技術(shù)總結(jié)
一種新型慢病毒包裝方法,由下述步驟組成:(1)接種2×106個(gè)293T細(xì)胞;(2)轉(zhuǎn)染的混合物培養(yǎng)12?15小時(shí);(3)混合每個(gè)轉(zhuǎn)染離心管,病毒載體為10ug小片段RNA質(zhì)粒,40ug包裝質(zhì)粒,20ug包膜蛋白質(zhì)粒,用100mM氯化鈉補(bǔ)足體積100μL;(4)配置Biomiga?Genetran?Ⅲ和氯化鈉的混合液;(5)加80μL的Biomiga?Genetran?Ⅲ和氯化鈉混合物到轉(zhuǎn)染離心管中,總體積180μL;(6)室溫放置20?30分鐘;(7)從細(xì)胞中吸出培養(yǎng)基,然后加8ml的新鮮培養(yǎng)基,半個(gè)小時(shí)內(nèi)加50μL仲丁巴比安,混勻;(8)培養(yǎng)48?60小時(shí);(9)72小時(shí)后,收集病毒。
技術(shù)研發(fā)人員:史鏡宇;章宏遠(yuǎn);劉艷紅;言國(guó)英;王敬紅;趙林軍;劉師岐
受保護(hù)的技術(shù)使用者:嘉興宇遠(yuǎn)生物科技有限公司
文檔號(hào)碼:201610977672
技術(shù)研發(fā)日:2016.11.08
技術(shù)公布日:2017.03.15