一種利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明涉及生物化工領(lǐng)域，具體涉及一種利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法。
【背景技術(shù)】
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[0002]油脂酵母是一種重要的工業(yè)微生物，其能合成滿足工業(yè)、食品、醫(yī)療保健用的各類微生物油脂。通常，油脂酵母提油后會留下大量非油脂類菌體。如果直接將這些非油脂類菌體丟棄，會造成巨大的資源浪費，同時還會污染環(huán)境。
[0003]一般而言，酵母細胞壁占其細胞干重18-30%，而細胞壁中又有85%的組成為酵母多糖物質(zhì)(以葡聚糖與甘露聚糖為主)。油脂酵母發(fā)酵后能積累自身干重50%以上的微生物油脂，而提油后剩下的菌體多為酵母細胞壁，因此富含酵母多糖。
[0004]通常而言，酵母多糖從釀酒酵母中提取得到(用啤酒廢酵母制備酵母多糖、海藻糖及酵母抽提物的方法，ZL 200910036820.5)。但工藝繁瑣，涉及的工藝包括細胞破碎，質(zhì)壁分離，除蛋白，除脂等。

【發(fā)明內(nèi)容】

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[0005]本發(fā)明的目的是提供一種利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法。
[0006]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的:
[0007]一種利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法，該方法包括以下步驟:
[0008]a、洗滌去雜:提油后的油脂酵母菌體用親水性有機溶劑和疏水性有機溶劑分別洗滌；
[0009]b、堿液或水處理:洗滌后的油脂酵母菌體在堿液或水中80_150°C處理0.5-3小時后固液分離得到固體和液體；
[0010]C、醇析:往步驟b獲得的液體中加入醇，靜置，固液分離，得到固體為水溶性或者堿溶性多糖產(chǎn)品；
[0011]d、酸處理:步驟b獲得的固體，使用酸80-150°C處理0.5_3小時后固液分離，得到固體為酸不溶性多糖產(chǎn)品。
[0012]所述的油脂酵母來源于工業(yè)中的斯達油脂酵母(Lipomyces starkeyi)、圓紅冬抱酵母(Rhodosporidium toruloides)、粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)、淺白隱球酵母(Cryptococcus albidus)、皮狀絲抱酵母(Trichosporon cutaneum)、解脂亞羅酵母(Yarrowia lipolytica)、Trichosporon dermatis、Trichosporn coremiiforme 中的任一種。
[0013]步驟a中所述親水性有機溶劑優(yōu)選為甲醇或乙醇，所述疏水性有機溶劑優(yōu)選為石油醚或正己烷，用親水性有機溶劑和疏水性有機溶劑分別洗滌提油后的油脂酵母菌體用來去除細胞外的親水性與疏水性雜質(zhì)。
[0014]步驟b中的所述的堿液選自氫氧化鈉水溶液、氫氧化鉀水溶液、氫氧化媽水溶液、氨水水溶液中的任一種。
[0015]步驟c中醇優(yōu)選為甲醇或乙醇，醇的用量為步驟b獲得的液體體積的的2-8倍，靜置時間為3-8小時，固液分離方法優(yōu)選為離心或者過濾。
[0016]步驟d中的酸優(yōu)選為鹽酸、硫酸、乙酸、甲酸中的任一種。
[0017]本發(fā)明的有益效果為:
[0018]與從釀酒酵母中提取酵母多糖的工藝相比，利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖有以下優(yōu)勢:
[0019]I)油脂酵母可以利用大量不同種類的廉價原料特別是木質(zhì)纖維素原料進行發(fā)酵，獲得更高的生物量用于多糖提??；
[0020]2)可免去釀酒酵母多糖提取過程中涉及的工藝包括細胞破碎，質(zhì)壁分離，除蛋白，除月旨等。
[0021]總之，本發(fā)明通過化學(xué)物理手段利用提油后的油脂酵母菌體制備高附加值的酵母多糖產(chǎn)品，不僅可實現(xiàn)“變廢為寶”，實現(xiàn)經(jīng)濟效益和環(huán)境效益，還可以通過油脂發(fā)酵廣泛利用各類廉價原料特別是木質(zhì)纖維素原料制備酵母多糖，且免除了傳統(tǒng)釀酒酵母多糖提取過程中涉及的工藝包括細胞破碎，質(zhì)壁分離，除蛋白，除脂等，從而提供一條切實可行的酵母多糖制備工藝。
【具體實施方式】
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[0022]以下是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。
[0023]實施例1:
[0024]利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法，該方法包括以下步驟:
[0025]a、以1g油脂提取后的皮狀絲孢酵母(Trichosporon cutaneum)菌體為原料，用乙醇、石油醚分別洗滌后固液分離；
[0026]b、步驟a得到的洗滌后的油脂酵母菌體在IM的氫氧化鈉水溶液在105°C下處理
1.5小時，過濾得到固體和液體；
[0027]C、往步驟b獲得的液體中加入其5倍體積的乙醇后靜置8小時過濾，得到固體為2g堿溶性多糖；
[0028]d、步驟b獲得的固體，使用IM硫酸在105°C下處理1.5小時，過濾后，得到固體為3g酸不溶性多糖產(chǎn)品。
[0029]實施例2:
[0030]利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法，該方法包括以下步驟:
[0031]a、以1g油脂提取后的斯達油脂酵母(Lipomyces starkeyi)菌體為原料，用甲醇、正己烷分別洗滌后固液分離；
[0032]b、步驟a得到的洗滌后的油脂酵母菌體在IM的氫氧化鉀水溶液在80°C下處理3小時，過濾得到固體和液體；
[0033]C、往步驟b獲得的液體中加入其2倍體積的甲醇后靜置5小時過濾，得到固體為
0.4g堿溶性多糖；
[0034]d、步驟b獲得的固體，使用IM鹽酸在80°C下處理3小時，過濾后，得到固體為3.0g
酸不溶性多糖。
[0035]實施例3:
[0036]利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法，該方法包括以下步驟:
[0037]a、以1g油脂提取后的圓紅冬孢酵母(Rhodosporidium toruloides)菌體為原料，用乙醇、正己烷分別洗滌后固液分離；
[0038]b、步驟a得到的洗滌后的油脂酵母菌體在0.1M的氫氧化鈣水溶液在150°C下處理0.5小時，過濾得到固體和液體；
[0039]C、往步驟b獲得的液體中加入其2倍體積的甲醇后靜置5小時過濾，得到固體為0.7g堿溶性多糖；
[0040]d、步驟b獲得的固體，使用2M乙酸在95°C下處理1.5小時，過濾后，得到固體為2.5g酸不溶性多糖。
[0041]實施例4:
[0042]利用提油后的油脂酵母菌體制備酵母多糖的方法，該方法包括以下步驟:
[0043]a、以1g油脂提取后的粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)菌體為原料，