本發(fā)明涉及一種真姬菇菌株。
背景技術(shù)：
：斑玉蕈，中文別名真姬菇(拉丁文名稱Hypsizygusmarmoreus)，隸屬擔子菌亞門、層菌綱、傘菌目、白蘑科、離褶菌族、玉蕈屬，因它具有獨特的蟹鮮味，故又稱它為蟹味菇。目前栽培的有棕色和純白色兩個品系，深受市場歡迎。最初的人工栽培于1978年前后開始于日本，其味道鮮美、食感脆嫩、營養(yǎng)豐富，其味比平菇鮮，其肉比滑菇厚,其質(zhì)比香菇韌，口感甚佳，其干品還香味濃溢。真姬菇含有豐富維生素和17種氨基酸，子實體中提取的β-1，3-D葡聚糖具有很高的抗腫瘤活性，是一種低熱量、低脂肪的保健食品，未來具有廣闊的市場前景。所述的β-葡聚糖，長久以來一直被認為是免疫系統(tǒng)中的非特定刺激物，通常會引起巨噬細胞活化。在過去的二十年中，β-葡聚糖刺激人類身體免疫系統(tǒng)的作用已被證實。1991年，Czopandcoworkers鑒定出β-(1,3)-D-葡聚糖系列中的低聚糖，是特定的巨噬細胞表面受體。β葡聚糖是在微生物、蘑菇和植物中廣泛存在的一種多糖，它是組成高等植物、酵母菌和真菌細胞壁的結(jié)構(gòu)大分子之一。現(xiàn)有的真姬菇品種雖然可以工廠化成產(chǎn)，但是其葡聚糖含量仍然相對較低，一般僅為4％以下。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是公開一種高產(chǎn)葡聚糖的棕色真姬菇菌株及其栽培方法和應(yīng)用，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的葡聚糖含量較低的缺陷。本發(fā)明提供的棕色真姬菇菌株名稱Finc-B-7，屬于真姬菇(Hypsizygusmarmoreus)，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCCNo.13193，保藏日期為2016年11月28日。所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7以Finc-B-3為親本，通過多孢自交，再經(jīng)選育獲得。所述多孢自交是指從一個親本的孢子中培養(yǎng)分離出的兩個以上的單核體在同一培養(yǎng)面上彼此之間相隔一定距離(一般在2-3cm)進行培養(yǎng)，從中分離篩選的出新菌株的方法。所述的Finc-B-3菌株是上海豐科生物科技股份有限公司培育菌株,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，F(xiàn)inc-B-3菌株保藏編號CGMCCNo.11203。進一步，本發(fā)明還涉及培養(yǎng)所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7得到的孢子、菌絲體或子實體；進一步，本發(fā)明還涉及所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7作為親本，在育種中的應(yīng)用；進一步的，所述育種方法包括單孢自交、單孢雜交、多孢自交或多孢雜交育種；本發(fā)明還提供了所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的子實體的栽培方法，包括如下步驟：先培養(yǎng)原種，然后再栽培子實體。所述的培養(yǎng)原種的方法，包括如下步驟：將所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的母種接入原種培養(yǎng)基，18～23℃，空氣相對濕度65～75％，二氧化碳濃度2000～4000ppm的條件下，培養(yǎng)28～35天，獲得原種。所述原種培養(yǎng)基，包括重量百分比含量為38-40％的原種培養(yǎng)料和余量的水；所述原種培養(yǎng)料按重量百分比計包括：雜木屑60-65％米糠18-23％麩皮7-10％玉米粉7-10％所述栽培子實體的方法，包括如下步驟：(1)接種與發(fā)菌：將所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的原種接入栽培培養(yǎng)基，18～23℃，空氣相對濕度65～75％，二氧化碳濃度2000～4000ppm的條件下，培養(yǎng)70-85天；(2)出菇：將步驟(1)發(fā)好菌的栽培瓶進行出菇管理，溫度13℃～15℃，空氣相對濕度93％～100％，二氧化碳濃度1000～2000ppm的條件下，前3～5天黑暗，然后開始光照，光照強度為50～100Lux，至第13～15天起，光照強度為200～300Lux；所述栽培培養(yǎng)基，包括重量百分比含量為34-36％的栽培培養(yǎng)料和余量的水；所述栽培培養(yǎng)料，包括如下重量百分比的組分：優(yōu)選的，在開始光照時，進行間隙式光照，刺激出菇，總共20～22天，獲得菇蓋成熟的子實體；具體的，所述的進行間隙式光照的方法，包括如下步驟：在開始光照時，光照1.5～2.5小時，黑暗4～6分鐘，依次循環(huán)交替給光；至第13～15天起，光照35～60分鐘，優(yōu)選45分鐘，黑暗10～20分鐘，優(yōu)選15分鐘，依次交替給光；采用上述方法，獲得的所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的子實體，含有蛋白質(zhì)，葡聚糖，氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)，可作為食品，或者應(yīng)用于食品，化妝品及其保健品中，或者將子實體做成菌菇干、菌菇粉、油炸菌菇、調(diào)味料等。本發(fā)明所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7，具有如下性質(zhì)：1.形態(tài)特征：菌蓋：直徑為1.8±0.5cm，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，斷面呈圓山型，斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央,中央斑紋大，邊緣小，菌蓋邊緣可見豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)；寬度3±2mm，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌褶：顏色(RAL9003)、排列方式筆直排列；孢子印顏色為(RAL9010)；菌柄：長度為8±2cm，顏色為(RAL9003)，中粗1.0±0.5cm，與菌蓋連接方式為中生，菌柄簇生。顏色標準參照PANTONE國際色卡，RAL色卡作為顏色描述標準，其中PANTONE國際色卡購自上海噴通文化用品有限公司RAL色卡來源于網(wǎng)絡(luò)http://wenku.baidu.com/link？url＝3WTaqOT96m5depJKlEyCB7Hv1agPwn-ws2ZRAo8vitviBDTMYuh8r_osLztD5Pl7y26w_lASDdEADz8QD91aRQWgrV88kp4nl23RhQZ2iwC；2.在各種培養(yǎng)基上的特征：將所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的栽培種接入以下培養(yǎng)基，溫度23℃，空氣相對濕度75％，二氧化碳濃度4000ppm條件下培養(yǎng)80天；之后搔菌，并置于生育房進行出菇，溫度13℃，空氣相對濕度100％，二氧化碳濃度2000ppm，前4天黑暗，后5～13天光照強度100Lux，第14天起光照強度300Lux；分別于搔菌后第6天，第14天，第21天觀察。優(yōu)選的，第5天起開始每天間隙式進行光照刺激出菇，所述的間隙式進行光照的方法，包括如下步驟：第5～13天，光照2小時，黑暗5分鐘，依次交替給光第14天開始，光照45分鐘，黑暗15分鐘，依次交替給光顏色標準參照PANTONE國際色卡，RAL色卡作為顏色描述標準。(1)培養(yǎng)基A：結(jié)果如下：第6天：料面出現(xiàn)針尖狀原基，原基顏色(RAL1013)第14天：分化出菌蓋，顏色(PANTONE410C)，菇蓋表面中央位置可見真姬菇特有的大理石狀斑紋，斑紋顏色(PANTONE411C)；子實體高度約1-3cm，菌柄顏色(RAL9003)。第21天：子實體成熟，直徑為1.8±0.5cm，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，斷面呈圓山型，斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央,中央斑紋大，邊緣小，菌蓋邊緣可見豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)；寬度1-5mm，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌柄長度為6-10cm，中粗(0.5-1.5cm)，(RAL9003)，與菌蓋連接方式為中生，菌柄簇生。(2)培養(yǎng)基B：結(jié)果如下：第6天：料面出現(xiàn)針尖狀原基，原基顏色(RAL1013)第14天：分化出菌蓋，顏色(PANTONE410C)，菇蓋表面中央位置可見真姬菇特有的大理石狀斑紋，斑紋顏色(PANTONE411C)；子實體高度約1-3cm，菌柄顏色(RAL9003)。第21天：子實體成熟，直徑為1.7±0.5cm，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，斷面呈圓山型，斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央,中央斑紋大，邊緣小，菌蓋邊緣可見豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)；寬度1～5mm，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌柄長度為5～9cm，中粗(0.4～1.2cm)，顏色(RAL9003)，與菌蓋連接方式為中生，菌柄簇生。由此可見，F(xiàn)inc-B-7菌株在不同的培養(yǎng)基中栽培表現(xiàn)一致，具有良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性。3.生物學特征：菌絲體培養(yǎng)溫度18℃～23℃，濕度65～75％，CO2濃度2000ppm～4000ppm，培養(yǎng)周期65d～80d。適宜出菇溫度為13℃～15℃，濕度93％～100％，CO2濃度1000～2000ppm，前6天光照強度50～100Lux，之后光照強度100～300Lux，每天間隙式開啟層架燈刺激出菇，栽培周期約21～22d。色素分泌：將Finc-B-7菌絲接種在PDA培養(yǎng)基中，23℃下培養(yǎng)12天，之后在同樣的溫度條件下光照(200Lux)24～72小時，背面觀察，培養(yǎng)基呈紅褐色。根據(jù)《中國大型真菌》(卯曉嵐主編，河南科學技術(shù)出版社，2000年出版)第158頁關(guān)于斑玉蕈的照片及相應(yīng)特征描述，F(xiàn)inc-B-7屬于斑玉蕈，中文別名真姬菇(拉丁文名稱Hypsizygusmarmoreus)，隸屬擔子菌亞門、層菌綱、傘菌目、白蘑科、離褶菌族、玉蕈屬。但是，該菌株與現(xiàn)有真姬菇菌株相比具有明顯區(qū)別，其主要不同點在于：(1)菌蓋斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，菌蓋邊緣有豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋寬度1～5mm,環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)，菌絲體長滿平板后，經(jīng)過光照可分泌色素，菌柄顏色為(RAL9003)，菌柄中粗(0.4～1.5cm)。(2)以干基計，子實體中葡聚糖含量為5～10％，優(yōu)選的，子實體中葡聚糖含量為6～9％；所述的葡聚糖為：β-1,3-D葡聚糖；術(shù)語“β-1,3-D葡聚糖”的化學結(jié)構(gòu)和理化性能，在以下文獻中有詳細的記載；王京杭，王強，徐兵.β-1,3-葡聚糖的結(jié)構(gòu)與功能《國外醫(yī)學(分子生物學分冊)》1997年04期；葡聚糖含量的檢測采用苯酚-硫酸法，“苯酚-硫酸法”，在以下文獻中有詳細記載：鄧勝國，鄧澤元.燕麥麩中β-葡聚糖的提取、測定及其在面條種的應(yīng)用[J].食品科學，2004，11(25)：204-206.具體的，子實體中，葡聚糖含量的檢測方法如下：Finc-B-7新鮮子實體采收后，采用紅外水分測定儀FD-610進行檢測含水量；然后采用苯酚-硫酸法檢測葡聚糖含量；根據(jù)下式計算葡聚糖含量：葡聚糖含量％＝g/(G-G1)×100；其中：g為采用苯酚-硫酸法檢測到的葡聚糖質(zhì)量；G為樣品子實體質(zhì)量；G1為采用紅外水分測定儀FD-610檢測到的水的質(zhì)量；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的棕色真姬菇菌株Finc-B-7具有以下優(yōu)點：(1)葡聚糖含量非常高，以干基計，子實體中葡聚糖含量為5～10％；(2)子實體培養(yǎng)和栽培周期短，單產(chǎn)高，大大提高了生產(chǎn)效率，降低了生產(chǎn)成本；(3)單株之間以及單株內(nèi)單根子實體之間的外觀均一度高，有利于機械化和自動化作業(yè)；(4)菌蓋花紋非常清晰，外觀精美，商品性狀好；(5)保鮮期長，有利于存儲(6)目前棕色真姬菇種植資源稀缺，本發(fā)明提供的菌株綜合特性優(yōu)良，可以作為重要親本從而培育出更多性能優(yōu)良的菌株，豐富真姬菇種類。綜上所述，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，獲得的新菌株子實體中葡聚糖含量高，栽培周期短，出菇時間較為集中，單產(chǎn)高，朵型優(yōu)美，保鮮期長，非常適合于大面積推廣種植，市場前景廣闊。附圖說明圖1是實施例2中棕色真姬菇菌株Finc-B-7和Finc-B-3的拮抗試驗正面圖，左側(cè)為Finc-B-7，右側(cè)為Finc-B-3；圖2是實施例2中棕色真姬菇菌株Finc-B-7和Finc-B-3的拮抗試驗背面圖，左側(cè)為Finc-B-7，右側(cè)為Finc-B-3；圖3是本發(fā)明所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7栽培的子實體照片；圖4是本發(fā)明所述棕色真姬菇菌株Finc-B-3栽培的子實體照片；具體實施方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。以下實施例中的Finc-B-5、Finc-B-3、Finc-B-1菌株是上海豐科生物科技股份有限公司培育菌株,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，F(xiàn)inc-B-1菌株保藏編號CGMCCNo.11203；Finc-B-3菌株保藏編號CGMCCNo.11203；Finc-B-5菌株保藏編號CGMCCNo.11204。TNN11，TNN12的子實體可在市場上購買獲得。下述實施例顏色標準參照PANTONE國際色卡，RAL色卡作為顏色描述標準。其中PANTONE國際色卡購自上海噴通文化用品有限公司RAL色卡來源于網(wǎng)絡(luò)http://wenku.baidu.com/link？url＝3WTaqOT96m5depJKlEyCB7Hv1agPwn-ws2ZRAo8vitviBDTMYuh8r_osLztD5Pl7y26w_lASDdEADz8QD91aRQWgrV88kp4nl23RhQZ2iwC；實施例1多孢自交獲得Finc-B-7采用多孢自交育種方法獲得棕色真姬菇菌株Finc-B-7。具體步驟如下：1)親本菌株Finc-B-3；2)配制母種培養(yǎng)基、原種培養(yǎng)基和栽培培養(yǎng)基：母種培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)：每1L培養(yǎng)基用馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水補足1L。原種培養(yǎng)基：按重量百分比計,包括40％的原種培養(yǎng)料和60％的水，所述原種培養(yǎng)料按重量百分比計包括：雜木屑65％米糠18％麩皮10％玉米粉7％栽培培養(yǎng)基：按重量百分比計，包括34％的栽培種培養(yǎng)料和66％的水，所述栽培種培養(yǎng)料包括：3)擔孢子的分離：將親本菌株Finc-B-3子實體的菌蓋置于培養(yǎng)皿中，24小時后，收集落在培養(yǎng)皿中的孢子，在無菌水中稀釋成適當?shù)臐舛?，并涂布在PDA培養(yǎng)基平板上。在23℃下培養(yǎng)10天，待孢子萌發(fā)后用接種環(huán)分別接種到PDA斜面試管上。將這些試管在23℃下培養(yǎng)12天，然后從試管中分離出菌絲，并在顯微鏡下觀察鎖狀聯(lián)合的形成，將沒有鎖狀聯(lián)合的菌株儲存在冰箱中備用。4)自交：將一個單核體和另一個單核體彼此相隔2.5cm接種到新鮮的馬鈴薯瓊脂板中，然后在恒溫培養(yǎng)箱中23℃下培養(yǎng)10天。分離菌絲并通過顯微鏡觀察以確定鎖狀聯(lián)合的形成，選擇具有鎖狀聯(lián)合的菌株，通過此方法獲得500個菌株；5)把獲得的菌株根據(jù)常規(guī)的方法進行栽培試驗和篩選；6)獲得目標菌株：通過系統(tǒng)篩選，從500個菌株中，獲得一個棕色真姬菇菌株，培養(yǎng)及栽培周期短，單產(chǎn)高，朵型優(yōu)美，瘤蓋菇出現(xiàn)率低，可食率高，保鮮期長，菌株活性穩(wěn)定，該菌株被命名為Finc-B-7。實施例2拮抗實驗本發(fā)明Finc-B-7和親本菌株Finc-B-3為試驗材料，所用培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基。所述PDA培養(yǎng)基同實施例1。Finc-B-7和親本菌株Finc-B-3在平板培養(yǎng)基上分別對峙接種和培養(yǎng)，接種點相距2.5cm，23℃恒溫培養(yǎng)20天，本試驗結(jié)果請參閱表1。表1不同棕色真姬菇菌株間拮抗試驗品種Finc-B-3Finc-B-7拮抗如圖1，圖2所示，在對峙培養(yǎng)菌落交界處之間，有明顯拮抗線，說明Finc-B-7是與親本菌株Finc-B-3不同的棕色真姬菇菌株。實施例3栽培實驗一將Finc-B-7與親本菌株Finc-B-3分別進行培養(yǎng)和栽培，從65天到80天設(shè)置4個菌齡，每增加5天為一個菌齡，每個菌齡96瓶，然后對小批量栽培的結(jié)果進行匯總比較，總結(jié)出本發(fā)明菌株Finc-B-7的優(yōu)勢。栽培瓶容積：850cc，瓶口直徑58mm。母種培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)：參照實施例1。原種培養(yǎng)基：按重量百分比計,包括40％的原種培養(yǎng)料和60％的水，所述原種培養(yǎng)料按重量百分比計包括：雜木屑65％米糠18％麩皮10％玉米粉7％栽培培養(yǎng)基：按重量百分比計，包括34％的栽培種培養(yǎng)料和66％的水，所述栽培種培養(yǎng)料包括：原種制備：將所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的母種接入原種培養(yǎng)基，23℃，空氣相對濕度75％，二氧化碳濃度4000ppm的條件下，培養(yǎng)35天，獲得原種。接種與發(fā)菌：將原種接種到栽培培養(yǎng)基，溫度25℃，空氣相對濕度75％，二氧化碳濃度4000ppm條件下分別培養(yǎng)65，70，75，80天。栽培出菇：出菇溫度設(shè)定為13℃，空氣相對濕度100％，二氧化碳濃度2000ppm，前4天黑暗，后5～13天，光照強度100Lux，第14天起光照強度300Lux；第5天起開始每天間隙式進行光照刺激出菇，獲得菇蓋成熟的子實體；所述的間隙式進行光照的方法，包括如下步驟：第5～13天，光照2小時，黑暗5分鐘，依次交替給光第14天開始，光照45分鐘，黑暗15分鐘，依次交替給光表2為Finc-B-7與親本菌株Finc-B-3栽培試驗結(jié)果，具體包括培養(yǎng)周期，栽培周期，單產(chǎn)。表2棕色真姬菇菌株栽培試驗結(jié)果試驗結(jié)果表明：Finc-B-7在上述培養(yǎng)基和栽培條件下最佳菌齡為70天，相應(yīng)栽培周期為21天，平均單產(chǎn)為188克/瓶；Finc-B-3最佳菌齡為70天，相應(yīng)栽培周期為21天，平均單產(chǎn)為183克/瓶；Finc-B-7單產(chǎn)方面表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。實施例4栽培實驗二本發(fā)明Finc-B-7與親本菌株Finc-B-3分別進行培養(yǎng)和栽培，從65天到80天設(shè)置4個菌齡，每增加5天為一個菌齡，每個菌齡96瓶，然后對小批量栽培的結(jié)果進行匯總比較，總結(jié)出本發(fā)明菌株Finc-B-7的優(yōu)勢和形態(tài)學特點。栽培瓶容積：850cc，瓶口直徑58mm。母種培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)：參照實施例1。原種培養(yǎng)基：按重量百分比計，包括38％的原種培養(yǎng)料和62％的水，所述原種培養(yǎng)料按重量百分比計包括：雜木屑60％米糠23％麩皮7％玉米粉10％栽培培養(yǎng)基：按重量百分比計，包括36％的栽培種培養(yǎng)料和64％的水，所述栽培種培養(yǎng)料包括：原種制備：將所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的母種接入原種培養(yǎng)基，18℃，空氣相對濕度65％，二氧化碳濃度2000ppm的條件下，培養(yǎng)28天，獲得原種。接種與發(fā)菌：將原種接種到栽培培養(yǎng)基，溫度21℃，空氣相對濕度65％，二氧化碳濃度2000ppm條件下分別培養(yǎng)65，70，75，80天；栽培：出菇溫度設(shè)定為15℃，空氣相對濕度93％，二氧化碳濃度1000ppm，前4天黑暗，后5～13天，光照強度50Lux，第14天起光照強度200Lux；優(yōu)選的，第5天起開始每天間隙式進行光照刺激出菇，獲得菇蓋成熟的子實體；所述的間隙式進行光照的方法，包括如下步驟：第5～13天，光照2小時，黑暗5分鐘，依次交替給光；第14天開始，光照45分鐘，黑暗15分鐘，依次交替給光；表4為Finc-B-7與親本菌株Finc-B-3栽培試驗結(jié)果，具體包括培養(yǎng)周期，栽培周期，單產(chǎn)。表4棕色真姬菇菌株栽培試驗結(jié)果Finc-B-7在上述培養(yǎng)基和栽培條件下最佳菌齡為70天，相應(yīng)栽培周期為21天，平均單產(chǎn)為186克/瓶；Finc-B-3最佳菌齡為70天，相應(yīng)栽培周期為21天，平均單產(chǎn)為183克/瓶；Finc-B-7單產(chǎn)方面表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。實施例5形態(tài)學特性Finc-B-7及其親本Finc-B-3在實施例3所述的培養(yǎng)基和栽培環(huán)境下，培養(yǎng)70天，栽培周期21天條件下具體形態(tài)特征的差異，請參閱表5。表5不同菌株形態(tài)特征對比如圖3、表5所示，F(xiàn)inc-B-7的形態(tài)特征：菌絲：顏色(RAL9010)，氣生菌絲中等，菌絲密度中等，菌落邊緣圓整；菌蓋：直徑為1.8±0.5cm，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，斷面呈圓山型，斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央,中央斑紋大，邊緣小，菌蓋邊緣可見豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)；寬度3±2mm，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌褶：顏色(RAL9010)、排列方式筆直排列；孢子印顏色為(RAL9010)；菌柄：長度為8±2cm，顏色(RAL9003)，中粗1.0±0.5cm，與菌蓋連接方式為中生，菌柄簇生。如圖4、表5所示，F(xiàn)inc-B-3的形態(tài)特征：菌絲：顏色(RAL9010)，氣生菌絲發(fā)達，菌絲致密，菌落邊緣圓整；菌蓋：直徑為1.8±0.5cm，斑紋顏色為PANTONE7559U，邊緣顏色PANTONE7502U，斷面呈圓山型，斑紋清晰度一般，主要分布在菌蓋中央，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌褶：顏色(RAL9010)、排列方式筆直排列；孢子印顏色為(RAL9010)；菌柄：長度為6±2cm，顏色(RAL1013)，柄粗0.6±0.5cm，與菌蓋連接方式為略偏心生，菌柄簇生。實施例6一致性，穩(wěn)定性試驗將所述棕色真姬菇菌株Finc-B-7的栽培種接入以下培養(yǎng)基，溫度23℃，空氣相對濕度75％，二氧化碳濃度4000ppm條件下培養(yǎng)80天；之后搔菌，并置于生育房進行出菇，溫度13℃，空氣相對濕度100％，二氧化碳濃度2000ppm，前4天黑暗，后5～13天光照強度100Lux，第14天起光照強度300Lux；分別于搔菌后第6天，第14天，第21天觀察。第5天起開始每天間隙式進行光照刺激出菇，所述的間隙式進行光照的方法，包括如下步驟：第5～13天，光照2小時，黑暗5分鐘，依次交替給光；第14天開始，光照45分鐘，黑暗15分鐘，依次交替給光；(1)培養(yǎng)基A：結(jié)果如下第6天：料面出現(xiàn)針尖狀原基，原基顏色(RAL1013)第14天：分化出菌蓋，顏色(PANTONE410C)，菇蓋表面中央位置可見真姬菇特有的大理石狀斑紋，斑紋顏色(PANTONE411C)；子實體高度約1-3cm，菌柄顏色(RAL9003)。第21天：子實體成熟，直徑為1.5±0.5cm，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，斷面呈圓山型，斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央,中央斑紋大，邊緣小，菌蓋邊緣可見豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)；寬度3±2mm，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌柄長度為8±2cm，中粗1±0.5cm，顏色為(RAL9003)，與菌蓋連接方式為中生，菌柄簇生。(2)培養(yǎng)基B：結(jié)果如下第6天：料面出現(xiàn)針尖狀原基，原基顏色(RAL1013)第14天：分化出菌蓋，顏色(PANTONE410C)，菇蓋表面中央位置可見真姬菇特有的大理石狀斑紋，斑紋顏色(PANTONE411C)；子實體高度約1～3cm，菌柄顏色(RAL9003)。第21天：子實體成熟，直徑為1.8±0.5cm，斑紋顏色為(PANTONE7504C)，菌蓋邊緣顏色為(PANTONE466U)，斷面呈圓山型，斑紋十分清晰，主要分布在菌蓋中央,中央斑紋大，邊緣小，菌蓋邊緣可見豎狀分布的環(huán)紋，環(huán)紋顏色為(PANTONE465U)；寬度3±2mm，菌蓋邊緣圓整，表面無龜裂，質(zhì)地脆嫩；菌柄長度為8±2cm，中粗(0.8±0.4cm)，顏色為(RAL9003)，與菌蓋連接方式為中生，菌柄簇生。由此可見，F(xiàn)inc-B-7菌株在不同的培養(yǎng)基中栽培表現(xiàn)一致，具有良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性。實施例7菌絲生長的溫度梯度試驗本實施例以培養(yǎng)溫度為標準，設(shè)計4組實驗，從接種了Finc-B-7和Finc-B-3馬鈴薯瓊脂板板上分別切取直徑為5.0mm的接種塊接種到PDA培養(yǎng)基上，分別于18℃、23℃、28℃和33℃培養(yǎng)15天，試驗結(jié)果見表6。表6溫度對不同棕色真姬菇菌絲生長速率的影響結(jié)果表明，棕色真姬菇菌株Finc-B-7菌株的適宜培養(yǎng)溫度為18～23℃。實施例8子實體中葡聚糖含量試驗分別進行培養(yǎng)和栽培，所獲得的子實體進行葡聚糖含量的測定。本發(fā)明Finc-B-7與對照菌株Finc-B-3、Finc-B-1、TNN-12、TNN-11接入以下培養(yǎng)基，溫度23℃，空氣相對濕度70％，二氧化碳濃度3000ppm條件下培養(yǎng)75天；之后搔菌，并置于生育房進行出菇，溫度13℃，空氣相對濕度95％，二氧化碳濃度2000ppm，前4天黑暗，后5～13天光照強度100Lux，第14天起光照強度300Lux；第5天起開始每天間隙式進行光照刺激出菇，所述的間隙式進行光照的方法，同實施例6；于第21天采收；(1)培養(yǎng)基A：(2)培養(yǎng)基B：葡聚糖含量的檢測：取Finc-B-7新鮮子實體作為樣品，采用紅外水分測定儀FD-610進行檢測：培養(yǎng)基A中培養(yǎng)的子實體，水分含量為90.6％；培養(yǎng)基B中培養(yǎng)的子實體，水分含量為91％，然后采用苯酚-硫酸法檢測葡聚糖含量；根據(jù)下式計算葡聚糖含量：葡聚糖含量％＝g/(G-G1)×100；培養(yǎng)基A中培養(yǎng)的子實體的葡聚糖含量為8±2％；培養(yǎng)基B中培養(yǎng)的子實體的葡聚糖含量為7±2％；檢測結(jié)果見表7。采用相同的方法，其它對照菌株的子實體在上述兩種培養(yǎng)基中培養(yǎng)后獲得的子實體進行檢測，結(jié)果，沒有檢測出葡聚糖。所述的葡聚糖為β-1,3-D葡聚糖；試驗結(jié)果請參閱表7。表7不同菌株子實體中葡聚糖含量對比對比項目Finc-B-7Finc-B-3TNN-11TNN-12葡聚糖％培養(yǎng)基A8±2未檢出未檢出未檢出葡聚糖％培養(yǎng)基B7±2未檢出未檢出未檢出注：樣品的所有結(jié)果是以干基計；實施例9色素分泌試驗將Finc-B-7與對照菌株Finc-B-3、Finc-B-1、TNN-12、TNN-11菌絲接種在PDA培養(yǎng)基中，23℃下培養(yǎng)12天，之后在同樣的溫度條件下分別光照(150±50Lux)12，24，48，72小時，背面觀察。試驗結(jié)果見表表8不同菌株色素分泌試驗結(jié)果表明Finc-B-7的菌絲發(fā)滿平皿后，經(jīng)過一定時間的光照，有紅色色素產(chǎn)生，隨著光照時間的延長，色素逐漸加深。當前第1頁1 2 3