一種那西肽精粉的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于獸藥制備技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種那西膚精粉的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 那西膚又名諾西膚、諾膚菌素和諾膚霉素，是一種含硫多膚類(lèi)抗生素，分子式 為CwH43Ni3〇i2Se。它是由放線(xiàn)菌菌株發(fā)酵產(chǎn)生，為淡黃色至淡褐色結(jié)晶性粉末，不溶于水 和石油酸，微溶于甲醇、乙醇、乙酸乙醋和苯，可溶于氯仿、化晚、二甲基甲酯胺，烙點(diǎn)為 310-320°C(伴隨分解）。那西膚的作用機(jī)制是阻礙細(xì)菌的蛋白質(zhì)合成，在低濃度時(shí)呈抑菌 作用，在高濃度時(shí)呈殺菌作用。由于那西膚阻抑了腸內(nèi)有害細(xì)菌的生長(zhǎng)，使腸道管壁吸收機(jī) 能正常，從而促進(jìn)了動(dòng)物的生長(zhǎng)，提高了飼料利用率。那西膚是一種毒性極低的物質(zhì)，其在 動(dòng)物體內(nèi)殘留極少且不被消化道吸收。那西膚與其它抗生素類(lèi)飼料添加劑相比，具有用量 少、無(wú)藥物殘留、毒性小，且對(duì)環(huán)境影響小等特點(diǎn)，是一種新型、高效、綠色的飼料添加劑。因 此，近年來(lái)那西膚倍受畜禽行業(yè)和養(yǎng)殖行業(yè)的關(guān)注。
[0003] 那西膚是一種脂溶性抗生素，主要存在于菌體細(xì)胞內(nèi)，僅有少量分泌到細(xì)胞外。對(duì) 于主要存在于細(xì)胞內(nèi)的脂溶性抗生素最有效的提取方法是有機(jī)溶劑萃取。李霞等（飼料 添加劑那西膚的分離提取和精制，工業(yè)微生物，1991，21 (1) : 19-22)采用乙醇浸提那西膚發(fā) 酵液，再經(jīng)正下醇反萃取得到那西膚粗品，精制后得那西膚精品。該法存在的主要缺點(diǎn)為： 1、正下醇萃取液濃縮溫度高，而那西膚在高溫下不穩(wěn)定，所W給提取工作帶來(lái)很大困難；2、 正下醇萃取時(shí)容易產(chǎn)生大量乳化層，分離乳化層使產(chǎn)品的收率大大降低（粗品70%，精品 50% )，因此不適合工業(yè)化生產(chǎn)。為此需要開(kāi)發(fā)一種適合工業(yè)化生產(chǎn)的那西膚提取工藝，W 期推動(dòng)在運(yùn)一領(lǐng)域的發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了解決現(xiàn)有的那西膚提取工藝中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種那西膚精粉的 提取方法，工藝簡(jiǎn)單，設(shè)備常規(guī)，制得那西膚精粉收率高，效價(jià)高，且不含菌絲體。
[0005] 本發(fā)明解決技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：
[0006] 一種那西膚精粉的提取方法，包括W下步驟：
[0007] (1)取滅活后的那西膚發(fā)酵液，加入助濾劑，采用邸式螺旋沉降離屯、機(jī)離屯、處理；
[0008] (2)取步驟（1)所得那西膚濾渣，向其中加入二氯乙燒，并于45-50°C攬拌0. 5-1 小時(shí)，過(guò)濾，濾液靜置分層，取有機(jī)相，得那西膚提取液；
[0009] (3)取步驟（2)所得濾渣，向其中加入二氯乙燒，并于45-50°C攬拌0.5-1小時(shí)，過(guò) 濾，濾液靜置分層，取有機(jī)相，得那西膚提取液；
[0010] (4)將步驟（2)、（3)所得那西膚提取液合并，減壓蒸饋回收二氯乙燒，再于室溫下 加入去離子水，過(guò)濾，濾餅經(jīng)水洗、干燥、研磨得那西膚精粉，蒸饋出的二氯乙燒可W直接回 收套用。
[0011] 作為優(yōu)選，所述助濾劑為娃藻±，其用量為那西膚發(fā)酵液的1%。為了防止二氯乙 燒提取時(shí)菌絲體沉淀結(jié)團(tuán)的現(xiàn)象，更有利于菌絲體中那西膚的溶出，加入少量助濾劑，能防 止濾渣菌絲體堆積過(guò)于密實(shí)，使過(guò)濾順利進(jìn)行。
[0012] 作為優(yōu)選，步驟（2)所述二氯乙燒溶劑的用量為那西膚濾渣質(zhì)量的3-5倍。
[0013] 作為優(yōu)選，步驟（3)所述二氯乙燒溶劑的用量為濾渣質(zhì)量的1-2倍。
[0014] 作為優(yōu)選，步驟（4)所述去離子水為那西膚提取液總質(zhì)量的1-1. 5倍。
[0015] 那西膚是一種脂溶性抗生素，主要存在于菌體細(xì)胞內(nèi)，僅有少量分泌到細(xì)胞外，因 此可W通過(guò)將那西膚發(fā)酵液離屯、去除上清液，收集濾渣菌體采用有機(jī)溶劑萃取的方法提 取。本發(fā)明采用邸式螺旋沉降離屯、機(jī)對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行離屯、處理，相比于傳統(tǒng)的板框過(guò)濾發(fā)酵 液方法，單位時(shí)間處理量更大，分離效果更好。利用那西膚溶于二氯乙燒的性質(zhì)，先將步驟 (1)所得那西膚濾渣采用二氯乙燒溶劑提取，溶解那西膚，除去菌絲體，得到那西膚提取液； 由于那西膚在水中不溶，向那西膚提取物中加入去離子水，那西膚晶體析出，其他雜質(zhì)溶于 水中，從而達(dá)到對(duì)那西膚精制的目的，提高那西膚效價(jià)和品質(zhì)。
[0016] 本發(fā)明的有益效果為：
[0017] 1、采用本發(fā)明所述方法所得那西膚精粉效價(jià)970ug/mg，產(chǎn)品不含菌絲體，收率高 達(dá)93%。
[0018] 2、本發(fā)明所述的那西膚提取工藝簡(jiǎn)單，提取效率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0019] 3、本發(fā)明所用的二氯乙燒溶劑可經(jīng)回收循環(huán)使用，從而減少?gòu)U水污染，降低生產(chǎn) 成本。
【具體實(shí)施方式】
[0020] W下結(jié)合實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明做任何形式的限 定。 陽(yáng)OW 實(shí)施例1
[0022] (1)取滅活后的那西膚發(fā)酵液3000g，加入娃藻± 30g，采用邸式螺旋沉降離屯、機(jī) 離屯、處理，得到120g含那西膚的濾渣（含水）；
[0023] (2)取步驟（1)所得那西膚濾渣，向其中加入360g二氯乙燒溶劑，并于45°C攬拌 0. 5小時(shí)，過(guò)濾、分層，取有機(jī)相，得364g那西膚提取液和116g菌絲體濾渣；
[0024] 做取步驟似所得局菌絲體濾渣，向其中加入116g二氯乙燒，并于45°C攬拌0. 5 小時(shí)，過(guò)濾、分層，取有機(jī)相，得117. 5g那西膚提取液；
[00巧](4)將步驟（2)、（3)所得西膚提取液合并，減壓蒸饋至干，室溫下向其中加入去離 子水481. 5g去離子水，過(guò)濾，濾餅經(jīng)水洗、干燥、研磨得5. 42g那西膚精粉。
[0026] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示： 1^0027]表1 :
[0028]
[0029] 實(shí)施例2
[0030] (1)取滅活后的那西膚發(fā)酵液3000g，加入娃藻± 30g，采用邸式螺旋沉降離屯、機(jī) 離屯、處理，得到120g含那西膚的濾渣（含水）；
[00川 似取步驟（1)所得那西膚濾渣，向其中加入480g二氯乙燒溶劑，并于48°C攬拌 0. 8小時(shí)，過(guò)濾、分層，取有機(jī)相，得512g那西膚提取液和88g菌絲體濾渣；
[0032] (3)取步驟（2)所得局菌絲體濾渣，向其中加入132g二氯乙燒，并于48°C攬拌0.8 小時(shí)，過(guò)濾、分層，取有機(jī)相，得122g那西膚提取液；
[0033] (4)將步驟（2)、（3)所得西膚提取液合并，減壓蒸饋至干，室溫下向其中加入去離 子水698g去離子水，過(guò)濾，濾餅經(jīng)水洗、干燥、研磨得5. 86g那西膚精粉。
[0034] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示：
[0035]表 2 :
[0036]
[0037] 實(shí)施例3
[003引（1)取滅活后的那西膚發(fā)酵液3000g，加入娃藻±30g，采用邸式螺旋沉降離屯、機(jī) 離屯、處理，得到120g含那西膚的濾渣（含水）；
[0039] 似取步驟（1)所得那西膚濾渣，向其中加入600g二氯乙燒溶劑，并于50°C攬拌 1小時(shí)，過(guò)濾、分層，取有機(jī)相，得615g那西膚提取液和105g菌絲體濾渣；
[0040] (3)取步驟（2)所得局菌絲體濾渣，向其中加入210g二氯乙燒，并于50°C攬拌1 小時(shí)，過(guò)濾、分層，取有機(jī)相，得223g那西膚提取液；
[0041] (4)將步驟（2)、（3)所得西膚提取液合并，減壓蒸饋至干，室溫下向其中加入 1257g去離子水，過(guò)濾，濾餅經(jīng)水洗、干燥、研磨得5. 79g那西膚精粉。
[0042] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所不：
[0043]表 3 :
[0044]
[0045] W上僅列舉了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限制于此，本領(lǐng)域 技術(shù)人員在本發(fā)明權(quán)利要求范圍內(nèi)所作的任何改變均落入本發(fā)明保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種那西肽精粉的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步驟： (1) 取滅活后的那西肽發(fā)酵液，加入助濾劑，采用臥式螺旋沉降離心機(jī)離心處理； (2) 取步驟（1)所得那西肽濾渣，向其中加入二氯乙烷，并于45-50°C攪拌0. 5-1小時(shí)， 過(guò)濾，濾液靜置分層，取有機(jī)相，得那西肽提取液； (3) 取步驟（2)所得濾渣，向其中加入二氯乙烷，并于45-50°C攪拌0. 5-1小時(shí)，過(guò)濾， 濾液靜置分層，取有機(jī)相，得那西肽提取液； (4) 將步驟（2)、（3)所得那西肽提取液合并，減壓蒸餾回收二氯乙烷，再于室溫下加 入去離子水，過(guò)濾，濾餅經(jīng)水洗、干燥、研磨得那西肽精粉。2. 如權(quán)利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，所述助濾劑為硅藻土，其 用量為那西肽發(fā)酵液質(zhì)量的1%。3. 如權(quán)利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，步驟⑵中所述二氯乙烷 的用量為那西肽濾渣的3-5倍。4. 如權(quán)利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，步驟⑶中所述二氯乙烷 的用量為那西肽濾渣的1-2倍。5. 如權(quán)利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，步驟（4)中所述去離子水 為那西肽提取液總質(zhì)量的1-1. 5倍。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種那西肽精粉的提取方法，將滅活后的那西肽發(fā)酵液，加入助濾劑離心處理后，取所得濾渣加入二氯乙烷，并于45-50℃攪拌0.5-1小時(shí)，過(guò)濾，濾液靜置分層后，取有機(jī)相得那西肽提取液，再經(jīng)減壓蒸餾回收二氯乙烷，于室溫下加入去離子水，過(guò)濾，濾餅經(jīng)水洗、干燥、研磨得那西肽精粉，蒸餾出的二氯乙烷可以直接回收套用。采用本發(fā)明所述方法所得那西肽精粉效價(jià)970ug/mg，產(chǎn)品不含菌絲體，收率高達(dá)93%。本發(fā)明所述的那西肽提取工藝簡(jiǎn)單，提取效率高，所用的二氯乙烷溶劑可經(jīng)回收循環(huán)使用，從而減少?gòu)U水污染，降低生產(chǎn)成本，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類(lèi)】C07K1/36, C07K1/34, C07K5/078, C07K1/30
【公開(kāi)號(hào)】CN105198958
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510633203
【發(fā)明人】吳中華, 張小朋, 陳貴才, 徐天華, 何奇雷, 聞鳴
【申請(qǐng)人】浙江匯能動(dòng)物藥品有限公司
【公開(kāi)日】2015年12月30日
【申請(qǐng)日】2015年9月29日