睡茄交酯類化合物及提取方法及應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了睡茄交酯類化合物及提取方法及應(yīng)用，睡茄交酯類化合物具有式(I)的結(jié)構(gòu)：本發(fā)明的睡茄交酯類化合物能有效地抑制一氧化氮(NO)的釋放，提示本發(fā)明化合物可作為抗炎的藥物。
【專利說明】
睡茄交酯類化合物及提取方法及應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及中藥提取領(lǐng)域，涉及一種睡茄交酯類化合物、提取方法及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]苦藤(Physalis angulata L.)，又稱燈籠草、天泡子、天泡草、樸樸草、打額泡等， 為前科(Solanaceae)酸衆(zhòng)屬(Physalis)-年生草本植物?！蛾懘ū静荨泛汀吨腥A本草》對(duì)苦藤 的藥用功效有著詳細(xì)的記載，苦藤具有行氣，消脹，利尿，治腹脹，清熱解毒，利尿止血，消腫 散結(jié)，可用于治療咽喉腫痛，肺癰，腮腺炎;小便不利，血尿牙齦腫痛，天皰瘡等疾病。民間多 用于治療皰瘡、牙齦腫痛、濕熱黃疸、咽喉紅腫疼痛、肺熱咳嗽等疾病。國內(nèi)外學(xué)者通過體 內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)了苦藤的抗炎（Choi, E.M.;et al.Investigations of antiinflammatory and antinociceptive activities of Piper cubeba,Physalis angulata and Rosa hybrida. Journal of Ethnopharmacology 2003,89,171-175.)、抗腫瘤（He,H·; et al.Physalin A induces apoptotic cell death and protective autophagy in HT1080human fibrosarcoma cells.Journal of Natural Products,2013,76,880-888.)n 抗菌（Si lva，M · T · G · ; et al. Studies on antimicrobial activity , in vitro , of Physalis angulata L.(Solanaceae)fraction and physalin B bringing out the importance of assay determination.Memorias do Instituto Oswaldo Cruz 2005, 100,779-782·)、抗氧化（Choi,E.M.;et al.Effect of some medicinal plants on plasma antioxidant system and lipid levels in rats.Phytotherapy research · 2005，19，382-386 ·)等作用。
[0003] 但從苦藤中提取睡茄交酯類化合物、提取方法及應(yīng)用尚未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供睡茄交酯類化合物。
[0005] 本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供睡茄交酯類化合物的提取方法。
[0006] 本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供睡茄交酯類化合物的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供包含權(quán)利要求1和2的睡茄交酯類化合物的苦藤提取 物。
[0008] 本發(fā)明的第五個(gè)目的是提供苦藤提取物的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明的第六個(gè)目的是提供含睡茄交酯類化合物的藥物組合物。
[0010] 本發(fā)明的第七個(gè)目的是提供上述藥物組合物的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：
[0012] 睡茄交酯類化合物，具有式(I)的結(jié)構(gòu)：
[0014] 其中：
[0015] 辦為㈨或0CH3;
[0016] R2 為 0H或 Η;
[0017] R3 為 0Η 或 OAc;
[0018] R4為 H;R5SH或 OH;或 R4 和 Rs 為
[0019] R6 為 H或 OH。
[0020] 上述化合物，優(yōu)選的結(jié)構(gòu)式為：
[0022]上述化合物的提取方法，包括如下步驟：
[0023] (1)以苦藤的干燥莖葉為原料，加入原料8-10質(zhì)量倍的體積分?jǐn)?shù)為60 %-80%乙醇 水溶液，回流提取2-3次，每次提取2-3小時(shí)，合并得到提取液，減壓回收溶劑，濃縮后得到總 浸膏；
[0024] (2)將總浸膏分散到5-10質(zhì)量倍的水中，依次用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取，乙酸 乙酯萃取液減壓回收溶劑，得到乙酸乙酯層浸膏；
[0025] (3)乙酸乙酯層浸膏經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比分別為100:1、50:1、30:1和15:1 的二氯甲烷一甲醇為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 1、Fr. 2、Fr. 3和Fr. 4;
[0026] (4)餾分Fr. 3經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比分別為10:1、8:1和6:1的石油醚一丙酮 為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 3-1、Fr. 3-2、Fr. 3-3;
[0027] (5)餾分Fr.3-3經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，以體積比為1:1的二氯甲烷-甲醇 為洗脫劑等度洗脫，得到餾分Fr. 3-3-1和Fr. 3-3-2;
[0028] (6)餾分Fr. 3-3-2經(jīng)0DS柱色譜分離，以體積比為1: 9、3 : 7、5:5和8: 2的甲醇-水為 洗脫劑梯度洗脫，得到饋分Fr · 3H-1、Fr · 3m、Fr · 3H-3和Fr · 3-3H;
[0029] (7)餾分Fr.3-3-2-4經(jīng)硅膠制備薄層色譜分離，以體積比為1:1的二氯甲烷一丙酮 為展開劑進(jìn)行制備，得到化合物2;
[0030] (8)餾分Fr · 4經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比為80 :1、40 :1、20 :1、10 :1和5 :1的氯 仿一丙酮為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 4-1、Fr. 4-2、Fr. 4-3、Fr. 4-4和Fr. 4-5;
[0031] (9)餾分Fr. 4-2經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化， 得到化合物4;
[0032] (10)餾分Fr. 4-4經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7:3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化， 得到化合物5;
[0033] (11)餾分Fr. 4-5經(jīng)0DS柱色譜分離，以體積比為7 : 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純 化，得到餾分 Fr · 4-5-1、Fr · 4-5-2;
[0034] (12)餾分Fr. 4-5-2經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純 化，得到化合物1和化合物3。
[0035] 睡茄交酯類化合物在制備抑制細(xì)胞釋放N0藥物中的應(yīng)用。
[0036]包含睡茄交酯類的苦藤提取物。
[0037] 苦藤提取物在制備抑制細(xì)胞釋放N0藥物中的應(yīng)用。
[0038] -種藥物組合物，是包含睡茄交酯類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，和藥學(xué)上可 接受的載體和/或賦形劑。
[0039]上述藥物組合物在制備抑制細(xì)胞釋放N0藥物中的應(yīng)用。
[0040]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0041]本發(fā)明的睡茄交酯類化合物能有效地抑制一氧化氮(N0)的釋放，提示本發(fā)明化合 物可作為抗炎的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0042]下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行描述，所描述的實(shí)施例僅僅是本 發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在 沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0043] 實(shí)施例1
[0044] 睡茄交酯類化合物的提取方法，包括如下步驟：
[0045] (1)以苦藤(Physalis angulata L.)的干燥莖葉（9.5kg)為原料，加入原料9質(zhì)量 倍的體積分?jǐn)?shù)為75%乙醇水溶液，回流提取2次，每次提取2小時(shí)，合并得到提取液，減壓回 收溶劑，濃縮后得到總浸膏（1370g);
[0046] (2)將總浸膏分散到5質(zhì)量倍的水中，依次用等體積石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取， 乙酸乙酯萃取液減壓回收溶劑，得到乙酸乙酯層浸膏116g;
[0047] (3)乙酸乙酯層浸膏經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比分別為100:1、50:1、30:1和15:1 的二氯甲烷一甲醇為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr.l、F r.2、Fr.3(35gWPFr.4(15g);
[0048] (4)餾分Fr. 3經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比分別為10:1、8:1和6:1的石油醚一丙酮 為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 3-1、Fr. 3-2、Fr. 3-3(4.2g);
[0049] (5)餾分Fr.3-3經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，以體積比為1:1的二氯甲烷-甲醇 為洗脫劑等度洗脫，得到餾分Fr. 3-3-1和Fr. 3-3-2 (600mg);
[0050] (6)餾分Fr. 3-3-2經(jīng)0DS柱色譜分離，以體積比為1: 9、3 : 7、5:5和8: 2的甲醇-水為 洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr · 3-3-2-1、Fr · 3-3-2-2、Fr · 3-3-2-3和Fr · 3-3-2-4( 500mg);
[0051] (7)餾分Fr.3-3-2-4經(jīng)硅膠制備薄層色譜分離，以體積比為1:1的二氯甲烷一丙酮 為展開劑進(jìn)行制備，得到化合物2(8mg);
[0052] (8)餾分Fr. 4經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比為80 :1、40 :1、20 :1、10 :1和5 :1的氯 仿一丙酮為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 4-1、Fr. 4-2(2g)、Fr.4-3、Fr. 4-4( 1.5g)和Fr.4-5(1.7g)；
[0053] (9)餾分Fr. 4-2經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化， 得到化合物4(19mg);
[0054] (10)餾分Fr. 4-4經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7:3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化， 得到化合物5(4mg);
[0055] (11)餾分Fr. 4-5經(jīng)0DS柱色譜分離，以體積比為7 : 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純 化，得到餾分Fr · 4-5-1、Fr · 4-5-2 (800mg);
[0056] (12)餾分Fr. 4-5-2經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純 化，得到化合物1 (19mg)和化合物3 (6mg)。
[0057]各化合物的物理化學(xué)和常數(shù)如下：
[0058] 化合物 1:無定型粉末；[?];; +54.5 (r 0.1，MeOH);UV(Me0H)Amax(l〇ge)218(4.0) nm;IR(KBr)v腹 3396,2921,2851,1740,1711,1683,1647,1467,1384,12290^^0)(1^01011111 (Δ ε)254( + 1.7) ,329(-0.9) ；HRESIME m/z 581.2727[M+Na] + (calcd for C3iH42〇9Na, 581.2727)，確定化合物1的分子式為〇311142〇9 ;111(40010^，？74(^116-(15)和13(：-匪1?(1001抱， pyridine_d5)數(shù)據(jù)見表1和2。
[0059] 化合物2:無定型粉末；[ot]f; +40.0 (rO.l, McOH);UV(MeOHUmax(loge)226(3.7) nm；IRvmax(KBr)3395,2920,2849,1646,1469a384ai21cm_1；CD(Me0H)nm( Δ ε)255(+1.5), 331(-0.1);HRES頂E m/z 583.2885[M+Na] + (calcd for C3iH44〇9Na,583.2883)，確定化合物 2 的分子式為 〇3。114。〇8;111(4001!^474(^116-(15)和13(：-匪1?(1001抱474乜116-(15)數(shù)據(jù)見表1 和2 〇
[0060] 化合物3:無定型粉末；[?];: +44.0(r0.1, Mc()H);UV(Me0H)Amax(l〇ge)218(3.9) nm;IR(KBr)vmax 3398，2920，2850，1760，1655，1467，1385，1133cm-1;CD(MeOH)nm(Δ ε)252( + 1.7)，333(-1.0);HRESnffi m/z 525.2461[M+Na] + (calcd for C28H38〇8Na，525.2464)，確定 化合物 3 的分子式為 C28H38〇8;1H(400MHz，pyridine-d5WP13C-NMR(100MHz，pyridine-d5#^ 據(jù)見表1和2。
[0061 ]化合物4:無定型粉未["];:+ 1()4.0〇:'0.丨，Vk、OH);UV(MeOHHmax(l〇ge)216(4.2) nm；IR(KBr)vmax 3398,2921,2850,1681,1647,1467,1384,1129αιι_1 ；CD(MeOH)nm( Δ ε)252( + 4.0) ,332(-1 ·9) ;HRESHffi m/z 537.2830[M+Na] + (calcd for C3〇H42〇7Na，537.2828)，確定 化合物4的分子式為〇3。1142〇7;111(40〇]\1]^ ;^71^(1;[116-(15)和130匪1?(100]\0^;^71^(1;[116-(15)數(shù) 據(jù)見表1和2。
[0062] 化合物5:無定型粉末；[?].;; +40.0 (t. 〇.丨，MeOH):UV(MeOH)Amax(loge)224(3.7) nm；
[0063] UV(MeOH)Amax(l〇ge)224(4·0)nm;IR(KBr)v腹 3395，2921，2850，1760，1647，1467，
[0064] 1384，1133cm-SaKMeOiOnnK Δ e)256(+1.4)，333(-0.4);HRESnffi m/z 511.2671 [M+Na] + (calcd for C28H4〇〇7Na，511 · 2672)，確定化合物5的分子式為C3qH4q〇8; ^HOOMHz， pyridine_d5)和 13C_NMR( 100MHz，pyridine_d5)數(shù)據(jù)見表 1 和 2〇
[0065] 表1化合物1-5氫譜數(shù)據(jù)
[0066]

[0068] 注：a，400MHz，pyridine-d5〇
[0069] 表2化合物1-5的碳譜數(shù)據(jù)
[0070]

[0072] 注：a，400MHz，pyridine-d5〇[0073] 各化合物的結(jié)構(gòu)為：
[0075] 實(shí)施例2
[0076]睡茄交酯類化合物的提取方法，包括如下步驟：
[0077] (1)以苦藤的干燥莖葉為原料，加入原料8質(zhì)量倍的體積分?jǐn)?shù)為80 %乙醇水溶液， 回流提取3次，每次提取2小時(shí)，合并得到提取液，減壓回收溶劑，濃縮后得到總浸膏；
[0078] (2)將總浸膏分散到5質(zhì)量倍的水中，依次用等體積石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取， 乙酸乙酯萃取液減壓回收溶劑，得到乙酸乙酯層浸膏；
[0079] (3)-(12)同實(shí)施例1(3)_(12)。
[0080] 實(shí)施例3
[0081]睡茄交酯類化合物的提取方法，包括如下步驟：
[0082] (1)以苦藤的干燥莖葉為原料，加入原料10質(zhì)量倍的體積分?jǐn)?shù)為60 %乙醇水溶液， 回流提取3次，每次提取2小時(shí)，合并得到提取液，減壓回收溶劑，濃縮后得到總浸膏；
[0083] (2)將總浸膏分散到10質(zhì)量倍的水中，依次用等體積石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取， 乙酸乙酯萃取液減壓回收溶劑，得到乙酸乙酯層浸膏；
[0084] (3)-(12)同實(shí)施例1(3)_(12)。
[0085] 實(shí)施例4
[0086] 睡茄交酯類化合物抑制小鼠巨噬細(xì)胞RAW 264.7釋放一氧化氮(N0)的活性測(cè)試小 鼠巨噬細(xì)胞RAW 264.7(ATCC)培養(yǎng)于10%熱滅活（56°C，30min)胎牛血清（Gibco，USA)、 1001]/11^青霉素鈉(6訃(3〇，1]5厶）、10(^8/11^鏈霉素(6訃(3〇，1]5厶）的1^]\0 1640(611^〇，1]5厶)培 養(yǎng)液中，37°C，5 %0)2的恒溫培養(yǎng)箱中孵育生長(zhǎng)。由于N0極不穩(wěn)定，在細(xì)胞培養(yǎng)上清液內(nèi)很 快代謝成亞硝酸基(MV)，故采用Griess法測(cè)定樣品中Ν0：Γ的濃度作為衡量N0水平的指標(biāo)。 Griess試劑A:0· 1 %N_萘乙二胺鹽酸鹽(naphthylethylene diamine dihydrochloride)溶 于水中；Griess試劑B: 1 %對(duì)氨基苯磺酰胺(sulphanilamide)溶于5%H3P〇4中。使用前等體 積混合試劑纟和8。用1?^1 1640培養(yǎng)液將1^1 264.7細(xì)胞稀釋至5\105〇6118/1^濃度，接種 于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔加入200100yL細(xì)胞懸浮液。C0 2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)lh后，每孔加入脂 多糖（lipopolysaccharide，LPS)(Sigma，JPN)(終濃度lyg/mL)和DMS0溶解的不同濃度的測(cè) 試樣品0.4yL，同時(shí)設(shè)LPS組(加入LPS，但不加入測(cè)試樣品，對(duì)N0釋放的抑制率為0% )和空白 對(duì)照組(不加入LPS和測(cè)試樣品，僅加入0.4yL DMS0，對(duì)N0釋放的抑制率為100 % )，每個(gè)樣品 設(shè)4個(gè)平行孔。在37°C，5%C02的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，吸取100yL培養(yǎng)液上清至酶標(biāo)板中， 離心（1000 Xg，4°C，3min)，加入100yL Griess試劑，室溫避光反應(yīng)10min，于酶標(biāo)儀測(cè)定其 540nm處吸光值。用濃度分別為1、5、10、50ymol/L的NaN0 2繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)NaN02標(biāo)準(zhǔn)曲線 細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NOf的濃度進(jìn)而計(jì)算測(cè)試樣品對(duì)N0釋放的抑制率。
[0087]表3化合物的抑制N0釋放結(jié)果
[0088]
[0089] 含有本發(fā)明所述化合物的組合物的抗炎藥物可以為適用于口服或注射等應(yīng)用形 式，例如，按常規(guī)技術(shù)，加入藥物可接受的載體和/或賦形劑制成片劑、膠囊劑、粉劑、糖漿 劑、針劑等。
[0090] 化合物具有藥理活性，因此，含有該化合物的組合物也具有藥理活性。
[0091] 以上實(shí)施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其中心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì) 于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行若干 改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)。
[0092] 本發(fā)明的睡茄交酯類化合物、含睡茄交酯類化合物的提取物、含睡茄交酯類化合 物的組合物能制備治療一氧化氮代謝異常相關(guān)聯(lián)疾病的藥物。
[0093] 其相關(guān)聯(lián)的疾病包括:全身炎癥反應(yīng)綜合癥、高血壓、腦血栓、心力衰竭、肝硬化、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、急性胰腺炎、腹膜炎、膽囊炎、闌尾炎、 糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、皮炎肌、銀肩病、急性髓性白血病、帕金森癥、早老性癡呆、抑郁 癥、敗血癥、慢性阻塞性肺炎、哮喘、急性胰腺炎、中樞神經(jīng)損傷等。其次，NO代謝異常還與癌 變及癌組織的增生有關(guān)，高濃度的NO也會(huì)誘發(fā)基因突變和腫瘤，上述化合物可以抑制NO釋 放，從而發(fā)揮抗腫瘤的作用。適用的腫瘤例子包括但不限于:各種實(shí)體腫瘤和白血病，如肺 癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、骨癌、食道癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、膀胱癌、子宮頸癌、黑色素 瘤、睪丸癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、膽管癌、絨毛膜癌、膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維肉瘤、淋 巴管瘤等。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 睡茄交酯類化合物，其特征是具有式(I)的結(jié)構(gòu)： 其中：Ri 為 0H 或 OCH3; R2為OH或Η; R3 為 OH 或 OAc; R4為Η; 1?5為!1或OH;或R4和恥為^^/; R6為Η或OH。2. 如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于所述化合物結(jié)構(gòu)式為：3. 權(quán)利要求1或2所述化合物的提取方法，其特征在于包括如下步驟： (1) 以苦藤的干燥莖葉為原料，加入原料8-10質(zhì)量倍的體積分?jǐn)?shù)為60% -80 %乙醇水溶 液，回流提取2-3次，每次提取2-3小時(shí)，合并得到提取液，減壓回收溶劑，濃縮后得到總浸 膏； (2) 將總浸膏分散到5-10質(zhì)量倍的水中，依次用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取，乙酸乙酯 萃取液減壓回收溶劑，得到乙酸乙酯層浸膏； (3) 乙酸乙酯層浸膏經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比分別為100:1、50:1、30:1和15:1的二 氯甲烷一甲醇為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 1、Fr. 2、Fr. 3和Fr. 4; (4) 餾分Fr. 3經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比分別為10:1、8:1和6:1的石油醚一丙酮為洗 脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 3-1、Fr. 3-2、Fr. 3-3; (5) 餾分Fr.3-3經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，以體積比為1:1的二氯甲烷-甲醇為洗 脫劑等度洗脫，得到餾分Fr. 3-3-1和Fr. 3-3-2; (6) 餾分Fr. 3-3-2經(jīng)ODS柱色譜分離，以體積比為1:9、3: 7、5: 5和8: 2的甲醇-水為洗脫 劑梯度洗脫，得到饋分Fr · 3H-1、Fr · 3m、Fr · 3-3?和Fr · 3-3H; (7) 餾分Fr.3-3-2-4經(jīng)硅膠制備薄層色譜分離，以體積比為1:1的二氯甲烷一丙酮為展 開劑進(jìn)行制備，得到化合物2; (8) 餾分Fr. 4經(jīng)硅膠柱色譜分離，以體積比為80:1、40:1、20:1、10:1和5:1的氯仿一丙 酮為洗脫劑梯度洗脫，得到餾分Fr. 4-1、Fr. 4-2、Fr. 4-3、Fr. 4-4和Fr. 4-5; (9) 餾分Fr. 4-2經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化，得到 化合物4; (10) 餾分Fr.4-4經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化，得到 化合物5; (11) 餾分Fr. 4-5經(jīng)ODS柱色譜分離，以體積比為7: 3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化，得 到餾分 Fr · 4-5-1、Fr · 4-5-2; (12) 餾分Fr. 4-5-2經(jīng)制備HPLC色譜，以體積比為7:3的甲醇-水為流動(dòng)相，進(jìn)行純化，得 到化合物1和化合物3。4. 權(quán)利要求1和2的睡茄交酯類化合物在制備抑制細(xì)胞釋放NO藥物中的應(yīng)用。5. 包含睡茄交酯類的苦藤提取物。6. 權(quán)利要求5的苦藤提取物在制備抑制細(xì)胞釋放NO藥物中的應(yīng)用。7. -種藥物組合物，其特征是包含睡茄交酯類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，和藥學(xué) 上可接受的載體和/或賦形劑。8. 權(quán)利要求7的藥物組合物在制備抑制細(xì)胞釋放NO藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K36/81GK105949266SQ201610341609
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年5月20日
【發(fā)明人】邱峰, 孫成鵬, 陳麗霞, 康寧
【申請(qǐng)人】天津中醫(yī)藥大學(xué)