技術特征:1.一種基于rpa-crispr/cas12a檢測麥角病菌的引物,其特征在于,所述麥角病菌的拉丁學名為clavicepspurpurea,所述檢測麥角病菌的引物包括rpa上游引物、rpa下游引物和crrna引物及通用引物,
2.一種基于rpa-crispr/cas12a檢測麥角病菌的試劑盒,其特征在于,包括權利要求1所述的基于rpa-crispr/cas12a檢測麥角病菌的引物。
3.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于,還包括cas12a蛋白、t7轉錄酶、dna聚合酶、緩沖液、cas12/13專用核酸檢測試紙條。
4.一種基于rpa-crispr/cas12a檢測麥角病菌的方法,其特征在于,包括以下步驟:
技術總結本發(fā)明提供了一種基于RPA?CRISPR/Cas12a檢測麥角病菌的引物,包括RPA上游引物、RPA下游引物和crRNA引物及通用引物,核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1~4所示;還提供了試劑盒,包括基于RPA?CRISPR/Cas12a檢測麥角病菌的引物、Cas12a蛋白、T7轉錄酶、DNA聚合酶、緩沖液、Cas12/13專用核酸檢測試紙條;還提供了檢測方法:首先提取待測樣品DNA,然后用RPA上、下游引物通過RPA擴增技術擴增靶標序列,隨后以RPA擴增產(chǎn)物和crRNA、Cas12a蛋白、FB探針建立RPA?CRISPR/Cas12a檢測體系,得到RPA?CRISPR/Cas12a反應產(chǎn)物,用Cas12/13專用核酸檢測試紙條進行檢測。本發(fā)明基于RPA?CRISPR/Cas12a檢測麥角病菌的檢測方法具有用時短、特異性強、靈敏度高、結果準確等優(yōu)點。
技術研發(fā)人員:胡小平,張慧瑩,王強,秦君,黃衛(wèi)利
受保護的技術使用者:西北農(nóng)林科技大學
技術研發(fā)日:技術公布日:2024/11/4