本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的原料藥制備，其涉及一種精品肝素鈉的提取方法。
背景技術(shù)：
肝素鈉是一種低分子肝素鈉鹽，肝素鈉為低分子量的肝素鈉，目前國(guó)內(nèi)在肝素鈉的純化技術(shù)上主要有離子交換層析法，分子排阻法，以及超濾等方法。離子交換層析與分子排阻法得到的肝素鈉雖然產(chǎn)品質(zhì)量較高，但操作步驟繁瑣，純化周期長(zhǎng)，成本高，僅適用于少量的肝素鈉進(jìn)行純化，無(wú)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種精品肝素鈉的提取方法，本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：降解，將肝素鈉溶解并降解，得到肝素鈉降解液；還原，將肝素鈉降解液用還原劑進(jìn)行還原，得到還原液；酶解，將上述還原液用鹽酸溶液調(diào)ph，升到一定溫度后加入酶開(kāi)始保溫一定時(shí)間；乙醇沉淀，加入乙醇，不斷攪拌；超濾，將乙醇沉淀再溶解，溶解液用超微濾膜進(jìn)行超濾；乙醇再沉淀，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph，加入乙醇，不斷攪拌；脫水干燥，用乙醇脫水干燥，得到肝素鈉；用5倍量的水將肝素鈉全部溶解，調(diào)節(jié)ph至8，在40℃下加入亞硝酸鈉，該亞硝酸鈉為肝素鈉重量的0.2％，在25分鐘內(nèi)迅速升溫至95℃，并保持45分鐘，不斷攪拌，冷卻至室溫，得到肝素鈉降解液；向肝素鈉降解液中加入氫氧化鈉至ph為12終止降解反應(yīng)，再加入還原劑連二亞硫酸鈉或焦亞硫酸鈉或兩者混合還原4小時(shí)，然后調(diào)節(jié)ph至7，即得到還原液，還原劑的量為肝素鈉重量的1％；將上述還原液用鹽酸溶液調(diào)ph9，升溫到65℃之間后加入胰蛋白酶7g/億單位，再加入15g/億單位胃蛋白酶，65℃保溫3小時(shí)；加入80%乙醇沉淀至乙醇度為80%；乙醇沉淀物再溶后，用可截留11000的分子量的超微濾膜進(jìn)行超濾，得到超濾液；先用氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph至8，在加入超濾液體積4倍的90%乙醇沉淀15小時(shí)；乙醇脫水物在75℃干燥7小時(shí)，得到肝素鈉。
本發(fā)明通過(guò)快速升溫使肝素鈉得到充分降解，縮短生產(chǎn)用時(shí)，且肝素鈉收率明顯提高，肝素鈉質(zhì)量有明顯提高，且方法簡(jiǎn)單易行。
此外，該方法生產(chǎn)用時(shí)少，條件溫和，對(duì)設(shè)備要求低，成本低，方法中用到的多種化學(xué)試劑均低于現(xiàn)有工業(yè)生產(chǎn)中的用量及成本，非常適合應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)中，具有重要的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施方式
一種精品肝素鈉的提取方法，該制備方法包括以下步驟：降解，將肝素鈉溶解并降解，得到肝素鈉降解液；還原，將肝素鈉降解液用還原劑進(jìn)行還原，得到還原液；酶解，將上述還原液用鹽酸溶液調(diào)ph，升到一定溫度后加入酶開(kāi)始保溫一定時(shí)間；乙醇沉淀，加入乙醇，不斷攪拌；超濾，將乙醇沉淀物溶解，溶解液用超微濾膜進(jìn)行超濾；乙醇再沉淀，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph，加入乙醇，不斷攪拌；脫水干燥，用乙醇脫水干燥，得到精品肝素鈉。用5倍量的水將肝素鈉全部溶解，調(diào)節(jié)ph至8，在40℃下加入亞硝酸鈉，該亞硝酸鈉為肝素鈉重量的0.2％，在25分鐘內(nèi)迅速升溫至95℃，并保持45分鐘，不斷攪拌，冷卻至室溫，得到肝素鈉降解液；向肝素鈉降解液中加入氫氧化鈉至ph為12終止降解反應(yīng)，再加入還原劑連二亞硫酸鈉或焦亞硫酸鈉或兩者混合還原4小時(shí)，然后調(diào)節(jié)ph至7，即得到還原液，還原劑的量為肝素鈉重量的1％；將上述還原液用鹽酸溶液調(diào)ph9，升溫到65℃之間后加入胰蛋白酶7g/億單位，再加入15g/億單位胃蛋白酶，65℃保溫3小時(shí)；加入80%乙醇沉淀至乙醇度為80%；乙醇沉淀物再溶后，用可截留11000的分子量的超微濾膜進(jìn)行超濾，得到超濾液；先用氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph至8，在加入超濾液體積4倍的90%乙醇沉淀15小時(shí)；乙醇脫水物在75℃干燥7小時(shí)，得到肝素鈉。
以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非是對(duì)本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等效實(shí)施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。