磷酸二氫鉀0. 4g/L后在121°C滅菌 18min。冷卻后，按照0? 4g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母CryptococcusalbidusATCC56298 (購(gòu) 自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在33°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌，控制溶解氧在 35%，培養(yǎng)到發(fā)酵液中殘?zhí)切∮?g/L，結(jié)束發(fā)酵。
[0053] (4)油脂的提取：步驟⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為28. 2g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法 的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油 脂含量為61. 0%。經(jīng)計(jì)算，油脂得率系數(shù)為0.IOg油/g秸桿。
[0054] 實(shí)施例7
[0055] (1)將秸桿用質(zhì)量濃度20% (w/v)的亞硫酸銨，以1:5的固液比（g/ml)，于密閉容 器中，進(jìn)行兩次升溫預(yù)處理。升溫前蒸球空轉(zhuǎn)5min，第一次升溫至115°C，保溫30min，小放 汽5min后進(jìn)行二次升溫至150°C，保溫60min。過(guò)濾洗滌后得再生秸桿，收率為64%。[0056] (2)預(yù)處理秸桿的酶解：將亞銨法獲得的再生秸桿200g，加水調(diào)制成固形物含量 為10% (w/v)的漿液，按照10FPU/g干燥的再生秸桿和IOmg木聚糖酶/g干燥的再生秸桿 加入纖維素酶和木聚糖酶，在50°C和pH4. 8條件下水解72h。
[0057] (3)油脂發(fā)酵：將上述所得的酶解液在3000g離心5min收集上清液。裝入3L發(fā)酵 罐中，添加至終濃度：硫酸銨5g/L，七水硫酸鎂I. 5g/L，磷酸二氫鉀0. 4g/L后在121°C滅菌 18min。冷卻后，按照0? 3g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母CryptococcusalbidusATCC56298 (購(gòu) 自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在30°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌，控制溶解氧在 24%，培養(yǎng)到發(fā)酵液中殘?zhí)切∮?g/L，結(jié)束發(fā)酵。
[0058] (4)油脂的提?。翰襟E⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為31. 2g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法 的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油 脂含量為54. 0%。經(jīng)計(jì)算，油脂得率系數(shù)為0.IOg油/g秸桿。
[0059] 實(shí)施例8
[0060] (1)將秸桿用質(zhì)量濃度6% (w/v)的亞硫酸銨，以1:10的固液比（g/ml)，于密閉容 器中，進(jìn)行兩次升溫預(yù)處理。升溫前蒸球空轉(zhuǎn)5min，第一次升溫至115°C，保溫50min，小放 汽5min后進(jìn)行二次升溫至150°C，保溫90min。過(guò)濾洗滌后得再生秸桿，收率為71 %。 [0061] (2)預(yù)處理秸桿的酶解：將亞銨法獲得的再生秸桿200g，加水調(diào)制成固形物含量 為10% (w/v)的漿液，按照10FPU/g干燥的再生秸桿和IOmg木聚糖酶/g干燥的再生秸桿 加入纖維素酶和木聚糖酶，在50°C和pH4. 8條件下水解72h。
[0062] (3)油脂發(fā)酵：將上述所得的酶解液在3000g離心5min收集上清液。裝入3L發(fā)酵 罐中，添加至終濃度：硫酸銨5g/L，七水硫酸鎂I. 5g/L，磷酸二氫鉀0. 4g/L后在121°C滅菌 18min。冷卻后，按照0? 3g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母CryptococcusalbidusATCC56298 (購(gòu) 自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在30°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌，控制溶解氧在 32%。流加濃縮后還原糖濃度為100g/L的水解液，稀釋率為0. 03h、
[0063] (4)油脂的提?。翰襟E⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為29. 2g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法 的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油 脂含量為56. 0%。經(jīng)計(jì)算，在油脂積累階段油脂得率系數(shù)為0.IOg油/g秸桿。
[0064] 實(shí)施例9
[0065] (1)將秸桿用質(zhì)量濃度13% (w/v)的亞硫酸銨，以1:6的固液比（g/ml)，于密閉容 器中，進(jìn)行兩次升溫預(yù)處理。升溫前蒸球空轉(zhuǎn)5min，第一次升溫至115°C，保溫50min，小放 汽5min后進(jìn)行二次升溫至150°C，保溫90min。過(guò)濾洗滌后得再生秸桿，收率為67%。 [0066] (2)預(yù)處理秸桿的酶解：將亞銨法獲得的再生秸桿加水調(diào)制成固形物含量為10% (w/v)的漿液，按照10FPU/g干燥的再生秸桿和IOmg木聚糖酶/g干燥的再生秸桿加入纖維 素酶和木聚糖酶，在50°C和pH4. 8條件下水解72h。
[0067] (3)油脂發(fā)酵：將上述所得的酶解液在3000g離心5min收集上清液。裝入3L發(fā)酵 罐中，添加至終濃度：硫酸銨5g/L，七水硫酸鎂I. 5g/L，磷酸二氫鉀0. 4g/L后在121°C滅菌 18min。冷卻后，按照0? 3g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母CryptococcusalbidusATCC56298 (購(gòu) 自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在30°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌，控制溶解氧在 20%。流加濃縮后還原糖濃度為300g/L的水解液，稀釋率為0.Olh、
[0068] (4)油脂的提?。翰襟E⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為83. 2g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法 的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油 脂含量為56. 0%。經(jīng)計(jì)算，油脂得率系數(shù)為0. 12g油/g秸桿。
[0069] 實(shí)施例10
[0070](1)將秸桿用質(zhì)量濃度15% (w/v)的亞硫酸銨，以1:6的固液比（g/ml)，于密閉容 器中，進(jìn)行兩次升溫預(yù)處理。升溫前蒸球空轉(zhuǎn)5min，第一次升溫至115°C，保溫50min，小放 汽5min后進(jìn)行二次升溫至150°C，保溫90min。過(guò)濾洗滌后得再生秸桿，收率為65%。
[0071] (2)預(yù)處理秸桿的酶解：將亞銨法獲得的再生秸桿加水調(diào)制成固形物含量為8% (w/v)的漿液，按照30FPU/g干燥的再生秸桿和IOmg木聚糖酶/g干燥的再生秸桿加入纖維 素酶和木聚糖酶，在50°C和pH4. 8條件下水解12h。
[0072] (3)油脂發(fā)酵：將上述所得的酶解液在3000g離心5min收集上清液。裝入3L 發(fā)酵罐中，添加至終濃度：硫酸銨0. 5g/L，七水硫酸鎂I. 5g/L，磷酸二氫鉀0. 4g/L后在 121 °C滅菌18min。冷卻后，按照0? 5g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母Cryptococcusalbidus ATCC56298 (購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在30°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌， 控制溶解氧在32%。流加濃縮后還原糖濃度為30g/L的水解液，稀釋率為0. 12h、
[0073] (4)油脂的提?。翰襟E⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為9. 6g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法的 比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油脂 含量為32. 0%。經(jīng)計(jì)算，在油脂積累階段油脂得率系數(shù)為0. 08g油/g秸桿。
[0074] 實(shí)施例11
[0075] (1)將秸桿用質(zhì)量濃度15% (w/v)的亞硫酸銨，以1:6的固液比（g/ml)，于密閉容 器中，進(jìn)行兩次升溫預(yù)處理。升溫前蒸球空轉(zhuǎn)5min，第一次升溫至115°C，保溫50min，小放 汽5min后進(jìn)行二次升溫至150°C，保溫90min。過(guò)濾洗滌后得再生秸桿，收率為65%。
[0076] (2)預(yù)處理秸桿的酶解：將亞銨法獲得的再生秸桿加水調(diào)制成固形物含量為10% (w/v)的漿液，按照30FPU/g干燥的再生秸桿和IOmg木聚糖酶/g干燥的再生秸桿加入纖維 素酶和木聚糖酶，在50°C和pH4. 8條件下水解60h。
[0077] (3)油脂發(fā)酵：將上述所得的酶解液在3000g離心5min收集上清液。取1800mL 上清液裝入3L發(fā)酵罐中，添加至終濃度：硫酸銨5g/L，七水硫酸鎂I. 5g/L，磷酸二氫鉀 0. 4g/L后在121°C滅菌18min。冷卻后，按照0. 5g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母Cryptococcus albidusATCC56298(購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在30°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣 量和攪拌，控制溶解氧在38 %。補(bǔ)加濃縮后還原糖濃度為300g/L的水解液，培養(yǎng)160h，殘 糖小于5g/L，結(jié)束發(fā)酵。
[0078] (4)油脂的提?。翰襟E⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為64. 6g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法 的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油 脂含量為71. 0%。經(jīng)計(jì)算，在油脂積累階段油脂得率系數(shù)為0. 12g油/g秸桿。
[0079] 實(shí)施例12
[0080] (1)將秸桿用質(zhì)量濃度15% (w/v)的亞硫酸銨，以1:6的固液比（g/ml)，于密閉容 器中，進(jìn)行兩次升溫預(yù)處理。升溫前蒸球空轉(zhuǎn)5min，第一次升溫至115°C，保溫50min，小放 汽5min后進(jìn)行二次升溫至150°C，保溫90min。過(guò)濾洗滌后得再生秸桿，收率為65%。
[0081] (2)預(yù)處理秸桿的酶解：將亞銨法獲得的再生秸桿加水調(diào)制成固形物含量為15% (w/v)的漿液，按照30FPU/g干燥的再生秸桿和IOmg木聚糖酶/g干燥的再生秸桿加入纖維 素酶和木聚糖酶，在50°C和pH4. 8條件下水解60h。
[0082] (3)油脂發(fā)酵：將上述所得的酶解液在3000g離心5min收集上清液。取1800mL 上清液裝入3L發(fā)酵罐中，添加至終濃度：硫酸銨3g/L，七水硫酸鎂I. 5g/L，磷酸二氫鉀 0? 4g/L后在121°C滅菌18min。冷卻后，按照0? 5g/L的接種量接入產(chǎn)油酵母Cryptococcus albidusATCC56298 (購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心），在30°C，pH5. 6培養(yǎng)，通過(guò)調(diào)節(jié)通氣 量和攪拌，控制溶解氧在70%。補(bǔ)加濃縮后還原糖濃度為150g/L的水解液，培養(yǎng)160h，殘 糖小于5g/L，結(jié)束發(fā)酵。
[0083] (4)油脂的提?。翰襟E⑶所得發(fā)酵液離心，收集菌體，在105°C下烘干至恒重，確 定干菌體含量為44. 6g/L。按文獻(xiàn)（李植峰，張玲，沈曉京，等.四種真菌油脂提取方法 的比較研究.微生物學(xué)通報(bào)，2001，28 (6)，72-75)使用酸熱-有機(jī)溶劑法提取油脂，確定油 脂含量為57.