專利名稱：：一種羥乙基磺酸鈉的高效液相色譜分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：一種羥乙基磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，本發(fā)明涉及高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(HPLC-ELSD)分析法。具體的說(shuō)，涉及用HPLC-ELSD分析法，分析脂肪?；撬猁}雜質(zhì)的含量。
背景技術(shù)：
：依捷邦A(yù)(IgeponA)為刺激性相對(duì)較小的陰離子表面活性劑，對(duì)硬水不敏感，有良好的泡沬性能與去污力，對(duì)人體的皮膚親和性好，被廣泛用于化妝品和洗滌劑配方中。IgeponA的生產(chǎn)原料主要是脂肪酸(大多數(shù)是椰子油酸)和羥乙基磺酸鈉(SI)。生產(chǎn)IgeponA時(shí)，產(chǎn)品中未參與酯化的SI殘余量的確定對(duì)制皂過(guò)程的整理階段非常重要，如果制皂過(guò)程中皂內(nèi)SI的量能控制在某一范圍內(nèi)，將能顯著改善皂的硬度和加工性能。少數(shù)羥乙基磺酸鹽可作為塊狀香皂的固化劑，硬度的提高對(duì)增加皂的出條能力起一定作用。在固體皂配方中，SI含量對(duì)皂的使用性能也產(chǎn)生非常大的影響，如皂中SI的含量超過(guò)了一定限度，會(huì)對(duì)皮膚產(chǎn)生一定的刺激性，所以SI含量對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量控制是一個(gè)重要的指標(biāo)，對(duì)IgeponA中殘留SI的含量進(jìn)行測(cè)定很有必要。但是IgeponA質(zhì)量指標(biāo)中關(guān)于殘留SI的含量測(cè)定，一直沒(méi)有文章報(bào)道，更沒(méi)有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布。離子色譜是目前對(duì)磺酸鹽含量分析比較成熟的方法，但離子色譜的使用遠(yuǎn)不及高效液相色譜普及。本發(fā)明提供的HPLC-ELSD分析SI的方法，是一種易于推廣普及的方法，可用于IgeponA和皂的生產(chǎn)過(guò)程檢測(cè)、產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種靈敏、快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)SI含量的高效液相色譜方法。本發(fā)明的技術(shù)方案一種羥乙基磺酸鈉SI的高效液相色譜分析方法，采用高效液相色譜，配合蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定羥乙基磺酸鈉含量。因IgeponA和SI均為磺酸鹽，紫外吸收極弱，無(wú)法選擇紫外檢測(cè)器作為檢測(cè)設(shè)備。雖然示差折光檢測(cè)器是通用型的檢測(cè)器，但由于其靈敏度太低，且易受外界環(huán)境波動(dòng)的影響，不能滿足低濃度分析的要求。選用高效液相色譜法分析烷基磺酸鹽時(shí)，除尋求好的分離條件外，還要選擇合適的檢測(cè)系統(tǒng)。所以，本方法采用靈敏度較高的蒸發(fā)光散射檢測(cè)器測(cè)定。高效液相色譜操作條件為色譜柱250mmx4.6mm(id)不銹鋼柱，Lichrospher-5|im-018填料；流動(dòng)相組成體積比甲醇超純水=10050:o50;推薦體積比為ioo80:020;流速0.21.2mL/min;推薦流速為0.30.8mL/min;柱溫1060。C;推薦柱溫2550°C;檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；檢測(cè)器的噴霧室級(jí)別50%80%;推薦檢測(cè)器的噴霧室級(jí)別為60%;漂移管溫度4060°C;推薦漂移管溫度為4050°C;氮?dú)鈮毫?540psi;推薦氮?dú)鈮毫?0psi。標(biāo)準(zhǔn)物采用>99%純度的Sl粉末或者質(zhì)量分?jǐn)?shù)48n/。的SI水溶液。推薦采用》99y。純度的SI粉末。高效液相色譜操作的進(jìn)樣體積采用常規(guī)參數(shù)，推薦進(jìn)樣量為20pL。推薦所述的流動(dòng)相所用的超純水，經(jīng)煮沸，以除去02和C02等溶解氣體；所述的流動(dòng)相在使用前用超聲波脫氣。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明采用HPLC-ELSD分析法，分析脂肪?；撬猁}雜質(zhì)含量，測(cè)定的結(jié)果得到傳統(tǒng)的離子色譜法的驗(yàn)證，正確可靠。本方法具有靈敏度高、檢測(cè)限低、精密度好、速度快、效率高等優(yōu)點(diǎn)，要求操作人員學(xué)會(huì)溶(注)樣品就可以準(zhǔn)確分析，適用于工廠在線控制分析和大批量樣品分析，隨著本方法的進(jìn)一步完善，將為國(guó)家SI分析標(biāo)準(zhǔn)的出臺(tái)提供一定的參考價(jià)值，也將對(duì)檢測(cè)機(jī)構(gòu)仲裁分析產(chǎn)生深遠(yuǎn)意義。圖1SI的HPLC-ELSD標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。國(guó)實(shí)施例1，令實(shí)施例2。圖2IgeponA中SI的HPLC-ELSD測(cè)試結(jié)果譜圖。圖3某合成皂中SI的HPLC-ELSD測(cè)試結(jié)果譜圖。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例1實(shí)驗(yàn)儀器WATERS1525型高效液相色譜儀(美國(guó)Waters);Waters2420型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(美國(guó)Waters);Empower色譜工作站；超聲清洗器，上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司；JA1004電子天平(1/10000天平)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；DionexOnGuardIIRP前處理預(yù)柱(美國(guó)Dionex);Dionex500離子色譜儀(美國(guó)Dionex);DionexAGll-ASll-HC分離柱(美國(guó)Dionex);Dionex電導(dǎo)檢測(cè)器(美國(guó)Dionex)。色譜條件色譜柱250mmx4.6mm(id)不銹鋼柱，Lichrospher-5nm-C18填料；流動(dòng)相組成體積比甲醇超純水=100:0;流速0.4mL/min;柱溫25°C;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；檢測(cè)器的噴霧室級(jí)別60%;漂移管溫度5(TC;氮?dú)鈮毫?0psi;進(jìn)樣量20jjL。藥品依捷邦A(yù):工業(yè)級(jí)，黃岡永安藥業(yè)有限公司；羥乙基磺酸鈉水溶液(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48%):工業(yè)級(jí)(其中活性物含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)》99.1%)，黃岡永安藥業(yè)有限公司；市售合成皂；甲醇色譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；其他試劑均為分析純。測(cè)定步驟1、標(biāo)準(zhǔn)品的處理取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48%SI水溶液10mg加入100mL無(wú)水乙醇，水浴加熱至透明，放入冰箱中(05'C)，12h后，待全部結(jié)晶析出，抽濾并干燥，105±2°C烘至恒重得到SI粉末(活性物質(zhì)量分?jǐn)?shù)》99.1%)。2、羥乙基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精確稱取由步驟l.處理過(guò)的SI固體粉末100.0mg置于50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，SI質(zhì)量濃度為2.0mg/mL。3、IgeponA溶液及合成皂樣品溶液的配制精確稱取IgeponA固體和合成皂各50.0mg，分別加30mL甲醇超聲溶解1min，分別移至100mL容量瓶中，并用甲醇定容至刻度。質(zhì)量濃度均為0.5mg/mL。樣品溶液使用前用0.20nm的尼龍濾紙過(guò)濾，清液待用。4、離子色譜用樣品溶液的配制稱取由步驟l.處理過(guò)的SI固體粉末23.749mg放入50mL燒杯中，加入少量超純水溶解，轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶中，定容得離子色譜用的SI標(biāo)準(zhǔn)溶液，質(zhì)量濃度為0.475mg/mL。稱取825mgIgeponA和525mg合成皂，加30mL超純水，超聲溶解5min，出現(xiàn)大量氣泡，加23滴無(wú)水乙醇清泡后定容至50mL，質(zhì)量濃度分別為16.5mg/mL和10.5mg/mL。5、標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性關(guān)系精密吸取步驟2.中SI標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于容量瓶中，甲醇定容，得質(zhì)量濃度分別為0.004mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL和1.0mg/mL的SI標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述色譜條件測(cè)定，每份對(duì)照液測(cè)定5次，取峰面積平均值，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=964348340.75x-1066624.69，線性范圍為0.0041.0mg/mL，RM細(xì)(圖1所示)。6、HPLC-ELSD法測(cè)定結(jié)果將步驟3.配制的IgeponA和合成皂溶液，分別經(jīng)HPLC-ELSD法測(cè)定，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出在IgeponA溶液中SI的質(zhì)量濃度為0.01157mg/mL，即在IgeponA固體中SI質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.314%;在合成鬼溶液中SI的質(zhì)量濃度為0.020%mg/mL，即在合成皂固體中SI的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.180%。7、離子色譜法測(cè)定結(jié)果經(jīng)離子色譜定量分析，得出IgeponA中含SI的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.211%，合成皂中含SI的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.543%(詳見(jiàn)中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所的"分析測(cè)試報(bào)告")。由此顯示，HPLC-ELSD法測(cè)定結(jié)果與離子色譜法測(cè)定結(jié)果吻合。8、精密度及回收率實(shí)驗(yàn)取質(zhì)量濃度為0.4mg/mLSI標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣7次，所得結(jié)果平均值為0.385mg/mL，精密度RSD1.800/0。精確量取5份質(zhì)量濃度為0.1mg/mLIgeponA2mL，每份各加入2mL體積的0mg/mL(空白)、0.004mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mLSI標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)行測(cè)定，取3次測(cè)定平均值計(jì)算回收率。回收率95.398.2%，結(jié)果見(jiàn)表1。性噪比為3:1時(shí)SI的濃度為0.02pg/mL,即為檢出限?？梢?jiàn)，本方法具有良好的精密度、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。表1加標(biāo)回收率計(jì)算<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表中加標(biāo)前量^空白加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測(cè)定值X進(jìn)樣量添加量=標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度X進(jìn)樣量+2加標(biāo)后量=加標(biāo)前量+添加量回收量=加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測(cè)定值X進(jìn)樣量回收率=回收量+加標(biāo)后量乂100%實(shí)施例2色譜條件色譜柱250mmx4.6mm(id)不銹鋼柱，Lichrospher-5nm-C18填料；流動(dòng)相組成體積比甲醇超純水=100:0;流速0.8mL/min;柱溫25°C;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；檢測(cè)器的噴霧室級(jí)別60%;漂移管溫度40°C;氮?dú)鈮毫?0psi;進(jìn)樣量為20pL。其余實(shí)施方式均與實(shí)施例1相同。1、標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性關(guān)系精密吸取實(shí)施例1步驟2中的SI標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于容量瓶中，甲醇定容，得質(zhì)量濃度分別為0.004mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL禾卩1.0mg/mL的SI禾示準(zhǔn)溶液，按上述色譜條件測(cè)定，每份對(duì)照液測(cè)定5次，取峰面積平均值，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=718740358.37x+185333.11，線性范圍為0.0041.0mg/mL，R2=0.995(圖1所示)。由于液相色譜的流速等操作條件的不同，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線也會(huì)不同。2、HPLC-ELSD法測(cè)定結(jié)果實(shí)施例1步驟3.配制的lgeponA和合成皂溶液，經(jīng)HPLC-ELSD法測(cè)定，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出在IgeponA溶液中SI的質(zhì)量濃麼為0.01193mg/mL，即在IgeponA固體中SI質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.386%;在合成皂溶液中SI的質(zhì)量濃度為0.02047mg/mL，即在合成皂固休中SI的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.094%。與離子色譜測(cè)定結(jié)果基本吻合。3、精密度及回收率實(shí)驗(yàn)取質(zhì)量濃度為0.4mg/mLSI標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣7次，所得結(jié)果平均值為0.380mg/mL，精密度RSD2.65%。精確量取5份質(zhì)量濃度為0.1mg/mLIgeponA2mL，每份各加入2mL體積的0mg/mL(空白)、0.004mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mLSI標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)行測(cè)定，取3次測(cè)定平均值計(jì)算回收率?；厥章?5.2%98.3%，結(jié)果見(jiàn)表2。表2加標(biāo)回收率計(jì)算<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表中加標(biāo)前量-空白加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測(cè)定值X進(jìn)樣量添加量=標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度X進(jìn)樣量+2加標(biāo)后量=加標(biāo)前量+添加量回收量=加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測(cè)定值X進(jìn)樣量回收率-回收量+加標(biāo)后量X100%權(quán)利要求1、一種羥乙基磺酸鈉SI的高效液相色譜分析方法，其特征是采用高效液相色譜，配合蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定SI的含量；高效液相色譜操作條件為色譜柱250mm×4.6mm不銹鋼柱，Lichrospher-5μm-C18填料；流動(dòng)相組成體積比甲醇∶超純水＝100～50∶0～50；流速0.2～1.2mL/min；柱溫10～60℃；檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；檢測(cè)器的噴霧室級(jí)別50％～80％；漂移管溫度40～60℃；氮?dú)鈮毫?5～40psi；進(jìn)樣量為20μL；標(biāo)準(zhǔn)物采用≥99％純度的SI粉末或者質(zhì)量分?jǐn)?shù)48％的SI水溶液。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述SI的高效液相色譜分析方法，其特征是流動(dòng)相組成體積比甲醇超純水=10080:020;流速0.30.8mL/min;柱溫2550°C;檢測(cè)器的噴霧室級(jí)別為60%;漂移管溫度4050°C;氮?dú)鈮毫?0psi;標(biāo)準(zhǔn)物采用》99。/。純度的SI粉末。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述SI的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述的流動(dòng)相在使用前用超聲波脫氣。全文摘要一種羥乙基磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，涉及用HPLC-ELSD分析法，分析脂肪?；撬猁}雜質(zhì)的含量。本發(fā)明利用高效液相色譜分析方法，配合蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定羥乙基磺酸鈉含量；試樣使用甲醇溶解，以甲醇-水為流動(dòng)相，使用Lichrospher-C₁₈為填料的不銹鋼柱和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，回收率為95.2％～98.3％，檢出限為0.02μg/mL，精密度RSD小于3.00％。本方法使用儀器普及，操作步驟簡(jiǎn)便，測(cè)定的結(jié)果得到傳統(tǒng)的離子色譜法的驗(yàn)證，正確可靠，且靈敏度高，重現(xiàn)性好。本發(fā)明公開(kāi)了一種靈敏、快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)羥乙基磺酸鈉(SI)含量的高效液相色譜方法，對(duì)控制固體合成洗滌皂配方中SI的含量，進(jìn)而對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量控制起重要作用。文檔編號(hào)G01N21/51GK101520442SQ20091002625公開(kāi)日2009年9月2日申請(qǐng)日期2009年3月18日優(yōu)先權(quán)日2009年3月18日發(fā)明者忠周,孫培冬,曹光群,成楊,敏楊,王建新申請(qǐng)人:江南大學(xué)