核酸分離純化試劑盒組件的制作方法
【技術(shù)領域】
[0001 ]本實用新型涉及生物醫(yī)藥領域，更具體地說，它涉及一種應用于吸附柱法提取全血中DNA基因組的試劑盒裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]核酸的分離純化是分子生物學的重要組成部分，是其下游PCR、酶切、DNA測序等各種實驗過程的重要前處理環(huán)節(jié)，換句話說，核酸質(zhì)量的好壞直接決定后續(xù)試驗的成敗。傳統(tǒng)的核酸分離提純方法是酚-氯仿抽提核酸，該法提取的缺點是不可避免的存有蛋白質(zhì)、糖類、鹽類以及有機溶劑等雜質(zhì)的污染;另一種較為常見的核酸提純方法就是吸附柱法，這種方法操作流程為:
[0003](I)首先，取一定量的血樣以及對應量的PBl溶液加入試劑盒內(nèi)，并震蕩I分鐘左右；
[0004](2)向上一步的溶液中加入與PBl溶液等量的PB2溶液，再次震蕩一段時間；
[0005](3)將步驟二中的液體的一部分注入純化管柱中，這個部分包括有吸附柱和廢液收集管兩個部分套接而成，溶液加入到套設在廢液收集管中的吸附柱內(nèi)腔；
[0006](4)將這個純化管柱放置到離心機上進行離心處理約I分鐘的時間，取出內(nèi)部的吸附柱，并清理掉廢液收集管中的廢液；
[0007]( 5)向上一步的溶液中加入PB3溶液，再次離心處理，并清理掉廢液收集管中的廢液；
[0008](6)向上一步的溶液中加入1^4溶液，再次離心處理，并清理掉廢液收集管中的廢液；
[0009](7)將上述步驟得到的、存儲于純化管柱中的物質(zhì)離心處理約3分鐘，并將吸附柱取出；
[0010](8)將存儲有離心處理后物質(zhì)的吸附柱安裝至另一個液體收集管中，向吸附柱中加入少量的PB5溶液，離心處理I分鐘左右，此時存儲在液體收集管中的液體即為核酸萃取液，是后續(xù)實驗過程的實驗對象。
[0011]上述過程中，步驟4至步驟7中需要多次對純化管柱進行離心處理，在這個過程存在兩個問題，一是吸附柱在離心處理時容易在離心力的作用下脫離廢液收集管;二是吸附柱尺寸較小，內(nèi)部液體的量多則會導致離心不充分、少又會影響最后核酸萃取液的量。申請日為2009.6.16、申請?zhí)枮?00920076350.0的實用新型專利(以下稱為對比文件I)中公開了一種核酸分離吸附柱，包括吸附柱、廢液收集管，吸附柱套在廢液收集管內(nèi)，吸附層置于吸附柱底部，在吸附柱內(nèi)設有卡固吸附層的卡扣。其主要解決的是步驟4至步驟7中多次對純化管柱進行離心處理時，容易出現(xiàn)的吸附柱脫離的廢液收集管的問題。
[0012]對比文件I中尚未解決的問題是吸附柱內(nèi)液體的定量問題，也就是說，從試劑盒到純化管柱的轉(zhuǎn)移過程需要引入其他定量儀器，以控制進入吸附柱中的溶液的量，以保證離心處理的效果。不僅過程較為麻煩，并且儀器的清洗要求也較為嚴格，一旦清洗不到位會影響最終的核酸萃取液的效果。
【實用新型內(nèi)容】
[0013]針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本實用新型的目的在于提供一種可以無需引入定量儀器，單靠自身結(jié)構(gòu)實現(xiàn)定量轉(zhuǎn)移液體至吸附柱內(nèi)的核酸分離純化試劑盒組件。
[0014]為實現(xiàn)上述目的，本實用新型提供了如下技術(shù)方案:一種核酸分離純化試劑盒組件，包括有上下開口的圓形試劑盒、廢液收集管以及懸空卡設于廢液收集管內(nèi)部的吸附柱，其特征是:所述圓形試劑盒的底部與卡接于吸附柱的上開口，圓形試劑盒的上開口上設置有用于定量擠壓并密封所述試劑盒內(nèi)部空間的推進裝置。
[0015]通過采用上述技術(shù)方案，將圓形試劑盒與吸附柱卡接，吸附柱又卡接于廢液收集管內(nèi)，這樣，則在核酸提純的過程中，無需引入任何外部的儀器即可實現(xiàn)液體的轉(zhuǎn)移，尤其是在圓形試劑盒的頂部開口上設置的推進裝置，通過推進裝置的移動，從而定量的擠壓圓形試劑盒的內(nèi)部空間，從而利用推進的氣體壓力將圓形試劑盒內(nèi)部的液體定量的擠入吸附柱內(nèi)腔，完成【背景技術(shù)】中的前七步的內(nèi)容，整個過程無需計量設備，單靠自身結(jié)構(gòu)即可實現(xiàn)定量轉(zhuǎn)移液體的目的。
[0016]本實用新型進一步設置為:所述圓形試劑盒底部的外圓表面上設置有卡槽，所述吸附柱上相應位置處設置有與卡槽尺寸適配的凸棱。
[0017]通過采用上述技術(shù)方案，由于在萃取核酸的過程中需要多次進行離心處理，因此，將吸附柱與圓形試劑盒底部利用卡槽與凸棱結(jié)構(gòu)的配合形成更為緊密的卡接關(guān)系，有利于提高在離心處理過程中兩者之間的卡接強度。
[0018]本實用新型進一步設置為:所述圓形試劑盒下端呈倒錐形設置，所述卡槽設置于倒錐形面上尺寸與凸棱尺寸適配的位置處。
[0019]通過采用上述技術(shù)方案，由于核酸萃取液的配置過程中，通常圓形試劑盒的內(nèi)的液體量要遠大于擠壓至吸附柱內(nèi)的液體的量，并且，由于圓形試劑盒的底部開口，為了防止內(nèi)部液體在不受擠壓時流入吸附柱內(nèi)，因此圓形試劑盒的底部開口要做的較小，以給予內(nèi)部液體一個較大的小孔阻尼力。因此，將圓形試劑盒底部設置成倒錐形的結(jié)構(gòu)有利于推進裝置擠壓圓形試劑盒內(nèi)腔時，將內(nèi)部液體擠出，防止圓形試劑盒底部的液體難以流入吸附柱內(nèi)。
[0020]本實用新型進一步設置為:所述推進裝置與圓形試劑盒的上開口螺紋連接。
[0021]通過采用上述技術(shù)方案，螺紋結(jié)構(gòu)本身的螺距是一定值，因此，在設計之初已知曉螺紋連接的螺距，這個值可以直接作為推進裝置的定量標準，即通過螺距、螺紋的公稱直徑直接計算出旋轉(zhuǎn)圈數(shù)與圓形試劑盒內(nèi)腔體積變化的關(guān)系，從而簡單、精確的實現(xiàn)推進裝置的定量。
[0022]本實用新型進一步設置為:所述吸附柱上與廢液收集管卡接的位置處設置有彈性卡環(huán)，所述廢液收集管內(nèi)腔對應位置配和設置有凹槽，當所述吸附柱卡接于廢液收集管內(nèi)時，所述彈性卡環(huán)與凹槽之間過盈配合。
[0023]通過采用上述技術(shù)方案，由于吸附柱與廢液收集管在立新處理時是與圓形試劑盒一起放置到離心設備上的，因此，兩者之間的卡接關(guān)系也要可靠，彈性卡環(huán)與凹槽過硬配合的形式，使兩者之間不僅具備卡接力，還有由彈性卡環(huán)擠壓凹槽帶來的壓力，因此，兩者的接合力更為可靠。
[0024]本實用新型進一步設置為:所述圓形試劑盒的外壁上設置有用于標記圓形試劑盒內(nèi)部液體體積的刻度線。
[0025]通過采用上述技術(shù)方案，由于吸附柱內(nèi)的液體過多或者過少均會影響最后的核酸萃取液的質(zhì)量，因此，刻度線的設置有利于精確的控制擠