專利名稱：總有機酸含量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種總有機酸含量的測定方法。
背景技術(shù)：
我國天然有機酸資源豐富，在中藥中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了較多種類和數(shù)量的有機酸類成分，如水楊酸、苯甲酸、桂皮酸、熊果酸、齊墩果酸、咖啡酸、阿魏酸、綠原酸、原兒茶酸、當歸酸、琥珀酸、丁香酸、甘草酸、沒食子酸及丹酚酸等。中藥中的有機酸類成分具有抗腫瘤、抑菌、抗血栓、抗病毒等生物活性，有望從中開發(fā)出應(yīng)用廣泛、療效好、作用強的藥物。目前，用于中藥中有機酸含量的分析測定方法有反相高效液相色譜法、高效毛細管電泳法、離子色譜法、薄層掃描法、氣相色譜法等。反相高效液相色譜法、高效毛細管電泳法通常用于芳香酸和萜酸成分的測定；離子色譜法在測定有機酸含量中應(yīng)用很少而且只局限于小分子脂肪酸的分離；薄層掃描法主要用于中藥中萜酸和芳香酸的測定；氣相色譜法多用于長鏈脂肪酸的分析和測定，也用于萜酸的研究，很少用于測定酚酸和小分子脂肪酸; 這些方法在測定有機酸含量時需要多種對照品，處理過程復雜，不適用于用來測定總有機酸的含量。利用酸堿滴定法或者由此而改進得到的電位滴定法進行有機酸含量的測定具有操作簡單，方便易行的特點，但是不能克服樣品中氨基酸對測定結(jié)果的影響，會造成較大的實驗誤差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服總有機酸含量測定所用的電位滴定法中存在的氨基酸干擾問題。本發(fā)明的目的在于提供一種總有機酸含量的測定方法，即利用電位滴定法進行測定，包括如下步驟將待測的樣品溶液先通過Na型陽離子樹脂以除去溶液中的氨基酸。優(yōu)選地，所述樣品溶液是將樣品放置于親水性有機溶劑中浸泡，之后回流或超聲提取，合并提取液而得。優(yōu)選地，所述親水性有機溶劑為乙醇或甲醇。優(yōu)選地，所述親水性有機溶劑為體積分數(shù)為10 95%的乙醇
優(yōu)選地，所述親水性有機溶劑為體積分數(shù)為30 70 %的乙醇。優(yōu)選地，所述樣品為植物類藥材、其提取物以及相應(yīng)的植物藥制劑。優(yōu)選地，所述電位滴定法中使用的對照品為水楊酸、苯甲酸、乙酸、綠原酸或蘋果酸。優(yōu)選地，所述電位滴定法中使用的對照品為水楊酸。優(yōu)選地，用茚三酮來檢測溶液中的氨基酸是否除去。優(yōu)選地，所述電位滴定法為pH直接電位滴定法。本發(fā)明具有如下的有益效果本發(fā)明的方法對現(xiàn)有技術(shù)中測定總有機酸含量的電位滴定法作以改進，徹底克服了待測樣品溶液中含有的氨基酸對測定結(jié)果的干擾，大大提高了測定結(jié)果的準確度。


圖1為水楊酸對照品滴定曲線圖。圖2為實施例1中板藍根藥材提取液的滴定曲線圖。圖3為實施例3中板藍根顆粒提取液的滴定曲線圖。
具體實施例方式以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明作進一步說明。應(yīng)理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。茚三酮反應(yīng)參照《張治安等.植物生理學實驗技術(shù).[M].吉林吉林大學出版社， 2008.》披露方法。購于安徽三星樹脂公司，型號為SA-2。實施例1、板藍根藥材粉末中總有機酸含量的測定1、對照樣品溶液及待測樣品溶液的制備稱取板藍根藥材粉末約10g，用70% (體積分數(shù))乙醇浸泡0. 5h,之后回流提取3 次，第一次加8倍70 %乙醇，提取1. 5h,第2次加6倍量70%乙醇，提取lh，第3次加6倍量70%乙醇，提取lh，合并提取液，定性濾紙過濾得濾液，之后70%乙醇定容至250ml作為對照樣品溶液；按同樣的方法制備得濾液，將濾液通過SA-2陽離子樹脂至流出液無茚三酮反應(yīng)為止，之后收集濾液，定容至250ml，得待測樣品溶液。2、pH直接電位滴定法測定樣品溶液中總有機酸的含量2. 1、水楊酸對照品溶液的制備稱取水楊酸對照品(購于西亞試劑，純度99. 5% ) 3. 4680g，用70% (體積分數(shù)) 乙醇溶解，定容于500ml容量瓶中，備用。2. 2、標準氫氧化鈉溶液的制備精密稱取氫氧化鈉固體4. 0873g，加新沸過的冷水使成1000ml，搖勻，得氫氧化鈉溶液。精密稱取基準鄰苯二甲酸氫鉀5. 1145g，加新沸過的冷水定容于250ml容量瓶中，之后取25ml于燒杯中，加酚酞指示液2滴，用新配制的氫氧化鈉溶液滴定至溶液顯粉紅色，重復滴定3次，得配制的氫氧化鈉濃度為0. 1022mol/L。2. 3、水楊酸對照品滴定曲線的制作精密吸取步驟2. 1得到的水楊酸對照品溶液40ml，置小燒杯中，浸入電極，以濃度 0. 1022mol/L的標準氫氧化鈉溶液滴定，記錄消耗堿溶液的體積和電位值，以電位的變化量 (ΔΕ)和體積的變化量(AV)的比值為縱坐標，電位變化前后所用氫氧化鈉溶液體積的平均值( )為橫坐標作圖，繪制ΔΕ/Δν 電位曲線圖，如圖1所示，曲線顯示滴定終點明顯，以滴定終點計算Irnl氫氧化鈉的標準溶液相當于的水楊酸質(zhì)量，經(jīng)計算，Iml氫氧化鈉的標準溶液相當于12. Olmg的水楊酸。2. 4、樣品溶液中總有機酸的含量的測定取步驟1制備的待測的樣品溶液，以0. 1022mol/L標準氫氧化鈉滴定，以70%乙醇(體積分數(shù))空白校正，按步驟2. 3中滴定曲線的制作方法，繪制板藍根藥材提取液的滴定曲線，如圖2所示。按照同樣的方法測定對照樣品溶液中總有機酸的含量。結(jié)果如表1所示，可見將樣品溶液經(jīng)Na型陽離子樹脂過濾后，pH直接電位滴定法測定樣品中總有機酸含量的結(jié)果更加準確，克服了樣品中氨基酸對測定結(jié)果的影響。表1板藍根藥材粉末中總有機酸含量
權(quán)利要求
1.一種總有機酸含量的測定方法，即利用電位滴定法進行測定，其特征在于，包括如下步驟將待測的樣品溶液先通過Na型陽離子樹脂以除去溶液中的氨基酸。
2.如權(quán)利要求1所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述樣品溶液是將樣品放置于親水性有機溶劑中浸泡，之后回流或超聲提取，合并提取液而得。
3.如權(quán)利要求2所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述親水性有機溶劑為乙醇或甲醇。
4.如權(quán)利要求3所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述親水性有機溶劑為體積分數(shù)為10 95%的乙醇。
5.如權(quán)利要求4所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述親水性有機溶劑為體積分數(shù)為30 70%的乙醇。
6.如權(quán)利要求1所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述樣品為植物類藥材、其提取物以及相應(yīng)的植物藥制劑。
7.如權(quán)利要求1所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述電位滴定法中使用的對照品為水楊酸、苯甲酸、乙酸、綠原酸或蘋果酸。
8.如權(quán)利要求7所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述電位滴定法中使用的對照品為水楊酸。
9.如權(quán)利要求1所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，用茚三酮來檢測溶液中的氨基酸是否除去。
10.如權(quán)利要求1所述的總有機酸含量的測定方法，其特征在于，所述電位滴定法為PH 直接電位滴定法。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物檢測技術(shù)領(lǐng)域的總有機酸含量的測定方法，本發(fā)明的方法即利用電位滴定法進行測定，包括將待測的樣品溶液先通過Na型陽離子樹脂以除去溶液中的氨基酸的步驟。本發(fā)明的方法對現(xiàn)有技術(shù)中測定總有機酸含量的電位滴定法作以改進，徹底克服了待測樣品溶液中含有的氨基酸對測定結(jié)果的干擾，大大提高了測定結(jié)果的準確度。
文檔編號G01N1/34GK102288666SQ20101025043
公開日2011年12月21日 申請日期2010年8月4日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月4日
發(fā)明者劉麗敏, 年四輝 申請人:劉麗敏, 年四輝