專利名稱:一種胃液提取物及其制備方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種胃液提取物及其制備方法。
背景技術:
胃癌是人類常見的惡性腫瘤之一,對其要早發(fā)現(xiàn)、早治療,才有可能減小其對 患者的傷害。目前常用的胃癌診斷方法有胃鏡、鋇餐造影等。但是這些方法操作比 較復雜,費用昂貴,敏感性和特異性有限,還會給患者帶來痛苦。因此,亟待需要 一種快速診斷胃癌的方法。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供一種胃液提取物。
本發(fā)明所提供的胃液提取物,它的有效組分包括結構與色氨酸類似的、相對分
子質量為216,具有吲哚結構的物質。
其中,所述胃液提取物可以是將離體的胃液進行高效液相色譜分離得到的; 所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混
合溶液作為流動相進行洗脫,混合溶液的流速為lml/min,收集保留時間為10. 5
11.5min的洗脫峰,即得胃液提取物;
所述高效液相色譜分離中所用的色譜柱的填充介質可以為0DS-3,孔徑5um。 所述高效液相色譜分離中在進行分離前還可包括將所述離體的胃液進行離心
濃縮的步驟。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種制備胃液提取物的方法。
本發(fā)明所提供的制備胃液提取物的方法,是將離體的胃液進行高效液相色譜分 離得到胃液提取物;
所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混 合溶液作為流動相進行洗脫,混合溶被的流速為lml/min,收集保留時間為10. 5 11.5min的洗脫峰,即得胃液提取物;
其中,所用的色譜柱的填充介質可為0DS-3,孔徑5um。
所述高效液相色譜分離中在進行分離前還可包括將所述離體的胃液進行離心 濃縮的步驟。本發(fā)明的胃液提取物可用來輔助診斷胃癌,具體可以是通過高效液相檢測提取 物的峰面積值來判斷是否患有胃癌,實驗證明,結果可靠、安全、快速;另外,本 發(fā)明制備胃液提取物的方法簡單、省時省力。因此,本發(fā)明的胃液提取物及其制備 方法在胃癌診斷領域中具有廣闊的應用前景。
圖1為胃癌患者和正常人的胃液提取物的高效液相色譜圖。
具體實施例方式
下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明,均為常規(guī)方法。 下述實施例中所用的材料、試劑等,如無特殊說明,均可從商業(yè)途徑得到。 實施例l、胃液提取物的制備及應用 一、制備方法
1、 取離體的人胃液20ml, 3000 rpm離心5min,取上清液10ml,低溫離心濃 縮至500ul。
2、 將上清液進行高效液相分離-
色譜柱為InertsilC-18(GL Sciences公司,JAPAN),柱長250陽,孔徑4. 6mm, 填充介質為ODS-3,孔徑5um;柱溫25"C; 自動進樣器進樣,進樣量100ul;
梯度洗脫液為流動相的組成為20%的甲醇(A液)-水溶液(B液);流速
為1 ml/min;梯度洗脫時間為lh;
檢測器為熒光檢測器,檢測激發(fā)波長288nm,發(fā)射波長為330nm; 收集保留時間為10. 5 11. 5min的洗脫峰,得到胃液提取物,并記錄峰面積值。
梯度洗脫步驟如下
時間(分) A(%) B(%)
0 10 35 65
11 20 50 50
21 30 65 35
31 40 80 20
41 50 95 5
51 60 100 03、 比較正常人和胃癌患者的胃液提取物的峰面積值
在如上色譜條件下,取20例正常人的離體胃液和20例胃癌患者的離體胃液進 行提取。
結果,正常人的胃液提取物的峰面積值為328553土119425,胃癌患者的胃液提 取物的峰面積值為2225455±1824224 (圖l, A為胃癌患者,B為正常人)。
4、 胃液提取物中組分的鑒定
將上述提取物進行質譜鑒定MALDI-T0F測定質荷比(m/z)。
結果測得,胃液提取物的平均相對分子質量為216,包含色氨酸的吲哚環(huán)。
二、胃液提取物的應用
另取20例已知胃癌患者的胃液,按照上述實驗一中所述方法進行提取,再進 行峰面積值記錄。結果表明,其峰面積值也均為2225455士1824224。 上述結果表明,本發(fā)明的胃液提取物可用于輔助診斷胃癌。
權利要求
1、一種胃液提取物,它的有效組分包括相對分子質量為216且具有吲哚結構的物質。
2、 根據(jù)權利要求l所述的胃液提取物,其特征在于所述胃液提取物是將離體的胃液進行高效液相色譜分離得到的;所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混合溶液作為流動相進行洗脫,混合溶液的流速為lral/min,收集保留時間為10. 5 11.5min的洗脫峰,即得胃液提取物。
3、 根據(jù)權利要求2所述的胃液提取物,其特征在于所述高效液相色譜分離中所用的色譜柱的填充介質為0DS-3,孔徑5um。
4、 根據(jù)權利要求2或3所述的胃液提取物,其特征在于所述高效液相色譜分離中在進行分離前包括將所述離體的胃液進行離心濃縮的步驟。
5、 一種制備胃液提取物的方法,是將離體的胃液進行高效液相色譜分離得到胃液提取物;所述高效液相色譜分離包括如下步驟以20%(體積百分含量)甲醇和水的混合溶液作為流動相進行洗脫,混合溶液的流速為lml/min,收集保留時間為10. 5 11.5min的洗脫峰,即得胃液提取物。
6、 根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于所述高效液相色譜分離中所用的色譜柱的填充介質為0DS-3,孔徑5rnn。
7、 根據(jù)權利要求6所述的方法,其特征在于所述高效液相色譜分離中在進行分離前包括將所述離體的胃液進行離心濃縮的步驟。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種胃液提取物及其制備方法。該胃液提取物的有效組分包括相對分子質量為216且具有吲哚結構的物質。本發(fā)明的胃液提取物可用來輔助診斷胃癌,具體可以是通過高效液相檢測提取物的峰面積值來判斷是否患有胃癌,實驗證明,結果可靠、安全、快速;另外,本發(fā)明制備胃液提取物的方法簡單、省時省力。因此,本發(fā)明的胃液提取物及其制備方法在胃癌診斷領域中具有廣闊的應用前景。
文檔編號G01N30/06GK101498696SQ200910078859
公開日2009年8月5日 申請日期2009年3月4日 優(yōu)先權日2009年3月4日
發(fā)明者周麗雅, 淵 李, 林三仁 申請人:北京大學第三醫(yī)院