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一種防偽證基因組DNA提取試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):11974619閱讀:534來源:國(guó)知局
一種防偽證基因組DNA提取試劑盒的制作方法與工藝

本實(shí)用新型屬于核酸純化領(lǐng)域,具體涉及一種防偽證基因組DNA提取試劑盒。



背景技術(shù):

近年來,從案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)提取人類基因組DNA再通過PCR技術(shù)檢測(cè)身份的方法大量應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)。通常法醫(yī)學(xué)用以提取核酸的方法與一般的臨床檢驗(yàn)、出入境檢疫部門并無不同,包括基于Chelex-100的水煮法粗提取、基于離心柱的基因組DNA提取、基于磁珠法的基因組DNA提取等。但是這些核酸提取方法中,并沒有辦法區(qū)分犯罪嫌疑人故意制造用以干擾檢測(cè)結(jié)果假象。

常用的身份鑒定的法醫(yī)學(xué)試劑盒,通常有ABI公司的Identif iler PCR擴(kuò)增試劑盒、Yfiler PCR擴(kuò)增試劑盒、STR MiniFiler PCR擴(kuò)增試劑盒、Sinofiler擴(kuò)增試劑盒,Promega公司的PowerP lex擴(kuò)增試劑盒,以及國(guó)產(chǎn)的基點(diǎn)認(rèn)知公司的Goldneye 16A試劑盒等。受一些國(guó)內(nèi)發(fā)表的文章影響。通常大多實(shí)驗(yàn)室使用的均為同一款PCR試劑盒。熟悉法醫(yī)學(xué)檢測(cè)的罪犯,往往可以通過用這種試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增,而后散布PCR產(chǎn)物的方式,偽造出虛假的DNA檢測(cè)證據(jù)。

一般身份檢測(cè)的PCR試劑盒的原理,是利用STR進(jìn)行檢測(cè)。STR廣泛存在于人類基因組中,一般由2-6個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)核心序列,核心序列串聯(lián)重復(fù)排列。對(duì)于一個(gè)特定的個(gè)體,染色體上某個(gè)特定位置的重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)是固定的,而對(duì)于不同的個(gè)體在同一位置處的重復(fù)次數(shù)可能不同,這就構(gòu)成了STR的多態(tài)性。目前人類基因組上13個(gè)STR的信息就足以區(qū)分不同的個(gè)體了。某實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了一個(gè)包含各種STR位點(diǎn)的DNA小片段,送樣本至不同的法醫(yī)檢測(cè)機(jī)構(gòu),均得出了錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果。

為了避免這種DNA檢材被造假的風(fēng)險(xiǎn),需要一種方法,從生物檢測(cè)中去除這種“虛假”的DNA,需要一種提取方法,能夠分離出純度更高的基因組DNA。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

為了克服現(xiàn)有的核酸提取方法無法分離人為添加進(jìn)法醫(yī)學(xué)檢材中的人造DNA這一缺陷,本實(shí)用新型建立一種用于法醫(yī)學(xué)中應(yīng)用的防偽證基因組DNA提取試劑盒,本實(shí)用新型的目的在于:通過超濾的結(jié)構(gòu),過濾掉法醫(yī)學(xué)檢測(cè)中的人造DNA。

本實(shí)用新型解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案如下:一種防偽證基因組DNA提取試劑盒,包括離心外管、離心管外塞、內(nèi)濾管、內(nèi)塞;所述內(nèi)濾管嵌套在離心外管內(nèi),內(nèi)塞與內(nèi)濾管卡扣連接;所述離心外管頂部帶有內(nèi)陷的固定臺(tái),架設(shè)在固定臺(tái)上,離心管外塞與離心外管卡扣連接;所述內(nèi)濾管頂部帶有凸臺(tái),內(nèi)濾管通過頂部的凸臺(tái)架設(shè)在固定臺(tái)上,內(nèi)濾管底部帶有超濾膜。

所述超濾膜為截留分子量為1000K的超濾膜。

還包括外塞系帶,所述外塞系帶為柔性條狀,一端連接在離心外管上,另一端連接在離心管外塞上。

所述內(nèi)濾管上部與凸臺(tái)連接部位直徑大,往下直徑逐漸變小,形成圓滑弧線,從而成為上部粗下部細(xì)的喇叭形結(jié)構(gòu);內(nèi)濾管中部為圓筒狀,下部為圓弧狀。

超濾是一種膜分離結(jié)構(gòu)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。選擇合適的體積和截流分子量(MWCO),可以區(qū)分大小不同的兩種DNA。一般,提取的基因組條帶大小,約為十幾到幾十kb,可以用1000K的MWCO進(jìn)行超濾,而人造的PCR產(chǎn)物大小約為100~500bp,人造的質(zhì)粒DNA大小一般約為3kb。選用規(guī)格為1000K或者更高M(jìn)WCO的濾膜,可以有效地過濾掉人為添加的PCR產(chǎn)物或質(zhì)粒。

本實(shí)用新型的有益效果在于:與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實(shí)用新型的有益效果是:

通過超濾的方法,過濾掉法醫(yī)學(xué)檢測(cè)中的人造DNA,降低后續(xù)的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果的可能;本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,設(shè)計(jì)科學(xué)合理,便于攜帶,適宜推廣應(yīng)用。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1防偽證基因組DNA提取試劑盒結(jié)構(gòu)示意圖;

圖2為實(shí)施例1離心外管結(jié)構(gòu)示意圖;

圖3為實(shí)施例1內(nèi)濾管結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實(shí)施方式

下面參照附圖詳細(xì)描述本實(shí)用新型的實(shí)施方式。

實(shí)施例1:

參見圖1-3本實(shí)施例防偽證基因組DNA提取試劑盒結(jié)構(gòu)示意圖:

一種防偽證基因組DNA提取試劑盒,包括離心外管1、離心管外塞2、內(nèi)濾管3、內(nèi)塞4;所述內(nèi)濾管3嵌套在離心外管1內(nèi),內(nèi)塞4與內(nèi)濾管3卡扣連接;所述離心外管1頂部帶有內(nèi)陷的固定臺(tái)6,架設(shè)在固定臺(tái)6上,離心管外塞2與離心外管1卡扣連接;所述內(nèi)濾管3頂部帶有凸臺(tái)7,內(nèi)濾管3通過頂部的凸臺(tái)7架設(shè)在固定臺(tái)6上,內(nèi)濾管3底部帶有超濾膜5。

所述超濾膜5為截留分子量為1000K的超濾膜。

還包括外塞系帶8,所述外塞系帶8為柔性條狀,一端連接在離心外管1上,另一端連接在離心管外塞2上。

所述內(nèi)濾管3上部與凸臺(tái)7連接部位直徑大,往下直徑逐漸變小,形成圓滑弧線,從而成為上部粗下部細(xì)的喇叭形結(jié)構(gòu);內(nèi)濾管3中部為圓筒狀,下部為圓弧狀。

當(dāng)然,以上所述是本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施方式,應(yīng)當(dāng)指出,對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說,在不脫離本實(shí)用新型原理的前提下,還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾,這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也視為本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。

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