本發(fā)明屬于染料脫色降解領(lǐng)域，特別涉及一種微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

染料作為一種有機(jī)化合物可以溶于水和其他介質(zhì)中，使纖維染成各種各樣牢靠的顏色。全世界每年約有80萬(wàn)噸產(chǎn)量的染料，其中中國(guó)年產(chǎn)量約為15萬(wàn)噸，位居世界前列。染料的排放首先造成水體色度的變化，即便存在微量的染料都會(huì)造成水體色度上較大的變化，不僅影響水體的透光度和溶解度，而且對(duì)水中生物的生存造成威脅。印染行業(yè)所使用的染料可根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)劃分成多種類型，其中偶氮染料作為印染行業(yè)中廣泛使用且用量最大的一類人工合成染料，占全部染料的70％左右。

顏料紅23作為一種色酚系偶氮有機(jī)顏料，該顏料品種呈暗藍(lán)光紅色，耐光牢度為3級(jí)，相對(duì)密度為1.47g/cm3，粒徑小，呈透明型，粘度較高，耐溶劑性能較差導(dǎo)致在包裝印墨中出現(xiàn)結(jié)晶現(xiàn)象?？捎糜诳椢镉』ǎ琻c-型及水性印墨，亦可用于涂料著色，只是耐罩漆性能稍差。在特殊條件下，它能分解產(chǎn)生20多種致癌芳香胺，經(jīng)過(guò)活化作用改變?nèi)梭w的基因結(jié)構(gòu)引起病變和誘發(fā)癌癥。

目前，關(guān)于脫色偶氮染料主要的研究方向集中在物理方法和化學(xué)方法，物理法主要通過(guò)過(guò)濾、吸附、萃取、沉淀、膜分離等一系列方法不改變?nèi)玖匣瘜W(xué)結(jié)構(gòu)，化學(xué)法主要是通過(guò)化學(xué)混凝、氧化和電化學(xué)法等化學(xué)作用去除或降低廢水中的污染物，并使污染物的性質(zhì)改變。物化法對(duì)染料廢水的脫色效果較好，但是由于其操作成本較高，過(guò)程中可能造成二次污染，相比之下，生物法成本低、費(fèi)用少、避免產(chǎn)生二次污染，并且由于微生物適應(yīng)性強(qiáng)、繁殖速度快等特點(diǎn)在偶氮染料廢水的降解脫色研究中有著廣泛的前景，對(duì)于改善紡織印染行業(yè)及顏料化工廠等廢水處理問(wèn)題具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

由于微生物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性強(qiáng)，且污染過(guò)程經(jīng)歷一段自然馴化期，因而可以通過(guò)馴化從自然環(huán)境中篩選到可降解某一污染物的微生物降解菌株。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌及其應(yīng)用，該微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌，對(duì)偶氮染料廢水的降解效果好，應(yīng)用方法簡(jiǎn)單，成本低，具有良好的應(yīng)用前景。

本發(fā)明提供了一種微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌，所述微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌為微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonasacidaminiphila)sp-3，保藏號(hào)為cgmccno.13711，核苷酸序列如seqidno.1所示。

本發(fā)明的微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonasacidaminiphila)sp-3已于2017年02月27日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，保藏號(hào)為cgmccno.13711。

本發(fā)明還提供了一種微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌的應(yīng)用，用于脫色降解顏料紅23廢水。

所述脫色降解顏料紅23廢水的具體步驟如下：在無(wú)菌條件下，將微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌接種到富集培養(yǎng)基中，在恒溫?fù)u床中震蕩培養(yǎng)；取富集培養(yǎng)后的菌液進(jìn)行離心配置成菌懸液，然后將菌懸液接種到含有顏料紅23的脫色培養(yǎng)基中進(jìn)行脫色降解，即可。

所述富集培養(yǎng)基的組成為：10g/l魚粉蛋白胨、5g/l酵母粉、10g/lnacl，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。

所述脫色培養(yǎng)基的組成為：0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lk2hpo4、1g/lna2hpo4、10g/l氮源或碳源，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。

所述氮源為魚粉蛋白胨、尿素、硫酸銨、磷酸銨或氯化銨。優(yōu)選的，氮源為魚粉蛋白胨。

所述碳源為葡萄糖、麥芽糖、可溶性淀粉、酵母粉或牛肉膏。優(yōu)選的，碳源為酵母粉。

所述震蕩培養(yǎng)的條件為：30-40℃、120-130rpm條件下培養(yǎng)18-24h。

所述脫色降解條件為：接種量為0.1～2％，ph為4.5～9.5，溫度為10～50℃，鹽度為0～8％，120-130rpm條件下培養(yǎng)18-24h。

優(yōu)選的，接種量低于1％(最優(yōu)0.5％)，ph為6.5，溫度為35℃，鹽度小于4％對(duì)顏料紅23廢水的脫色率達(dá)90％。

所述微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌以海藻酸鈉作為包埋載體、fecl3作為交聯(lián)劑制成固定化小球進(jìn)行脫色降解。

固定化小球的制備方法包括如下步驟：

取海藻酸鈉加入無(wú)菌水中，在加熱的條件下待完全溶解后配成膠狀溶液，待冷卻至30℃。在無(wú)菌條件下，將菌懸液與膠狀溶液混合均勻。用注射器于將混合物快速地滴入不斷攪拌的fecl3溶液中，形成均勻規(guī)則的小球，將小球浸泡在fecl3溶液中，并置于4℃冰箱內(nèi)靜置24h。將固化交聯(lián)后的小球用無(wú)菌水清洗2-3次，即得固定化微生物小球。

優(yōu)選的，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％的fecl3作為交聯(lián)劑，菌體量為1.5％制成固定化小球，投加量為50g/l時(shí)對(duì)顏料紅23廢水的脫色率達(dá)86％。

有益效果

本發(fā)明對(duì)偶氮染料廢水的降解效果好，脫色率可達(dá)90％；還可制成固定化小球，脫色率可達(dá)86％；應(yīng)用方法簡(jiǎn)單，成本低，固定后的菌株在不良環(huán)境中表現(xiàn)出良好的耐受性，提高對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力，在偶氮染料廢水處理中具有良好的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

圖1為stenotrophomonasacidaminiphila菌株的生長(zhǎng)曲線及顏料紅23的脫色曲線；

圖2為碳源種類對(duì)顏料紅23廢水的脫色效果的影響；

圖3為氮源種類對(duì)顏料紅23廢水的脫色效果的影響；

圖4為接種量對(duì)顏料紅23廢水的脫色效果的影響；

圖5為溫度對(duì)顏料紅23廢水的脫色效果的影響；

圖6為ph對(duì)顏料紅23廢水的脫色效果的影響；

圖7為鹽度對(duì)顏料紅23廢水的脫色效果的影響；

圖8為stenotrophomonasacidaminiphila菌株對(duì)顏料紅23廢水脫色前后的紫外光譜圖；

圖9為海藻酸鈉作為包埋載體、fecl3作為交聯(lián)劑的stenotrophomonasacidaminiphila菌株固定化小球及其脫色效果。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。

實(shí)施例1

1、菌株的分離

(1)采集污水處理廠的活性污泥，置于一個(gè)長(zhǎng)31.2cm、寬22.0cm、高22.5cm的玻璃馴化裝置，在不加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，沒(méi)有進(jìn)水出水交換的基礎(chǔ)上用空壓機(jī)不間斷曝氣3天。然后進(jìn)行換水，排出裝置中大約10l的泥水混合物，加入營(yíng)養(yǎng)液并進(jìn)行不間斷曝氣。在培養(yǎng)10天后在加入營(yíng)養(yǎng)液的同時(shí)開始加入顏料紅23溶液，保持裝置中顏料紅23濃度在10mg/l左右，并按照sbr工藝(進(jìn)水、曝氣、靜置、排水、閑置)進(jìn)行馴化培養(yǎng)，隔天換水，培養(yǎng)馴化30天。培養(yǎng)液的配制：400mg/l葡萄糖、80mg/l無(wú)水乙酸鈉、125mg/lnahco3、4.75mg/lkcl、2.5mg/l無(wú)水cacl2、24mg/lkh2po4、27.5mg/lmgso4·7h2o、礦物鹽配方1ml。礦物鹽配方：375mg/lfecl3、37.5mg/lh3bo3、7.5mg/lcuso4·5h2o、45mg/lki、30mg/lmncl2·4h2o、30mg/lznso4·7h2o、2500mg/ledta,配制成約10l營(yíng)養(yǎng)液。

(2)取1mlsbr混合廢水上清液，加入100ml液體培養(yǎng)基的250ml的三角瓶中，于35℃恒溫振蕩培養(yǎng)12h。采用相同的方法接種一代培養(yǎng)液1ml至新鮮的富集培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，使樣品中的好氧菌群得到富集和活化。富集培養(yǎng)基的主要成分為：10g/l魚粉蛋白胨、5g/l酵母粉、10g/lnacl，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。

(3)分裝顏料紅23篩選培養(yǎng)基100ml于250ml的錐形瓶中，在無(wú)菌條件下，接種第一代活化菌液1ml進(jìn)行篩選培養(yǎng)。采用此方法對(duì)混合菌液連續(xù)篩選培養(yǎng)5代，利用顏料紅23作為碳源進(jìn)行以3天為一個(gè)周期的逐漸增加污染物濃度的馴化方法進(jìn)行馴化培養(yǎng)。搖床轉(zhuǎn)速為120rpm，溫度為35℃，培養(yǎng)時(shí)間為半個(gè)月。在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基(0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2)中加入顏料紅23溶液，配制顏料紅23濃度梯度為20、40、60、80、100mg/l的馴化培養(yǎng)基。

(4)取馴化最后一個(gè)周期的馴化培養(yǎng)基1ml，按10倍稀釋法，用無(wú)菌水將菌液作10^-1～10^-7梯度稀釋。每種稀釋濃度分別取0.1ml菌液均勻涂布于固體培養(yǎng)基上，將培養(yǎng)皿倒置于30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。固體培養(yǎng)基的主要成分為：10g/l魚粉蛋白胨、5g/l酵母粉、10g/lnacl、100mg/l顏料紅23、20g/l瓊脂，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。

(5)待長(zhǎng)出獨(dú)立菌落后，觀察各菌落形態(tài)，挑取形態(tài)清晰的單一菌落，在分離培養(yǎng)基上劃線分離，將培養(yǎng)皿倒置于35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，再觀察結(jié)果。反復(fù)5～7次，并在電子顯微鏡下觀察，確保是純的單一菌株后，并將其接種到固體斜面培養(yǎng)基上，4℃下保存于冰箱中，待后續(xù)進(jìn)行脫色試驗(yàn)。固體分離培養(yǎng)基sm(separatemedium)的主要成分為：10g/l魚粉蛋白胨、5g/l酵母粉、10g/lnacl、100mg/l顏料紅23、20g/l瓊脂，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。固體斜面培養(yǎng)基的主要成分：10g/l魚粉蛋白胨、5g/l酵母粉、10g/lnacl、20g/l瓊脂，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。

2、菌體及菌落形態(tài)特征

微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌株個(gè)體為球狀，革蘭氏染色陰性；其菌落為圓形，邊緣整齊，黃色，不透明，隆起，有粘性。

微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonasacidaminiphilasp.)sp-3，其16srdna序列如seqidno.1所示。

3、菌體生長(zhǎng)曲線及染料降解曲線測(cè)定

配置富集培養(yǎng)基，其主要成分為：10g/l魚粉蛋白胨、5g/l酵母粉、10g/lnacl，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。在無(wú)菌條件下，將菌株接種到裝有100ml富集培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在35℃、120rpm環(huán)境下恒溫培養(yǎng)48h。

配置顏料紅23脫色培養(yǎng)基，其主要成分為：0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、10g/l酵母粉、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。取出10ml富集培養(yǎng)的菌液置于滅菌離心管中，以6000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min，用無(wú)菌生理鹽水洗滌并離心2次，配成一定濃度的菌懸液。在顏料紅23的脫色培養(yǎng)基中接種10％的菌懸液，在35℃、120rpm環(huán)境下恒溫培養(yǎng)18h。每2h取樣取出10ml培養(yǎng)基在10000r/min離心6min，取上清液測(cè)定在579nm的吸光度at，以無(wú)菌脫色培養(yǎng)基做空白對(duì)照a0，計(jì)算其脫色率η＝(a0-at)/a0×100％，分析該菌株對(duì)顏料紅23的脫色效果。重復(fù)3次取平均值。

如圖1所示，可知該菌株在連續(xù)培養(yǎng)24h內(nèi)，隨著培養(yǎng)時(shí)間增長(zhǎng)，該菌株生長(zhǎng)密度逐漸增大，使得對(duì)顏料紅23的降解作用隨之增強(qiáng)，但由于空間和營(yíng)養(yǎng)源的作用，在18h后生長(zhǎng)密度達(dá)到飽和，對(duì)顏料紅23的降解作用也達(dá)到最大。兩條曲線均符合細(xì)菌生長(zhǎng)趨勢(shì)及其降解能力。

實(shí)施例2

將該菌株接種于顏料紅23脫色培養(yǎng)基中，每2h測(cè)定其od600和在579nm處的吸光度，以未接種的脫色培養(yǎng)基作為空白對(duì)照，繪制該菌的生長(zhǎng)曲線和顏料脫色曲線，確定最佳脫色時(shí)間是18h。選取碳源、氮源、接種量、溫度、ph、鹽度，研究其單一因素的最佳條件，判斷各因素對(duì)該菌株的生長(zhǎng)及對(duì)顏料脫色效果的影響。每個(gè)因子均設(shè)置不同的影響梯度，研究其中某一因素的影響時(shí)，僅對(duì)該因素設(shè)置不同影響水平，其他因素保持不變，后面因素以前面實(shí)驗(yàn)得到的各因素最適條件為前提進(jìn)行。所有實(shí)驗(yàn)均設(shè)置三組平行實(shí)驗(yàn)。

結(jié)果表明：微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonasacidaminiphila)sp-3最適宜的脫色條件為酵母粉作為營(yíng)養(yǎng)源，接種量為0.5％，ph為6.5，溫度為35℃，鹽度小于4％，在此條件下，微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌脫色率達(dá)90％。此外，紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)掃描脫色代謝產(chǎn)物的吸收?qǐng)D譜表明，染料脫色過(guò)程主要以生物降解為主，如圖8所示。

具體實(shí)施如下：

(1)碳源對(duì)顏料脫色的影響

無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基的主要成分為：0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。碳源種類為葡萄糖、麥芽糖、可溶性淀粉、酵母粉、牛肉膏，添加以上碳源各1g。在無(wú)菌條件下，將10ml菌懸液接種于裝有100ml脫色培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在35℃、120rpm下恒溫震蕩培養(yǎng)18h，取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖2所示，可知酵母粉、牛肉膏、麥芽糖為碳源時(shí)都呈現(xiàn)較好的脫色效果，優(yōu)選的，碳源為酵母粉。

(2)氮源對(duì)顏料脫色的影響

無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基的主要成分為：0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。氮源種類為魚粉蛋白胨、尿素、硫酸銨、磷酸銨、氯化銨，添加以上氮源各1g。在無(wú)菌條件下，將10ml菌懸液接種于裝有100ml脫色培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在35℃、120rpm下恒溫震蕩培養(yǎng)18h，取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖3所示，可知相比碳源，魚粉蛋白胨、尿素、硫酸銨、磷酸銨或氯化銨作為氮源對(duì)顏料的脫色效果普遍偏低，優(yōu)選的，氮源為魚粉蛋白胨。

(3)接種量對(duì)顏料脫色的影響

在最佳營(yíng)養(yǎng)源濃度為酵母粉的條件下，脫色培養(yǎng)基的主要成分為：1g酵母粉、0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。無(wú)菌條件下，設(shè)置接種量為單菌落，0.1、0.2、0.5、1.0、2.0ml，接種于裝有100ml脫色培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在35℃、120rpm下恒溫震蕩培養(yǎng)18h，取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖4所示，可知接種量在0.1％～0.5％時(shí)，該菌株對(duì)顏料的脫色率隨接種量增加而增大，高于0.5％時(shí)，菌株對(duì)顏料的脫色效果隨之降低，最優(yōu)接種量為0.5％。

(4)溫度對(duì)顏料脫色的影響

在最佳營(yíng)養(yǎng)源濃度為酵母粉、接種量為0.5％的最佳條件下，1g酵母粉、0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，ph＝6.8～7.2。設(shè)置溫度梯度為10、20、30、35、40、50℃，無(wú)菌條件下，將0.5ml菌懸液接種于裝有100ml脫色培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在不同溫度下、120rpm恒溫震蕩培養(yǎng)18h，取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖5所示，可知在10℃到35℃范圍內(nèi)，隨著溫度升高，菌株對(duì)顏料的脫色效果隨之增強(qiáng)。在35℃到50℃范圍內(nèi)，隨著溫度升高，導(dǎo)致菌株生長(zhǎng)緩慢、脫色作用減弱。菌株在30℃到40℃具有較好的脫色效果，過(guò)高或過(guò)低的溫度都會(huì)抑制菌株對(duì)顏料的脫色作用。

(5)ph對(duì)顏料脫色的影響

在最佳營(yíng)養(yǎng)源濃度為酵母粉、接種量為0.5％的最佳條件下，1g酵母粉、0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lnacl、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，調(diào)節(jié)ph梯度為4.5、5.5、6.5、7、7.5、8.5、9.5，無(wú)菌條件下，將0.5ml菌懸液接種于裝有100ml脫色培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在35℃、120rpm下恒溫震蕩培養(yǎng)18h，取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖6所示，可知在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿環(huán)境下，菌株的生長(zhǎng)受到抑制，導(dǎo)致脫色效果最低。當(dāng)ph在6.5～7.5范圍內(nèi)脫色能力較好，其中ph＝6.5的微酸性環(huán)境下，菌株的脫色效果最佳，脫色率達(dá)到最大值。

(6)鹽度對(duì)顏料脫色的影響

在最佳營(yíng)養(yǎng)源濃度為酵母粉、接種量為0.5％的最佳條件下，1g酵母粉、0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水，ph＝6.5，設(shè)置鹽度梯度為0、0.5％、1％、2％、4％、6％、8％。在無(wú)菌條件下，將0.5ml菌懸液接種于裝有100ml脫色培養(yǎng)基的250ml滅菌錐形瓶中，在35℃、120rpm下恒溫震蕩培養(yǎng)18h，取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖7所示，可知鹽度在0到4％范圍內(nèi)，菌株對(duì)顏料的脫色率較高。當(dāng)鹽度大于4％時(shí)，菌株對(duì)顏料的脫色效果減弱，脫色率隨著鹽度增大而逐漸減小?？梢?jiàn)，低鹽度時(shí)細(xì)胞滲透壓保持正常，并未影響細(xì)菌的生長(zhǎng)作用和降解能力。

實(shí)施例3

取0.75g海藻酸鈉至于50ml無(wú)菌水，在加熱的條件下待完全溶解后配成膠狀溶液，待冷卻至30℃。在無(wú)菌條件下，將3ml菌懸液與膠狀溶液混合均勻。用1ml注射器于將混合物快速地滴入不斷攪拌的fecl3溶液中，形成均勻規(guī)則的小球，將小球浸泡在fecl3溶液中，并置于4℃冰箱內(nèi)靜置24h。將固化交聯(lián)后的小球用蒸餾水清洗2次，即得固定化微生物小球，如圖9所示。

在最佳營(yíng)養(yǎng)源濃度為酵母粉，1g酵母粉、0.1g/lcacl2、0.5g/lmgso4·7h2o、1g/lkh2po4、1g/lna2hpo4、100mg/l顏料紅23，1l蒸餾水配置脫色培養(yǎng)基，ph＝6.5。在無(wú)菌條件下，將100ml脫色培養(yǎng)基分裝到250ml滅菌錐形瓶中。

取10～90g/l的小球分別加入到100ml濃度為100mg/l脫色培養(yǎng)基中，在35℃、120r/min下好氧培養(yǎng)18h。取樣測(cè)菌體od600及在579nm處上清液吸光度，并計(jì)算脫色率。重復(fù)3次取平均值。

如圖9所示，固定化小球的添加量在10、90g/l時(shí)，該菌株對(duì)顏料的脫色率較低；30～70g/l時(shí)，對(duì)顏料紅23的脫色效果較好，其中固定化小球添加量為50g/l時(shí)效果最佳。

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<110>東華大學(xué)

<120>一種微嗜酸寡養(yǎng)單胞菌及其應(yīng)用

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