一種用于修復(fù)硝基甲苯污染土壤的微生物制劑的制備工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于修復(fù)硝基甲苯污染土壤的微生物 制劑的制備工藝。
【背景技術(shù)】
[0002] 1階(2,4,6三硝基甲苯）是一種無色或淡黃色晶體，溶點(diǎn)為3541((80.9°〇。丁階' 是目前產(chǎn)量最高的生產(chǎn)炸藥，近年來彈藥車間中TNT的制造、加工和包裝已經(jīng)導(dǎo)致土壤高 濃縮的污染，最終將導(dǎo)致地下水的污染。人長(zhǎng)期暴露于硝基甲苯會(huì)增加患貧血癥和肝功能 不正常的機(jī)會(huì)。注射了或吸入三硝基甲苯的動(dòng)物亦發(fā)現(xiàn)會(huì)影響血液和肝臟、脾臟發(fā)大和其 他有關(guān)免疫系統(tǒng)的壞影響。亦有證據(jù)證明了TNT對(duì)男性的生殖功能有不良影響，而TNT也 被列為一種可能致癌物。目前，該類污染物處理難度較大。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)硝基甲苯污染處理的方式主要有：物理方法：吸附法和萃取法；化 學(xué)法：濃縮焚燒法、紫外照射法、臭氧及組合臭氧氧化法等；然而，物理方法、化學(xué)方法處理 三硝基甲苯廢水，操作復(fù)雜，費(fèi)用貴，治理不徹底，效果令人不堪滿意。生物法是利用生物的 新陳代謝作用對(duì)廢水中的污染物進(jìn)行轉(zhuǎn)化，使之無害化的處理方式。硝基甲苯類化合物降 解菌對(duì)硝基甲苯的徹底降解是十分必需的。許多化工廠已經(jīng)應(yīng)用降解性微生物處理硝基甲 苯，并且已經(jīng)取得了顯著的效果。中國(guó)專利CN102864108A公開了一種修復(fù)硝基甲苯污染土 壤的復(fù)合菌劑，該菌劑具備一定的修復(fù)功能，但是部分菌株的繁殖速率慢，以及對(duì)二硝基甲 苯的處理效果差，不能兼做肥料。因此，我們需要開發(fā)研制一種用于去除土壤中硝基甲苯的 新型微生物制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是，克服了現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足之處，提供了一種 用于修復(fù)硝基甲苯污染土壤的微生物制劑的制備工藝，該工藝簡(jiǎn)單可行，其制備的微生物 制劑包含多種菌株，配伍合理，協(xié)同作用強(qiáng)，能夠有效地去除土壤中的硝基甲苯，而且還可 以作為一種生物菌肥，大大提高了糧食產(chǎn)量；本發(fā)明工藝制備的微生物制劑投入成本低廉， 可大規(guī)模推廣使用。
[0005] 本發(fā)明的目的是通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 一種用于修復(fù)硝基甲苯污染土壤的微生物制劑的制備工藝，其包括如下步驟：將 復(fù)合菌液和生物有機(jī)質(zhì)混合攪拌均勻，30°C培養(yǎng)12小時(shí)，然后添加輔料和天然礦物質(zhì)，100 轉(zhuǎn)/min攪拌3min，最后進(jìn)行低溫干燥，干燥溫度為20°C，干燥后含水量為8%，即得；所述 復(fù)合菌液、輔料、天然礦物質(zhì)以及生物有機(jī)質(zhì)的質(zhì)量比為：1_2 : 1-2 : 3-4 : 10-15。
[0007] 所述復(fù)合菌液按照如下方法制備而成：將鮑曼不動(dòng)桿菌、蠟狀芽孢桿菌、 赤紅球菌、藤黃微球菌以及糞腸球菌分別培養(yǎng)成濃度為IX108個(gè)/ml的菌液，按照 1:1:2:3:3的體積比混合攪拌均勻即得。
[0008] 所述輔料按照如下方法制備而成：
[0009] 首先控制鋸末和殼聚糖的粒徑均為50-100目，然后將鋸末、殼聚糖和甘油按照 1 : 1 : 1的質(zhì)量比混合均勻，即得。
[0010] 所述天然礦物質(zhì)按照如下方法制備而成：
[0011] 首先將沸石進(jìn)行粉碎處理，得到粒徑在50-100目之間的沸石粉，然后與腐植酸和 草炭按照1 : 1 : 1的重量比混合均勻，即得；所述腐植酸和草炭的粒徑均控制在50-100 目之間；
[0012] 所述生物有機(jī)質(zhì)按照如下方法制備而成：將豆柏按1 : 1的重量比加水，攪拌均 勻，90°C提取lh，過濾，取上清液即為豆柏浸提液；將花生殼曬干，用粉碎機(jī)粉碎成花生殼 粉；將花生殼粉和豆柏浸提液添加到攪拌罐中，500轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌15分鐘后，將攪拌 罐中的物料送入反應(yīng)器中，往反應(yīng)器中通入水蒸汽，維持反應(yīng)器的溫度在95°C以上，保溫反 應(yīng)30分鐘，最后自然冷卻即得；花生殼粉和豆柏浸提液質(zhì)量比為1 : 2。
[0013] 所述鮑曼不動(dòng)桿菌為鮑曼不動(dòng)桿菌（Acinetobacterbaumanii)為ATCC19606 ; 所述蠟狀芽孢桿菌為蠟狀芽孢桿菌（Bacilluscereus)ATCC10876;所述赤紅球菌為赤 紅球菌（Rhodococcusruber)ATCC15906;所述藤黃微球菌為藤黃微球菌（Micrococcus luteus)ATCC49442;所述奠腸球菌為奠腸球菌（Enterococcusfaecalis)為ATCC29212。
[0014] 上述微生物制劑的使用方法包括：首先將土壤翻松平整，翻土深度為30-40cm，噴 灑水，保持土壤含水量為30 %，然后按照每立方米土壤使用200g微生物制劑的添加量播撒 微生物制劑。
[0015] 本發(fā)明所述菌種均可以從美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)（ATCC)等商業(yè)渠道購(gòu)買得到。 本發(fā)明的菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)方法可按照文獻(xiàn)記載或者現(xiàn)有技術(shù)的記載進(jìn)行，此處不是本發(fā)明 的創(chuàng)新點(diǎn)，限于篇幅，并不一一贅述。
[0016] 本發(fā)明取得的有益效果主要但不限于以下幾個(gè)方面：
[0017] 本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單可行，其制備的微生物制劑能夠有效地處理硝基甲苯污染土壤， 處理效果好，成本低廉；本發(fā)明工藝制備的微生物制劑還具備一定的肥效，可作為一種微生 物肥料，可提高糧食作物的產(chǎn)量；本發(fā)明工藝制備的微生物制劑中各菌種之間合理配伍，共 生協(xié)調(diào)，互不拮抗，活性高，生物量大，繁殖快；本發(fā)明工藝技術(shù)充分利用了農(nóng)業(yè)廢棄物和天 然礦物質(zhì)，既可作為微生物養(yǎng)料，還可以作為肥料養(yǎng)分，一舉兩得，變廢為寶。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 為了使本技術(shù)領(lǐng)域的人員更好地理解本申請(qǐng)中的技術(shù)方案，下面將結(jié)合本申請(qǐng)具 體實(shí)施例，對(duì)本申請(qǐng)的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本申 請(qǐng)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒旧暾?qǐng)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒 有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0019]實(shí)施例1
[0020] 一種用于修復(fù)硝基甲苯污染土壤的微生物制劑的制備工藝，其包括如下步驟：將 復(fù)合菌液和生物有機(jī)質(zhì)混合攪拌均勻，30°C培養(yǎng)12小時(shí)，然后添加輔料和天然礦物質(zhì)，100 轉(zhuǎn)/min攪拌3min，最后進(jìn)行低溫干燥，干燥溫度為20°C，干燥后含水量為8 % (w/w)，即得； 所述復(fù)合菌液、輔料、天然礦物質(zhì)以及生物有機(jī)質(zhì)的質(zhì)量比為1 : 1 : 3 : 10。
[0021] 所述復(fù)合菌液按照如下方法制備而成：
[0022] 將鮑曼不動(dòng)桿菌、蠟狀芽孢桿菌、赤紅球菌、藤黃微球菌以及糞腸球菌分別培養(yǎng)成 濃度為IX108個(gè)/ml的菌液，按照1 : 1 : 2 : 3 : 3的體積比混合攪拌均勻即得；
[0023] 所述輔料按照如下方法制備而成：
[0024] 首先控制鋸末和殼聚糖的粒徑均為50目，然后將鋸末、殼聚糖和甘油按照 1 : 1 : 1的質(zhì)量比混合均勻，即得；
[0025] 所述天然礦物質(zhì)按照如下方法制備而成：
[0026] 首先將沸石進(jìn)行粉碎處理，得到粒徑在50目的沸石粉，然后與腐植酸和草炭按照 1 : 1 : 1的重量比混合均勻，即得；所述腐植酸和草炭的粒徑均控制在50目；
[0027] 所述生物有機(jī)質(zhì)按照如下方法制備而成：
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