專利名稱：一種有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于一種有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑及其制備方法，屬于微生物有機(jī)肥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在白酒發(fā)酵過(guò)程中，含水量在52 55%的入窖酒醅經(jīng)微生物代謝后產(chǎn)生大量的游離水。這些水與酒醅中未被微生物所利用的水逐漸沉降，將酒醅中的酸、可溶性淀粉、酵母溶出物、還原糖、單寧、酒精及香味前體物質(zhì)溶出，最后沉積于窖池底部而形成棕黃色、呈絮體狀的液體，這種液體被稱為黃水。據(jù)測(cè)定，黃水的PH為3. O 3. 5，黃水中富含醋酸、丁酸、乳酸、己酸等有機(jī)酸類物質(zhì)及其他醇、醛類物質(zhì)，還含有乙酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯等白酒香味物質(zhì)，及少量的殘余淀粉、殘?zhí)呛途凭?、腐殖質(zhì)和酵母菌體的自溶物、厭氧性微生物等有機(jī)質(zhì)。其C0D、B0D遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)廢水排放標(biāo)準(zhǔn)。目前，對(duì)黃水的利用途徑較少，利用率 較低。主要是進(jìn)一步蒸餾得黃水酒、與酒尾一起回窖發(fā)酵、拌糟醅回窖發(fā)酵等。開發(fā)新的黃水利用途徑，提高酒廠廢水排放水質(zhì)、少排廢水、變廢為寶，是一個(gè)急需解決的課題。隨著微生物有機(jī)肥技術(shù)的不斷發(fā)展和推廣，一些工業(yè)和農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品被不斷被開發(fā)利用，如果能得到有效利用，富含有機(jī)物質(zhì)的釀酒副產(chǎn)品黃水同樣也不失為是一種優(yōu)質(zhì)的生物有機(jī)肥原料。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，針對(duì)上述問(wèn)題，提供一種利用黃水生產(chǎn)有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑的制備方法，其特征在于，(I)將白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水進(jìn)行過(guò)濾、蒸發(fā)濃縮處理；(2)黃水處理完畢后加入葡萄糖、(NH4)2SO4,KH2PO4,MgSO4 · 7H20、MnS04 · H20、NaCl和CaCO3充分混合溶解后進(jìn)行高溫滅菌；(3)滅菌結(jié)束后的發(fā)酵母液接入混合菌種發(fā)酵液發(fā)酵24 48h，通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶；所述的混合種菌種發(fā)酵液由沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris )、突光假單胞菌(Pseudomonas f luorescens)、揭球固氣菌(Azotobacterchroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)菌液組成；所述混合菌種發(fā)酵液中沼澤紅假單胞菌、熒光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發(fā)酵母液重量的2 5%、2 5%、2 5%、5 10%、5 10%。如上所述的方法，優(yōu)選地，步驟(I)中所述的白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水采用多袋式過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，去除其中較大的雜質(zhì)，然后再通過(guò)蒸發(fā)濃縮罐將發(fā)酵母液蒸發(fā)濃縮為總固形物含量為15%的液體。如上所述的方法，優(yōu)選地，所述的葡萄糖、(NH4) 2S04、KH2PO4' MgSO4 · 7H20、MnSO4 .H20、NaCl 和 CaCO3 分別按 I 2%、0· 5 1%、0· 01 O. 02%,O. 01 O. 02%,O. 001 O. 005%,O. 01 O. 02%和I 2%的重量比添加到發(fā)酵母液中；所述高溫滅菌是在115°C 121 °C>O. 07MPa O.1lMPa條件下蒸煮滅菌20 30mino如上所述的方法，優(yōu)選地，所述的沼澤紅假單胞菌菌液是按以下方法制成的配制種子培養(yǎng)基=K2HPO4O.78g、KH2PO4O. 5g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaClO. 5g、CaCl2O. 05g、(NH4)2SO4O. 05g、酵母膏 2. 5g、醋酸鈉1 . 65g、硼酸鈉 0. 38g、鑰酸銨 0. 22g，蒸餾水 lOOOmL，pH 6. 7 7. 2，在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接入種子培養(yǎng)基中，溫度25 30°C、轉(zhuǎn)速100 120r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度25 30°C、通風(fēng)量體積比為1: O. 5 I的條件下、以80 100r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。如上所述的方法，優(yōu)選地，所述的熒光假單胞菌菌液是按以下方法制成的配制種子培養(yǎng)基蛋白胨5g、牛肉浸膏3g、NaCl 5g,蒸懼水IOOOmL混合均勻，pH6. 8 7. 0，在溫度115 121°C下滅菌20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接入種子培養(yǎng)基中，溫度28 30°C、轉(zhuǎn)速100 120r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。如上所述的方法，優(yōu)選地，所述的褐球固氮菌菌液是按以下方法制成的配制種子培養(yǎng)基K2HP040. 8g、KH2PO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaC10. 5g、CaCl2O. lg、甘露醇 20g、酵母膏 0. 5g、FeCl30. 005g,Na2MoO4. 2H200. 002g,蒸餾水 lOOOmL，pH 7. 0 7. 2，在溫度115 121°C下滅菌20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接種入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度28 30°C、轉(zhuǎn)速100 120r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。如上所述的方法，優(yōu)選地，所述的巨大芽孢桿菌菌液是按以下方法制成的配制一級(jí)種子培養(yǎng)基蛋白胨10. Og,牛肉浸膏3. 0g, NaCl 5. Og,葡萄糖5. Og,蒸餾水lOOOmL，pH 6. 8 7. 0，在溫度115 121°C下滅菌20 30min ；配制二級(jí)種子培養(yǎng)基玉米粉10kg、黃豆粉 10kg、K2HP04l. 5kg,MgSO4 ·7Η201. 5kg、CaCO3L 5kg，蒸餾水 1000L, pH 6. 8 7.0，在溫度 115 121°C 下滅菌 20 30min ;一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝一級(jí)種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度28 30°C、轉(zhuǎn)速130 150r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。如上所述的方法，優(yōu)選地，所述的膠凍樣芽孢桿菌菌液是按以下方法制成的配置種子培養(yǎng)基=K2HPO4O.2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、CaC035g、NaClO. 2g、蔗糖 10g、CaSO4 · 2Η200· lg，蒸餾水 lOOOmL, pH 6· 8 7. 0，在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接種入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度25 28°C、轉(zhuǎn)速130 150r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度25 28°C、通風(fēng)量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。如上所述的方法，優(yōu)選地，步驟(3)中所述發(fā)酵母液滅菌、接種后，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機(jī)械攪拌培養(yǎng)24 48h，然后通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶。如上所述方法制備得到的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑。按照本發(fā)明所述方法制備得到的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑，該產(chǎn)品中總固形物彡17. 00%、有機(jī)酸鈣含量彡1. 00%、有機(jī)酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡11. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡2. 50X 108、熒光假單胞菌彡1.00父109、褐球固氮菌(0 ~8)彡2. 00 X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 55 X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 20 X IO9。本發(fā)明的有益效果為本發(fā)明選用性能優(yōu)良的生物有機(jī)肥生產(chǎn)菌種，采用先進(jìn)的微生物液態(tài)深層發(fā)酵技術(shù)，以白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水作為發(fā)酵母液，經(jīng)過(guò)濾、濃縮處理后加入一定比例葡萄糖、(NH4)2SO4, KH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl 和 CaCO3 充分混合溶解后進(jìn)行高溫滅菌，然后接種由沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris)、突光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)、揭球固氣菌(Azotobacterchroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillusmegaterium)和膠凍樣芽孢桿菌(BaciIlusmuciIaginosus)組成的混合菌種，經(jīng)深層液態(tài)發(fā)酵，可制得一種富含有機(jī)酸、有益微生物和植物生長(zhǎng)必須有機(jī)微量元素的植物土壤調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明所用原料黃水中含有豐富的有機(jī)酸和殘?zhí)牵梢詾槲⑸锷L(zhǎng)繁殖提供良 好的營(yíng)養(yǎng)條件。選用優(yōu)良的微生物有機(jī)肥生產(chǎn)菌，采用先進(jìn)的微生物液態(tài)發(fā)酵技術(shù)，對(duì)黃水中殘存的有機(jī)質(zhì)和糖類進(jìn)行深層發(fā)酵，在發(fā)酵過(guò)程中加入一些植物生長(zhǎng)所必須的微量元素，通過(guò)菌體發(fā)酵分解和有機(jī)螯合作用生成生物有機(jī)質(zhì)，能使農(nóng)作物更易于吸收和利用。同時(shí)，通過(guò)微生物發(fā)酵還產(chǎn)生了大量的有益微生物和豐富的微生物代謝產(chǎn)物及有機(jī)酸。使黃水發(fā)酵生產(chǎn)的生物有機(jī)肥既能均衡、協(xié)調(diào)農(nóng)作物的生長(zhǎng)發(fā)育和刺激根系生長(zhǎng)，改善土壤鹽堿性，增加作物產(chǎn)量和土壤肥力，改善作物品質(zhì)；又能增強(qiáng)作物的免疫力，提高抗病、抗旱、保水、抗寒能力。同時(shí)還減少了廢水的排放，使制酒副產(chǎn)物得到有效的回收和利用，變廢為寶，減少了環(huán)境污染，具有很好的生態(tài)效益、經(jīng)濟(jì)效益以及開發(fā)前景。更具體地說(shuō)，本發(fā)明提供的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑的制備方法具有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明的產(chǎn)品中富含的有機(jī)酸鈣可通過(guò)生物絡(luò)合、置換反應(yīng)，置換清除土壤團(tuán)粒上多余的Na+，活化鹽堿土壤中難利用的P5+、Fe2+、Ca2+、Mg2+等離子及微量元素，使其轉(zhuǎn)變?yōu)榭衫脿顟B(tài)被植物吸收，解除植物生理缺素癥狀。同時(shí)通過(guò)Na+降低，活化Ca2+、Mg2+等離子之后，可使土壤水傳導(dǎo)能(HC)增高，使土壤水分更易流動(dòng)，從而有效地改善了土壤的鹽堿性和作物根系環(huán)境，促進(jìn)根系生長(zhǎng)，保證作物苗齊、苗壯，使植物能夠在鹽堿地上生長(zhǎng)和提聞廣量。2、本發(fā)明的產(chǎn)品富含的有機(jī)酸，可有效中和和緩解土壤鹽堿性。
3、本發(fā)明的產(chǎn)品中的有益微生物能產(chǎn)生糖類物質(zhì)，占土壤有機(jī)質(zhì)的O. 1%，與植物粘液，礦物胚體和有機(jī)膠體結(jié)合在一起，可以改善土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)土壤的物理性能和減少土壤顆粒的損失，在一定的條件下，還能參與腐殖質(zhì)形成。所以施用微生物肥料能改善土壤物理性狀，有利于提高土壤肥力。4、本發(fā)明的產(chǎn)品可取代化學(xué)肥料和農(nóng)藥，緩和或減少農(nóng)產(chǎn)品污染，而且能夠改善農(nóng)廣品的品質(zhì)。5、本發(fā)明的產(chǎn)品中富含的有益微生物菌群能促進(jìn)土壤物質(zhì)轉(zhuǎn)化，改善土壤結(jié)構(gòu)，提高土壤肥力，促進(jìn)作物生長(zhǎng)。通過(guò)微生物固氮作用，能提高土壤氮素水平，通過(guò)其代謝活動(dòng)能有效地提高土壤中某些有機(jī)成分、硫化物和氨態(tài)氮，并促進(jìn)有害污染物如農(nóng)藥等的轉(zhuǎn)化。同時(shí)能促進(jìn)有益微生物的增殖，使之共同參與土壤生態(tài)的物質(zhì)循環(huán)。6、本發(fā)明的產(chǎn)品中的有益微生物菌群能增強(qiáng)作物抗病防病能力，能促進(jìn)放線菌等有益微生物的繁殖，抑制絲狀真菌等有害菌群生長(zhǎng)，從而有效地抑制某些植病的發(fā)生與蔓延。7、本發(fā)明產(chǎn)品中的微生物具有解磷、解鉀、固氮的作用，可提高肥料利用率10% 30%以上。這種肥料的大量生產(chǎn)和推廣使用，可以節(jié)約肥料資源以及與之相關(guān)的煤炭、天然氣、石油等資源，對(duì)緩解能源危機(jī)有一定的幫助。8、應(yīng)用本發(fā)明方法及制得的產(chǎn)品，可降低農(nóng)民生產(chǎn)成本、提高作物產(chǎn)量，增加農(nóng)民收入。9、本發(fā)明提供的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑中，總固形物> 17. 00%、有機(jī)酸鈣含量彡1. 00%、有機(jī)酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡11. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡2. 50 X 108、熒光假單胞菌彡1. OOX 109、褐球固氮菌(CFU/g)彡2. 00 X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 55X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 20X IO90


圖1為本發(fā)明方法的流程示意圖。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)具體實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)及特點(diǎn)，但這些實(shí)施例并非用以限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
本發(fā)明以下實(shí)施例中所用沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris)、突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、揭球固氣菌(Azotobacterchroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillusmucilaginosus)是分別購(gòu)買于中國(guó)工業(yè)微生物保藏管理中心(CICC)、中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)和中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心(ACCC)的野生菌種。保藏號(hào)分別為ACCC 10649、CICC21461、CGMCC1. 175、CICC 21694、CICC 23575。實(shí)施例1·參見圖1，按照以下方法制備本實(shí)施例的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑1.稱取白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水1000L，采用多袋式過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，去除其中較大的雜質(zhì)。然后再通過(guò)蒸發(fā)濃縮罐將發(fā)酵母液蒸發(fā)濃縮為總固形物含量為15%的液體。2.黃水處理完畢后，將葡萄糖、(NH4)2SO4' KH2PO4' MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H20、NaCl和CaCO3分別按1%、1%、0· 02%,0. 02%,0. 005%,0. 02%和2%的重量比添加到發(fā)酵母液中，然后在121°C、0.1lMPa條件下蒸煮滅菌30min。3.將沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)、突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、揭球固氣菌(Azotobacter chroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)分別按以下方法進(jìn)行增菌培養(yǎng)(I)沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)A.制備種子培養(yǎng)基=K2HPO4O. 78g、KH2PO4O. 5g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaCl 0. 5g、CaCl2O. 05g、(NH4) 2S040. 05g、酵母膏 2. 5g、醋酸鈉1. 65g、硼酸鈉0. 38g、鑰酸銨0. 22g，蒸餾水lOOOmL, pH 6. 7，在溫度121°C下滅菌30min。B.培養(yǎng)條件一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50mL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度30°C、轉(zhuǎn)速100r/min、振蕩培養(yǎng)24h。二級(jí)種子培養(yǎng)100L自動(dòng)種子發(fā)酵罐裝種子培養(yǎng)基50L，將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，溫度30°C、通風(fēng)量體積比1:0. 5、機(jī)械攪拌100r/min、培養(yǎng) 24h。(2)突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)A.制備種子培養(yǎng)基蛋白胨5g、牛肉浸膏3g、NaCl 5g,蒸懼水IOOOmL混合均勻，pH7. O,在溫度121°C下滅菌30min。B.培養(yǎng)條件一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50mL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度30°C、轉(zhuǎn)速100r/min、振蕩培養(yǎng)24h。二級(jí)種子培養(yǎng)100L自動(dòng)種子發(fā)酵罐裝種子培養(yǎng)基50L，將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，溫度30°C、通風(fēng)量體積比1:0. 5、機(jī)械攪拌100/min、培養(yǎng) 24h。(3)褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)A.制備種子培養(yǎng)基=K2HPO4O. 8g、KH2PO4O. 2g、MgSO4 · 7H20 0. 2g、NaClO. 5g、CaCl20. lg、甘露醇 20g、酵母膏 0. 5g、FeCl30 . 00 5g,Na2MoO4. 2H200. 002g,蒸懼水lOOOmL, pH 7. 2,在溫度121°C下滅菌30min。B.培養(yǎng)條件一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50mL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度30°C、轉(zhuǎn)速120r/min、振蕩培養(yǎng)24h。二級(jí)種子培養(yǎng)100L自動(dòng)種子發(fā)酵罐裝種子培養(yǎng)基50L，將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，溫度30°C、通風(fēng)量體積比1:1、機(jī)械攪拌120r/min、培養(yǎng) 24h。(4)巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)A.制備一級(jí)種子培養(yǎng)基蛋白胨10. Og,牛肉浸膏3. 0g , NaCl 5. Og,葡萄糖5. Og,蒸懼水lOOOmL, pH 7. O,在溫度121°C下滅菌30min。B.制備二級(jí)種子培養(yǎng)基玉米粉10kg、黃豆粉10kg、K2HPO4L 5kg，MgSO4 · 7Η201· 5kg、CaCO3L 5kg，蒸餾水 1000L, pH 7. 0，在溫度 121°C下滅菌 30min。C.培養(yǎng)條件一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝一級(jí)種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/IOOmL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度30°C、轉(zhuǎn)速150r/min、振蕩培養(yǎng)24h。二級(jí)種子培養(yǎng)200L自動(dòng)種子發(fā)酵罐裝二級(jí)種子培養(yǎng)基100L，將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，溫度30°C、通風(fēng)量體積比1:1、機(jī)械攪拌 150r/min、培養(yǎng) 24h。(5)膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)A.制備種子培養(yǎng)基=K2HPO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、CaC035g、NaClO. 2g、蔗糖 10g、CaSO4 · 2H200. lg，蒸餾水 lOOOmL, pH7. 0，在溫度 121°C下滅菌 30min。B.培養(yǎng)條件一級(jí)種子培養(yǎng)IOOOmL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/IOOmL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度25°C、轉(zhuǎn)速150r/min、振蕩培養(yǎng)24h。二級(jí)種子培養(yǎng)200L自動(dòng)種子發(fā)酵罐裝種子培養(yǎng)基100L，將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，溫度25°C、通風(fēng)量體積比1:1 1、機(jī)械攪拌 150r/min、培養(yǎng) 24h。4.混合菌種發(fā)酵液中沼澤紅假單胞菌、熒光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發(fā)酵母液重量百分比的5%、5%、5%、10%、10%。5.發(fā)酵母液滅菌、接種后，溫度30°C、通風(fēng)量體積比1:1、機(jī)械攪拌120r/min、培養(yǎng)48h通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶。6.按照以上方法制備得到的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑，其中總固形物彡19. 25%、有機(jī)酸鈣含量彡1. 50%、有機(jī)酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡20. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡5. 00 X 108、熒光假單胞菌彡1. 50 X 109、褐球固氮菌(CFU/g)彡3. 00X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡3. 00X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡2. 50X IO9。實(shí)施例2參見圖1，按照以下方法制備本實(shí)施例的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑1.稱取白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水1000L，采用多袋式過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，去除其中較大的雜質(zhì)。然后再通過(guò)蒸發(fā)濃縮罐將發(fā)酵母液蒸發(fā)濃縮為總固形物含量為20%的液體。
2.黃水處理完畢后，將葡萄糖、(NH4)2SCV KH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl和CaCO3分別按1. 5%、0· 5%、0· 01%,O. 01%,O. 002%,O. 01%和1. 5%的重量比添加到發(fā)酵母液中，然后在121°C、0.1lMPa條件下蒸煮滅菌30min。3.將沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)、突光假單胞菌(Pseudomonas florescens)、揭球固氣菌(Azotobacter chroococcum)、巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)和膠凍樣芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus)分別按如實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行增菌培養(yǎng)。4.混合菌種發(fā)酵液中，沼澤紅假單胞菌、熒光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發(fā)酵母液重量百分比的3%、3%、5%、5%、5%。5.發(fā)酵母液滅菌、接種后，溫度30°C、通風(fēng)量體積比1:1、機(jī)械攪拌120r/min、培養(yǎng)48h通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶。
6.按照以上方法制備得到的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑，其中總固形物彡17. 00%、有機(jī)酸鈣含量彡1. 00%、有機(jī)酸總量彡30. 00g/L、N+P+K+Mg+Mn+S彡11. 00g/L、沼澤紅假單胞菌(CFU/g)彡2. 50 X 108、熒光假單胞菌彡1. 00X 109、褐球固氮菌(CFU/g)彡2. 00X 108、巨大芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 55X 109、膠凍樣芽孢桿菌(CFU/g)彡1. 20X IO9。
權(quán)利要求
1.一種有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑的制備方法，其特征在于，(1)將白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水進(jìn)行過(guò)濾、蒸發(fā)濃縮處理；(2)黃水處理完畢后加入葡萄糖、(NH4)2SCVKH2PO4, MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl 和 CaCO3充分混合溶解后進(jìn)行高溫滅菌；(3)滅菌結(jié)束后的發(fā)酵母液接入混合菌種發(fā)酵液發(fā)酵24 48h，通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶；所述的混合種菌種發(fā)酵液由沼澤紅假單胞菌、熒光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌菌液組成；所述混合菌種發(fā)酵液中沼澤紅假單胞菌、熒光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌的接種量分別為發(fā)酵母液重量的2 5%、2 5%、2 5%、5 10%、5 10%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(I)中所述的白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水采用多袋式過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，去除其中較大的雜質(zhì)，然后再通過(guò)蒸發(fā)濃縮罐將發(fā)酵母液蒸發(fā)濃縮為總固形物含量為15%的液體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的葡萄糖、(NH4)2SCVΚΗ2Ρ04、 MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, NaCl 和 CaCO3 分別按 I 2%、0· 5 1%、0· 01 O. 02%、O. 01 O.02%,O. 001 O. 005%,O. 01 O. 02%和I 2%的重量比添加到發(fā)酵母液中；所述高溫滅菌是在115°C 121°C、0. 07MPa O.1lMPa條件下蒸煮滅菌20 30min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的沼澤紅假單胞菌菌液是按以下方法制成的配制種子培養(yǎng)基=K2HPO4O. 78g、KH2PO4O. 5g、MgSO4 · 7H20 O. 2g、NaClO. 5g、CaCl2O. 05g、 (NH4)2SO4O. 05g、酵母膏 2. 5g、醋酸鈉1. 65g、硼酸鈉 0. 38g、鑰酸銨 0. 22g，蒸餾水 1000mL，pH6.7 7. 2，在溫度115 121°C下滅菌20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)=IOOOmL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接入種子培養(yǎng)基中，溫度25 30°C、轉(zhuǎn)速100 120r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度25 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以80 100r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的熒光假單胞菌菌液是按以下方法制成的配制種子培養(yǎng)基蛋白胨5g、牛肉浸膏3g、NaCl 5g,蒸懼水IOOOmL混合均勻，pH6. 8 7.0，在溫度115 121°C下滅菌20 30min;一級(jí)種子培養(yǎng)IOOOmL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接入種子培養(yǎng)基中，溫度28 30°C、轉(zhuǎn)速100 120r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的褐球固氮菌菌液是按以下方法制成的配制種子培養(yǎng)基=K2HPO4O. 8g, KH2PO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、NaC10. 5g、CaCl20. lg、甘露醇 20g、酵母膏 O. 5g、FeCl3O. 005g、Na2MoO4. 2Η200· 002g，蒸餾水 IOOOmL, pH 7.0 7. 2，在溫度115 121°C下滅菌20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)=IOOOmL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接種入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度28 30°C、轉(zhuǎn)速100 120r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的巨大芽孢桿菌菌液是按以下方法制成的配制一級(jí)種子培養(yǎng)基蛋白胨10. Og,牛肉浸膏3. 0g, NaCl 5. Og,葡萄糖5. Og,蒸懼水 IOOOmL, pH 6. 8 7. 0，在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ；配制二級(jí)種子培養(yǎng)基玉米粉10kg、黃豆粉10kg、K2HPO4L 5kg，MgSO4 · 7Η201· 5kg、 CaCO3L 5kg，蒸餾水 1000L, pH 6. 8 7.0，在溫度 115 121°C 下滅菌 20 30min ;一級(jí)種子培養(yǎng)1000mL三角瓶中裝一級(jí)種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度28 30°C、轉(zhuǎn)速130 150r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的膠凍樣芽孢桿菌菌液是按以下方法制成的配置種子培養(yǎng)基=K2HPO4O. 2g、MgSO4 · 7Η200· 2g、CaC035g、NaClO. 2g、蔗糖 10g、 CaSO4 · 2Η200· lg，蒸餾水 IOOOmL, pH 6· 8 7. 0，在溫度 115 121°C下滅菌 20 30min ；一級(jí)種子培養(yǎng)=IOOOmL三角瓶中裝種子培養(yǎng)基500mL，將菌種斜面按環(huán)/50 IOOmL的比例接種入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，溫度25 28°C、轉(zhuǎn)速130 150r/min、振蕩培養(yǎng)24 48h ；二級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)一級(jí)種子培養(yǎng)的菌液按照5 10%的重量比接種到二級(jí)種子罐中，在溫度25 28°C、通風(fēng)量體積比為1:1 1. 2的條件下、以130 150r/min機(jī)械攪拌，培養(yǎng)24 48h。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中所述發(fā)酵母液滅菌、接種后，在溫度28 30°C、通風(fēng)量體積比為1:0. 5 I的條件下、以100 120r/min機(jī)械攪拌培養(yǎng) 24 48h，然后通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶。
10.按照權(quán)利要求1 9中任一項(xiàng)所述方法制備得到的有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑。
全文摘要
一種有機(jī)酸植物土壤調(diào)節(jié)劑的制備方法，其是將白酒發(fā)酵副產(chǎn)物黃水進(jìn)行過(guò)濾、蒸發(fā)濃縮處理；黃水處理完畢后加入葡萄糖、(NH4)2SO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、MnSO4·H2O、NaCl和CaCO3充分混合溶解后進(jìn)行高溫滅菌；滅菌結(jié)束后的發(fā)酵母液接入混合菌種發(fā)酵液發(fā)酵24～48h，通過(guò)無(wú)菌灌裝機(jī)進(jìn)行裝瓶；所述的混合種菌種發(fā)酵液由沼澤紅假單胞菌、熒光假單胞菌、褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌和膠凍樣芽孢桿菌分別按發(fā)酵母液重量的2～5%、2～5%、2～5%、5～10%、5～10%混合組成。
文檔編號(hào)C12R1/01GK103012009SQ20121050199
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月30日
發(fā)明者張有聰, 劉景輝, 索全義, 劉成剛, 岳彥 申請(qǐng)人:張有聰