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鑒定梯棱羊肚菌交配型的方法和特異引物對(duì)與流程

文檔序號(hào):12346687閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.鑒定梯棱羊肚菌交配型的方法,其特征在于,包括用于檢測(cè)交配型MAT1-1的特異引物對(duì)P8-4F/P8-4R,用于檢測(cè)交配型MAT1-2的特異引物對(duì)P6-1F/P6-1R,相應(yīng)的PCR擴(kuò)增體系和擴(kuò)增程序;

所述的P8-4F/P8-4R特異引物對(duì)中,P8-4F的核苷酸序列為5’-GCTCTCTTGTGCCCCTTTTGACTAT-3’, P8-4R的核苷酸序列為5’-TCTACCAGCCATGTGAAACAAGCAA-3’ ;

所述的P6-1F/P6-1R特異引物對(duì)中,P6-1F的核苷酸序列為5’-GAGACTCAAATCTGACTGACTTCCT-3’,P6-1R 的核苷酸序列為5’-GAAGAACCTCAGATAAGCGTAAAAT-3’。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定梯棱羊肚菌交配型的方法,其特征在于,鑒定交配型MAT1-1和MAT1-2的PCR擴(kuò)增體系相同,均包括2×PCRmix 12.5 μL,10 μM/L 的正反向引物各1 μL,DNA模板10 ng, ddH2O補(bǔ)足至25 μL。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鑒定梯棱羊肚菌交配型的方法,其特征在于,鑒定MAT1-1交配型的PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3 min;94℃變性30 sec,60℃退火30 sec,72℃延伸90 sec,30個(gè)循環(huán);72℃延伸10 min;

鑒定MAT1-2交配型的PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3 min;94℃變性30 sec,58℃退火30 sec,72℃延伸90 sec,30個(gè)循環(huán);72℃延伸10 min。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鑒定梯棱羊肚菌交配型的方法,其特征在于,檢測(cè)梯棱羊肚菌菌株的MAT1-1交配型時(shí),可以獲得大小為1837bp唯一條帶,且該條帶包含了MAT1-1-1全長基因;檢測(cè)梯棱羊肚菌菌株的MAT1-2交配型時(shí),可以獲得大小為1744bp唯一條帶,且該條帶包含了MAT1-2-1全長基因。

5.鑒定梯棱羊肚菌交配型的PCR引物對(duì),其特征在于,包括用于檢測(cè)交配型MAT1-1的特異引物對(duì)P8-4F/P8-4R和用于檢測(cè)交配型MAT1-2的特異引物對(duì)P6-1F/P6-1R。

6.含有權(quán)利要求5 所述的PCR 引物對(duì)的鑒定梯棱羊肚菌交配型的試劑。

7.含有權(quán)利要求5所述的PCR 引物對(duì)的鑒定梯棱羊肚菌交配型的試劑盒。

8.權(quán)利要求5所述的PCR 引物對(duì)、權(quán)利要求6所述的試劑或權(quán)利要求7所述的試劑盒在鑒定梯棱羊肚菌交配型中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求5所述的PCR 引物對(duì)、權(quán)利要求6所述的試劑或權(quán)利要求7所述的試劑盒在鑒定梯棱羊肚菌育種的應(yīng)用。

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