本發(fā)明涉及日用化妝品和保健品原料以及生物領域，具體涉及一種鼠李糖乳桿菌、其發(fā)酵產(chǎn)物和應用。

背景技術：

1、鼠李糖乳桿菌(lactobacillus?rhamnosus)是一種常見的乳酸桿菌，屬于革蘭氏陽性、兼性厭氧菌，不具備形成芽孢的能力，耐酸，適合生長的ph在5.5-6.2之間。鼠李糖乳桿菌多見于人和動物的腸道內(nèi)容物、糞便及生殖道內(nèi)，也出現(xiàn)在牛奶及乳制品中。

2、在保健品領域，鼠李糖乳桿菌因其顯著的益生效果而被廣泛應用。其作為益生菌補充劑，能夠改善腸道功能，緩解腹瀉、便秘等消化問題，增強腸道屏障功能，減少病原體感染的風險。尤其在嬰幼兒和老年人群中，鼠李糖乳桿菌gg菌株(lgg)被廣泛應用于嬰幼兒配方奶粉、益生菌滴劑等產(chǎn)品中，以促進嬰幼兒腸道菌群的健康發(fā)展，增強免疫力，預防和治療抗生素相關性腹瀉，以及在老年人中維護腸道健康，改善免疫力下降帶來的問題。

3、在化妝品領域，鼠李糖乳桿菌及其代謝產(chǎn)物的獨特功效正在逐步被發(fā)掘和利用。

4、如wo2011029784a1公開了保藏號為lmgp-25211的鼠李糖乳桿菌，在口服或局部給藥時表現(xiàn)出強的抗炎活性，但是并未發(fā)現(xiàn)其他效果，而且需要服用或施用微生物菌劑。

5、cn113046268a公開了一種鼠李糖乳桿菌11-7，其發(fā)酵后菌體用酶裂解得到的溶胞物可抑制致病菌的繁殖生長，能調(diào)節(jié)皮膚微生態(tài)。

6、cn112980892a公開了由植物乳桿、干酪乳桿菌、乳雙歧桿菌、動物雙歧桿菌和鼠李糖乳桿組成的益生菌組合物發(fā)酵產(chǎn)物，具有特有的發(fā)酵代謝產(chǎn)物，可維持皮膚菌群平衡，具有祛皺、增加皮膚彈性、抗炎癥等效果。kr1020110134151a公開了多種益生菌混合培養(yǎng)發(fā)酵產(chǎn)物對于痤瘡和皮膚炎性疾病有較好效果，但鼠李糖乳桿菌發(fā)酵物并沒有改善上述皮膚問題。

7、kr1020080094459a公開了，用乳桿菌對草藥(甘草等)進行發(fā)酵，其發(fā)酵物具有抗氧化活性。

8、由此可見，現(xiàn)有技術中，鼠李糖乳桿菌的微生物制劑、溶胞物或者發(fā)酵產(chǎn)物功能較為單一，或者需要與其他益生菌聯(lián)合發(fā)酵從而獲得較好的護膚效果。因此，需要提供一種鼠李糖乳桿菌及其發(fā)酵產(chǎn)物，能夠解決多種皮膚問題，而無需在護膚品中添加多種功效成分。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在提供一種鼠李糖乳桿菌及其發(fā)酵產(chǎn)物，以及應用。

2、其技術方案如下：

3、一種鼠李糖乳桿菌jmb235(lactobacillus?rhamnosus?jmb235)，保藏編號為cctcc?no.m?20232530，保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(地址：中國湖北省武漢市武漢大學，郵編430072)，于2023年12月11日保藏。

4、上述鼠李糖乳桿菌jmb235菌株的培養(yǎng)方法如下。

5、種子培養(yǎng)基：0.5％～3％葡萄糖、2％～5％蛋白胨、0.5％～3％脫脂牛奶粉、0.5％～3％酵母提取物、0.01％～1％七水硫酸鎂、0.01％～1％磷酸氫二鉀、0.01％～1％氯化鉀、0.01％～1％氯化鈉，余量為水，所述百分比為質(zhì)量百分比。培養(yǎng)基的ph為5.5-6.5。

6、菌體擴大培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基：0.5％～3％葡萄糖、2％～5％蛋白胨、0.5％～3％脫脂牛奶粉、0.5％～3％酵母提取物、0.01％～1％七水硫酸鎂、0.01％～1％磷酸氫二鉀、0.01％～1％氯化鉀、0.01％～1％氯化鈉，余量為水，所述百分比為質(zhì)量百分比。培養(yǎng)基的ph為5.5-6.5。

7、取單個菌落接種至種子培養(yǎng)基中，搖床或發(fā)酵罐中以26℃～36℃、靜置培養(yǎng)16-24小時將菌種活化，得到鼠李糖乳桿菌種子液。

8、種子培養(yǎng)：種子液在培養(yǎng)基中26℃～36℃、靜置培養(yǎng)40～50小時，至od600為0.5-5.0，優(yōu)選的，od600為2.0-5.0。

9、菌體擴大培養(yǎng)：將所述種子液菌體按0.1％～10.0％接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，優(yōu)選的，接種量為1％-10％；26℃～36℃，培養(yǎng)40～50小時，培養(yǎng)過程攪拌在50rpm～100rpm，所述百分比為質(zhì)量百分比。優(yōu)選的，培養(yǎng)12-16小時后，添加補料培養(yǎng)基使葡萄糖終濃度為1％～2％。所述的補料培養(yǎng)基中含有葡萄糖和酵母抽提物，余量為水；葡萄糖與酵母抽提物的質(zhì)量比為1：0.5-3，優(yōu)選為1：1-2。優(yōu)選的，補料培養(yǎng)基含2％～6％葡萄糖，1％～2％酵母抽提物。

10、鼠李糖乳桿菌jmb235的發(fā)酵產(chǎn)物可用于制備皮膚外用劑、保健品、美容口服劑、食品或食品添加劑。

11、所述的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑、食品或食品添加劑具有以下功能中的至少一種：控制油脂分泌、防脫發(fā)、抑制痤瘡、促進毛發(fā)生長、抑制濕疹、抑制炎癥、維護皮膚屏障、促進表皮細胞增殖分化、防曬、修復受損皮膚或改善睡眠。

12、所述發(fā)酵產(chǎn)物及其制備的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑或食品添加劑具有抑制5α-還原酶的作用，能夠控制油脂分泌、防止脫發(fā)和抑制痤瘡。

13、所述發(fā)酵產(chǎn)物及其制備的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑或食品添加劑還具有改善睡眠，預防和減輕失眠的作用。

14、所述發(fā)酵產(chǎn)物及其制備的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑或食品添加劑具有抑制炎癥因子基因表達、抑制tnf-α蛋白分泌，尤其是抑制金黃色葡萄球菌引起的炎癥因子基因表達和tnf-α蛋白分泌，可以用于預防或者減緩濕疹，尤其是嬰幼兒濕疹。

15、所述發(fā)酵產(chǎn)物及其制備的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑或食品添加劑具有調(diào)控表皮細胞增殖和分化相關基因轉錄水平的作用，可用于促進表皮細胞增殖和分化，能夠修復受損皮膚屏障和維持皮膚屏障；尤其是紫外線合并空氣污染物(如bap苯并芘)導致的皮膚損傷。

16、優(yōu)選的，能夠上調(diào)krt1、krt16、klk5和klk11的表達，尤其是在紫外線合并空氣污染物(如bap苯并芘)的情況下，提高krt1、krt16、klk5和klk11的表達。

17、所述發(fā)酵產(chǎn)物及其制備的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑或食品添加劑具有抑制脂質(zhì)類過氧化代謝產(chǎn)物的作用，可下調(diào)花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝、亞油酸代謝信號通路，能夠用于調(diào)節(jié)皮脂腺細胞活性，減少皮脂的分泌，達到控油效果。

18、優(yōu)選的，能夠抑制紫外線合并光污染化學物質(zhì)(如bap苯并芘)下的花生四烯酸代謝、α-亞麻酸代謝、亞油酸代謝信號通路。尤其適用于紫外線合并光污染化學物質(zhì)(如bap苯并芘)導致的皮脂腺增生、皮脂腺細胞的增殖分化和油脂分泌過多的情況。

19、所述發(fā)酵產(chǎn)物及其制備的皮膚外用劑、保健品、美容口服劑或食品添加劑具有促進人永生化角質(zhì)形成細胞(hacat)、真皮成纖維細胞(fb)、毛囊真皮毛乳頭細胞(dp)增殖、抵御紫外線導致的損傷和促進修復紫外線損傷的作用，可修復皮膚和促進毛發(fā)生長，以及抗光衰老和防曬及曬后修復。

20、上述鼠李糖乳桿菌jmb235的發(fā)酵產(chǎn)物制備方法如下：

21、將擴大培養(yǎng)后的鼠李糖乳桿菌菌液接種至已滅菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，26℃～36℃、50～150rpm條件下發(fā)酵，ph控制在5.5-6.5，最優(yōu)地6.0。接種后發(fā)酵12h～16h開始補料，使葡萄糖終濃度為1％～2％，總培養(yǎng)時間在40～50小時。優(yōu)選的，擴大培養(yǎng)后的鼠李糖乳桿菌菌液按0.1～10.0％接種量加入發(fā)酵培養(yǎng)基中，在搖床或發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵。

22、鼠李糖乳桿菌jmb235的發(fā)酵產(chǎn)物中，其干物質(zhì)包括以下質(zhì)量百分比的成分：

23、有機酸及其衍生物46％-49％，碳水化合物和碳水化合物結合物43％-45％，氨基酸、肽類及類似物7％-8％，核苷、核苷酸及類似物0.25％-0.5％，類固醇和類固醇衍生物0.1％-0.2％，生物胺0.1％-0.2％，嘧啶和嘧啶衍生物0.03％-0.08％，苯類0.03％-0.08％，脂類0.02％-0.05％，嘌呤和嘌呤衍生物0.02％-0.05％，吲哚和衍生物0.001％-0.005％，含氮雜環(huán)化合物0.001％-0.005％，吡啶和衍生物0.001％-0.005％。其他未檢測的成分小于0.06％。

24、發(fā)酵產(chǎn)物的穩(wěn)定性好，不加入防腐劑也可以放置較長時間，保持澄清透明，且其ph、電導率、折光率、固含量等理化指標及顏色氣味均保持穩(wěn)定。

25、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果在于：

26、(1)發(fā)現(xiàn)了一種新的鼠李糖乳桿菌菌株，經(jīng)過發(fā)酵后，其發(fā)酵產(chǎn)物具有多種護膚功能，可用于制備化妝品、美容口服劑、食品、保健品和添加劑等，具有廣泛的應用前景。

27、(2)這種鼠李糖乳桿菌的發(fā)酵產(chǎn)物的作用包括控制油脂分泌、防脫發(fā)、抑制痤瘡、促進毛發(fā)生長、抑制濕疹、抑制炎癥、維護皮膚屏障、促進表皮細胞增殖分化、防曬、修復受損皮膚、改善失眠等，功能廣泛，添加到化妝品或者用于食品、保健品，可實現(xiàn)多種功能，而無需復配各種不同功能的成分。

28、(3)所得到的發(fā)酵產(chǎn)物穩(wěn)定性好，不加入防腐劑也可以貯存較長時間，澄清透明，且顏色氣味均保持穩(wěn)定，用于化妝品，可減少防腐劑、穩(wěn)定劑等添加劑的使用。