方法，該方法為在PBS緩沖溶液中加入標(biāo)記了的熒光素(FAM)的DNA，震蕩混勻；向上述溶液中加入硝酸銀溶液，震蕩混勻，靜置，使銀離子與DNA充分作用，吸附到DNA上；向上述溶液中加入硼氫化鈉，銀離子在DNA被還原上形成銀納米顆粒，淬滅熒光素的熒光。該方法是在加入硼氫化鈉前向溶液中通入汞離子作用一段時(shí)間，則銀、汞離子在硼氫化鈉的還原下生成游離的銀汞合金從而保留熒光素的熒光，因此可用于檢測汞離子，同時(shí)也可用于檢測汞蒸氣。所述方法用來檢測汞元素(離子、蒸氣)操作簡便，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，專一性高，靈敏度好，具有較大的創(chuàng)新性和對其它目標(biāo)物的應(yīng)用前景。
文檔編號G01N21/64GK102495033SQ20111039349
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月1日
發(fā)明者曹忠, 李繼山, 楊榮華, 鄧立 申請人:湖南大學(xué)