專利名稱：一種復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種質(zhì)量檢測方法，特別是涉及一種復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心舒寶片是具有活血化瘀，益氣止痛的心血管藥物，用于冠心病，氣虛血瘀引起的胸悶，心絞痛，以及高血壓，高血脂，動脈硬化等。該中藥品種方中丹參苦微寒，祛瘀止痛、活血通經(jīng)，為活血化瘀之要藥；刺五加辛微苦溫，益氣健脾、補(bǔ)腎安神，令氣旺血行、瘀去絡(luò)通；山楂酸甘微溫，消食健胃、行氣散瘀，二藥配合丹參則活血化瘀，益氣止痛之功益彰；白芍緩急止痛，郁金行氣化瘀，使氣行則血行，通則不痛，加強(qiáng)活血、化瘀止痛之功。本品標(biāo)本兼治，祛邪而不傷正，扶正而不礙邪，共奏活血化瘀，益氣止痛之功，是治療冠心病，氣虛血瘀引起的胸悶，心絞痛，以及高血壓，高血脂，動脈硬化等的常用藥物。為促進(jìn)中藥制劑現(xiàn)代化，中藥制劑不斷研究質(zhì)量檢測方法是必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種新的復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法包括如下含量測定和/或鑒別中的一種或幾種含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VI D)；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，25-29∶8-12∶60-65甲醇-乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為280-300nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加70-80％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70-80％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流30-60分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用70-80％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
鑒別a取固體制劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以30-50∶3-7∶8-12∶0.1-0.3三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取固體制劑5g，研細(xì)，加70-80％乙醇50ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以17-20∶1氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法優(yōu)選如下含量測定和/或鑒別中的一種或幾種含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VI D)；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27∶10∶63甲醇-乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不得少于0.60mg。
鑒別a取固體制劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以40∶5∶10∶0.2三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取固體制劑5g，研細(xì)，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
本發(fā)明復(fù)方中藥固體制劑是由如下方法制成的丹參100～300g白芍1000～3000g 刺五加500～1500g郁金150～450g山楂1000～3000g以上五味，取白芍200～500g粉碎成細(xì)粉，備用；山楂用乙醇加熱回流提取1～3次，每次1～3小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，50～80℃以真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用，剩余白芍或全部白芍與其余丹參用6～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.05～1.35，加乙醇，使含醇量達(dá)50～80％，靜置過夜，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，按常規(guī)方法制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸等固體制劑。
本發(fā)明質(zhì)量檢測方法使本發(fā)明復(fù)方中藥制劑質(zhì)量可控、療效確切。下述實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例1 本發(fā)明復(fù)方中藥固體制劑心舒寶片的抗心絞痛作用研究方法和結(jié)果(一)小鼠心臟耐缺氧能力取ICR系小鼠50只，♀♂各半，體重23～28g，隨機(jī)分為5組，每組10只，禁食不禁水12小時后按表1分別給予生理鹽水、復(fù)方丹參以及等比劑量的心舒寶灌胃。40分鐘后腹腔注射5％烏拉坦0.15ml/10g麻醉，暴露氣管，以XZ-11心電監(jiān)視儀(上海醫(yī)用電子儀器廠)監(jiān)視肢體II導(dǎo)聯(lián)心電并記錄心率，然后以棉線將氣管扎緊，完全阻斷呼吸，以心臟停轉(zhuǎn)時間的長短做為心臟耐缺氧的指標(biāo)，結(jié)果進(jìn)行t測驗(yàn)(表1)。
表1心舒寶對小鼠心臟耐缺氧能力的影響(X±SD，n＝10)

注與生理鹽水對照組比較表1提示，三個等比劑量的心舒寶都顯著地提高小鼠心臟的耐缺氧能力并具有量效關(guān)系，其大劑量組的心臟耐缺氧時間延長達(dá)185.5％，超過復(fù)方丹參組。
(二)離體大鼠心臟冠脈流量雄性SD系大鼠40只，250～320g，隨機(jī)分為4組，每組10只，按Langendorff法進(jìn)行離體心臟灌流(灌流壓50cmH2O，洛氏液溫38±1℃，PH7.25±1，充氧)，心尖部經(jīng)換能器與LMS-2A二道生理記錄儀(成都儀器廠)相連，冠脈流量由自動記錄儀(自制)描繪，給藥情況及實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2.心舒寶對離體大鼠心臟冠脈流量和心率的影響(X±SD，n＝10)

※P＜0.05，※※P＜0.01，給藥前后自身對比從表2可見，心舒寶能顯著地減慢離體心臟的心率，提高冠脈灌流量，其作用特點(diǎn)與心得安相似，其效果以0.25％濃度組最明顯，加大灌流濃度并不相應(yīng)提高療效。
(三)對抗大鼠急性心肌缺血心電圖雄性SD系大鼠55只，250-350g，隨機(jī)分為5組(其中生理鹽水組15只)，腹腔注射烏拉坦麻醉后以XDH-2心電圖機(jī)(上海醫(yī)用電子儀器廠)描記肢體II導(dǎo)聯(lián)心電圖(1mv＝10mm，50mm/s)并按表3所示給藥。經(jīng)1小時(復(fù)方丹參組0.5小時)后再次描記心電圖，從尾靜脈注入腦下垂體后葉素0.75u/kg(10″)，分別記錄注射后10″，20″，30″，40″，1′，3′，和5′的心電圖，按中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所標(biāo)準(zhǔn)(中草藥有效成份的研究，人民衛(wèi)生出版社1972)判斷是否發(fā)生急性心肌缺血，結(jié)果進(jìn)行X2測驗(yàn)(表3)。
表3.心舒寶對大鼠急性心肌缺血心電圖的保護(hù)作用

注與生理鹽水對照組比較對照組大鼠在靜脈注射腦下垂體后葉素后，出現(xiàn)典型的缺血性T-ST波形，部份實(shí)驗(yàn)鼠還出現(xiàn)心律失常，急性心肌缺血發(fā)生率達(dá)93.3％，而口服心舒寶1g/100g和2g/100g的大鼠，其心肌缺血發(fā)生率明顯降低，分別只在20％和10％。其保護(hù)作用與腹腔注射復(fù)方丹參2g/100g組相似，組間無顯著差異。這提示，心舒寶片口服有明顯的抗急性心肌缺血作用。
下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
丹參200g 白芍2000g 刺五加1000g 郁金300g 山楂2000g以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取二次。每次2小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，70℃以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍與其余丹參等三味加8、6倍水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.165-1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，制粒，壓制成1000片，即得。
含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VI D)；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27∶10∶63甲醇-乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取片劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不得少于0.60mg。
鑒別a取片劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以40∶5∶10∶0.2三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取片劑5g，研細(xì)，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
實(shí)施例2丹參200g 白芍2000g 刺五加1000g 郁金300g 山楂2000g以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取二次。每次2小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，70℃以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍與其余丹參等三味加8、6倍水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.165-1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，制粒，制成膠囊1000粒，即得。
含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VID)；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27∶10∶63甲醇-乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取膠囊內(nèi)容物，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不得少于0.60mg。
鑒別取膠囊內(nèi)容物5g，研細(xì)，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
實(shí)施例3丹參200g 白芍2000g 刺五加1000g 郁金300g 山楂2000g以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取二次。每次2小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，70℃以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍與其余丹參等三味加8、6倍水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.165-1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，加常規(guī)輔料制成滴丸。
含量測定照高效液相色譜法測定(中國藥典2005年版一部附錄VID)；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27∶10∶63甲醇-乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取滴丸，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不得少于0.60mg。
鑒別取滴丸1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以40∶5∶10∶0.2三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例4丹參200g 白芍2000g 刺五加1000g 郁金300g 山楂2000g
以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取二次。每次2小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，70℃以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍或全部白芍與其余丹參等三味加8、6倍水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.165-1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，加常規(guī)輔料制成顆粒劑。
鑒別a取顆粒劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以40∶5∶10∶0.2三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b取顆粒劑5g，研細(xì)，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
實(shí)施例5丹參200g 白芍2000g 刺五加1500g 郁金300g 山楂2000g以上五味，取白芍330g粉碎成細(xì)粉，備用；山楂用乙醇加熱回流提取二次。每次2小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉混合，70℃以下真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用；剩余白芍與其丹參等三味加水8、6倍水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.165-1.205，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，制粒，壓制成1000片，即得。
含量測定照高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27∶10∶63甲醇-乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不得少于0.60mg。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方中藥的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定和/或鑒別中的一種或幾種含量測定照高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，25-29∶8-12∶60-65甲醇一乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為280-300nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加70-80％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70-80％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流30-60分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用70-80％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得；鑒別a取固體制劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以30-50∶3-7∶8-12∶0.1-0.3三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b取固體制劑5g，研細(xì)，加70-80％乙醇50ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以17-20∶1氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；所述的復(fù)方中藥固體制劑是由如下方法制成的丹參100～300g白芍1000～3000g 刺五加500～1500g郁金150～450g山楂1000～3000g以上五味，取白芍200～500g粉碎成細(xì)粉或不粉碎，備用；山楂用乙醇加熱回流提取1～3次，每次1～3小時，合并提取液，回收乙醇，濃縮至適量，與白芍粉或輔料混合，50～80℃以真空干燥，粉碎成細(xì)粉備用，剩余白芍或全部白芍與其余丹參6～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至密度為1.05～1.35，加乙醇，使含醇量達(dá)50～80％，靜置過夜，回收乙醇，濃縮成稠膏，與上述細(xì)粉混勻，按常規(guī)方法制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸等固體制劑。
2.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定和/或鑒別中的一種或幾種含量測定照高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，27∶10∶63甲醇一乙睛-1％甲酸溶液為流動相；檢測波長為286nm，理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方中藥固體制劑，研細(xì)，取5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，稱定重量，加熱回流45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；固體制劑中單位制劑含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不得少于0.60mg；鑒別a取固體制劑1g，研細(xì)，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以40∶5∶10∶0.2三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b取固體制劑5g，研細(xì)，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1氯仿一甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
全文摘要
一種復(fù)方中藥心舒寶片的質(zhì)量檢測方法，該方法包括含量測定和/或鑒別，具體指對心舒寶制劑中的刺五加、白芍進(jìn)行薄層色譜定性鑒別，對丹參采用高效液相色譜法進(jìn)行丹酚酸B的含量測定。
文檔編號G01N33/15GK1879851SQ20061007915
公開日2006年12月20日 申請日期2006年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月10日
發(fā)明者陳紀(jì)鵬, 趙水連, 洪緋, 羅志毅, 夏松 申請人:漳州片仔癀藥業(yè)股份有限公司