本發(fā)明屬于生物物發(fā)酵工程
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其是一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法。
背景技術(shù)：
：無機(jī)鹽是微生物生命活動不可缺少的物質(zhì)。谷氨酸發(fā)酵過程中需要磷、鉀等營養(yǎng)元素，磷是無機(jī)鹽中代謝過程中氧化磷酸化的主要元素，它也是核酸、磷脂、某些輔酶的組成成分；高能磷酸鍵在能量貯存與傳遞中起著重要的作用，磷酸鹽還是一種重要的緩沖劑。在谷氨酸發(fā)酵中也不例外，磷含量的高低對其影響很大，磷濃度過高，菌體代謝有轉(zhuǎn)向合成擷氨酸的傾向。磷濃度過低，菌體生長不好，表現(xiàn)為耗糖慢、殘?zhí)歉?，菌體生長緩慢。生產(chǎn)中經(jīng)常使用磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)、磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O)等磷酸鹽提供磷元素；氯化鉀(KCl)提供鉀元素。目前，在生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過程中，發(fā)酵培養(yǎng)基中常常添加磷酸鹽進(jìn)行制備，但是，使用磷酸鹽制備發(fā)酵培養(yǎng)基存在如下缺點(diǎn)：一方面克服磷酸鹽完全溶于水需要的時間較長，容易造成發(fā)酵培養(yǎng)基的混合不均勻，提高了發(fā)酵培養(yǎng)基的配制時間，降低了生產(chǎn)效率；另一方面比產(chǎn)酸速率較低，延長了發(fā)酵周期，菌體產(chǎn)酸較慢，提高了生產(chǎn)成本。通過檢索，發(fā)現(xiàn)如下兩篇與本專利申請相關(guān)的專利公開文獻(xiàn)：1、一種高效發(fā)酵生產(chǎn)L-谷氨酸的方法(CN101402979A)，以生物素缺陷型菌株為生產(chǎn)菌株，以一些營養(yǎng)組分按一定比例配制成營養(yǎng)豐富且均衡的培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵過程中，通過調(diào)節(jié)發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速和風(fēng)量將溶氧控制在適當(dāng)?shù)乃缴希ㄟ^流加氨水控制pH，并通過流加一定濃度的葡萄糖溶液將殘?zhí)强刂圃谳^低水平，發(fā)酵32h停止。本發(fā)明在不增加任何額外設(shè)備和人力投入的情況下，縮短了整個發(fā)酵周期，并大幅提高了L-谷氨酸的產(chǎn)量(140g/L以上)和轉(zhuǎn)化率(60％以上)，整個工藝過程操作簡便，生產(chǎn)成本較低，十分適合于工業(yè)化生產(chǎn)。2、磷酸鹽用量對谷氨酸發(fā)酵影響的研究(作者：劉利鋒，于衛(wèi)紅，發(fā)酵科技通訊第36卷)，為了提高谷氨酸的產(chǎn)酸率,從培養(yǎng)基的配方中尋找突破口。首先從增加鉀鹽考慮，將磷酸氫二鉀的用量由0.17％增加到0.20％。從試驗(yàn)結(jié)果看產(chǎn)酸低，原因是：整個發(fā)酵過程中,磷鹽的多少與菌體變形及生長速度有很大的關(guān)系，磷鹽多,菌體短而粗，自10～20h，菌體大量增殖，并且耗糖，最終導(dǎo)致耗脲少，產(chǎn)酸低，確定用16％的雙酶糖的培養(yǎng)基中，用磷酸氫二鉀0.14％的用量較好,其產(chǎn)酸率平穩(wěn)，平均10.55％，轉(zhuǎn)化率平穩(wěn)且較高，平均65.95％。通過對比，本發(fā)明專利申請與上述專利公開文獻(xiàn)存在本質(zhì)的不同。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，該方法在發(fā)酵過程中，用磷酸替代發(fā)酵培養(yǎng)基的磷酸鹽，之后再用堿性物質(zhì)中和發(fā)酵培養(yǎng)的PH值，一方面可以克服磷酸鹽完全溶于水需要的時間較長，容易造成發(fā)酵培養(yǎng)基的混合不均勻，縮短發(fā)酵培養(yǎng)基的配制時間，提高生產(chǎn)率；另一方面可以提高比產(chǎn)酸速率，促進(jìn)菌體產(chǎn)酸，最終產(chǎn)酸水平得到了顯著提升，可提高15％左右，提高了谷氨酸得率和糖酸轉(zhuǎn)化率。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，在發(fā)酵生產(chǎn)過程中，使用磷酸代替生物素亞適量發(fā)酵工藝中的磷酸鹽制備發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸。而且，磷酸代替生物素亞適量發(fā)酵工藝中的磷酸鹽制備發(fā)酵培養(yǎng)基時，需利用堿性物質(zhì)對發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行中和，使發(fā)酵培養(yǎng)基的PH符合菌體生長要求。而且，以等摩爾當(dāng)量的磷酸替代替發(fā)酵培養(yǎng)基中的磷酸鹽，使用堿性物質(zhì)對發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行中和，使發(fā)酵培養(yǎng)基的PH符合菌體生長要求。而且，所述發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用氫氧化鈉中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5～7.0。而且，所述發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用碳酸鈉中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5～7.0。而且，所述發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用氨水中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5～7.0。而且，所述發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用氫氧化鉀中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5～7.0。而且，步驟如下：⑴配料：按照配比，將各種原料稱量好，溶解完全配制成發(fā)酵培養(yǎng)基；⑵滅菌：將配好的發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌，溫度108～110℃，維持時間8～10分鐘，滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基在發(fā)酵罐內(nèi)降溫至33℃等待接種；⑶將OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液按種子培養(yǎng)液：發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為0.05～0.2：1的比例接入發(fā)酵培養(yǎng)基中；發(fā)酵溫度控制在32～40℃；補(bǔ)充氮源至pH為6.5～7.5，控制通氣量為0.1～0.5vvm；發(fā)酵周期為32h，即得谷氨酸。而且，所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液的制備步驟如下：⑴將一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株接入己滅菌的種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.6～0.8的菌株活化液；⑵將菌株活化液按體積比為7％～15％的比例接入種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液。而且，所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株為天津短桿菌(Brevibacteriumtianjinese)S9114、CM415。本發(fā)明取得的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是：1、本發(fā)明方法在發(fā)酵過程中，用磷酸替代發(fā)酵培養(yǎng)基的磷酸鹽，之后再用堿性物質(zhì)中和發(fā)酵培養(yǎng)的PH值，一方面可以克服磷酸鹽完全溶于水需要的時間較長，容易造成發(fā)酵培養(yǎng)基的混合不均勻，縮短發(fā)酵培養(yǎng)基的配制時間，提高生產(chǎn)率；另一方面可以提高比產(chǎn)酸速率，促進(jìn)菌體產(chǎn)酸，最終產(chǎn)酸水平得到了顯著提升，可提高15％左右，提高了谷氨酸得率和糖酸轉(zhuǎn)化率。2、本發(fā)明方法在與現(xiàn)有生產(chǎn)工藝相比不增加任何額外設(shè)備和人力投入的情況下，大幅提高了L-谷氨酸的產(chǎn)酸率(150g/L以上)和轉(zhuǎn)化率(68％以上)，整個工藝過程操作簡便，生產(chǎn)成本較低，十分適合于工業(yè)化生產(chǎn)。3、本發(fā)明方法操作方便，有利于降低谷氨酸的發(fā)酵成本，提高谷氨酸產(chǎn)酸率和糖酸轉(zhuǎn)化率，具有廣闊的工業(yè)應(yīng)用前景。4、本方法通過工藝革新，適當(dāng)調(diào)節(jié)發(fā)酵液的原料配比，用等摩爾磷酸代替生物素亞適量發(fā)酵工藝中的磷酸鹽制備發(fā)酵培養(yǎng)基，為培養(yǎng)基提供磷源，并利用分別利用氫氧化鈉、碳酸鈉、氫氧化鉀、氨水中和磷酸鉀對發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行中和調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值，以達(dá)到降低成本的目的。5、本發(fā)明方法中因等質(zhì)量的磷酸比磷酸鹽有效成分含量高，等摩爾的有效成分成本低，為了降低生產(chǎn)成本，希望能夠用磷酸代替磷酸鹽。等摩爾當(dāng)量的磷酸替代磷酸鹽，由于磷酸是強(qiáng)酸，培養(yǎng)基配制完成后pH為2.4—2.8，不適合谷氨酸發(fā)酵的需要，同時在此pH條件下滅菌對培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分破壞也較大，故必須在配料時采用適當(dāng)?shù)膲A性物質(zhì)予以中和，以保證生產(chǎn)需要。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此，不能以下述實(shí)施例來限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。下述實(shí)施實(shí)例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所使用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。本發(fā)明磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，是用磷酸代替生物素亞適量發(fā)酵工藝中的磷酸鹽制備發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸。采用本發(fā)明所述的磷酸代替磷酸鹽制備的培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的操作方法和工藝控制條件，若不特加說明，均與用磷酸鹽的發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的公知操縱方法和工藝控制條件一致。本發(fā)明中所使用的微生物菌株可以為生物素缺陷型的谷氨酸棒狀桿菌S9114(CorynebacteriumglutamicumS9114)。對照實(shí)施例：一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，其發(fā)酵培養(yǎng)的工藝步驟及條件如下：(1)配料：按照配比，將各種原料稱良好，溶解完全配成6L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的原料配比如下：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，Na2HPO48.32g/L，用氨水調(diào)節(jié)發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5。(2)滅菌：將配好的發(fā)酵培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10L發(fā)酵罐內(nèi)并進(jìn)行滅菌，溫度108～110℃，維持時間8～10分鐘，滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基在發(fā)酵罐內(nèi)降溫至33℃等待接種；(3)接種發(fā)酵：將OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型菌株的種子培養(yǎng)液按種子培養(yǎng)液600mL接入發(fā)酵培養(yǎng)基中；發(fā)酵溫度控制在32～40℃；補(bǔ)充氮源至pH為7.0，控制通氣量為0.1～0.5vvm；發(fā)酵周期為32h，即得谷氨酸。發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液中的谷氨酸含量，并計算產(chǎn)酸率及轉(zhuǎn)化率，并進(jìn)行成本核算。其中，本實(shí)施例所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液的制備步驟如下：(1)將一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌接入己滅菌的種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.6～0.8的菌株活化液；(2)將菌株活化液按體積比為7％～15％的比例接入種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌種子液。實(shí)施例1：一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，其發(fā)酵培養(yǎng)的工藝步驟及條件如下：(1)配料：按照配比，將各種原料稱良好，溶解完全配成6L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的原料配比如下：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用氫氧化鈉中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5。(2)滅菌：將配好的發(fā)酵培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10L發(fā)酵罐內(nèi)并進(jìn)行滅菌，溫度108～110℃，維持時間8～10分鐘，滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基在發(fā)酵罐內(nèi)降溫至33℃等待接種；(3)接種發(fā)酵：將OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型菌株的種子培養(yǎng)液按種子培養(yǎng)液600mL接入發(fā)酵培養(yǎng)基中；發(fā)酵溫度控制在32～40℃；補(bǔ)充氮源至pH為7.0，控制通氣量為0.1～0.5vvm；發(fā)酵周期為32h，即得谷氨酸。發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液中的谷氨酸含量，并計算產(chǎn)酸率及轉(zhuǎn)化率，并進(jìn)行成本核算。其中，本實(shí)施例所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液的制備步驟如下：(1)將一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌接入己滅菌的種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.6～0.8的菌株活化液；(2)將菌株活化液按體積比為7％～15％的比例接入種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌種子液。實(shí)施例2：一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，其發(fā)酵培養(yǎng)的工藝步驟及條件如下：(1)配料：按照配比，將各種原料稱良好，溶解完全配成6L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的原料配比如下：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用碳酸鈉中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5。(2)滅菌：將配好的發(fā)酵培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10L發(fā)酵罐內(nèi)并進(jìn)行滅菌，溫度108～110℃，維持時間8～10分鐘，滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基在發(fā)酵罐內(nèi)降溫至33℃等待接種；(3)接種發(fā)酵：將OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型菌株的種子培養(yǎng)液按種子培養(yǎng)液600mL接入發(fā)酵培養(yǎng)基中；發(fā)酵溫度控制在32～40℃；補(bǔ)充氮源至pH為7.0，控制通氣量為0.1～0.5vvm；發(fā)酵周期為32h，即得谷氨酸。發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液中的谷氨酸含量，并計算產(chǎn)酸率及轉(zhuǎn)化率，并進(jìn)行成本核算。其中，本實(shí)施例所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液的制備步驟如下：(1)將一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌接入己滅菌的種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.6～0.8的菌株活化液；(2)將菌株活化液按體積比為7％～15％的比例接入種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌種子液。實(shí)施例3：一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，其發(fā)酵培養(yǎng)的工藝步驟及條件如下：(1)配料：按照配比，將各種原料稱良好，溶解完全配成6L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的原料配比如下：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用氨水中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5。(2)滅菌：將配好的發(fā)酵培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10L發(fā)酵罐內(nèi)并進(jìn)行滅菌，溫度108～110℃，維持時間8～10分鐘，滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基在發(fā)酵罐內(nèi)降溫至33℃等待接種；(3)接種發(fā)酵：將OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型菌株的種子培養(yǎng)液按種子培養(yǎng)液600mL接入發(fā)酵培養(yǎng)基中；發(fā)酵溫度控制在32～40℃；補(bǔ)充氮源至pH為7.0，控制通氣量為0.1～0.5vvm；發(fā)酵周期為32h，即得谷氨酸。發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液中的谷氨酸含量，并計算產(chǎn)酸率及轉(zhuǎn)化率，并進(jìn)行成本核算。其中，本實(shí)施例所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液的制備步驟如下：(1)將一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌接入己滅菌的種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.6～0.8的菌株活化液；(2)將菌株活化液按體積比為7％～15％的比例接入種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌種子液。實(shí)施例4：一種磷酸用于生物素亞適量發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的方法，其發(fā)酵培養(yǎng)的工藝步驟及條件如下：(1)配料：按照配比，將各種原料稱良好，溶解完全配成6L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的原料配比如下：葡萄糖130～150g/L，玉米漿3.5～5g/L，糖蜜2.5～4g/L，MgSO4·7H2O0.6～0.9g/L，MnSO40.0025～0.005g/L，VB10.001～0.0025g/L，KCl2～3g/L，H3PO40.8～4g/L，用氫氧化鉀中和磷酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為6.5。(2)滅菌：將配好的發(fā)酵培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10L發(fā)酵罐內(nèi)并進(jìn)行滅菌，溫度108～110℃，維持時間8～10分鐘，滅菌好的發(fā)酵培養(yǎng)基在發(fā)酵罐內(nèi)降溫至33℃等待接種；(3)接種發(fā)酵：將OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型菌株的種子培養(yǎng)液按種子培養(yǎng)液600mL接入發(fā)酵培養(yǎng)基中；發(fā)酵溫度控制在32～40℃；補(bǔ)充氮源至pH為7.0，控制通氣量為0.1～0.5vvm；發(fā)酵周期為32h，即得谷氨酸。發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液中的谷氨酸含量，并計算產(chǎn)酸率及轉(zhuǎn)化率，并進(jìn)行成本核算。其中，本實(shí)施例所述生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌株的種子培養(yǎng)液的制備步驟如下：(1)將一環(huán)斜面培養(yǎng)基上的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌接入己滅菌的種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.6～0.8的菌株活化液；(2)將菌株活化液按體積比為7％～15％的比例接入種子培養(yǎng)基中，30～35℃振蕩培養(yǎng)6～10h，得OD值為0.7～1.0的生物素缺陷型谷氨酸生產(chǎn)菌種子液。本發(fā)明實(shí)施例實(shí)驗(yàn)結(jié)果對比如下表所示：表1實(shí)施例實(shí)驗(yàn)結(jié)果表從各種替代方案的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出：替代組的發(fā)酵水平與對照組相比發(fā)酵產(chǎn)酸率與糖酸轉(zhuǎn)化率均有所提高，培養(yǎng)基配方中的無機(jī)鹽可以使用含有同樣元素、價格便宜的其他無機(jī)鹽，根據(jù)等摩爾當(dāng)量的關(guān)系換算后配制培養(yǎng)基，以降低原材料成本。成本核算：(1)目前生產(chǎn)中每批次相關(guān)原料的用量目前味精車間發(fā)酵工段種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中均使用磷酸氫二鈉和氯化鉀提供磷、鉀元素，具體使用量如下：二級種子培養(yǎng)基配方Na2HPO46.0kg，KCl5.5kg三級種子培養(yǎng)基配方Na2HPO4300L*30％＝90kg，KCl265L*30％＝79.5kg發(fā)酵培養(yǎng)基配方Na2HPO42700L*30％＝810kg，KCl2400L*30％＝720kg每一批次需要Na2HPO4的量＝6.0+90+810＝906kg，需要KCl的量＝805kg。(2)、相關(guān)原料的價格我公司生產(chǎn)中使用的相關(guān)無機(jī)鹽購買價格為：無機(jī)鹽規(guī)格及價格(3)、生產(chǎn)中原配方和各種實(shí)施例相關(guān)材料的單批成本核算1)、各種實(shí)施方案相關(guān)原料的單批成本(單位：元)類別對照組實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3實(shí)施例4單批成本2627.42164.720852754.22126.72)、各種方案每年可節(jié)約原料成本按滿負(fù)荷生產(chǎn)每月上罐139批，全年1668批次計算，每年可節(jié)約生產(chǎn)成本如下：(單位：萬元)類別實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3實(shí)施例4節(jié)約成本77.290.5成本升高83.5采用實(shí)施例2，可在目前的磷酸氫二鈉溶液儲罐中，將碳酸鈉和磷酸稀釋適當(dāng)倍數(shù)后中和，由于中和反應(yīng)會產(chǎn)生大量的二氧化碳，有可能會跑料，需要加強(qiáng)操作管理。采用實(shí)施例4，可將磷酸稀釋適當(dāng)倍數(shù)后置于目前的磷酸氫二鈉溶液儲罐中，將液氨管線連接到磷酸氫二鈉溶液儲罐或配料罐，用液氨中和使每批培養(yǎng)基配后PH達(dá)到5.5-6.2(不能直接調(diào)到7.0，否則滅菌時會使氨溢出，造成浪費(fèi))，接種前再將PH調(diào)節(jié)到需要值。此法簡便易行，可操作性強(qiáng)?？傊瑥纳a(chǎn)工藝角度講，上述4種方案均可行；從降低原材料成本角度講，具體選擇哪一種方案，要根據(jù)相應(yīng)原料價格來決定。如若90％含量的氫氧化鉀價格低于6000元/噸，實(shí)施例3也是可行的。當(dāng)前第1頁1 2 3