250mL三角瓶中，裝入液體培養(yǎng)基100mL，將固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的適宜大小的單菌落接種進(jìn)獨(dú)立三角瓶中，搖床150r/min、30°C培養(yǎng)96h使菌體含量達(dá)到1.0X 108-6.0X 18個(gè)/mL ；
[0114]步驟C發(fā)酵罐混合擴(kuò)大培養(yǎng)
[0115]將混合培養(yǎng)基4L加入發(fā)酵罐中，分別接種氨氧化假諾卡氏菌、氨氧化細(xì)菌、產(chǎn)氣腸桿菌、脫氮副球菌、枯草芽孢桿菌和氧化亞鐵硫酸桿菌為混合培養(yǎng)基體積的10%，9%，2%, 3%, 2%, 2%, 30°C培養(yǎng)72h使混合菌種菌體含量達(dá)到1.0X 108_2.0X 18個(gè)/mL ；
[0116]步驟D復(fù)合微生物、收集沉淀、干燥得到混合菌粉
[0117]將步驟C中得到的混合菌種培養(yǎng)液經(jīng)過(guò)4000r/min離心收集沉淀，再將沉淀在30°C干燥，得到混合菌粉；
[0118]步驟E復(fù)合微生物菌劑的制備
[0119]將步驟D得到的混合菌粉與沸石、Ca(OH)2、無(wú)水亞硫酸鈉、葡萄糖混合制成復(fù)合微生物菌劑，以質(zhì)量計(jì)，其中混合菌粉60份、沸石30份、Ca (OH)2L 5份、無(wú)水亞硫酸鈉0.5份、葡萄糖I份、硫酸銅0.01份。其中沸石粉碎，過(guò)80-120目篩。
[0120]步驟F復(fù)合微生物菌劑的使用
[0121]首先，用Ca (OH) 2調(diào)節(jié)污水pH為7.0-8.0，然后向每20m 3污水中投入該復(fù)合微生物菌劑0.5-lKg，緩慢向污水中通入空氣。
[0122]實(shí)施例7
[0123]步驟A各菌種的活化
[0124]采用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)，將銅綠假單胞菌、氨氧化假諾卡氏菌、氨氧化細(xì)菌、產(chǎn)氣腸桿菌、枯草芽孢桿菌和氧化亞鐵硫酸桿菌的菌種接種于固體培養(yǎng)基上28-30°C培養(yǎng)84h。
[0125]步驟B三角瓶擴(kuò)大培養(yǎng)
[0126]分別制備步驟A中各菌種的液體培養(yǎng)基裝入250mL三角瓶中，裝入液體培養(yǎng)基100mL，將固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的適宜大小的單菌落接種進(jìn)獨(dú)立三角瓶中，搖床150r/min、30°C培養(yǎng)96h使菌體含量達(dá)到1.0X 108-6.0X 18個(gè)/mL ；
[0127]步驟C發(fā)酵罐混合擴(kuò)大培養(yǎng)
[0128]將混合培養(yǎng)基4L加入發(fā)酵罐中，分別接種銅綠假單胞菌、氨氧化假諾卡氏菌、氨氧化細(xì)菌、產(chǎn)氣腸桿菌、枯草芽孢桿菌和氧化亞鐵硫酸桿菌為混合培養(yǎng)基體積的6 %，I %，10%,3%,3%,1%, 30°C培養(yǎng)72h使混合菌種菌體含量達(dá)到1.0X 108_2.0X 18個(gè)/mL ；
[0129]步驟D復(fù)合微生物、收集沉淀、干燥得到混合菌粉
[0130]將步驟C中得到的混合菌種培養(yǎng)液經(jīng)過(guò)4000r/min離心收集沉淀，再將沉淀在30°C干燥，得到混合菌粉；
[0131]步驟E復(fù)合微生物菌劑的制備
[0132]將步驟D得到的混合菌粉與沸石、Ca(OH)2、無(wú)水亞硫酸鈉、葡萄糖混合制成復(fù)合微生物菌劑，以質(zhì)量計(jì)，其中混合菌粉55份、沸石40份、Ca (OH)21份、無(wú)水亞硫酸鈉0.5份、葡萄糖0.5份、硫酸銅0.01份。其中沸石粉碎，過(guò)80-120目篩。
[0133]步驟F復(fù)合微生物菌劑的使用
[0134]首先，用Ca (OH) 2調(diào)節(jié)污水pH為7.0-8.0，然后向每20m 3污水中投入該復(fù)合微生物菌劑0.5-lKg，緩慢向污水中通入空氣。
[0135]本發(fā)明的復(fù)合微生物不含病原體和致病菌，利用污水中的有機(jī)物滿足自身營(yíng)養(yǎng)需求，能夠有效的降解污水污染物，當(dāng)污水得到凈化后，這些微生物會(huì)隨著污染物的減少而逐漸消失，也不會(huì)對(duì)環(huán)境造成危害，對(duì)污水中氨氮的去除率達(dá)到98%，磷的去除率為96.5%，氟的去除率達(dá)到99%，氰的去除率達(dá)到97.9%，達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 步驟A、各菌種的活化: 將硝化細(xì)菌、亞硝化細(xì)菌以及聚磷菌在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行活化； 步驟B、三角瓶擴(kuò)大培養(yǎng): 分別制備各菌種液體培養(yǎng)基裝入250mL三角瓶中，裝入液體培養(yǎng)基lOOmL，將固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落接種進(jìn)獨(dú)立三角瓶中，搖床培養(yǎng)，培養(yǎng)菌體數(shù)量達(dá)到1.0 X 108-6.0 X 18個(gè)ML ;步驟C、發(fā)酵罐混合擴(kuò)大培養(yǎng): 將混合培養(yǎng)基3.5-4L加入發(fā)酵罐中，分別接種硝化細(xì)菌、亞硝化細(xì)菌以及聚磷菌進(jìn)發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)混合菌種菌體數(shù)量達(dá)到1.0X 108-2.0X 18個(gè)/mL ； 步驟D、離心、收集沉淀、干燥得到混合菌粉: 將步驟C中得到的混合菌種培養(yǎng)液經(jīng)過(guò)離心收集沉淀，再將沉淀干燥，得到混合菌粉；步驟E、復(fù)合微生物菌劑的制備: 將步驟D得到的混合菌粉與沸石、Ca(OH)2、無(wú)水亞硫酸鈉、葡萄糖、硫酸銅混合制成復(fù)合微生物菌劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，步驟E中，以質(zhì)量份數(shù)計(jì)，其中混合菌粉50-60份、沸石30-50份、Ca(OH)2 1-2份、無(wú)水亞硫酸鈉0.5-1份、葡萄糖0.5-1份和硫酸銅0.01-0.02份；其中沸石粉碎，過(guò)80-120目篩。
3.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，所述硝化細(xì)菌為銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa) CGMCC N0.150和氨氧化假諾卡氏菌(Pseudonocardia ammon1xydans)CGMCC N0.41877 的一種或兩種； 所述亞硝化細(xì)菌為氨氧化細(xì)菌(Ammonia oxidizing bacteria) CGMCC N0.4287 ； 所述聚磷菌為產(chǎn)氣腸桿菌(Enterbacter aerogenes)CGMCC N0.16753、脫氮副球菌(Paracoccus denitrificans)CGMCC N0.15358、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtillus)CGMCCN0.17408 和氧化亞鐵硫酸桿菌(Acidith1bacillus ferrooxidans)CGMCC N0.15066 中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)3所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于， 所述氨氧化假諾卡氏細(xì)菌液體培養(yǎng)基組分為:葡萄糖10g，酵母浸粉10g，蒸餾水IL ;所述氨氧化細(xì)菌液體培養(yǎng)基組分為:(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 2g，F(xiàn)eSO4.7H20 0.4g，K2HPO4 lg，MgSO4.7H20 0.5g，NaCO3 5g，蒸餾水 1L，調(diào)節(jié) pH 值為 7.2 ； 所述枯草芽孢桿菌液體培養(yǎng)基組分為:葡萄糖5g，蛋白胨5g，NaCl 3g，牛肉膏0.5g，蒸餾水IL ； 所述產(chǎn)氣腸桿菌液體培養(yǎng)基組分為:(NH4)2SO4 lg, NaCl 0.lg，葡萄糖5g，Na2HPO4 2g,MgSO4.7H20 0.5g，酵母浸粉 0.5g，NaCO3 lg,蒸餾水 1L，調(diào)節(jié) pH 值為 7.0 ； 上述各菌種的固體培養(yǎng)基為分別在其液體培養(yǎng)基中加入15-20g瓊脂粉，并在121°C滅菌 30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)3所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，所述混合培養(yǎng)基組分為:葡萄糖10g，酵母浸粉10g, NaCl lg, (NH4)2SO4 lg, K2HPO4 Ig,MgSO4.7H20 0.5g，F(xiàn)eSO4.7H20 3g，NaCO3 2g，蒸餾水 1L，調(diào)節(jié) pH 值為 7.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，步驟B中，接入三角瓶中的菌落為單菌落，搖床轉(zhuǎn)速為150r/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，步驟C中，分別接種硝化細(xì)菌、亞硝化細(xì)菌以及聚磷菌量為發(fā)酵罐容積的5-10%。
8.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，步驟D中，離心速率為4000r/min，干燥溫度為30-40°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)I所述的處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法，其特征在于，步驟A、步驟B和步驟C中，培養(yǎng)時(shí)間為72-96h，培養(yǎng)溫度均為28-30°C。
10.處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑使用方法，其特征在于，首先，用Ca(OH)2調(diào)節(jié)污水pH為7.0-8.0，然后，在每20m3污水中投入該復(fù)合微生物菌劑0.5_lKg，處理污水時(shí)，緩慢向污水中通入空氣。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種處理復(fù)合肥污水的高效微生物菌劑制備方法及使用方法，利用硝化細(xì)菌、亞硝化細(xì)菌以及聚磷菌將污水中的氨氮轉(zhuǎn)化為氮?dú)?，將磷轉(zhuǎn)化為多磷酸鹽聚積在菌體內(nèi)；利用沸石、Ca(OH)2、無(wú)水亞硫酸鈉將氟、氰等離子沉淀，可有效地去除這些污染物；加入葡萄糖可保持一定的硝化速率；利用三角瓶分別擴(kuò)大培養(yǎng)，可達(dá)到各個(gè)菌種的最高生長(zhǎng)需要，發(fā)酵罐擴(kuò)大混合培養(yǎng)節(jié)約資源，各菌種達(dá)到要求濃度，且容易培養(yǎng)，經(jīng)處理后的水質(zhì)達(dá)到國(guó)家排放標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明的微生物菌劑對(duì)復(fù)合肥污水具有非常好的去污效果，而且微生物會(huì)隨著污染物的減少而逐漸消失，也不會(huì)對(duì)環(huán)境造成危害，本發(fā)明的復(fù)合微生物菌劑成本低，具有廣泛的應(yīng)用前景。
【IPC分類】C02F101-18, C02F103-34, C02F101-14, C12R1-385, C12R1-125, C12R1-01, C12N1-20, C12R1-365, C02F3-34
【公開(kāi)號(hào)】CN104830740
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510283409
【發(fā)明人】龔國(guó)利, 張?zhí)?
【申請(qǐng)人】陜西科技大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年8月12日
【申請(qǐng)日】2015年5月28日