本發(fā)明涉及蛋白多肽提取,具體為一種可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法。
背景技術(shù):
1、人類攝取蛋白質(zhì)經(jīng)消化酶作用后,并非主要以氨基酸的形式吸收,而是以肽的形式吸收,一些肽不僅能提供人體生長、發(fā)育所需營養(yǎng)物質(zhì),同時具有多種生理功能,如能改善和提高礦物質(zhì)運輸和吸收、抗菌和病毒、提高免疫力、抗氧化、降膽固醇、抗癌作用、清除自由基抗衰老等作用。
2、而經(jīng)科學(xué)研究,羊胚胎素含有多種能夠調(diào)節(jié)人體組織器官機能的活性成分,其中包括超氧化物歧化酶(sod)、表皮生長因子(egf)、透明質(zhì)酸刺激因子(hasf)和堿性成纖維細胞生長因子(bfgf)等具有美化肌膚功效的成分,因此羊胚胎提取物也成了人們用于生產(chǎn)美容保健產(chǎn)品的重要原料之一。
3、但是現(xiàn)有的羊胚胎在提取蛋白多肽的生產(chǎn)工藝中,由于企業(yè)的大規(guī)模生產(chǎn)方式,使得羊胚胎原料的品質(zhì)狀況無法保證完全一致,這就使得不同批次的羊胚胎提取物的蛋白多肽提取率不同,同時其含有的雜質(zhì)量也不同,從而降低了羊胚胎原料中提取的蛋白多肽溶液的純度,降低了后續(xù)美容保健產(chǎn)品的生產(chǎn)質(zhì)量;鑒于此,我們提出了一種可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法,以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:一種可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法,包括以下步驟:
3、步驟一、原料準(zhǔn)備:取妊娠2~3個月的檢疫健康無病母羊的羊胚胎,并且保證羊胚胎原料提取于12h內(nèi),將羊胚胎原料使用純化水清洗之后對其進行冷凍處理,得到冷凍羊胚胎和羊胚胎清洗液;
4、步驟二、粉碎:通過粉碎機對步驟一中得到的冷凍羊胚胎進行粉碎作業(yè),并且保證粉碎機的作業(yè)環(huán)境處于0~5℃,粉碎后得到粗羊胚胎冷凍粉末;
5、步驟三、超微粉碎:將步驟二中得到的粗羊胚胎冷凍粉末置入-30℃環(huán)境中冷凍30min,之后將冷凍后的粗羊胚胎冷凍粉末置入超微粉碎機內(nèi)進行超微粉碎,最終得到細羊胚胎冷凍粉末;
6、步驟四、過濾提?。簩⒉襟E三中得到的細羊胚胎冷凍粉末加入到混合容器中,并將步驟一中得到的羊胚胎清洗液倒入,同時按質(zhì)量比1:10的比例加入蒸餾水進行混合,通過離心機對混合容器內(nèi)的混合溶液進行離心作業(yè),離心結(jié)束后取懸浮液過濾得到濾液和沉淀;
7、步驟五、制取水解液:取步驟四中得到的沉淀于水解容器中,并向水解容器內(nèi)加入適量的蛋白酶,并對水解容器內(nèi)的ph值進行調(diào)節(jié),使其處于7.0~9.0之間,并通過溫控設(shè)備控制水解容器的溫度范圍為50℃-60℃,水解結(jié)束后冷卻至常溫,并進行過濾后得到羊胚胎水解液;
8、步驟六、混合調(diào)節(jié):將步驟四中得到的濾液與步驟五中得到的羊胚胎水解液進行混合,并對混合液進行ph值調(diào)節(jié)至中性,得到羊胚胎素原液;
9、步驟七、干燥收集:將步驟六中得到的羊胚胎素原液泵入噴霧干燥機內(nèi),噴出細小液滴,并且對細小液滴進行加熱,使其快速蒸發(fā)干燥得到蛋白多肽提取物粉末進行收集。
10、優(yōu)選的,所述步驟一中的羊胚胎原料在加工前對其使用純化水進行清洗,且清洗過程分為兩步,第一步通過持續(xù)向羊胚胎原料表面噴出純化水,洗去羊胚胎表面多余組織物和血液等雜質(zhì),第二步則對羊胚胎原料進行清洗后得到的清洗液進行保存,以用作后續(xù)混合步驟的混合液,減少原料的損耗的同時可以避免初始的羊胚胎原料表面的雜質(zhì)影響到后續(xù)的提取作業(yè)的開展,提高羊胚胎提取物的提取精度。
11、優(yōu)選的,所述步驟一中的羊胚胎原料的冷凍溫度設(shè)置為-45~-50℃之間,并且羊胚胎原料在冷凍時溫度采用逐步降低的方式進行降溫,降溫時長設(shè)定為50~60min,從而使得羊胚胎原料在冷凍后達到凍干的程度,而不會過度的破壞其內(nèi)部結(jié)構(gòu),保證其新鮮度,以方便運輸和轉(zhuǎn)運,保證其活性,并且采用逐級降溫的方式可以有效避免羊胚胎原料受損,影響到后續(xù)的蛋白多肽的提取率,并且所述羊胚胎清洗液常溫密封保存,避免其在加工過程中受到其他環(huán)境因素影響,避免其影響到后續(xù)混合液的制備。
12、優(yōu)選的,所述步驟二中對冷凍羊胚胎進行粉碎時使用過濾設(shè)備對初粉碎料進行過濾,并且所述過濾設(shè)備采用網(wǎng)孔直徑為5mm的濾網(wǎng),以使得步驟二中得到的粗冷凍羊胚胎粉末的細度小于5mm,從而方便后續(xù)的超微粉碎作業(yè)。
13、優(yōu)選的,所述步驟三中進行超微粉碎時分多次進行,首先將步驟二中得到的粗羊胚胎冷凍粉末均分為若干份,每次對一份粗羊胚胎粉末進行超微粉碎作業(yè),得到的細羊胚胎冷凍粉末置于冷凍設(shè)備內(nèi)進行冷凍,之后將每次超微粉碎后的產(chǎn)出物與之前得到的細羊胚胎冷凍粉末進行混合,最終得到所有的混合產(chǎn)出物再次進行超微粉碎作業(yè),得到均勻混合的細羊胚胎冷凍粉末,從而保證粗羊胚胎粉末的超微粉碎效果,有效地減小羊胚胎粉末的細度,從而方便后續(xù)的水解作業(yè)的開展,提高雜質(zhì)在純化水中濾出的效率。
14、優(yōu)選的,所述步驟四中進行混合時以與蒸餾水體積比為1:20的體積比加入乙醇溶液,先進行震蕩搖勻后再進行離心作業(yè),并且持續(xù)重復(fù)震蕩搖勻-離心-靜置-去沉淀物步驟三次以上,直至混合溶液中無明顯沉淀為止,以有效的提取出細羊胚胎冷凍粉末混合溶液中的沉淀物,保證混合溶液的溶解效果。
15、優(yōu)選的,所述步驟四中進行離心作業(yè)時保證環(huán)境溫度處于0~5℃,并且加入的蒸餾水溫度也處于0~5℃,且蒸餾水的加入方式分三步進行,三次加入的純化水體積分別為總加入體積的20%、30%、50%,以保證細羊胚胎冷凍粉末的溶解效果較好,不會出現(xiàn)結(jié)凍或者變質(zhì)的情況,影響到后續(xù)的混合作業(yè)開展。
16、優(yōu)選的,所述步驟五中進行ph值調(diào)節(jié)時采用naoh溶液,且所述naoh溶液的濃度為1~3mol/l,從而在保證盡可能少加入ph值調(diào)節(jié)溶液的情況下可以快速地對水解容器中的混合溶液的ph值進行調(diào)節(jié),使最終的結(jié)果也更加的準(zhǔn)確,且水解容器的外部設(shè)置有水浴加熱器,以使得水解容器中的溫度提升更加均衡和穩(wěn)定,并可以保持較好的溫度維持效果,進而保證水解作業(yè)中蛋白酶的活性,從而更高效地破壞細胞的細胞壁,從而釋放細胞內(nèi)的蛋白多肽。
17、優(yōu)選的,所述步驟六中進行混合時采用離心機混合,且離心機的轉(zhuǎn)速設(shè)定為5000r/min,并且離心作業(yè)時間不少于10min,不超過15min,從而使得羊胚胎水解液和濾液之間的混合更加均勻,并且最終得到羊胚胎素原液之前對混合后溶液的懸浮液去除,以最大限度地去除混合溶液中的雜質(zhì),保證提取的蛋白多肽的純度。
18、優(yōu)選的,所述噴霧干燥機內(nèi)的加熱方式為低溫加熱,且所述噴霧干燥機內(nèi)的溫度范圍為40℃~80℃,以避免在噴霧干燥加工過程中對蛋白多肽的活性造成影響,進而降低了提取的蛋白多肽的使用效果。
19、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明提供了一種可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法,具備以下有益效果:
20、1、該可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法,通過對羊胚胎原料的多次清洗并在提取了粗羊胚胎冷凍粉末后進行超微粉碎,并通過細羊胚胎冷凍粉末制備的水解液和處于清洗液進行混合,同時在得到羊胚胎素原液前進行離心過濾并去除懸浮液,從而在最大限度地降低蛋白損耗的情況下提取更多的蛋白多肽,保證從羊胚胎肌肉原料中提取的蛋白多肽的效率和純度,從而提高本制備方法的收益,降低原材料的損耗。
21、2、該可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法,通過在進行超微粉碎作業(yè)過程中進行分批多次粉碎,并將粉碎后得到的產(chǎn)出物進行總混合后再次進行超微粉碎步驟,從而保證粗羊胚胎粉末的超微粉碎效果,有效的減小羊胚胎粉末的細度,從而方便后續(xù)的水解作業(yè)的開展,提高雜質(zhì)在純化水中濾出的效率,減少羊胚胎原液中的雜質(zhì)含量。
22、3、該可提高從羊胚胎肌肉中蛋白多肽提取率的方法,為了避免通過采用水浴的方式對水解容器進行穩(wěn)定加熱,并在水解過程中分批逐次加入純化水,以保證細羊胚胎冷凍粉末的溶解效果較好,不會出現(xiàn)結(jié)凍或者變質(zhì)的情況,影響到后續(xù)的混合作業(yè)開展。