本發(fā)明涉及食品成分的分離技術(shù)領(lǐng)域,具體是提供一種多酚類物系統(tǒng)分離方法。
背景技術(shù):
芒果成熟后質(zhì)地柔軟,在長期保鮮和儲運的過程中,會發(fā)生褐變的現(xiàn)象。芒果的表皮會逐漸產(chǎn)生黑色的斑點,直至完全變黑。這主要是由于芒果皮及果肉中含有多酚氧化酶和大量酚類物質(zhì),它們呈隔離分布狀態(tài),同時作為呼吸傳遞物質(zhì)參與呼吸代謝作用,酚與醌之問的氧化與還原處于動態(tài)平衡狀態(tài),因此完整的芒果組織不會發(fā)生酶促褐變。但當(dāng)組織細(xì)胞受到機械損傷后或處于異常環(huán)境變化(冷或熱)時,正常的呼吸鏈被打破,其組織內(nèi)氧化與還原反應(yīng)失去平衡,再加上氧氣大量入侵,結(jié)果導(dǎo)致原料中的酚類化合物在酚酶的作用下迅速氧化成鄰醌,進(jìn)而又快速聚合,形成類黑色素導(dǎo)致褐變,尤其在打漿中,果漿極易褐變。應(yīng)用大孔樹脂分離技術(shù)可以很好地將果皮中的多酚類物質(zhì)分離出來。大孔樹脂又稱多孔樹脂,是由聚合單體和交聯(lián)劑、致孔劑、分散劑等添加劑經(jīng)聚合反應(yīng)制備而形成一種不溶于酸、堿及各種有機溶劑的有機高分子聚合物。聚合物形成后,致孔劑被除去,在樹脂中留下了大大小小、形狀各異,互相貫通的孔穴。大孔樹脂的孔徑與比表面積都比較大,在樹脂內(nèi)部具有三維空間立體孔結(jié)構(gòu),由于具有物理化學(xué)穩(wěn)定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和,再生處理方便、使用周期長、宜于構(gòu)成閉路循環(huán)、節(jié)省費用等諸多優(yōu)點,它是依靠其與被吸附分子之間的范德華引力,通過其巨大的比表面積進(jìn)行物質(zhì)吸附過程。大孔吸附樹脂分離純化技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物中活性成分如黃酮類、皂昔類、生物堿、多酚類等大分子化合物的提 取分離,應(yīng)用大孔樹脂進(jìn)行分離的技術(shù)是20世紀(jì)60年代末發(fā)展起來的繼離子交換樹脂后的分離新技術(shù)之一。但到目前,應(yīng)用于芒果多酚分離的研究還未見報道。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
為克服現(xiàn)有技術(shù)上的不足,本發(fā)明目的是提供一種多酚類物系統(tǒng)分離方法。
為實現(xiàn)本發(fā)明的目的,本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種多酚類物系統(tǒng)分離方法,包括制備中性樹脂和濕法裝柱以及吸附分離。
所述制備中性樹脂具體步驟為:先用95%乙醇充分浸泡24h.然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁,再用去離子水洗盡乙醇,然后轉(zhuǎn)入酸堿處理;用5%HCl溶液浸泡5h,再用去離子水洗至PH值為中性.接著用5%NaOH溶液浸泡5h,最后用去離子水洗至pH值為中性;
所述濕法裝柱的具體步驟為:1)將層析柱垂直固定在鐵架臺上,關(guān)閉活塞,在柱中加入一定量的超純水;2)用燒杯將大孔樹脂水漿液一次性均勻的倒入帶有一定水的吸附柱中,邊加樹脂邊用玻璃棒攪拌燒杯中的樹脂。3)把過量水通過柱底放出,保持水面高于樹脂層面3cm以上,直到全部樹脂轉(zhuǎn)移到柱中。
所述吸附分離的具體步驟為:將處理好的樹脂于水中濕法裝柱,樹脂裝填高度20cm,樹脂體積約l00mL。將芒果多酚水溶液上柱,控制流速控制為lmL/min,分部收集流出液,當(dāng)吸附飽和時,停止上樣。
所述大孔樹脂為XDA-200樹脂。
所述吸附分離步驟中,當(dāng)流出液濃度達(dá)到上樣濃度的1/2O時,即為吸附飽和。
本發(fā)明選用的樹脂理化性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于酸、堿以及有機溶劑,不受無機鹽類及強離子低分子化合物的影響,利用樹脂和被吸附分子之間的范德瓦爾斯 引力,通過巨大的比表面進(jìn)行物理吸附,使有機化合物根據(jù)有吸附力及其分子量大小的不同得以分離。本發(fā)明方法具有快速高效、成本低廉、方便靈敏、選擇性好等優(yōu)點。
具體實施方式
為使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解,下面結(jié)合具體實施方式,進(jìn)一步闡述本發(fā)明。
以下將結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明。
實施例1
試驗原料和試劑
飽和氯化鈉溶液,95%乙醇、HCl、NaOH等均為分析純。
試驗步驟:
a.樹脂預(yù)處理:取體積約等于待處理樹脂兩倍的飽和氯化鈉溶液(工業(yè)用)將樹脂浸泡10-15h,而后放盡氯化鈉溶液,用去離子水漂洗凈,使排出的水不顯黃色;而后再用95%乙醇充分浸泡24h.然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁,再用去離子水洗盡乙醇,然后轉(zhuǎn)入酸堿處理;用5%HCl溶液浸泡5h,再用去離子水洗至PH值為中性.接著用5%NaOH溶液浸泡5h,最后用去離子水洗至pH值為中性;
b.濕法裝柱:1)將層析柱垂直固定在鐵架臺上,關(guān)閉活塞,在柱中加入一定量的超純水;2)用燒杯將大孔樹脂水漿液一次性均勻的倒入帶有一定水的吸附柱中,邊加樹脂邊用玻璃棒攪拌燒杯中的樹脂。3)把過量水通過柱底放出,保持水面高于樹脂層面3cm以上,直到全部樹脂轉(zhuǎn)移到柱中。
c.吸附分離:將處理好的樹脂于水中濕法裝柱,樹脂裝填高度20cm,樹脂體積約l00mL。將芒果多酚水溶液上柱,控制流速控制為lmL/min,分部收集流出液,當(dāng)流出液濃度達(dá)到上樣濃度的1/2O時,停止上樣。所得溶液既為去多 酚水溶液。
以上所述僅為本發(fā)明的實施例,并非因此限制本發(fā)明的專利范圍,凡是利用本發(fā)明說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換,或直接或間接運用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域,均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。