一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]紫杉醇(paclitaxel)是從紅豆杉科紅豆杉屬(Taxus)植物的樹皮中提取得到的二萜類化合物。它是一種新型的微管穩(wěn)定劑，具有獨特抗癌活性，被美國國立癌癥研究所認(rèn)為是近15?20年來腫瘤化療的最重要的進展。作為晚期卵巢癌的二線治療藥，至今已在40多個國家獲準(zhǔn)上市，并在乳腺癌、肺癌、白血病、胃腸道癌及介入治療后的血管再狹窄等治療上顯示了令人鼓舞的療效。紫杉醇由于資源匱乏和水溶性低的問題而限制了它的臨床應(yīng)用。
[0003]紫杉醇及其類似物迄今為止僅存在于裸子植物紅豆杉科的紅豆杉屬和澳洲紅豆杉屬中，紅豆杉屬植物全世界共有11種，廣泛分布于歐亞大陸和北美的寒帶、溫帶及亞熱帶地區(qū)，但分布零散且生長緩慢。澳洲紅豆杉屬僅分布于南半球，數(shù)量稀少，紫杉醇在紅豆杉植物中含量普遍很低，即使當(dāng)前公認(rèn)含量最高的短葉紅豆杉樹皮中也不到0.1 %。
[0004]如果直接通過植物組織提取紫杉醇，則需要大量的紅豆杉樹木實體，其種植周期和種植成本過高;若采取組織培養(yǎng)的方式，雖然可以適當(dāng)降低成本，但由于紫杉醇在紅豆杉樹木不同細(xì)胞中的分布不均勻，因此其產(chǎn)率較低。如果能直接針對高產(chǎn)紫杉醇的紅豆杉細(xì)胞系進行純培養(yǎng)，則有可能提升紫杉醇的生產(chǎn)效率。為實現(xiàn)紫杉醇的高產(chǎn)率，僅僅提升細(xì)胞培養(yǎng)密度是不夠的，紫杉醇分泌量的提升往往低于生物量的提升，因此應(yīng)當(dāng)依據(jù)細(xì)胞自身特性匹配適宜的培養(yǎng)條件，以促進其定向分泌紫杉醇。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)缺陷，提供一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，以解決紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)過程中紫杉醇分泌量較低的技術(shù)問題。
[0006]為實現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0007]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，包括以下重量份的成分:苯丙氨酸8?10份，乙酸鈉4?6份，茉莉酸甲酯2?3份，水楊酸I?2份，硝酸銀I?2份，花生四烯酸I?2份，乙二胺四乙酸I?2份，檸檬酸鈉I?2份，氯化鈣I?2份，硼酸I?2份，水50?60份。
[0008]作為優(yōu)選，還包括I?2重量份的尼古丁。
[0009]作為優(yōu)選，還包括I?2重量份的亮氨酸。
[0010]作為優(yōu)選，還包括I?2重量份的小球藻粉。
[0011]作為優(yōu)選，還包括I?2重量份的氯化鋅。
[0012]作為優(yōu)選，所述誘導(dǎo)子組合物由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸9份，乙酸鈉5份，茉莉酸甲酯2.5份，水楊酸1.5份，硝酸銀1.5份，花生四烯酸1.5份，乙二胺四乙酸1.5份，檸檬酸鈉1.5份，氯化鈣1.5份，硼酸1.5份，水55份。
[0013]作為優(yōu)選，所述誘導(dǎo)子組合物由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸8.5份，乙酸鈉5.5份，茉莉酸甲酯2.1份，水楊酸1.3份，硝酸銀1.7份，花生四烯酸1.6份，乙二胺四乙酸1.2份，檸檬酸鈉1.1份，氯化鈣1.4份，硼酸1.5份，尼古丁 1.4份，亮氨酸1.1份，小球藻粉1.5份，氯化鋅1.8份，水57份。
[0014]本發(fā)明提供的誘導(dǎo)子組合物，用于促進紅豆杉細(xì)胞定向分泌紫杉醇，其使用方法是直接添加至細(xì)胞培養(yǎng)液中，可以在培養(yǎng)開始階段添加也可以在細(xì)胞進入培養(yǎng)穩(wěn)定期后添加。實驗發(fā)現(xiàn)，添加本發(fā)明誘導(dǎo)子組合物后雖然不會直接提升細(xì)胞培養(yǎng)密度，但是同等生物量的細(xì)胞培養(yǎng)液中紫杉醇產(chǎn)率顯著提升，這表明本發(fā)明誘導(dǎo)子組合物對紅豆杉細(xì)胞代謝特性產(chǎn)生了一定的影響。本發(fā)明以創(chuàng)新性的技術(shù)手段實現(xiàn)了突出的技術(shù)效果，通過本發(fā)明的誘導(dǎo)子組合物有望全面提升紫杉醇的規(guī)?；a(chǎn)現(xiàn)狀，帶來廣闊的應(yīng)用前景。
【具體實施方式】
[0015]以下將對本發(fā)明的【具體實施方式】進行詳細(xì)描述。為了避免過多不必要的細(xì)節(jié)，在以下實施例中對屬于公知的結(jié)構(gòu)或功能將不進行詳細(xì)描述。除有定義外，以下實施例中所用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員普遍理解的相同含義。
[0016]實施例1
[0017]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸8份，乙酸鈉4份，茉莉酸甲酯2份，水楊酸I份，硝酸銀I份，花生四烯酸I份，乙二胺四乙酸I份，檸檬酸鈉I份，氯化鈣I份，硼酸I份，水50份。
[0018]實施例2
[0019]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸10份，乙酸鈉6份，茉莉酸甲酯3份，水楊酸2份，硝酸銀2份，花生四烯酸2份，乙二胺四乙酸2份，檸檬酸鈉2份，氯化鈣2份，硼酸2份，水60份。
[0020]實施例3
[0021 ] 一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸9份，乙酸鈉5份，茉莉酸甲酯2.3份，水楊酸1.8份，硝酸銀1.5份，花生四烯酸1.6份，乙二胺四乙酸1.7份，檸檬酸鈉1.8份，氯化鈣1.2份，硼酸1.8份，水55份。
[0022]實施例4
[0023]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸8.8份，乙酸鈉5.4份，茉莉酸甲酯2.7份，水楊酸1.2份，硝酸銀1.2份，花生四烯酸1.2份，乙二胺四乙酸1.5份，梓檬酸鈉1.6份，氯化鈣1.4份，硼酸1.7份，尼古丁 I份，氯化鋅1.1份，水52份。
[0024]實施例5
[0025]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸9.4份，乙酸鈉4.2份，茉莉酸甲酯2.1份，水楊酸1.3份，硝酸銀1.1份，花生四烯酸I份，乙二胺四乙酸2份，梓檬酸鈉1.9份，氯化鈣1.2份，硼酸1.9份，亮氨酸1.3份，小球藻粉1.2份，氯化鋅1.6份，水58份。
[0026]實施例6
[0027]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸8.8份，乙酸鈉5.4份，茉莉酸甲酯2.7份，水楊酸1.2份，硝酸銀1.2份，花生四烯酸1.2份，乙二胺四乙酸1.5份，梓檬酸鈉1.6份，氯化鈣1.4份，硼酸1.7份，尼古丁 1.5份，水55份。
[0028]實施例7
[0029]—種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸9.2份，乙酸鈉5.7份，茉莉酸甲酯2.4份，水楊酸1.5份，硝酸銀1.5份，花生四烯酸1.7份，乙二胺四乙酸1.7份，檸檬酸鈉1.2份，氯化鈣1.9份，硼酸2份，小球藻粉1.8份，水59份。
[0030]實施例8
[0031 ] 一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸8.5份，乙酸鈉5.5份，茉莉酸甲酯2.1份，水楊酸1.3份，硝酸銀1.7份，花生四烯酸1.6份，乙二胺四乙酸1.2份，檸檬酸鈉1.1份，氯化鈣1.4份，硼酸1.5份，尼古丁 1.4份，亮氨酸
1.1份，小球藻粉I.5份，氯化鋅1.8份，水57份。
[0032]以上對本發(fā)明的實施例進行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實施例，并不用以限制本發(fā)明。凡在本發(fā)明的申請范圍內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于包括以下重量份的成分:苯丙氨酸8?10份，乙酸鈉4?6份，茉莉酸甲酯2?3份，水楊酸I?2份，硝酸銀I?2份，花生四烯酸I?2份，乙二胺四乙酸I?2份，檸檬酸鈉I?2份，氯化鈣I?2份，硼酸I?2份，水50?60份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于還包括I?2重量份的尼古丁。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于還包括I?2重量份的亮氨酸。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于還包括I?2重量份的小球藻粉。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于還包括I?2重量份的氯化鋅。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于所述誘導(dǎo)子組合物由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸9份，乙酸鈉5份，茉莉酸甲酯2.5份，水楊酸1.5份，硝酸銀1.5份，花生四烯酸1.5份，乙二胺四乙酸1.5份，檸檬酸鈉1.5份，氯化鈣1.5份，硼酸1.5份，水55份。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，其特征在于所述誘導(dǎo)子組合物由以下重量份的成分組成:苯丙氨酸8.5份，乙酸鈉5.5份，茉莉酸甲酯2.1份，水楊酸1.3份，硝酸銀1.7份，花生四烯酸1.6份，乙二胺四乙酸1.2份，梓檬酸鈉1.1份，氯化鈣1.4份，硼酸1.5份，尼古丁 1.4份，亮氨酸1.1份，小球藻粉1.5份，氯化鋅1.8份，水57份。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種利用紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉醇的誘導(dǎo)子組合物，該誘導(dǎo)子組合物優(yōu)選了苯丙氨酸、乙酸鈉、茉莉酸甲酯、水楊酸、硝酸銀、花生四烯酸、乙二胺四乙酸、檸檬酸鈉、氯化鈣、硼酸等成分并對其用量配比進行了合理化設(shè)計，其使用方法是直接添加至細(xì)胞培養(yǎng)液中，可以在培養(yǎng)開始階段添加也可以在細(xì)胞進入培養(yǎng)穩(wěn)定期后添加。實驗發(fā)現(xiàn)，添加本發(fā)明誘導(dǎo)子組合物后雖然不會直接提升細(xì)胞培養(yǎng)密度，但是同等生物量的細(xì)胞培養(yǎng)液中紫杉醇產(chǎn)率顯著提升，這表明本發(fā)明誘導(dǎo)子組合物對紅豆杉細(xì)胞代謝特性產(chǎn)生了一定的影響。本發(fā)明以創(chuàng)新性的技術(shù)手段實現(xiàn)了突出的技術(shù)效果，通過本發(fā)明的誘導(dǎo)子組合物有望全面提升紫杉醇的規(guī)?；a(chǎn)現(xiàn)狀。
【IPC分類】C12P17/02, C12N5/04
【公開號】CN105506020
【申請?zhí)枴緾N201510973542
【發(fā)明人】馬丹, 馬超
【申請人】天津市博愛生物藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年4月20日
【申請日】2015年12月18日