融合多肽及使用方法
【專利說明】融合多肽及使用方法
【背景技術(shù)】
[0001] IL28B與IL28A和IL29-起代表干擾素家族的亞組（III型）。多種人細(xì)胞類 型中的病毒感染可誘導(dǎo)它們的表達(dá)（NatImmunol. 2003 ;4(1) :69_77.NatImmunol. 2003 ; 4(1) :63-68)，并且它們進(jìn)而可以結(jié)合并通過由IL28R和IL10R2組成的異二聚體受體復(fù)合 物發(fā)出信號(hào)。由IL28B、IL28A和IL29誘導(dǎo)的基因的組庫（r印ertoire)與由干擾素a所 誘導(dǎo)的基本上相同。它們當(dāng)中有0AS1和MX1，這兩者結(jié)合并通過由IFNAR1和IFNAR2組成 的異二聚體受體復(fù)合物發(fā)出信號(hào)（Gastroenterology. 2006 ; 131 (6) : 1887-1898)。
[0002] 由包括IL28B、IL28A和IL29在內(nèi)的III型干擾素誘導(dǎo)的抗病毒活性已被 證實(shí)對(duì)抗腦心肌炎病毒（EMCV)、水皰性口炎病毒（VSV)、流感（Eur J Immuno 1. 2004 ; 34 (3) : 796-805. J Virol. 2006 ;80 (9) : 4501-4509)、乙型肝炎病毒（HBV)和丙型肝炎 病毒（HCV)(J Virol.2005;79(6):3851-3854)。然而，在許多細(xì)胞類型中，對(duì)III型干 擾素的抗病毒應(yīng)答的幅度通常小于對(duì)干擾素a的抗病毒應(yīng)答的幅度。III型干擾素 與干擾素a系統(tǒng)間的一個(gè)顯著區(qū)別是受體分布的模式。雖然干擾素a的受體廣泛 地表達(dá)，但I(xiàn)II型干擾素受體的IL28R組分只存在于細(xì)胞的有限亞組中，包括肝細(xì)胞 (Cytokine 2005, 31，109-118)。大部分造血細(xì)胞顯著缺少功能性 IL28R〇fepatology. 2006 ; 44(4) :896-906)。臨床前毒理學(xué)研宄已經(jīng)表明，不同于聚乙二醇化的干擾素a，聚乙二醇化 的IL29肽不誘導(dǎo)對(duì)骨髓干細(xì)胞集落形成的抑制或誘導(dǎo)外周血白細(xì)胞中的抗病毒和抗增殖 活性（Ann NY Acad Sci. 2009 ; 1182:80-87)。
[0003]全球大約有1. 5億人慢性感染丙型肝炎病毒（HCV)，這是肝硬化、肝細(xì)胞癌和肝移 植的首要原因（WHO.丙型肝炎資料簡報(bào)第164號(hào)Ofepatitis C fact sheet No. 164))。在 大多數(shù)患者中HCV被認(rèn)為是可治愈的疾病。當(dāng)前的最前線（topline)治療方案包括聚乙二 醇化干擾素 a與小分子抗病毒藥物如利巴韋林（Health Technology Assessment 2004 ; Vol.8:No. 39)、替拉瑞韋和波普瑞韋（Ther Adv Gastroenterol 2012 ;5(2) 139-151)的組 合。遺憾的是，采用聚乙二醇化干擾素a的治療不總是具有良好的耐受性，從而導(dǎo)致較差 的患者依從性。與聚乙二醇化干擾素a相關(guān)的主要毒性包括但不限于：流感樣癥狀，如頭 痛、疲勞和虛弱；神經(jīng)精神性異常，如抑郁、焦慮和易怒；且更重要的是血液系統(tǒng)病癥，如中 性粒細(xì)胞減少癥和貧血。全球約3. 5億人慢性感染乙型肝炎病毒（HBV)。當(dāng)前的治療包括 聚乙二醇化干擾素a和小分子抗病毒藥物，如拉米夫定、阿德福韋、替諾福韋、替比夫定和 恩替卡韋。用聚乙二醇化干擾素a治療HBV導(dǎo)致與對(duì)于HCV的毒性相類似的毒性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 因此，對(duì)于比現(xiàn)有療法具有更好的耐受性和/或更有效的用于丙型肝炎以及其它 疾病的新抗病毒藥物存在相當(dāng)大的需求。本發(fā)明滿足了這種需求并且還提供了相關(guān)的優(yōu) 點(diǎn)。本發(fā)明涵蓋修飾的人白介素28B(IL28B)和人白介素29(IL29)融合多肽。本發(fā)明還提 供了用于生產(chǎn)融合多肽的方法，例如在原核系統(tǒng)如大腸桿菌（E.coli)中。此外，本發(fā)明公 開了該融合多肽在治療病毒感染（包括但不限于丙型肝炎、乙型肝炎和流感）、自身免疫性 疾?。òǖ幌抻诙喟l(fā)性硬化）和各種類型的癌癥（包括但不限于肝細(xì)胞癌）中的藥學(xué) 用途。
[0005] 在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了包含來自第一干擾素A同種型的第一片段和來自第 二干擾素A同種型的第二片段的融合多肽，其中該第一和第二片段在融合位點(diǎn)處融合在 一起，以形成連續(xù)的多肽，其中該融合位點(diǎn)包含與該第一和第二干擾素A同種型中的相應(yīng) 序列相同的至少約6個(gè)氨基酸的序列。
[0006] 在一些情況下，所述融合多肽可以保留第一或第二同種型的二級(jí)結(jié)構(gòu)。在一些情 況下，該融合多肽與第一或第二同種型的T-表位相比，可以缺乏任何額外的T-表位。在進(jìn) 一步的情況下，該融合多肽與第一或第二同種型的B-表位相比，可以缺乏任何額外的B-表 位。
[0007] 在一些實(shí)例中，第一干擾素A同種型可以是IL29同種型。在一些實(shí)施例中，第二 干擾素A同種型可以是IL28B同種型。在進(jìn)一步的實(shí)例中，第一干擾素X同種型可以是 IL29同種型且第二干擾素A同種型可以是IL28B同種型。
[0008] 在一些實(shí)例中，所述融合位點(diǎn)可包含與第一和第二干擾素A同種型中的相應(yīng)序 列相同的至少約8個(gè)氨基酸的序列。
[0009] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了具有式I的結(jié)構(gòu)的融合多肽：（S1)_(螺旋 A) - (S2)-(螺旋 C) - (S3)-(螺旋 D) - (S4)-(螺旋 E) - (S5)-(螺旋 F) - (S6) 其中： a?螺旋 D 包含與具有 IL28B(SEQ ID N0:2)的從約 V98 至 Q112 或 IL29(SEQ ID N0:1) 的從約V89至Q103的殘基的片段展現(xiàn)出至少90%同源性的氨基酸序列； b. 螺旋 E 包含與具有 IL28B(SEQ ID N0:2)的從約 R130 至 E145 或 IL29(SEQ ID N0:1) 的從約R121至E136的殘基的片段展現(xiàn)出至少90%同源性的氨基酸序列； c. Sl、S2、S3、S4、S5和S6中的每一個(gè)獨(dú)立地是具有1至約50個(gè)氨基酸殘基的間隔序 列； 且其中該融合多肽的特征在于： i. 螺旋A包含與具有IL28B(SEQ ID N0:2)的從約P27至L44的殘基的片段展現(xiàn)出至 少95%同源性的氨基酸序列，螺旋(：包含與具有1129(3￡〇10勵(lì) :1)的從約1?56至480的殘 基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列，且螺旋F包含與具有IL29(SEQ ID NO: 1) 的從約G139至A161的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列；或 ii.螺旋A包含與具有IL29(SEQIDN0:1)的從約P20至L37的殘基的片段展現(xiàn)出至少 95%同源性的氨基酸序列，螺旋C包含與具有IL28B (SEQIDN0:2)的從約R63至A87的殘 基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列，且螺旋F包含與具有IL28B(SEQIDN0:2) 的從約G148至A170的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列；或 iii.螺旋A包含與具有IL28B(SEQ ID N0:2)的從約P27至L44的殘基的片段展現(xiàn) 出至少95%同源性的氨基酸序列，螺旋C包含與具有IL28B(SEQ ID N0:2)的從約R63至 A87的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列，且螺旋F包含與具有IL29 (SEQ ID NO: 1)的從約G139至A161的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列；或 iv. 螺旋A包含與具有IL29(SEQ IDN0:1)的從約P20至L37的殘基的片段展現(xiàn)出至 少95%同源性的氨基酸序列，螺旋(：包含與具有1129(3￡〇10勵(lì) :1)的從約1?56至480的殘 基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列，且螺旋F包含與具有IL28B(SEQ ID N0:2) 的從約G148至A170的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列；或 v. 螺旋A包含與具有IL28B(SEQ ID N0:2)的從約P27至L44的殘基的片段展現(xiàn)出至 少95%同源性的氨基酸序列，螺旋(：包含與具有1129(3￡〇10勵(lì) :1)的從約1?56至480的殘 基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列，且螺旋F包含與具有IL28B(SEQ ID N0:2) 的從約G148至A170的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列；或 vi. 螺旋A包含與具有IL29(SEQ ID N0:1)的從約P20至L37的殘基的片段展現(xiàn)出至少 95%同源性的氨基酸序列，螺旋C包含與具有IL28B (SEQ ID NO: 2)的從約R63至A87的殘 基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列，且螺旋F包含與具有IL29(SEQ ID NO: 1) 的從約G139至A161的殘基的片段展現(xiàn)出至少95%同源性的氨基酸序列。
[0010] 在一些情況下，螺旋A可以與具有IL28B (SEQ ID N0:2)的從約P27至L44的殘基 的片段相同。在其它情況下，螺旋A可以與具有IL29(SEQ ID N0:1)的從約P20至L37的 殘基的片段相同。
[0011] 在一些情況下，螺旋C可以與具有IL28B (SEQ ID N0:2)的從約R63至A87的殘基 的片段相同。在其它情況下，螺旋C可以與具有IL29 (SEQ ID NO: 1)的從約R56至A80的 殘基的片段相同。
[0012] 在一些情況下，螺旋F可以與具有IL28B(SEQ ID N0:2)的從約G148至A170的殘 基的片段相同。在其它情況下，螺旋F可以與具有IL29(SEQ ID N0:1)的從約G139至A161 的殘基的片段相同。
[0013] 在一些情況下，S2可進(jìn)一步包含螺旋B。
[0014] 在一些情況下，所述融合多肽可進(jìn)一步在與IL28B(SEQ ID N0:2)相對(duì)應(yīng)的氨基酸 殘基中包含至少一個(gè)修飾，其中該至少一個(gè)修飾選自dV2、dP3、dV4、dA5、dR6、dL7、dR8、G9K、 A10P、LI 1T、P12T、D13T、A14G、R15K、A20G、Q21R、Q31A、A32S、R35K、K37R、L45K、D48N、C49W、 K50S、R52S、R54P、L55V、R58G、T59N、Q64L、T88A、dD90、dT91、D92P、G96E、R114Q、T127P、 C168S、C175S、P3G、V4P、A5V、R6P、L7T 和 R8S。
[0015] 在一些情況下，所述融合多肽還可在與IL29 (SEQ ID NO: 1)相對(duì)應(yīng)的氨基酸殘基 中包含至少一個(gè)修飾，其中該至少一個(gè)修飾選自R14Q、L57Q、A81T、82aD、82bT、G83D、E87G、 Q105R、P118T 和 D162E。
[0016] 在一些情況下，所述融合多肽可包含融合位點(diǎn)，該融合位點(diǎn)包含與IL28B (SEQ ID N0:2)和IL29(SEQ ID N0:1)中的相應(yīng)序列相同的至少約6個(gè)氨基酸的序列。在進(jìn)一步的 情況下，該融合位點(diǎn)可包含與IL28B(SEQ ID N0:2)和IL29(SEQ ID N0:1)中的相應(yīng)序列相 同的至少約8個(gè)氨基酸的序列。在一些實(shí)例中，該融合位點(diǎn)可包含與所述至少兩種干擾素 入同種型的相應(yīng)序列相同的至少約6-25個(gè)氨基酸的序列。
[0017] 在一些情況下，所述融合多肽可保留IL28B(SEQ ID N0:2)或IL29(SEQ ID N0:1) 的二級(jí)結(jié)構(gòu)。在一些情況下，該融合多肽與IL28B (SEQ ID NO: 2)或IL29 (SEQ ID NO: 1)的 T-表位相比，可以缺乏任何額外的T-表位。在一些情況下，該融合多肽與IL28B(SEQ ID NO: 2)或IL29 (SEQ ID NO: 1)的B-表位相比，可以缺乏任何額外的B-表位。
[0018] 在一些情況下，所述融合多肽可展現(xiàn)出與IL28B(SEQ ID N0:2)或IL29(SEQ ID NO: 1)的至少90%的序列同源性。在進(jìn)一步的情況下，該融合多肽可展現(xiàn)出與IL28B(SEQ ID N0:2)或IL29(SEQ ID N0:1)的至少95%的序列同源性。
[0019] 在一些情況下，所述融合多肽的N末端可進(jìn)一步被聚乙二醇（PEG)修飾。在一些 實(shí)例中，該聚乙二醇可以是單甲氧基PEG丙醛。在一些實(shí)例中，該聚乙二醇可具有約12Kd 至40Kd的分子量。在進(jìn)一步的情況下，該聚乙二醇化的融合多肽與IL28B(SEQ ID N0:2) 或IL29(SEQ ID N0:1)相比，可展現(xiàn)出延長的體內(nèi)半衰期。
[0020] 在一些情況下，所述融合多肽與IL28B(SEQ ID N0:2)或IL29(SEQ ID N0:1)相比， 可展現(xiàn)增強(qiáng)的化學(xué)穩(wěn)定性。
[0021] 在一些實(shí)例中，所述融合多肽可包含選自SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6、SEQ ID N0:7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID N0:10、SEQ ID N0:11、 SEQ ID NO:12,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:15,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:17, SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19的氨基酸序列。
[0022] 在又一方面，本發(fā)明提供了表達(dá)所述融合多肽的宿主細(xì)胞。在一些情況下，該宿主 細(xì)胞可以是原核細(xì)胞。在一些實(shí)例中，該原核細(xì)胞可以是大腸桿菌。在其它情況下，該宿主 細(xì)胞可以是真核細(xì)胞。
[0023] 在一方面，本發(fā)明提供了在有需要的哺乳動(dòng)物中治療病毒感染的方法，該方法包 括向該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的所述融合多肽。在一些情況下，該病毒感染可以由選自 乙型肝炎、丙型肝炎和流感的病毒造成。
[0024] 在另一方面，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療炎癥的方法，該方法包括向 該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的所述融合多肽。在一些情況下，該炎癥可以是多發(fā)性硬化。
[0025] 在又一方面，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療癌癥的方法，該方法包括向 該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的所述融合多肽。在一些情況下，該癌癥可選自結(jié)腸癌、黑素瘤 和肝細(xì)胞癌。
[0026] 在一方面，本發(fā)明提供了包含所述融合多肽中的至少一種和藥學(xué)上可接受的賦形 劑的藥物組合物。
[0027] 在另一方面，本發(fā)明提供了包含所述融合多肽中的至少一種和第二治療劑的藥物 組合物。
[0028] 在又一方面，本發(fā)明提供了包含編碼所述融合多肽的多核苷酸的載體。
[0029] 在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了產(chǎn)生所述融合多肽的方法，該方法包括在適于蛋 白質(zhì)表達(dá)的條件下在細(xì)胞中表達(dá)所述載體，從而產(chǎn)生所述融合多肽。
[0030] 通過下列詳細(xì)描述，本公開內(nèi)容的其它方面和優(yōu)點(diǎn)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將會(huì)變 得顯而易見，詳細(xì)描述中僅示出和描述了本公開內(nèi)容的說明性實(shí)施方案。如將會(huì)意識(shí)到的， 本公開內(nèi)容能夠具有其它和不同的實(shí)施方案，并且其若干細(xì)節(jié)能夠在各個(gè)明顯的方面進(jìn)行 修改，所有這些都不脫離本公開內(nèi)容。因此，附圖和說明書本質(zhì)上將被視為說明性的而不是 限制性的。 援引并入
[0031] 本說明書中提及的所有出版物、專利和專利申請(qǐng)均通過引用并入本文，其程度如 同特別地和單獨(dú)地指出每個(gè)單獨(dú)的出版物、專利或?qū)＠暾?qǐng)均通過引用而并入。
【附圖說明】
[0032] 本發(fā)明的新穎特征特別地在所附權(quán)利要求書中闡述。通過參考以下對(duì)其中利用了 本發(fā)明的原理的說明性實(shí)施方案加以闡述的詳細(xì)描述及其附圖，將會(huì)獲得對(duì)本發(fā)明的特征 和優(yōu)點(diǎn)的更好的理解，在附圖中：
[0033] 圖1說明了使用本發(fā)明的方法進(jìn)行融合多肽（SEQ ID N0:8)的蛋白質(zhì)表達(dá)后的 SDS-PAGE 分析。
[0034] 圖2說明了使用本發(fā)明的方法進(jìn)行融合多肽（SEQ ID N0:12)的蛋白質(zhì)表達(dá)后的 SDS-PAGE 分析。
[0035] 圖3說明了使用本發(fā)明的方法進(jìn)行融合多肽（SEQ ID N0:8)的重折疊和純化后的 SDS-PAGE 分析。
[0036] 圖4說明了使用本發(fā)明的方法進(jìn)行融合多肽（SEQ ID N0:12)的重折疊和純化后 的SDS-PAGE分析。
[0037] 圖5說明了使用本發(fā)明的方法進(jìn)行融合多肽（SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:5、SEQ ID 勵(lì):7、5￡〇10勵(lì)：11、5￡〇10勵(lì)：12和5￡〇10勵(lì)：13)的^末端聚乙二醇化和5?-即純化 后的SDS-PAGE分析。
[0038] 圖6說明了融合多肽（SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15)在C168巰基部分處的聚 乙二醇化后的SDS-PAGE分析。
[0039] 圖7說明了在用參考IL29蛋白質(zhì)（SEQ ID N0:1)和四種IL28B/IL29融合多肽 (SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:7 和 SEQ ID N0:12)處理后 12 小時(shí)，在 Ifep G2 細(xì) 胞中的Mx的劑量依賴性誘導(dǎo)。
[0040] 圖8說明了在用參考IL29蛋白質(zhì)（SEQ ID N0:1)和四種IL28B/IL29融合多肽 (SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:7 和 SEQ ID N0:12)處理后 12 小時(shí)，在 Ifep G2 細(xì) 胞中的〇AS的劑量依賴性誘導(dǎo)。
[0041] 圖9說明了在用10ng/mL的參考IL29蛋白質(zhì)（SEQ ID N0:1)和四種IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 7 和 SEQ ID NO: 12)處理后，在 H印 G2 細(xì)胞中的Mx的時(shí)間依賴性誘導(dǎo)。
[0042] 圖10說明了在用10ng/mL的參考IL29蛋白質(zhì)（SEQ ID NO: 1)和四種IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 7 和 SEQ ID NO: 12)處理后，在 H印 G2 細(xì)胞中的〇AS的時(shí)間依賴性誘導(dǎo)。
[0043]圖 11 說明了在參考 IL29(SEQ ID N0:1)和 IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID N0:12) 的變性后，Mx-誘導(dǎo)的損失。
[0044]圖 12 說明了在參考 IL29(SEQ ID N0:1)和 IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID N0:12) 的變性后，0AS-誘導(dǎo)的損失。
[0045]圖 13 說明了參考 IL29 肽（SEQ ID NO: 1)、IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID N0:12 和 SEQ ID NO: 3)、修飾的 IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID NO: 16 和 SEQ ID NO: 17)和 N-末 端聚乙二醇化的修飾的IL28B/IL29融合多肽（SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 17)的Mx誘導(dǎo) 性質(zhì)。
[0046]圖 14 說明了參考 IL29 肽（SEQ ID N0:1)、IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID N0:12 和 SEQ ID NO: 3)、修飾的 IL28B/IL29 融合多肽（SEQ ID NO: 16 和 SEQ ID NO: 17)和 N-末 端聚乙二醇化的修飾的IL28B/IL29融合多肽（SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 17)的Mx誘導(dǎo) 性質(zhì)。
[0047] 圖15說明了聚乙二醇化的干擾素a2b(派羅欣（Pegasys))、參考N-末端聚乙二醇 化的IL29肽（SEQ ID NO: 1)、N-末端聚乙二醇化的修飾的IL28B/IL29融合多肽（SEQ ID NO: 16)和N-末端聚乙二醇化的修飾的IL28B/IL29融合多肽（SEQ ID NO: 17)的HCV復(fù)制 抑制性質(zhì)。
[0048] 圖16說明了 H3N2感染的A549細(xì)胞在96孔板中的多種處理?xiàng)l件。
[0049] 圖17說明了依循多種處理?xiàng)l件對(duì)A549細(xì)胞的H3N2感染的抑制。 發(fā)明詳沭
[0050] 在描述本發(fā)明的實(shí)施方案之前，應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施方案僅通過舉例給出，并且本 文所述的本發(fā)明實(shí)施方案的各種替代方案可用于實(shí)施本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員在不脫離本 發(fā)明的情況下將會(huì)想到許多變化、改變和替換。
[0051] 除非另有定義，本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語所具有的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域 的普通技術(shù)人員普遍理解的相同。盡管與本文所述類似或等同的方法和材料可用于實(shí)施或 測(cè)試本發(fā)明，但下文仍描述了合適的方法和材料。在沖突的情況下，以本專利說明書（包括 定義）為準(zhǔn)。此外，材料、方法和實(shí)例僅是說明性的，并非旨在進(jìn)行限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員 在不脫離本發(fā)明的情況下將會(huì)想到許多變化、改變和替換。
[0052] 如在本說明書和權(quán)利要求書中所用，單數(shù)形式"一種"、"一個(gè)"和"該"包括復(fù)數(shù)指 代，除非上下文另有明確規(guī)定。
[0053] 術(shù)語"多肽"、"肽"和"蛋白質(zhì)"在本文中可互換使用，指的是任何長度的氨基酸聚 合物。該聚合物可以是線性的或分支的，它可以包括修飾的氨基酸，并且它可以被非氨基酸 打斷。該術(shù)語還涵蓋已通過例如二硫鍵形成、糖基化、脂化、乙?；?、磷酸化或任何其它操作 (例如與標(biāo)記組分的偶聯(lián)）而修飾的氨基酸聚合物。
[0054] 術(shù)語"氨基酸"是指天然的和/或非天然的或合成的氨基酸，包括但不限于D或L 旋光異構(gòu)體，以及氨基酸類似物和擬肽。標(biāo)準(zhǔn)的單字母或三字母代碼用來指稱氨基酸。
[0055] 術(shù)語"天然的L-氨基酸"意指甘氨酸（G)、脯氨酸（P)、丙氨酸（A)、纈氨酸（V)、 亮氨酸（L)、異亮氨酸（I)、甲硫氨酸（M)、半胱氨酸（C)、苯丙氨酸（F)、酪氨酸（Y)、色氨酸 (W)、組氨酸（H)、賴氨酸（K)、精氨酸（R)、谷氨酰胺（Q)、天冬酰胺（N)、谷氨酸（E)、天冬氨 酸（D)、絲氨酸（S)和蘇氨酸（T)的L旋光異構(gòu)體形式。
[0056] 用于序列并在本文中使用的術(shù)語"非天然存在的"意指與在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的野 生型或天然存在的序列不具有對(duì)應(yīng)物、不互補(bǔ)或者不具有高度同源性的多肽或多核苷酸序 列。例如，當(dāng)適當(dāng)比對(duì)時(shí)，與天然序列相比，非天然存在的多肽或片段可享有不超過99%、 98%、95%、90%、80%、70%、60%、50%或甚至更低的氨基酸序列同一性。