一種培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)真菌的液體培養(yǎng)基及其制備方法，具體涉及一種培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前食線蟲真菌培養(yǎng)大多采用固相培養(yǎng)基，如馬鈴薯、玉米粉瓊脂等，而液體培養(yǎng)基主要采用如馬鈴薯汁、酵母浸出物、蛋白胨、葡萄糖及微量鹽制成的各種培養(yǎng)基。其中，用馬鈴薯汁制成的液體培養(yǎng)基較渾濁難于觀察；用酵母浸出物等制成的人工復合培養(yǎng)基，較適用于細菌生長，雖然真菌也可以生長，但其成本昂貴，同時由于營養(yǎng)高易于造成細菌和其它微生物的污染。因此，探索一種主要用來生產(chǎn)真菌的菌絲液體培養(yǎng)基作為種子培養(yǎng)基(真菌一般在液體培養(yǎng)基不產(chǎn)生孢子)來培養(yǎng)食線蟲真菌是當前的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種易于觀察的培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基，并且該液體培養(yǎng)基可使食線蟲真菌生長快，菌絲產(chǎn)量高。
[0004]本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是:
[0005]本發(fā)明之一種培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基，由濃度為2%麩皮浸出液，濃度為2%的紅糖，余量為水組成。
[0006]進一步，所述麩皮為新鮮干燥的麩皮；所述水為蒸餾水。
[0007]本發(fā)明之一種培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟:
(1)稱取新鮮麩皮，加入水，微火煮沸I小時后，補水使麩皮濃度為2%；
(2)接著將步驟(I)中的麩皮溶液用紗布過濾，濾液置4°C沉淀，虹吸上清液，棄去沉淀；
(3)稱取紅糖加入步驟(2)中的上清液中，加熱溶解，使其紅糖濃度為2%，濾紙過濾；
(4)隨后分裝至三角燒瓶中，121°C高壓滅菌20分鐘，即成。
[0008]進一步，步驟(2)中，所述的紗布為六層紗布。
[0009]本發(fā)明之培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基用來源廣泛、價格低廉的含有豐富的磷、鈣、錳、鋅等有益的元素麩皮作原料，適用于食線蟲真菌的生長，該液體培養(yǎng)基略帶紅糖色，透明、清亮，易于觀察；并且加入紅糖原料與加入同等量的葡萄糖、蔗糖相比，真菌生長快，菌絲產(chǎn)量高。因此，本發(fā)明之培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基可廣泛適用于食線蟲性真菌的菌絲培養(yǎng)，以及大規(guī)模生產(chǎn)捕食線蟲性真菌的種子培養(yǎng)基。實驗證明，本發(fā)明之培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基菌絲產(chǎn)量的干重最高可達到0.0182±0.0033g/mlo
【具體實施方式】
[0010]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進一步加以說明。
[0011]實施例1
[0012]稱取20g新鮮麩皮，加入100ml蒸餾水，微火煮沸I小時后，補水至1000ml，使麩皮濃度為2% ;接著用六層紗布過濾，濾液置4°C沉淀，虹吸上清液，棄去沉淀；然后稱取市售的紅糖2g加入上述上清液中，加熱溶解，使其紅糖濃度為2%，濾紙過濾；隨后分裝至三角燒瓶中，121°C高壓滅菌20分鐘，即得到培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基。
[0013]本實施例制備的液體培養(yǎng)基，略帶紅糖色，透明、清亮，易于觀察；對食線蟲真菌3個屬的22個分離株及2株厚垣普奇尼亞菌(Pochonia chlamydosporia)做振搖培養(yǎng)試驗:對每株菌，用直徑為5mmX5mm的打孔器從生長了 4?7天的平板上取2個菌碟接種于含上述液體培養(yǎng)基40ml的10ml的三角燒瓶中，然后于置25 °C培養(yǎng)，先在轉(zhuǎn)速80r/min振搖48?72小時，后在轉(zhuǎn)速160r/min振搖72小時終止培養(yǎng)，菌液用型號為102號中速濾紙(15?20um)過濾，將濾紙上的菌絲于55 °C烘干，稱取凈的菌絲的風干重量，推算出每毫升培養(yǎng)基生產(chǎn)的菌絲干重(g/ml)，具體結(jié)果如下:鞭式達丁屯氏菌(Duddingtonia flagrans)4 株平均干重可達到 0.0182±0.0033g/ml。少抱節(jié)叢抱(Arthorbotiys oligosora) 10 株平均干重可達到 0.0110±0.0027g/ml。圓維節(jié)從抱(Arthorbotiys conoides) 2株平均干重可達到0.0074±0.0018g/ml。彎抱節(jié)叢抱(Arthrobotrys musiformis) I 株平均干重可達到 0.0095±0.0016g/ml。多抱節(jié)叢抱(Arthrobotrys superba) 2株平均干重可達到0.0094±0.0024g/ml。長抱隔指抱(Dactylella Ieptospora) I株平均干重可達0.0061 ±0.0004g/ml。囊抱單頂抱(Monacrosporium cystosporium) I 株平均干重可達到 0.0043±0.0008g/ml。多鹽單頂抱(Monacrosporium salinum) I株平均干重可達到0.0039±0.0014g/ml。厚垣普奇尼亞菌(Pochonia ch lamydospori a) 2株平均干重可達到0.0126±0.0005g/ml。由上述試驗表明真菌生長快，菌絲產(chǎn)量高。
【主權(quán)項】
1.一種培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基，其特征在于，由濃度為2%麩皮浸出液，濃度為2%的紅糖，余量為水組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基，其特征在于，所述麩皮為新鮮干燥的麩皮；所述水為蒸餾水。
3.一種如權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)稱取新鮮麩皮，加入水，微火煮沸I小時后，補水使麩皮濃度為2%； (2)接著將步驟(I)中的麩皮溶液用紗布過濾，濾液置4°C沉淀，虹吸上清液，棄去沉淀； (3)稱取紅糖加入步驟(2)中的上清液中，加熱溶解，使其紅糖濃度為2%，濾紙過濾； (4)隨后分裝至三角燒瓶中，121°C高壓滅菌20分鐘，即成。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的紗布為六層紗布。
【專利摘要】一種培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基及其制備方法，所述液體培養(yǎng)基由濃度為2％麩皮浸出液，濃度為2％的紅糖，余量為水組成。本發(fā)明還包括培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基的制備方法。本發(fā)明之培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基原料來源廣，且價格低廉；該液體培養(yǎng)基略帶紅糖色，透明、清亮，易于觀察；并且加入紅糖原料與加入同等量的葡萄糖、蔗糖相比，真菌生長快，菌絲產(chǎn)量高。因此，本發(fā)明之培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基可廣泛適用于食線蟲性真菌的菌絲培養(yǎng)，以及大規(guī)模生產(chǎn)捕食線蟲性真菌的種子培養(yǎng)基。實驗證明，本發(fā)明之培養(yǎng)食線蟲真菌的液體培養(yǎng)基菌絲產(chǎn)量的干重最高可達到0.0182±0.0033g/ml。
【IPC分類】C12R1-645, C12N1-14
【公開號】CN104560729
【申請?zhí)枴緾N201410817879
【發(fā)明人】王波波, 蔡葵蒸, 李禤, 謝德瓊, 黎曉珊, 許強, 易林鑫, 王慧, 孫龍杰, 陳明月, 韓元, 彭建偉, 劉偉, 趙明旺, 吳佳嚴, 楊靜, 魏栓, 李清, 李丹, 丁嘉烽, 陳春蓉, 鄭天惠, 王悅縈, 王康英, 藺國珍, 劉翊中, 徐春蘭, 秦鴿鴿, 李亞群, 王冬梅, 張濤杰, 馬忠仁, 白振京, 方文秀, 張超, 蔡彬, 劉艷秋, 胡黔林, 王帆, 王峰, 楊再昀
【申請人】西北民族大學
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年12月24日