％，即得賴 氨酸鹽酸鹽成品。
[0045] 實施例
[0046] 以下的實施例將對本發(fā)明作進一步的說明，但并不因此限制本發(fā)明。
[0047] 在下述實施例和對比例中：
[0048] OD值測定：將種子液進行26倍稀釋，采用722N可見光分光光度計，在波長562納 米可見光下測定吸光值，即為OD值。
[0049] 按照GB/T5009. 7-2008的方法測定發(fā)酵液中還原性糖的濃度。
[0050] 按照GB3595-83的方法測定發(fā)酵液中銨根離子的濃度。
[0051] 采用戴安公司ICS-2500型離子色譜儀測定發(fā)酵液中S0,的含量。
[0052] 按照GB10794-89標準檢測發(fā)酵液中的賴氨酸濃度（以賴氨酸鹽酸鹽計)。
[0053] 單罐供酸量=(放罐的賴氨酸濃度X放罐體積+中間放料賴氨酸濃度X中間放 料體積)。
[0054] 轉(zhuǎn)化率（％) =單罐供酸量/總糖的重量X 100%，其中總糖的重量包括種子罐用糖 重量和發(fā)酵罐用糖重量。
[0055] 按照GB8245-87標準檢測L-賴氨酸鹽酸的干燥失重和賴氨酸鹽酸鹽含量。
[0056] 實施例1
[0057] 本實施例用于說明本發(fā)明提供的發(fā)酵制備賴氨酸的方法。
[0058] ( 1)將收獲的100重量份玉米通過機械加工將玉米顆粒粉碎，使玉米粉過30目篩 的通過率為80%。
[0059] (2)將粉碎后的產(chǎn)物加水調(diào)漿至12Β?°，相對于每克粉碎產(chǎn)物的干重，加入20個 酶活力單位的淀粉酶（α -淀粉酶，諾維信公司），在90°C、ρΗ為5. 5的條件下酶解100分鐘， 得到酶解產(chǎn)物。其中，將酶解產(chǎn)物通過用液壓式板框壓濾機進行壓濾，分離出酶解清液（固 含量為20重量％);之后加入115個酶活力單位的糖化酶（α -1，4-葡萄糖水解酶，諾維信公 司），在60°C、pH為4. 5的條件下酶解420分鐘，得到淀粉質(zhì)原料糖化清液。
[0060] (3)使用步驟（2)得到的淀粉質(zhì)原料糖化清液配制種子罐培養(yǎng)基，具體組成為：相 對于每升種子罐培養(yǎng)基，淀粉質(zhì)原料糖化清液的用量為35克，玉米漿(干重為35重量％)的 用量為80克，磷酸氫二鉀的用量為1.0 克，硫酸鎂的用量為0. 5克，硫酸銨的用量為10克， 蘇氨酸的用量為〇. 2克，蛋氨酸的用量為0. 2克。將培養(yǎng)基加熱到121°C消毒，維持20分鐘 后降溫至31°C并保持恒定。開啟攪拌，調(diào)節(jié)罐壓為0.1 MPa，按照通風(fēng)量與培養(yǎng)基1:0. 5體 積比通入無菌空氣，用氨水調(diào)節(jié)pH至6. 8并保持恒定。然后將黃色短桿菌(菌株原種FB42 購自江南大學(xué))活化和增殖后接入種子罐中進行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中每隔120分鐘取樣鏡檢并 測定OD值，當(dāng)鏡檢菌體形態(tài)正常且OD值達到0. 8時停止培養(yǎng)，得到成熟種子液。
[0061] (4)使用步驟（2)得到的淀粉質(zhì)原料糖化清液配制發(fā)酵培養(yǎng)基，具體組成為：相對 于每升發(fā)酵培養(yǎng)基，淀粉質(zhì)原料糖化清液的用量為50克，糖蜜(產(chǎn)地新疆）的用含量為40 克，玉米楽(干重為35重量％)的用量為30克，硫酸銨的用量為18克，磷酸氫二鉀的用量為 I. 〇克，硫酸鎂的用量為〇. 54克，蘇氨酸的用量為0. 2克，蛋氨酸的用量為0. 2克，谷氨酸 的用量為〇. 3克。培養(yǎng)基加熱到121°C消毒30分鐘后降溫至31°C并保持恒定，用氨水調(diào)節(jié) pH至6. 9。測定配制好的發(fā)酵培養(yǎng)基（即初始培養(yǎng)基）中S042_的含量為13. 52克/升。
[0062] (5)在發(fā)酵罐中裝入步驟（4)配制好的發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基體積為發(fā)酵罐體積 的50%。使用步驟（3)所得的成熟種子液，接入發(fā)酵罐的培養(yǎng)基中進行發(fā)酵培養(yǎng)，以接種后 的發(fā)酵培養(yǎng)基為基準，步驟（3)所得的成熟種子液的接種量為15體積％。接種后連續(xù)流加 步驟（2)得到的淀粉質(zhì)原料糖化清液和氯化銨，流加步驟（2)得到的淀粉質(zhì)原料糖化清液 的量使發(fā)酵過程中培養(yǎng)基中的還原性糖的濃度控制在6-8克/升，流加氯化銨的量使發(fā)酵 過程中培養(yǎng)基中銨根離子的濃度控制在〇. 6-0. 8克/升，將罐壓控制為0.1 MPa，發(fā)酵溫度 控制為37°C，通氣量為0. 7立方米空氣/立方米的培養(yǎng)基/分鐘，并用液氨調(diào)節(jié)pH維持在 6. 9進行發(fā)酵培養(yǎng)，流加步驟（2)得到的淀粉質(zhì)原料糖化清液和氯化銨至發(fā)酵罐體積的75% 時放料，放料體積為放料前發(fā)酵罐中發(fā)酵液體積的8%。發(fā)酵培養(yǎng)48小時后放罐。測定放罐 的賴氨酸濃度（即終點賴氨酸含量，下同）和中間放料的賴氨酸濃度，計算單罐供酸量和轉(zhuǎn) 化率見表1。
[0063] (6)將放罐的發(fā)酵液和中間放料的發(fā)酵液混合得到發(fā)酵結(jié)束后收集得到的發(fā)酵 液，加鹽酸調(diào)pH至5. 5,利用碟片離心機進行固液分離，得到pH5. 4、濁度12NTU的賴氨酸清 液，將賴氨酸清液加鹽酸微調(diào)PH至4. 9,加入濃縮結(jié)晶器中蒸發(fā)濃縮，控制溫度40°C、真空 度為-0. 09Mpa，當(dāng)濃縮的賴氨酸晶漿液中的晶體含量達到50重量％時，進行離心分離，將濕 晶體在KKTC下烘干至含水量為1.0重量％，得到賴氨酸鹽酸鹽成品，測定賴氨酸鹽酸鹽成 品的含量見表1。
[0064] 實施例2
[0065] 本實施例用于說明本發(fā)明提供的發(fā)酵制備賴氨酸的方法。
[0066] 淀粉質(zhì)原料糖化清液的制備方法、種子罐培養(yǎng)基配方、種子罐成熟種子液培養(yǎng)方 法均與實施例1相同。
[0067] 使用制得到的淀粉質(zhì)原料糖化清液配制發(fā)酵培養(yǎng)基，相對于每升發(fā)酵培養(yǎng)基，硫 酸銨的用量為15克，硫酸鎂的用量為0. 15克，其他組分及其用量均與實施例1相同。培養(yǎng) 基加熱到121°C消毒30分鐘后降溫至31°C并保持恒定，用氨水調(diào)節(jié)pH至6. 9。測定配制好 的發(fā)酵培養(yǎng)基(即初始培養(yǎng)基）中SO廣的含量為11. 03克/升。
[0068] 發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基體積為發(fā)酵罐體積的40%。將成熟種子液接入發(fā)酵罐的培養(yǎng)基 中進行發(fā)酵培養(yǎng)，以接種后的發(fā)酵培養(yǎng)基為基準，種子液的接種量為12體積％。接種后連續(xù) 流加制得的淀粉質(zhì)原料糖化清液和氯化銨，流加制得的淀粉質(zhì)原料糖化清液的量使發(fā)酵過 程中培養(yǎng)基中還原性糖的濃度控制在5-7克/升，流加氯化銨的量使發(fā)酵過程中培養(yǎng)基中 銨根離子的濃度控制在〇. 5-0. 7克/升，將罐壓控制為0. 08MPa，發(fā)酵溫度控制為38°C，通 氣量為0. 8立方米空氣/立方米的培養(yǎng)基/分鐘，并用液氨調(diào)節(jié)pH維持在6. 7進行發(fā)酵培 養(yǎng)，流加制得的淀粉質(zhì)原料糖化清液和氯化銨至發(fā)酵罐體積的70%時放料，放料體積為放 料前發(fā)酵罐中發(fā)酵液體積的5%。發(fā)酵培養(yǎng)42小時后放罐。測定放罐的賴氨酸濃度和中間 放料的賴氨酸濃度，計算單罐供酸量和轉(zhuǎn)化率見表1。
[0069] 將放罐的發(fā)酵液和中間放料的發(fā)酵液混合得到發(fā)酵結(jié)束后收集得到的發(fā)酵液，加 鹽酸調(diào)pH至5. 7,利用碟片離心機進行固液分離，得到pH5. 5、濁度13NTU的賴氨酸清液， 將賴氨酸清液加鹽酸微調(diào)PH至5. 1，加入濃縮結(jié)晶器中蒸發(fā)濃縮，控制溫度48°C、真空度 為-0. 07Mpa，當(dāng)濃縮的賴氨酸晶漿液中的晶體含量達到45重量％時，進行離心分離，將濕晶 體在80°C下烘干至含水量為0. 9重量％，得到賴氨酸鹽酸鹽成品，測定賴氨酸鹽酸鹽成品的 含量見表1。
[0070] 實施例3
[0071] 本實施例用于說明本發(fā)明提供的發(fā)酵制備賴氨酸的方法。
[0072