含穿心蓮萃取物或穿心蓮內(nèi)酯或其鹽的皮膚狀態(tài)改善用合成物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及含穿心蓮（Andrographispaniculata)萃取物或穿心蓮內(nèi)酯 (Andrographolide)或其鹽的皮膚細(xì)胞增殖用合成物，及還所述合成物的皮膚狀態(tài)改善用 合成物。
【背景技術(shù)】
[0002] 皮膚老化首先顯現(xiàn)在皮膚。為了延遲或預(yù)防這種現(xiàn)象，已在化妝品領(lǐng)域做了很多 相關(guān)研究。皮膚老化通常從25歲開始發(fā)生，40歲前后進入真正的皮膚老化期。皮膚老化 的典型現(xiàn)象為皮脂分泌量減少、皮膚發(fā)干，細(xì)胞再生遲緩，老化角質(zhì)積累、皮膚變得粗糙。另 外，支撐表皮的膠原纖維（collagen)合成量減少，導(dǎo)致彈性蛋白（elastin:彈性纖維）變 性，產(chǎn)生皺紋。同時皮膚顏色會發(fā)生變化，出現(xiàn)痣、斑紋等色素沉積癥狀，表皮變薄、皮膚保 護功能下降。之外，隨著皮膚的厚度變小，皮膚的屏障作用（BarrierEffect)下降，引發(fā)更 多的皮膚問題。
[0003] 皮膚老化相關(guān)研究主要涉及讓皮膚免受皮膚老化主要成因紫外線與活性氧傷害 的材料，皮膚皺紋改善材料，皮膚彈性增進材料，皮膚保濕強化材料，抑制生痣的材料。
[0004] 皮膚發(fā)生老化后，真皮會發(fā)生顯著的變化，70歲以后出現(xiàn)的真皮萎縮是典型的老 化現(xiàn)象。真皮的變化是起因于纖維原細(xì)胞（fibroblast)的數(shù)字減少和它們的能力下降致 使細(xì)胞外基質(zhì)中的大分子量物質(zhì)發(fā)生變化。其具體變化有膠原纖維束（collagenbundle) 的分離，黏多醣（mucopolysaccharide)合成減少，膠原纖維與彈力纖維（elastin)數(shù)量及 直徑減少，膠原纖維與彈力纖維降解及血管的膨脹等。通常，皮膚的水分含量，膠原纖維含 量及對外部環(huán)境的免疫作用能力等各種綜合因素中，對皺紋的形成影響最大的指標(biāo)是纖維 母細(xì)胞活化時的纖維母細(xì)胞增殖及由纖維母細(xì)胞合成的膠原纖維彈性纖維等指標(biāo)。目前為 止，穿心蓮萃取物與穿心蓮內(nèi)酯對纖維原細(xì)胞的影響，還從未有人揭示過。
[0005] 皮膚上，干細(xì)胞所處位置大體上有三個部位。第一是存在于稱為毛囊和毛囊之間 的表皮（interfollicular epidermis:濾泡間上皮）的表皮基底細(xì)胞層（the basal cell layer of epidermis)。第二是毛囊（hair follicle)。存在于該部位的干細(xì)胞是產(chǎn)生細(xì)胞 分化之前的細(xì)胞，在細(xì)胞表皮的再生方面，起最重要的作用。第三是存在于皮下脂肪層的脂 肪干細(xì)胞（Adipose Derived Stem Cells)。存在于皮膚的干細(xì)胞與皮膚健康息息相關(guān)，起 綜合調(diào)節(jié)作用，可以說是與皮膚健康關(guān)系最密切的重要細(xì)胞群。干細(xì)胞在存活的過程中，進 行不斷的細(xì)胞分裂，生成各種細(xì)胞活化物質(zhì)，活化周圍細(xì)胞，讓細(xì)胞免受有害環(huán)境的影響， 抑制細(xì)胞的老化，可以再生或修復(fù)有問題的部位。但是干細(xì)胞同樣是細(xì)胞群，隨著年齡的增 長其功能會逐漸喪失。即，皮膚的干細(xì)胞也隨著老化，會逐漸喪失其活性，細(xì)胞分裂能力下 降，逐漸處于非活化狀態(tài)，會產(chǎn)生老化引起的皺紋，黑斑，傷口愈合緩慢，修復(fù)緩慢等各種問 題。如果活化存在于皮膚的干細(xì)胞，則應(yīng)該能夠避免干細(xì)胞的老化，恢復(fù)其活性（Journal of Dermatological Science (2004)35, 113-123)〇
[0006] 干細(xì)胞化妝品是利用來自人體或動物的細(xì)胞或其副產(chǎn)物制造的產(chǎn)品。但其安全性 受到人們的質(zhì)疑，目前干細(xì)胞材料開發(fā)方式轉(zhuǎn)變成開發(fā)與干細(xì)胞培養(yǎng)液中有益皮膚成分相 同的成分，或者探索活化干細(xì)胞的成分。
[0007] 與此相關(guān)，韓國公開專利第10-2010-0042708號公開一種作為有效成分含阿 曼托黃素（Amentoflavone)，通過提高α6整合素（a6integrin)的表達，促進皮膚表 皮干細(xì)胞（keratinocytestemcell，KSC)的增殖的皮膚再生促進用合成物，而韓國公 開專利第10-2010-0018278號公開一種通過增加人體表皮角化細(xì)胞干細(xì)胞（Epidermal KeratinocyteStemCells,KSC)數(shù)量，作為有效成分含紫花前胡素（Decursin)的藥學(xué)合成 物。
[0008] 但，目前為止，穿心蓮萃取物及穿心蓮內(nèi)酯的有關(guān)干細(xì)胞增殖及皮膚再生的功效 還未曾得到揭示。
[0009] 本發(fā)明的發(fā)明人以天然材料為對象，探查干細(xì)胞活化及皮膚細(xì)胞活化功效的結(jié) 果，發(fā)現(xiàn)穿心蓮萃取物及從其分離的穿心蓮內(nèi)酯具有最優(yōu)秀的活性功效，完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0010] 發(fā)明目的
[0011] 因此，本發(fā)明的目的在于提供一種作為有效成分含穿心蓮萃取物或穿心蓮內(nèi)酯或 其鹽的皮膚干細(xì)胞性能增進用合成物或皮膚細(xì)胞增殖用合成物。
[0012] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種含所述合成物的皮膚狀態(tài)改善用合成物。
[0013] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述皮膚狀態(tài)改善用合成物的在藥劑、化妝材 料、及/或食品方面的用途。
[0014] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種向個體投入所述干細(xì)胞性能增進用合成物或皮 膚細(xì)胞增殖用合成物，提高個體干細(xì)胞或皮膚細(xì)胞中的某一種以上細(xì)胞活性的方法及其用 途。
[0015] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種向個體投入所述干細(xì)胞性能增進用合成物或皮 膚細(xì)胞增殖用合成物，改善個體皮膚狀態(tài)的方法及其用途。
[0016] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種向個體投入所述皮膚狀態(tài)改善用合成物，改善個 體皮膚狀態(tài)的方法及其用途。
[0017] 技術(shù)方案
[0018] 本發(fā)明提供一種作為有效成分含選自穿心蓮萃取物或穿心蓮內(nèi)酯或穿心蓮鹽的 中的某一種以上物質(zhì)的脂肪干細(xì)胞或表皮干細(xì)胞的干細(xì)胞性能增進用合成物。
[0019]本發(fā)明中，穿心蓮（Andrographispaniculata)是爵床科（Acanthaceae)的單年 生草木，是在印度全域、特別是在南部的野外或樹叢的陰涼、水分充足的地方生長的植物。 植物高為0. 3-1. 0m，莖呈深綠色、粗2-6mm，葉長8cm、寬2. 5cm，呈柳葉狀，葉尖尖，花色呈白 色或淡粉紅色，有紫色斑紋。穿心蓮植物的所有部位味道均極苦，叫做Maha_tita(摩訶泰 坦）（Kingofbitters(比特王）），雖然遠(yuǎn)矮于印度楝（Neem)，但形狀很像，而且同樣很苦， 又叫做bhui-neem。據(jù)知穿心蓮有抗癌、消炎、抗菌、抗病毒的作用，作為民間藥材用于免疫 證、化痰、解熱等。
[0020] 本發(fā)明的穿心蓮萃取物是對所述穿心蓮的全草、葉子、根、莖、花等，以通常的方法 進行萃取，或者從此分離的具有干細(xì)胞性能增進及皮膚細(xì)胞增殖活性，可改善皮膚狀態(tài)的 物質(zhì)。另外，所述萃取物不僅包括以通常方法從傳勤練萃取物萃取的萃取液，還包括利用其 干燥粉末或利用此制劑化的所有形態(tài)的物質(zhì)。
[0021] 本發(fā)明的穿心蓮萃取物可以通過水或有機溶劑萃取，所萃取的液體，可以以液體 形式使用或，通過濃縮及/或干燥使用。所述有機溶劑是甲醇（Methanol)、乙醇（Ethanol)、 異丙醇（isopropanol)、丁醇（butanol)、乙?。╡thylene)、丙酮（acetone)、己燒（hexane)、 釀（ether)、氯仿（chloroform)、乙酸乙酯（ethylacetate)、乙酸丁酯（Butylacetate)、 二氯甲燒（dichloromethane)、N,N-二甲基甲酰胺（N,N-DimethylFormamide:DMF)二甲基 諷（dimethylsulfoxide:DMS0) 1,3-丁二醇（1,3-butyleneglycol)、丙二醇（propylene glycol)或這些物質(zhì)的混合溶劑，在不破壞萃取物有效成分或最低限度降低所述破壞的條 件下，以室溫或通過加熱萃取。按萃取的有機溶劑，萃取物有效成分的萃取程度和損失程度 會有所差異，因此選擇適當(dāng)?shù)挠袡C溶劑進行萃取。萃取方法上沒有特別限制，比如可以采用 冷浸萃取、超聲波萃取、環(huán)流萃取等方法。
[0022] 過濾是從萃取液去除懸浮固體粒子的過程，利用棉、尼龍等過濾粒子或者可以采 用超濾法（Ultrafiltration)、冷凍過濾法、離心分離法等，但不限于此。另外，可以外加包 括通過多種層析法（chromatography:與大小、電荷、疏水性或親和性相關(guān)的層析法）進行 的分離過程。干燥濾液的步驟包括凍結(jié)干燥、真空干燥、熱風(fēng)干燥、噴霧干燥、減壓干燥、泡 沫干燥、高頻干燥、紫外線干燥等，但不限于此。根據(jù)情況可以追加把最終干燥的萃取物進 行粉碎的工序。
[0023]本發(fā)明的穿心蓮內(nèi)酯（andrographolide)是二砲內(nèi)酯（diterpenoidlactone)類 物質(zhì)，具有如下化學(xué)式1的結(jié)構(gòu)，其IUPAC名稱為3-[2-[decahydro_6-hydroxy-5-(hydrox ymethyl)-5, 8a-dime