本發(fā)明屬于生物，具體涉及l(fā)rtor在nsclc奧希替尼耐藥及轉(zhuǎn)移的預(yù)警、指引奧希替尼臨床用藥及疾病預(yù)后中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、egfr突變是非小細(xì)胞肺癌中最常見的驅(qū)動(dòng)突變，大約50％的亞洲腺癌患者攜帶egfr突變。盡管egfr酪氨酸激酶抑制劑(tki)最初對(duì)大多數(shù)egfr突變患者效果良好，但幾乎所有患者最終都會(huì)因?qū)Π邢蛩幬锂a(chǎn)生耐藥性而出現(xiàn)疾病進(jìn)展。t790m突變是第一代和第二代egfr-tki獲得性耐藥的主要機(jī)制。以?shī)W希替尼(osimertinib，osi)為代表的第三代egfr-tki對(duì)egfrt790m耐藥突變具有選擇性，對(duì)egfr啟動(dòng)突變也具有較強(qiáng)效力，且副作用小。奧希替尼雖然在egfr突變的非小細(xì)胞肺癌一線和二線治療中療效顯著，但病人通常也在一年左右出現(xiàn)耐藥。迄今為止尚缺乏有效的針對(duì)奧希替尼耐藥的替代療法。因此，奧希替尼耐藥的臨床診斷亟待早期準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)和在奧希替尼耐藥發(fā)生前的精準(zhǔn)評(píng)估。

2、人類基因中只有約1.2％的rna編碼蛋白質(zhì)，超過98％的rna為非編碼rna(ncrna)，其中長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸的ncrna稱為長(zhǎng)鏈非編碼rna(lncrna)，研究表明，lncrna的異常表達(dá)在腫瘤中普遍存在。lncrna可通過增強(qiáng)dna修復(fù)、改變信號(hào)傳導(dǎo)、影響線粒體功能、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程、誘導(dǎo)emt和腫瘤干細(xì)胞(csc)轉(zhuǎn)化等機(jī)制引發(fā)腫瘤耐藥。腫瘤及血液中的某些lncrnas已經(jīng)被研究證實(shí)可以作為一些疾病，如癌癥的生物標(biāo)志物用于診斷和預(yù)防，其重要意義在于提供一種新型診斷和預(yù)后手段。應(yīng)用現(xiàn)有成熟的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，能快速建立起以lncrnas為標(biāo)志物的檢測(cè)方法，這種新方法相對(duì)于其他診斷技術(shù)有特異性高、方法簡(jiǎn)便、標(biāo)本容易獲得、標(biāo)本用量少等特點(diǎn)，使基于lncrnas的新檢測(cè)方法具有巨大的臨床應(yīng)用潛力。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在于應(yīng)用lncrna標(biāo)志物lrtor診斷并預(yù)警nsclc奧希替尼耐藥及轉(zhuǎn)移，指導(dǎo)奧希替尼臨床用藥及疾病預(yù)后。

2、本發(fā)明第一方面的目的，在于提供lncrna?lrtor作為生物標(biāo)志物的應(yīng)用。

3、本發(fā)明第二方面的目的，在于提供檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明第三方面的目的，在于提供一種用于診斷或評(píng)估肺癌的奧希替尼耐藥性的產(chǎn)品。

5、本發(fā)明第四方面的目的，在于提供一種用于肺癌的奧希替尼耐藥性的診斷或評(píng)估的系統(tǒng)。

6、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

7、本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供lncrna?lrtor作為生物標(biāo)志物的應(yīng)用，所述應(yīng)用包括(a1)～(a3)中任一種：

8、(a1)制備用于診斷、預(yù)警或預(yù)后肺癌奧希替尼耐藥性的產(chǎn)品；

9、(a2)制備用于評(píng)估肺癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力的產(chǎn)品；

10、(a3)制備用于指導(dǎo)肺癌臨床用藥適用性的產(chǎn)品，所述藥包括奧希替尼；

11、所述lncrna?lrtor的核苷酸序列如seq?id?no:5所示。

12、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述產(chǎn)品包括藥物、試劑、試劑盒、試紙、系統(tǒng)和芯片中至少一種。

13、本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用。

14、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)包含定量檢測(cè)lncrnalrtor的物質(zhì)。

15、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述物質(zhì)包括在基因或蛋白水平上檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)。

16、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)包括通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫熒光法、放射免疫測(cè)定法、免疫共沉淀法、免疫印跡法、高效液相色譜法、毛細(xì)管凝膠電泳法、近紅外光譜法、質(zhì)譜法、免疫化學(xué)發(fā)光法、膠體金免疫技術(shù)、熒光免疫層析技術(shù)、表面等離子共振技術(shù)、pcr、免疫-pcr技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、單細(xì)胞測(cè)序或生物素-親和素技術(shù)檢測(cè)所述lncrna?lrtor的物質(zhì)。

17、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)選自：對(duì)lncrna?lrtor具有特異性的物質(zhì)、lncrna?lrtor特異性的探針、基因芯片、pcr引物。

18、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述對(duì)lncrna?lrtor具有特異性的物質(zhì)為(f1)～(f3)中的任一種：

19、(f1)特異性結(jié)合lncrna?lrtor的抗體；

20、(f2)特異性結(jié)合lncrna?lrtor的配體蛋白或多肽；

21、(f3)特異性識(shí)別lncrna?lrtor的非蛋白類化合物。

22、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述的抗體包括多克隆抗體、單克隆抗體、單鏈抗體、功能性抗體片段、抗體fab區(qū)，納米抗體、嵌合抗體、多特異性抗體中的至少一種。

23、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述lncrna?lrtor特異性的探針如seq?id?no:3或seqid?no:4所示。

24、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述pcr引物包括上游引物和下游引物，其上游引物和下游引物的序列如seq?id?no:1和seq?id?no:2所示。

25、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述物質(zhì)還可以包括檢測(cè)反應(yīng)常用的酶和試劑。

26、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述產(chǎn)品包括試劑、試劑盒、試紙、系統(tǒng)和芯片中至少一種。

27、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述肺癌包括非小細(xì)胞肺癌。

28、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述產(chǎn)品的受試樣品選自待測(cè)對(duì)象的體液(如血液、尿液等)、組織(如腫瘤組織)、細(xì)胞、排泄物中的至少一種。

29、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述產(chǎn)品具有如下至少一種功能：用于診斷、預(yù)警或預(yù)后肺癌奧希替尼耐藥性、用于評(píng)估肺癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力或指導(dǎo)肺癌臨床用藥。

30、本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供一種用于診斷或評(píng)估肺癌的奧希替尼耐藥性的產(chǎn)品，包括本發(fā)明第二方面中所述的檢測(cè)lncrna?lrtor的物質(zhì)。

31、本發(fā)明的第四個(gè)方面，提供一種用于肺癌的奧希替尼耐藥性的診斷或評(píng)估的系統(tǒng)，包括：

32、檢測(cè)模塊，用于檢測(cè)肺癌患者樣本中l(wèi)ncrna?lrtor的表達(dá)水平；

33、分析模塊，用于獲取上述檢測(cè)結(jié)果，根據(jù)預(yù)定規(guī)則判斷診斷結(jié)果。

34、在本發(fā)明一些實(shí)施方式中，所述預(yù)定規(guī)則為：當(dāng)檢測(cè)到lncrna?lrtor的表達(dá)水平高于正常樣本，則判斷為肺癌的奧希替尼耐藥性高。

35、本發(fā)明的有益效果是：

36、本發(fā)明提出一種新型的lncrna，將其命名為lrtor。首次公開lrtor的表達(dá)水平與nsclc的奧希替尼耐藥及腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)，與預(yù)后(生存期)呈顯著負(fù)相關(guān)。提示lrtor有望成為分子靶標(biāo)用于nsclc的奧希替尼耐藥及轉(zhuǎn)移的預(yù)警、指導(dǎo)奧希替尼臨床用藥及疾病的預(yù)后。

37、通過檢測(cè)腫瘤組織及體液(如血液、尿液等)中的lrtor表達(dá)預(yù)警nsclc奧希替尼耐藥及轉(zhuǎn)移、指導(dǎo)奧希替尼臨床用藥及評(píng)估疾病預(yù)后，相較于傳統(tǒng)臨床檢測(cè)手段，本發(fā)明的方法更簡(jiǎn)單、更靈敏、更特異、更準(zhǔn)確，具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。