專利名稱：一種診斷口腔疾病的試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及口腔粘膜癌和癌前損害(口腔癌前病變)的監(jiān)測和診斷的試劑，適用于臨床對口腔癌的診斷、對癌前病變的連續(xù)監(jiān)測，對口腔粘膜疾病的自我識別，人群中口腔癌和癌前損害的流行病普查，有助于口腔癌的早期診斷。
背景技術(shù)：
口腔癌是一個發(fā)病率和死亡率都很高的疾病，口腔癌前損害是一種癌前期的病變，易惡變?yōu)榘浒l(fā)病率也很高。口腔粘膜病患者往往長期思想負(fù)擔(dān)重，精神壓力大，惟恐惡變。目前用于口腔癌和癌前病變的診斷技術(shù)有二類1、創(chuàng)傷性技術(shù)即組織病理方法，需切除患者病變組織，然后切片在顯微鏡下觀察組織病變情況。該方法直接、準(zhǔn)確。但因具創(chuàng)傷性，有促進(jìn)轉(zhuǎn)移的可能性；口腔病損組織小，取樣和切片時可能因部位偏差出現(xiàn)假陰性。故此法不易為病人早期接受，而影響早期診斷。
2、非創(chuàng)傷性技術(shù)(1)脫落細(xì)胞檢查法1951年Montgonony最早用脫落細(xì)胞來檢查癌變細(xì)胞，其優(yōu)點為非創(chuàng)傷性技術(shù)，易被患者接受，但隨后研究發(fā)現(xiàn)，此法假陽性結(jié)果可高達(dá)37％，因而此法的研究應(yīng)用逐漸減少。
(2)甲苯胺藍(lán)染色法，此法于1964年由Nelbel shedel首先報道，其機(jī)理是細(xì)胞的病變狀態(tài)與甲苯胺藍(lán)著色的深淺有較高的相關(guān)性。目前國際上現(xiàn)用的Oratest(奧泰口腔癌檢測系統(tǒng))就是此技術(shù)。Oratest是英國產(chǎn)品，現(xiàn)已進(jìn)入國內(nèi)市場。該方法的優(yōu)點是無創(chuàng)傷性，患者易接受；對口腔癌的診斷準(zhǔn)確性較高；操作簡便。缺點在于不能鑒別出癌前損害；特異性不很高。1998年Miller等用此對DMBA所致金黃地鼠頰部白斑和癌進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)不典型增生和原位癌有95.2％的假陰性，對癌有27.8％的假陰性。
(3)20世紀(jì)80年代初，國際國內(nèi)曾開展了血卟林衍生物對口腔白斑和口腔癌的監(jiān)測研究，但因該法影響因素多，設(shè)備要求高，假陰性高，近年報道很少，幾無應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種診斷口腔疾病的試劑，該試劑配伍合理，工藝簡便，操作方便，使用安全，提高了疾病的診斷率和病檢的陽性率，為患者提供了一種自我對疾病的識別。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施選用孟加拉紅為染色劑，其與腫瘤細(xì)胞DNA多聚酶有親和力，因此其著色對口腔癌的診斷有特異性。其著色深淺度能鑒別口腔癌和癌前損害。本發(fā)明制備出孟加拉紅口腔癌診斷試劑原料 重量比(％)碳酸氫鈉 0.5-3.0甲醛或乙醇1.0-3.0孟加拉紅 0.5-4.0蒸餾水90.0-98.0將上述原料依次加入，便得到一種診斷口腔疾病的試劑。
該試劑①供臨床專業(yè)醫(yī)師診斷口腔癌用，同時具有輔助指示活檢部位，提高病檢陽性率的作用；②供患者自我識別病情。該試劑盒將著色程度分級，通過標(biāo)準(zhǔn)比色板比較來鑒別正常組織細(xì)胞或癌前損害或癌變細(xì)胞(動物實驗染色值與肉眼觀察和組織病理分析見下表。
表1 染色值與肉眼觀察和組織病理分析

實驗頰囊1-10周染色值動態(tài)變化見下表2。
表2 實驗頰囊1～10周的染色值動態(tài)變化(％)

口腔黏膜病組織病理和染色值比值分布見下表3。
表3 196例口腔粘膜疾病的組織病理和染色比值分布

臨床診斷與染色值及病理檢查符合率見下表4-6。
表4 88例臨床診斷為癌的病理與染色比值情況

表5 染色比值在0.25以下的組織病理與臨床判斷符合率

表6 染色比值在0.5以上的組織病理與臨床判斷符合率

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點和效果1、配伍合理，工藝簡單。2、特異性高。因為孟加拉紅直接與腫瘤細(xì)胞的DNA多聚酶特異性結(jié)合。3、敏感性強，現(xiàn)用方法均為定性和半定量，而本法可定量、分級，能區(qū)別癌變和癌前損害，故較定性和半定量方法診斷準(zhǔn)確率高，準(zhǔn)確率高達(dá)95％以上。4、分級定量，配有比色板，有利于非專業(yè)者掌握判斷標(biāo)準(zhǔn)，故可供患者自我識別。并且安全無毒，操作簡便，便于患者對病情的連續(xù)觀察和早期診斷。5、協(xié)助提高病檢診斷率?？谇徊p取樣部位稍有偏差，就易出現(xiàn)假陰性，本染色可指示取樣部位，從而大大提高陽性診斷率。
具體實施例方式
孟加拉紅3.1蒸餾水 92.8將上述原料依次加入，便得到一種監(jiān)測和診斷口腔疾病的試劑。
權(quán)利要求
1.一種診斷口腔疾病的試劑，它由以下重量配比的原料制配的試劑原料％碳酸氫鈉0.5-3.0甲醛或乙醇 1.0-3.0孟加拉紅0.5-4.0蒸餾水 90.0-98.0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種診斷口腔疾病的試劑，其特征是各原料的重量配比是原料％碳酸氫鈉1.7甲醛或乙醇 2.4孟加拉紅3.1蒸餾水 92.8
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種診斷口腔疾病的試劑，其特征是各原料的重量配比是原料 ％碳酸氫鈉 0.8甲醛 1.5孟加拉紅 2.5蒸餾水95.2
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種診斷口腔疾病的試劑，其特征是各原料的重量配比是原料 ％碳酸氫鈉 3..0乙醇 2.2孟加拉紅 0.5蒸餾水94.3
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種診斷口腔疾病的試劑，其特征是各原料的重量配比是原料 ％碳酸氫鈉 2.8乙醇 3.0孟加拉紅1.5蒸餾水 92.7
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種診斷口腔疾病的試劑，其特征是各原料的重量配比是原料 ％碳酸氫鈉 0.5甲醛 1.0孟加拉紅 4.0蒸餾水 94.全文摘要
本發(fā)明公開了一種診斷口腔疾病的試劑,選用孟加拉紅為染色劑,其與腫瘤細(xì)胞DNA多聚酶有親和力,其著色對口腔癌的診斷有特異性,其著色深淺度能鑒別口腔癌和癌前損害,制備出孟加拉紅口腔癌診斷試劑由以下原料構(gòu)成:碳酸氫鈉、甲醛或乙醇、孟加拉紅、蒸餾水,均按一定比例配制。本發(fā)明工藝簡單,配伍合理,安全無毒,操作簡便,提高疾病檢診斷率和病檢陽性率,并可供患者自我識別病情,有助于臨床對口腔癌的早期診斷。
文檔編號G01N33/52GK1369711SQ0211552
公開日2002年9月18日 申請日期2002年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月5日
發(fā)明者陳漢正, 陳作良, 李宏禮, 蘇倩倩, 徐學(xué)義, 李成章, 樊明文, 邊專 申請人:武漢大學(xué)