本分案申請(qǐng)是基于申請(qǐng)?zhí)枮?01380016674.4，申請(qǐng)日為2013年3月28日，發(fā)明名稱為“新的烷化劑”的原始中國(guó)專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

本發(fā)明涉及新類型的包含與dna-結(jié)合部分相連的噻吩并-吲哚部分的烷化劑，它們的制備方法，包含它們的藥物組合物及其在治療某些哺乳動(dòng)物腫瘤中的應(yīng)用。

許多化學(xué)品現(xiàn)已可用于治療癌癥。盡管在抗癌研究中做出了努力，但癌癥仍然是模糊和難以捉摸的靶點(diǎn)，因此仍然需要新的抗癌劑。

烷化劑是已經(jīng)用于治療癌癥超過(guò)60年的細(xì)胞毒活性劑，而它們的全部功能仍然在增加。這些活性劑在細(xì)胞周期的所有階段期間直接作用于dna，引起dna鏈斷裂，導(dǎo)致異常的堿基配對(duì)、胞分裂的抑制并最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

本發(fā)明提供了新類型的烷化劑，其包含與dna-結(jié)合部分連接的噻吩并-吲哚部分。

gb2344818中描述了噻吩并-吲哚衍生物；將以上提及的專利申請(qǐng)的一些具體化合物排除在本發(fā)明的通式之外。

因此，本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供式(i)或(ii)的化合物及其可藥用鹽

其中r1和r2一起形成基團(tuán)(d)或(g):

其中r5是氫、直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基或直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基；

r3和r4各自獨(dú)立地是氫或是選自任選被取代的直鏈或支鏈的c1-c4烷基和直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基的基團(tuán)；

r6是離去基團(tuán)；

t不存在或是n；

bm是式(v)的dna結(jié)合部分:

其中:

x不存在、是直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c2-c4烯基或直鏈或支鏈的c2-c4炔基；

y和y’獨(dú)立地是任選被取代的芳基或雜芳基；

u是式(vi)或(vii)的部分:

其中r3如上文所定義；

q是0至4的整數(shù)；

l1是氫或l，其中l(wèi)不存在或是在一定條件下可裂解的部分；

w1不存在或是包含一個(gè)或多個(gè)自我分解(self-immolative)基團(tuán)的自我分解系統(tǒng)；

z1不存在或是肽、非肽或者雜肽和非肽的連接基；

條件是當(dāng)以下情形時(shí)，排除其中l(wèi)1是氫的式(i)的化合物或式(ii)的化合物：

1)t和x均不存在，q是0且

y’是式(viii)、(viii)’或(viii)”的雜環(huán)基部分:

或

2)t和x均不存在，q是1，u是式(vii)的基團(tuán)，

y是式(ix)的雜環(huán)基部分

且

y’是式(viii)”’的雜環(huán)基部分

其中q是n或o，且r21是氫或是選自–n(c2h5)2和–c(nh)nh2的基團(tuán)。

細(xì)胞毒藥物以各種不同的機(jī)制作用于快速增殖細(xì)胞，通常通過(guò)直接或間接干擾dna復(fù)制。盡管該療法對(duì)不同類型的腫瘤有效，但其可能受到一些限制:干擾細(xì)胞增殖事實(shí)上還影響經(jīng)常增殖的正常細(xì)胞，諸如骨髓、胃腸道細(xì)胞和毛囊。因?yàn)閷?duì)這些組織的劑量限制性的副作用導(dǎo)致免疫抑制、胃腸道毒性和脫發(fā)，所以可能達(dá)不到會(huì)完全消滅腫瘤的藥物濃度。

另外，在一些情況中細(xì)胞毒藥物顯示非最佳的理化性質(zhì)，且可能缺乏適合的藥物動(dòng)力學(xué)形式，限制它們?cè)诨颊咧械膽?yīng)用。

細(xì)胞毒藥物與能攜載藥物并由此改善腫瘤靶向或能修飾其藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的分子的綴合是已采用的解決以上提及的問(wèn)題的策略之一。已經(jīng)報(bào)道了細(xì)胞毒藥物與蛋白質(zhì)、肽或適體、聚合物或納米微粒的綴合的不同實(shí)例，所述蛋白質(zhì)、肽或適體、聚合物或納米微粒能有更好的靶點(diǎn)遞送，改善溶解度、及在一些情況中改善其他的藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)、諸如增加的半衰期或藥物局部濃度，和改善藥物性能。事實(shí)上，根據(jù)與細(xì)胞毒活性劑綴合的具體分子的性質(zhì)，生成的綴合物在溶解度、進(jìn)入細(xì)胞的滲透性、體內(nèi)治療窗、控制釋放、到達(dá)靶點(diǎn)的能力方面具有改善的特性。

因此，對(duì)于開發(fā)適合與不同類型的分子綴合的官能團(tuán)化的細(xì)胞毒活性劑有增加的需求。

本發(fā)明還提供了官能團(tuán)化的烷化劑，其除了具有細(xì)胞毒活性，還適用于與不同類型的親核體綴合。

因此，本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供式(iii)或(iv)的化合物及其可藥用鹽:

其中

bm是式(v)’的dna結(jié)合部分:

其中:

x、y、u、y’和q如上文所定義；

a是選自-o-、-nh-、-co-的原子；

a’不存在或是a，其中a如上文所定義；

l不存在或是在一定條件下可裂解的部分；

w不存在或是包含一個(gè)或多個(gè)自我分解基團(tuán)的自我分解系統(tǒng)；

z不存在或是肽、非肽或雜肽和非肽的連接基；

rm不存在或是連接于一個(gè)或多個(gè)a、l、w或z基團(tuán)的反應(yīng)性部分；

rm1不存在或是連接于一個(gè)或多個(gè)l1、w1或z1基團(tuán)的反應(yīng)性部分；

且r1、r2、r3、r4、r6、t、bm、l1、w1和z1如上文所定義；

條件是

1)當(dāng)a’不存在，且rm1不存在時(shí)，排除式(iv)的化合物；

2)當(dāng)以下情形時(shí)，排除式(iii)或(iv)的化合物：

a)t和x均不存在，q是0且

y’是式(viii)^iv的雜環(huán)基部分

其中

q是-o-、-s-、-nr14，其中r14是氫、c1-c4烷基或c1-c4羥烷基；

q1是-ch＝或-n＝；

r7和r8獨(dú)立地是氫、鹵素、羥基、c1-c4烷氧基、氰基、-ncoor3、-c(nh)-nh2或–nr3r4，其中r3和r4如上文所定義；

或

b)t和x均不存在，q是1或2，u是式(vii)的基團(tuán)，

y是式(ix)’的雜環(huán)基部分:

且y’是式(viii)^iv的雜環(huán)基部分

其中q、q1、r7和r8如上文所定義。

應(yīng)注意當(dāng)l1是氫或是在一定條件下可裂解的部分，且o-l1鍵斷裂產(chǎn)生oh官能團(tuán)時(shí)，則式(ii)或(iv)的化合物可分別被轉(zhuǎn)化為式(i)或(iii)的化合物，其通過(guò)文獻(xiàn)中報(bào)道的適當(dāng)綜述的反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行(參見例如baiard,r；等,j.am.chem.soc.1963,85,567-578；zhao,r.y.等j.med.chem.2012,55,766-782.)

此外，應(yīng)注意式(iii)的化合物具有一個(gè)官能團(tuán)化的基團(tuán)

而式(iv)的化合物可具有一個(gè)或兩個(gè)官能團(tuán)化的基團(tuán)。

具體而言，當(dāng)a’是a，且l1是氫時(shí)(如在式(iv)’的化合物中)，

或

a’不存在，且l1不是氫時(shí)(如在式(iv)”’的化合物中)，

式(iv)的化合物具有官能團(tuán)化的基團(tuán)，因?yàn)閘、w、z和/或rm不能直接連接于bm。

當(dāng)a’是a，且l1是l時(shí)(如式(iv)”的化合物中)，

式(iv)的化合物具有兩個(gè)官能團(tuán)化的基團(tuán)。

本發(fā)明還提供了合成方法，其通過(guò)由標(biāo)準(zhǔn)的合成轉(zhuǎn)化構(gòu)成的方法制備式(i)、(ii)、(iii)和(iv)的化合物，以及異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、水合物、溶劑化物、復(fù)合物、代謝產(chǎn)物、前藥、載體、n-氧化物。

本發(fā)明還提供了治療癌癥的方法，其包括向有需要的哺乳動(dòng)物施用有效量的如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物。所述有需要的哺乳動(dòng)物可以是例如人。

本發(fā)明還提供了如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物，其用于治療癌癥、細(xì)胞增殖性障礙和病毒感染的方法。

優(yōu)選地，如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物用于治療特定類型的癌癥的方法，所述癌癥包括但不限于：癌，諸如膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌，包括小細(xì)胞肺癌、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌、和皮膚癌，包括鱗狀細(xì)胞癌；淋巴細(xì)胞系血液腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病，急性成淋巴細(xì)胞性白血病、b-細(xì)胞淋巴瘤、t-細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；髓系造血腫瘤，包括急性和慢性髓性白血病、骨髓增生異常綜合征和前髓細(xì)胞性白血??；間質(zhì)起源的腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；其它腫瘤，包括黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤(keratoxanthoma)、甲狀腺濾泡癌、卡波西肉瘤和間皮瘤。

此外，如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物用于治療特定的細(xì)胞增殖性障礙的方法，特定的細(xì)胞增殖性障礙為例如，良性前列腺增生、家族性腺瘤性息肉病(fap)、神經(jīng)纖維瘤病、銀屑病、與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的血管平滑細(xì)胞增生、肺纖維化、關(guān)節(jié)炎、腎小球腎炎以及術(shù)后狹窄和再狹窄。

此外，如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物用于抑制腫瘤血管發(fā)生和轉(zhuǎn)移的方法，以及用于治療器官移植排斥和移植物抗宿主病的方法。

本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含治療有效量的如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物或其可藥用鹽和至少一種可藥用賦形劑、載體和/或稀釋劑。

本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物和一種或多種化療劑。

本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物，與已知的抗癌治療、諸如放射療法或化學(xué)療法組合，其與以下藥劑組合：細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑或細(xì)胞毒活性劑、抗生素類藥、烷化劑、抗代謝劑、激素藥劑、免疫劑、干擾素類藥、環(huán)氧化酶抑制劑(例如cox-2抑制劑)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑、端粒酶抑制劑、酪氨酸激酶抑制劑、抗生長(zhǎng)因子受體劑、抗her2劑、抗egfr劑、抗血管生成藥(例如血管生成抑制劑)、法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、ras-raf信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、其它c(diǎn)dk抑制劑、微管蛋白結(jié)合劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶i抑制劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶ii抑制劑等。

另外，本發(fā)明提供了產(chǎn)品，其包含如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物或其可藥用鹽和一種或多種化療劑，作為組合的制劑，用于在抗癌治療法中同時(shí)、分開或連續(xù)應(yīng)用。

在本發(fā)明的又一個(gè)方面提供了如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物或其可藥用鹽，其用作藥物。

此外，本發(fā)明提供了如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物或其可藥用鹽在制備具有抗癌活性的藥物中的應(yīng)用。

最后，本發(fā)明提供了如上文定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物或其可藥用鹽在制備綴合物中的應(yīng)用。

除非另外規(guī)定，如本文使用的以下術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)旨在具有以下含義。

術(shù)語(yǔ)“直鏈或支鏈的c1-c4烷基”意指例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基的任何基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基”意指例如2-羥基乙基、3-羥基丙基、2-羥基丙基、4-羥基丁基、3-羥基丁基、2-羥基丁基的任何基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“直鏈或支鏈的c1-c4烷氧基”意指例如甲氧基、乙氧基、丙氧基等的任何基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“鹵素”意指氟、氯溴或碘。

術(shù)語(yǔ)“直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基”意指例如，2-氨基乙基、3-氨基丙基、4-氨基丁基、3-氨基丁基等的任何基團(tuán)。

如本文使用的術(shù)語(yǔ)"c3-c8環(huán)烴基"是指飽和的或不飽和的非芳族的全-碳單環(huán)，其可由一個(gè)環(huán)或稠合在一起的兩個(gè)或多個(gè)環(huán)組成。實(shí)例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、1,3-環(huán)己二烯基、十氫萘基和1,4-環(huán)己二烯基。

如本文使用的術(shù)語(yǔ)"雜環(huán)基"是指飽和的或不飽和的非芳族的c4-c8碳環(huán)，其可由一個(gè)環(huán)或稠合在一起的兩個(gè)或多個(gè)環(huán)組成，其中1至4個(gè)碳原子被雜原子、諸如氮、氧、硫替代，其中所述雜原子彼此之間可直接相連；氮和硫可任選地被氧化，且氮可任選地被季銨化。雜環(huán)基的非限制性實(shí)例為例如，四氫呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、1,4-二氧雜環(huán)己基、十氫喹啉基、哌嗪基、噁唑烷基和嗎啉基。

如本文使用的術(shù)語(yǔ)"芳基"是指1至4個(gè)環(huán)系統(tǒng)的單-、二-或多-碳環(huán)烴，其任選地進(jìn)一步稠合或彼此通過(guò)單鍵連接，其中碳環(huán)中的至少一個(gè)是芳族的，其中術(shù)語(yǔ)“芳族的”是指完全共軛的π-電子鍵系統(tǒng)。此類芳基的非限制性實(shí)例是苯基、α-或β-萘基或蒽基。

如本文使用的術(shù)語(yǔ)"雜芳基"是指芳族的雜環(huán)，通常為4-至7-元雜環(huán)，具有1至4個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子，其中氮和硫可任選地被氧化，且氮可任選地被季銨化；所述雜芳基環(huán)可以任選地進(jìn)一步稠合或連接于以下環(huán)：一個(gè)或稠合在一起的兩個(gè)或多個(gè)、芳族的和非芳族的碳環(huán)和雜環(huán)。雜原子可彼此直接連接。雜芳基的實(shí)例包括但不限于吡啶基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、三唑基、吡唑基、吡嗪基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、咪唑基、噻吩基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、吲唑基、苯并三唑基、苯并異噁唑基、喹喔啉基、異喹啉基和喹啉基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述雜芳基包含1至4個(gè)雜原子。應(yīng)注意"c1雜芳基"是指雜芳族基團(tuán)的環(huán)系統(tǒng)中僅存在一個(gè)碳(因此不計(jì)算任選的取代基中的碳原子)。該雜芳族基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是四唑基。

術(shù)語(yǔ)“離去基團(tuán)”是指取代反應(yīng)中可以被另一個(gè)基團(tuán)取代的基團(tuán)。此類離去基團(tuán)在本領(lǐng)域中眾所周知，且實(shí)例包括但不限于鹵素基團(tuán)(氟化物、氯化物、溴化物和碘化物)、疊氮化物、磺酸酯(例如，任選被取代的c1-c6烷烴磺酸酯、諸如甲磺酸酯和三氟甲磺酸酯或任選被取代的c7-c12烷基苯磺酸酯、諸如對(duì)甲苯磺酸酯)、琥珀酰亞胺-n-氧化物、對(duì)硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、羧酸酯、氨基羧酸酯(氨基甲酸酯)和烷氧基羧酸酯(碳酸酯)。對(duì)于飽和碳上的取代，優(yōu)選的離去基團(tuán)是鹵素基團(tuán)和磺酸酯。對(duì)于羰基碳上的取代，可以使用例如鹵素基團(tuán)、琥珀酰亞胺-n-氧化物、對(duì)硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、羧酸酯或烷氧基羧酸酯(碳酸酯)作為離去基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“離去基團(tuán)”還指由于消除反應(yīng)(例如，電子級(jí)聯(lián)反應(yīng)或螺環(huán)化反應(yīng))而被消除的基團(tuán)。在這種情況中，可以使用例如鹵素基團(tuán)、磺酸酯、疊氮化物、氨基羧酸酯(氨基甲酸酯)或烷氧基羧酸酯(碳酸酯)作為離去基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“活性酯”是指其中酯部分的烷氧基是好的離去基團(tuán)的官能團(tuán)。這種烷氧基的實(shí)例包括但不限于琥珀酰亞胺-n-氧化物、對(duì)硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、1-羥基苯并三唑和1-羥基-7-氮雜苯并三唑和具有類似離去能力的基團(tuán)。基于未被取代的烷基的烷氧基基團(tuán)例如甲氧基、乙氧基、異丙氧基和叔丁氧基不被認(rèn)為是好的離去基團(tuán)，因此甲基、乙基、異丙基和叔丁基的酯不被認(rèn)為是活性酯。

術(shù)語(yǔ)“親核體”是指攜帶親核基團(tuán)的分子。術(shù)語(yǔ)“親核基團(tuán)”是指在化學(xué)反應(yīng)中向親電子基團(tuán)提供電子對(duì)以形成化學(xué)鍵的基團(tuán)。此類親核基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于鹵素、胺、亞硝酸鹽/酯、疊氮化物、醇、醇鹽陰離子、羧酸陰離子、硫醇、硫醇鹽等。

術(shù)語(yǔ)“親電子基團(tuán)”是指在化學(xué)反應(yīng)中從親核基團(tuán)接受電子對(duì)以形成化學(xué)鍵的基團(tuán)。此類親電子基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于酯、醛、酰胺、酮等。

術(shù)語(yǔ)“烷化部分"是指一個(gè)或多個(gè)可裂解的鍵斷裂后仍存在且可能或可能不共價(jià)鍵合于核酸鏈的結(jié)構(gòu)。

術(shù)語(yǔ)“非天然氨基酸”是指天然存在的氨基酸的d-立體異構(gòu)體。

式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物的可藥用鹽包括與無(wú)機(jī)或有機(jī)酸的酸加成鹽，例如硝酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、富馬酸、乳酸、草酸、丙二酸、蘋果酸、馬來(lái)酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、羥乙磺酸和水楊酸。

式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物的可藥用鹽還包括與無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿的鹽，例如堿金屬或堿土金屬，尤其是鈉、鉀、鈣、銨或鎂的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽、無(wú)環(huán)或環(huán)胺類。

如果異構(gòu)體中心的立體中心或另一種形式存在于本發(fā)明的化合物中，則這種異構(gòu)體的所有形式包括對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體都預(yù)以被本文覆蓋。包含立體中心的化合物可以作為外消旋混合物、富含對(duì)映異構(gòu)體的混合物使用或可以使用眾所周知的技術(shù)分離外消旋混合物，且各個(gè)對(duì)映異構(gòu)體可以單獨(dú)使用。在化合物具有不飽和碳-碳雙鍵的情況中，順式(z)和反式(e)異構(gòu)體都屬于本發(fā)明的范圍。

在當(dāng)化合物可以以互變體形式存在的情況中，每種形式均被認(rèn)為包括在本發(fā)明中，無(wú)論是以平衡形式還是以一種主要形式存在。

dna-結(jié)合部分bm

bm部分是將式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物與dna雙鏈結(jié)合或連接的結(jié)合部分。所述結(jié)合部分可以改善衍生物對(duì)dna的親和性或者改善烷化劑的烷基化反應(yīng)性或者靶向dna的不同序列以調(diào)整化合物的靶向?qū)Ｒ恍浴?/p>

優(yōu)選地，在式(i)或(ii)的化合物中，bm部分是如上文定義的式(v)的基團(tuán)，

其中

x不存在或是式(xiv)的c2-c4烯基:

其中r3獨(dú)立地如上文所定義，其為相同或不同的；

u和q如上文所定義；

如存在，y是選自以下的基團(tuán):

且

y’是選自以下的基團(tuán):

其中r3如上文所定義，且r15、r16和r20獨(dú)立地是氫、鹵素、羥基、no2、任選被取代的直鏈或支鏈的c1-c6烷基或c1-c6烷氧基、氰基、-cooh、-conh-r3、-n-c(o)o-r3、-c(nh)-nh2或–nr3r4，其中r3和r4如上文所定義。

根據(jù)本發(fā)明且除非另外規(guī)定，以上的r3、r15、r16和r20基團(tuán)可以任選地在它們?nèi)魏斡坞x位置被一個(gè)或多個(gè)、例如1至3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代:烷氧基、羥基、氨基、直鏈或支鏈的c1-c4烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基。進(jìn)而，每當(dāng)適合時(shí)，以上取代基中的每一個(gè)可進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)上述基團(tuán)取代。

更優(yōu)選地，在式(i)或(ii)的化合物中，bm部分是如上文定義的式(v)的基團(tuán)，其中x和u如上文所定義，q是0至2的整數(shù)；

如存在，y是選自以下的基團(tuán)

其中r3如上文所定義；

且

y’是選自以下的基團(tuán):

其中r3如上文所定義，且r15、r16和r20獨(dú)立地是氫或甲氧基。

優(yōu)選地，在式(iii)或(iv)的化合物中，bm部分是如上文定義的式(v)’的基團(tuán)，其中

x不存在或是如上文定義的式(xiv)的c2-c4烯基；

u和q如上文所定義；

且

如存在，y和y’獨(dú)立地選自:

其中r3、r15、r16和r20如上文所定義。

更優(yōu)選地，在式(iii)或(iv)的化合物中，bm部分是如上文定義的式(v)’的基團(tuán)，其中x和u如上文所定義，q是0至2的整數(shù)；

如存在，y選自:

其中r3如上文所定義；且

y’是選自以下的基團(tuán):

其中r3如上文所定義，且r15、r16和r20獨(dú)立地是氫或甲氧基。

在一定條件下可裂解的部分l或l1

如存在，l或l1部分是在一定條件下可裂解的部分，在引入某些條件或在某些條件下其可以通過(guò)化學(xué)、光化學(xué)、物理、生物或酶方法裂解。這些條件之一可例如將本發(fā)明的化合物引入導(dǎo)致l和/或l1水解的水性環(huán)境中，或者將本發(fā)明的化合物引入含識(shí)別并裂解l和/或l1的酶的環(huán)境中，或者將本發(fā)明的化合物引入還原條件下，其導(dǎo)致l和/或l1的還原和/或移去，或者將本發(fā)明的化合物引入氧化條件下，其導(dǎo)致l和/或l1的氧化和移去，或者使本發(fā)明的化合物與輻射、例如uv光接觸，其導(dǎo)致裂解，或者將本發(fā)明的化合物與熱接觸，其導(dǎo)致l和/或l1的裂解。由于在循環(huán)中酶普遍存在，在將本發(fā)明的化合物施用于動(dòng)物、例如哺乳動(dòng)物、例如人之后可直接遇到該條件?；蛘撸?dāng)化合物位于特定的器官、組織、細(xì)胞、亞細(xì)胞靶點(diǎn)或細(xì)菌、病毒或微生物靶點(diǎn)時(shí)可遇到所述條件，例如通過(guò)內(nèi)在因素(例如，靶點(diǎn)特異性酶或低氧)的存在或應(yīng)用外界因素(例如，輻射、磁場(chǎng))。

l或l1的裂解意指式(iii)或(iv)的化合物中的a和l之間的鍵或式(ii)或(iv)的化合物中氧和l1之間的鍵破裂:

應(yīng)注意在式(iv)的化合物中，可以存在兩個(gè)在一定條件下可裂解的部分。在該情況中，所述兩個(gè)部分可能是或可能不是相同的，且對(duì)于裂解可能或可能不需要相同的條件。

在一個(gè)實(shí)施方案中，l和/或l1可以是通過(guò)與身體的其他部分相比的靶細(xì)胞附近或內(nèi)部存在的酶或水解條件裂解的部分，或通過(guò)僅在靶細(xì)胞附近或內(nèi)部存在的酶或水解條件裂解的部分。必須注意到如果靶點(diǎn)部位特異性僅基于選擇性轉(zhuǎn)化和/或所述l在靶點(diǎn)部位的裂解而實(shí)現(xiàn)，則引起裂解的條件應(yīng)當(dāng)優(yōu)選地(至少在一定程度上)為靶點(diǎn)部位特異性的。在一個(gè)實(shí)施方案中，l的裂解在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，l的裂解在細(xì)胞外發(fā)生。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，l和/或l1的裂解可以通過(guò)普遍存在的胞內(nèi)酶發(fā)生。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，l和/或l1可以是能通過(guò)普遍存在的酶裂解的部分，例如，循環(huán)中存在的酯酶或胞內(nèi)酶、例如蛋白酶和磷酸酶，或者是通過(guò)ph-控制的水解。因此l和/或l1可任選地與連接原子a或氧一起形成可以在體內(nèi)裂解的甲酸酯、氨基甲酸酯、脲、酯、酰胺、亞胺、二硫化物、醚、縮醛、縮酮或磷酸酯基團(tuán)。

在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中a是–o-，且l和l1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán):

–nhco-r9(xa)；-nhconh-r9(xb)；-nhcoo-r9(xc)；-nh-r9(xd)；

其中:

r9和r10各自獨(dú)立地不存在、是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基；

n是0至2的整數(shù)和

n1是0至4的整數(shù)。

根據(jù)本發(fā)明且除非另外規(guī)定，以上的r9和r10基團(tuán)可任選地被取代可以任選地在它們?nèi)魏斡坞x位置被一個(gè)或多個(gè)、例如1至3個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代:鹵素、直鏈或支鏈的c1-c4烷基、多氟化烷基、直鏈或支鏈的c1-c4烷氧基、多氟化烷氧基、羥基、氨基、直鏈或支鏈的c1-c4烷基氨基、二烷基氨基、c1-c4烷基羰基、c3-c8環(huán)烴基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基和雜芳基烷基。

在另一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，a是–n-，且l和l1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán):

其中:

r9和n1如上文所定義。

在另一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，a是–co-，且l和l1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán):

其中:

r9、r10和n1如上文所定義。

自我分解系統(tǒng)w或w1

如存在，w或w1基團(tuán)是自我分解系統(tǒng)，其在式(iii)和(iv)的化合物中以穩(wěn)定的方式從一端將l或a(如果l不存在)連接于z或rm(如果z不存在)；在式(ii)的化合物中以穩(wěn)定的方式從一端將l1或氧(如果l1不存在)連接于z1，或另外在式(iv)的化合物中連接于rm1(如果z1不存在)。如上文所述地，在引入某些條件后或在某些條件下通過(guò)化學(xué)、光化學(xué)、物理、生物或酶方法活化后l-w、a-w、l1-w1或o-w1鍵可以變得不穩(wěn)定，任選地導(dǎo)致釋放相應(yīng)的部分:

應(yīng)注意在式(iv)的化合物中，可以存在兩個(gè)自我分解系統(tǒng)。在該情況中，所述兩個(gè)系統(tǒng)可能是或可能不是相同的，且對(duì)于裂解可能或可能不需要相同的條件。

式(ii)、(iii)或(iv)的化合物中可引入自我分解系統(tǒng)例如以改善溶解度或改善烷基化部分和反應(yīng)部分之間的空間；此外所述自我分解系統(tǒng)可以調(diào)節(jié)rm或rm1對(duì)親核體的反應(yīng)性。

自我分解系統(tǒng)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，參見例如wo2002/083180和wo2004/043493中描述的那些；或tranoy-opalinsi,a.等.anticanceragentsinmedicinalchemistry,2008,8,618-637中描述的那些。自我分解系統(tǒng)的其他實(shí)例包括但不限于任選被取代的4-氨基丁酸酰胺、適當(dāng)?shù)厝〈亩h(huán)[2.2.1]和二環(huán)[2.2.2]環(huán)系統(tǒng)或2-氨基苯基丙酸酰胺[參見wo2005/079398,wo2005/105154和wo2006/012527；greenwald,r.b.,等.adv.drugdeliveryrev.2003,55,217-250；kingsbury,w.d.；等.j.med.chem.1984,27,1447-1451]。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，w或w1可以與連接原子l、l1、a、z、z1、rm、rm1或氧一起形成能任選地通過(guò)活化裂解的碳酸酯、氨基甲酸酯、脲、酯、酰胺、醚或硫代酰胺連接基團(tuán)。

在優(yōu)選的實(shí)施方案中，w和w1獨(dú)立地不存在或是自我分解系統(tǒng)，其包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的自我分解基團(tuán):

其中

r9和r10之一不存在，且另一個(gè)如上文所定義；

r11和r12各自獨(dú)立地是氫、鹵素、甲基、乙基或直鏈或支鏈的c1-c4羥基甲基；

m是0至3的整數(shù)；且

a1是ch2、ch2n-r12或n-r12，其中r12如上文所定義。

在另一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，w和w1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán):

其中r9和r10之一不存在，且另一個(gè)如上文所定義；且

r11如上文所定義。

z或z1連接基

如存在，z或z1連接基可以是肽的(za),非肽的(zb)或雜化的，其中所述雜化連接基是肽和非肽(zc)的；在式(ii)、(iii)或(iv)的化合物中，所述z或z1連接基可以如上文所述在引入某些條件后或在某些條件下通過(guò)化學(xué)、光化學(xué)、物理、生物或酶方法分別從w或w1裂解:

z或z1連接基可以是直鏈或支鏈的。

z或z1及其左側(cè)部分之間的鍵或z或z1與任選的rm或rm1之間的鍵可以是酰胺、碳酸酯、二硫化物或氨基甲酸酯鍵。

在一個(gè)實(shí)施方案中，z和z1均不存在；在另一個(gè)實(shí)施方案中，z或z1之一不存在。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，z、z1是可以通過(guò)蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶、β-葡糖醛酸糖苷酶、半乳糖苷酶、前列腺特異性抗原(psa)、尿激酶型纖維蛋白酶原激活劑(u-pa)或基質(zhì)金屬蛋白酶家族的成員裂解的肽連接基za。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，z、z1是可包含一個(gè)或多個(gè)非肽水溶性部分的非-肽連接基zb。在該情況中，所述連接基為式(ii)、(iii)或(iv)的化合物增加了水溶性。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，zb是可包含一個(gè)或多個(gè)減少式(ii)、(iii)或(iv)的化合物的聚集的非肽部分的非-肽連接基，所述非肽部分可能是或可能不是還增加式(ii)、(iii)或(iv)的化合物的水溶性的部分。

例如，非肽水溶性zb連接基可包含寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，z、z1是可以包含通式za-zb的肽殘基和非肽殘基二者的雜連接基zc，

其中za和zb獨(dú)立地是肽連接基或非-肽連接基。雜連接基可增加式(ii)、(iii)或(iv)的化合物的溶解度和/或是能被蛋白酶、例如基質(zhì)金屬蛋白酶家族的成員裂解的底物。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，za是單一氨基酸、二肽、三肽、四肽或寡肽部分，其包含天然l-氨基酸、非天然d-氨基酸、合成氨基酸、或其任何組合，其中c-末端或n-末端氨基酸殘基之一連接于w、l或a，或者連接于w1、l1或氧，且另一個(gè)末端氨基酸以cooh或nh2基團(tuán)結(jié)尾或者任選地連接于rm或rm1。

在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，za是二肽或三肽，通過(guò)其c-末端連接于w或w1，或者當(dāng)w不存在時(shí)連接于l，或者當(dāng)w1不存在時(shí)連接于l1，或者當(dāng)w和l均不存在時(shí)連接于a，或者當(dāng)w1和l1均不存在時(shí)連接于0。

在另一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，二肽或三肽的c-末端氨基酸殘基選自甘氨酸、丙氨酸、精氨酸和瓜氨酸；且n-末端氨基酸殘基選自任何天然或非天然氨基酸；優(yōu)選地，在三肽的情況中，中間氨基酸殘基選自丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、苯基丙氨酸和脯氨酸。

在另一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，za包含五肽，其中c-末端氨基酸選自任何天然或非天然氨基酸，且n-末端氨基酸殘基為6-氨基己酸。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，zb可包含寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物。

在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，zb是選自以下的基團(tuán):

其中

r9和r10之一不存在，且另一個(gè)如上文所定義；且

p是1至20的整數(shù)；

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，zc是雜化部分，其包含

肽部分za，其中za是單一氨基酸、三肽或四肽，其包含天然l氨基酸和非天然d氨基酸；和

非肽部分zb，其包含寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物。

反應(yīng)性部分rm或rm1

如存在，rm或rm1部分是可以在相對(duì)溫和條件下、且不需要反應(yīng)性部分的預(yù)先官能團(tuán)化的情況下與親核體(即攜帶親核基團(tuán)的分子)反應(yīng)的親電子基團(tuán)，所述反應(yīng)性部分和所述親核體之間的反應(yīng)將僅需要施加一些熱、壓力、催化劑、酸和/或堿。

因此，當(dāng)rm或rm1部分之一存在時(shí)，式(iii)或(iv)的化合物與不同類型的親核體綴合。

當(dāng)rm和rm1部分均不存在時(shí)，式(iii)或(iv)的化合物通過(guò)一個(gè)或多個(gè)a、l、l1、w、w1、z和z1部分上存在的親核基團(tuán)與不同類型的親電體(即攜帶親電子基團(tuán)的分子)綴合。

在式(iii)的化合物中，rm部分可以連接于a、l、w或z基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)；在式(iv)的化合物中，rm可以連接于a、l、w或z基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)和/或連接于l1、w1、z1基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)或者連接于氧原子:

反應(yīng)性部分的實(shí)例包括但不限于氨基甲?；u、酰鹵、活性酯、酸酐、α-鹵代乙?；ⅵ?鹵代乙酰胺、馬來(lái)酰亞胺、異氰酸酯、異硫氰酸酯、二硫化物、硫醇、肼、酰肼、磺酰氯、醛、甲基酮、乙烯基砜、鹵代甲基和磺酸甲酯。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)親核體的親核基團(tuán)是nh、nh2或oh時(shí)，rm和rm1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán)

其中r13是c1-c3烷基或含no2和cn基團(tuán)的吸電子基團(tuán)；

r是0至7的整數(shù)；且

r11和r12如上文所定義。

在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)親核體的親核基團(tuán)是cooh時(shí)，rm和rm1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán)

在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)親核體的親核基團(tuán)是sh時(shí)，rm和rm1獨(dú)立地不存在或是選自以下的基團(tuán)

其中r13如上文所定義。

在一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案中，rm和rm1中至少一個(gè)并非不存在。

優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(i)或(ii)的化合物，其特征在于

r1和r2一起形成基團(tuán)(d)，其中r5是直鏈或支鏈的c1-c4烷基。

更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(ii)的化合物，其特征在于r6是鹵素基團(tuán)且

l1是氫或式(xj)的在一定條件下可裂解的部分

其中r9是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基。

優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(iii)或(iv)的化合物，其特征在于

r1和r2一起形成基團(tuán)(d)，其中r5是直鏈或支鏈的c1-c4烷基。

更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(iv)的化合物，其特征在于r6是鹵素基團(tuán)；且

a’不存在，且l1是l，其中l(wèi)如上文所定義。

更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(iii)或(iv)的化合物，其特征在于l和l1獨(dú)立地不存在或是選自以下的在一定條件下可裂解的部分

nhco-r9(xa)；-nhconh-r9(xb)；-nhcoo-r9(xc)；-nh-r9(xd)；

其中:

r9和r10各自獨(dú)立地不存在、是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基；

n是0至2的整數(shù)且

n1是0至4的整數(shù)。

更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(iii)或(iv)的化合物，其特征在于w和w1獨(dú)立地是包含獨(dú)立地選自以下的一個(gè)或多個(gè)自我分解基團(tuán)的自我分解系統(tǒng):

其中

r9和r10之一不存在，且另一個(gè)如上文所定義；

r11和r12各自獨(dú)立地是氫、鹵素、甲基、乙基或直鏈或支鏈的c1-c4羥基甲基；

m是0至3的整數(shù)；且

a1是ch2、ch2n-r12或n-r12，其中r12如上文所定義。

更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(iii)或(iv)的化合物，其特征在于z和z1獨(dú)立地是肽連接基、優(yōu)選二肽或三肽連接基，或者是非肽連接基，其包含選自以下的寡聚乙二醇或聚乙二醇部分或其衍生物:

其中

r9和r10之一不存在，且另一個(gè)如上文所定義；且

p是1至20的整數(shù)。

更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了如上文定義的式(iii)或(iv)的化合物，其特征在于rm和rm1獨(dú)立地是選自以下的反應(yīng)性部分：

其中r13是c1-c3烷基或含no2和cn基團(tuán)的吸電子基團(tuán)；

r是0至7的整數(shù)；且

r11和r12如上文所定義。

具體且非限制性地，任選地為可藥用鹽形式，優(yōu)選的本發(fā)明的化合物為以下化合物:

1)n-(6-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-3-基)-1h-吲哚-6-甲酰胺,

2)n-(5-{[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-1-甲基-4-{[(1-甲基-4-硝基-1h-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1h-吡咯-2-甲酰胺,

3)(2e)-1-[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮,

4)(2e)-1-[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮,

5)n-(6-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-3-基)-1h-吲哚-6-甲酰胺,

6)1-甲基-n-(1-甲基-5-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吡咯-3-基)-4-{[(1-甲基-4-硝基-1h-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1h-吡咯-2-甲酰胺,

7)(3bs,4ar)-3-甲基-6-[(2e)-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯?；鵠-4,4a,5,6-四氫-8h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮,

8)(3br,4as)-3-甲基-6-[(2e)-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯?；鵠-4,4a,5,6-四氫-8h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮,

9)(3bs,4ar)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-甲酰胺,

10)(8r)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺,

11)(8s)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺,

12)(3br,4as)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-甲酰胺,

13)n-(3-{(1e)-3-[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

14)n-(3-{(1e)-3-[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

15)n-(3-{(1e)-3-[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

16)n-(3-{(1e)-3-[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

17)n-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-甲酰胺,

18){2-[(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

19)5-氨基-n-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-5a,7,8,8a-四氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

20){2-[(2-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲?；鵠-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

21)5-氨基-n-(2-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

22)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

23)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-6-[(5-{[(5-氨基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯鹽酸鹽,

24)哌嗪-1-甲酸(8s)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1h-吲哚-2-基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

25){2-[(2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯,

26)5-氨基-n-(2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

27)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

28)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-6-[(5-{[(5-氨基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯鹽酸鹽,

29)n-(2-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-硝基-1h-吲哚-2-甲酰胺,

30)n-(2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-硝基-1h-吲哚-2-甲酰胺,

31)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

32)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

33)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羥基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

34)4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羥基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯,

35)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-纈氨酰-n～5～-氨基甲?；?n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺(ornithinamide),

36)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n～5～-氨基甲?；?n-[4-({[{3-[({[(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

37)[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}甲酮,

38)[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}甲酮，

39)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

40)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{3-[({[(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

41)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[(3-{[({(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2e)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

42)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[(3-{[({(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2e)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}丙-2-烯酰基]-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

43)(2e)-1-[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1h-吲哚-3-基)丙-2-烯-1-酮,

44)n-(2-{[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1h-吲哚-5-基)-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酰胺,

45)1-甲基-n-(1-甲基-2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺,

46)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

47)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

48)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

49)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺,

50)l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

51)l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

52)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺,

53)n-[19-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)-17-氧代-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜十九烷-1-?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰,胺和

54)n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺。

就所涉及的任何具體的任選地為可藥用鹽形式的本發(fā)明的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物而言，參見實(shí)驗(yàn)部分和權(quán)利要求。

本發(fā)明還提供了如上述所定義的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物的制備方法，通過(guò)使用下述反應(yīng)途徑和合成方案進(jìn)行、使用本領(lǐng)域可得到的技術(shù)和易于得到的原料進(jìn)行。本發(fā)明一些實(shí)施方案的制備描述在下文的實(shí)施例中，但本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為所述的制備適合于制備本發(fā)明的其他實(shí)施方案。例如，本發(fā)明非典型的化合物的合成可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的改進(jìn)進(jìn)行，例如通過(guò)適當(dāng)?shù)姆乐垢蓴_的基團(tuán)，通過(guò)改變成本領(lǐng)域公知的其他適合的反應(yīng)物，或通過(guò)進(jìn)行反應(yīng)條件的常規(guī)改變?；蛘?，本文涉及或本領(lǐng)域公知的其他反應(yīng)被視為適合于制備本發(fā)明的其他化合物。

本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)理解根據(jù)所述方法進(jìn)行的任何轉(zhuǎn)化都可能需要標(biāo)準(zhǔn)的改進(jìn)，例如保護(hù)干擾基團(tuán)、改變成本領(lǐng)域公知的其他適合的試劑或?qū)Ψ磻?yīng)條件進(jìn)行常規(guī)改變。

本發(fā)明提供了制備如上文所定義的式(i)或(iii)的化合物的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟:

a)轉(zhuǎn)化式(ii)或(iv)的化合物

其中

l1是氫，w1、z1和rm1不存在，且

r1、r2、r3、r4、r6、t、bm、a’、l、w、z和rm如上文所定義，

分別得到如上文定義的式(i)或(iii)的化合物及其可藥用鹽。

因此，下文流程1中描述了式(i)或(iii)的化合物的制備:

流程1

根據(jù)步驟a)，所述反應(yīng)通過(guò)本領(lǐng)域中報(bào)道的眾所周知的方法進(jìn)行(參見例如boger,d.l.；j.am.chem.soc.1996,118,2301-2302)。一個(gè)不意欲限制所述方法的實(shí)例是使用堿性條件、例如使用tea、nahco3或dbu。所述反應(yīng)在dcm或dmf或它們的混合物中、在20℃至回流的溫度進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。

本發(fā)明還提供了制備如上文定義的式(ii)的化合物(即式(ii)’的化合物(其中l(wèi)1是氫)和式(ii)”的化合物(其中l(wèi)1不是氫))的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟:

b)將式(xvi)的化合物

其中r17是鹵素、oh或羧基的活化部分、例如活化的酯，t如上文所定義，且bm是如上文定義的式(v)的結(jié)合部分,

與式(xvii)的化合物反應(yīng)

其中r18是氫或保護(hù)基團(tuán)，且r1、r2、r3、r4和r6如上文所定義；

任選地

c)除去保護(hù)(如存在)，并將生成的式(ii)’的化合物

其中r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義，與式(xviii)的化合物反應(yīng)

r19-l1-w1-z1(xviii)

其中r19不存在、是氫、nh基團(tuán)的的活化部分、優(yōu)選甲苯磺酰基或r17，其中r17如上文所定義，且

l1、w1和z1如上文所定義，且它們中至少一個(gè)并非不存在，

得到式(ii)”的化合物

其中l(wèi)1如上文所定義但氫除外，l1,w1和z1中至少一個(gè)并非不存在，

且r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義,

及其可藥用鹽。

因此，下文流程2中描述了式(ii)的化合物的制備:

流程2

本發(fā)明還提供了制備如上文定義的式(iv)的化合物(即式(iv)’的化合物(其中a’是a，且l1是氫)和式(iv)”的化合物(其中a’是a，且l1不是氫))的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟:

d)將式(xix)的化合物

其中a’是a，其中a如上文所定義,

t如上文所定義，且

bm如上文定義的是式(v)’的結(jié)合部分,

與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19如上文所定義，且

l、w、z和rm如上文所定義，且它們中的至少一個(gè)并非不存在；

e)將生成的式(xxi)的化合物

其中a’是a，其中a如上文所定義，且

t、bm、l、w、z和rm如上文所定義，

與如上文定義的式(xvii)的化合物反應(yīng)；

任選地

f)將生成的式(iv)′的化合物

其中a’是a，其中a如上文所定義，

l、w、z和rm如上文所定義，且它們中的至少一個(gè)并非不存在，

且r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義，

與式(xx)′的化合物反應(yīng)

其中r19如上文所定義，l1如上文所定義但氫除外，且w1、z1和rm1如上文所定義，且它們中的至少一個(gè)并非不存在，得到式(iv)″的化合物

其中l(wèi)1如上文所定義但氫除外，

w1、z1和rm1如上文所定義，且它們中的至少一個(gè)并非不存在

a’是a，其中a如上文所定義,

l、w、z和rm如上文所定義，且

r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義，

及其可藥用鹽。

本發(fā)明還提供了制備如上文定義的式(iv)的化合物、即如上文定義的式(iv)’的化合物和式(iva)”的化合物的方法，其中a’是a，其中a是選自oh、nh2和cooh的飽和的基團(tuán)，且l1不是氫，其特征在于所述方法包括以下步驟:

d’)將式(xix)的化合物與如上文定義的式(xvii)的化合物反應(yīng)；

e’)將生成的式(xv)的化合物

其中a’是a，其中a是選自oh、nh2和cooh的飽和的基團(tuán)

且

r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義，

與如上文定義的式(xx)的化合物反應(yīng)；

任選地

f’)將生成的式(iv)′的化合物

其中a’是a，其中a如上文所定義，且

r1、r2、r3、r4、r6、t、bm、l、w、z和rm如上文所定義，

與上文定義的式(xx)’的化合物反應(yīng)，得到如上文定義的式(iv)″的化合物及可藥用鹽。

或

e″)將如上文定義的式(xv)的化合物與如上文定義的式(xx)′的化合物反應(yīng)；

任選地

f”)將生成的式(iva)”的化合物

其中l(wèi)1如上文所定義但氫除外，l1、w1、z1和rm1如上文所定義，且它們中的至少一個(gè)并非不存在，

a’是a，其中a是選自oh、nh2和cooh的飽和的基團(tuán)，且r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義，

與如上文定義的式(xx)的化合物反應(yīng)，得到如上文定義的式(iv)″的化合物和可藥用鹽。

因此，以下流程3描述了式(iv)的化合物、即如上文定義的式(iv)’、(iv)”或(iva)”的化合物的制備:

流程3

根據(jù)步驟c)、d)、f)、e′)、f′)、e″)和f″)，偶聯(lián)反應(yīng)在有機(jī)溶劑中、優(yōu)選dmf、在縮合劑、例如dcc、edc的存在下進(jìn)行(一般的偶聯(lián)試劑參見例如aminoacids,peptidesandproteinsinorganicchemistry:buildingblocks,catalysisandcouplingchemistry,第3卷；andrewb.hughes,aymanel-faham,fernandoalbericio)。還參見下文實(shí)驗(yàn)部分中報(bào)道的具體的化學(xué)條件。

根據(jù)b)、e)、d’)，偶聯(lián)反應(yīng)優(yōu)選在20℃至回流的溫度范圍、任選地在堿的存在下進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。

式(xvii)和(xix)的化合物是已知的，或者可以通過(guò)本領(lǐng)域中技術(shù)人員已知的方法或如上文引用的gb2344818或j.med.chem.2003,(46)第634-637頁(yè)中報(bào)道的方法制備。

式(xvi)、(xviii)、(xx)和(xx)’的化合物是已知的，或者可以通過(guò)本領(lǐng)域中技術(shù)人員已知的方法或如anticanceragentsinmedchem2008,(8)第618-637頁(yè)中或wo2010/009124中報(bào)道的方法制備。

本發(fā)明還提供了制備如上文定義的式(iv)的化合物、即式(iv)”’的化合物的方法，其中a’不存在，且l1不是氫，其特征在于所述方法包括以下步驟:

e”’)將式(ii)’的化合物

其中a’不存在,

r1、r2、r3、r4、r6和t如上文所定義且

bm是如上文定義的式(v)的結(jié)合部分，

與式(xx)’的化合物反應(yīng)

其中l(wèi)1如上文所定義、但不是氫，且

r19、w1、z1和rm1如上文所定義，得到式(iv)”’的化合物

其中a’不存在，

l1如上文所定義但氫除外，

r1、r2、r3、r4、r6、t和bm如上文所定義，且

w1、z1和rm1如上文所定義，且它們中的至少一個(gè)并非不存在，

及其可藥用鹽。

因此，以下流程4中描述了式(iv)的化合物的制備，其中a’不存在:

流程4

根據(jù)步驟e”’)，偶聯(lián)反應(yīng)如上文e”)所述進(jìn)行。

從上述所有描述中，本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見，當(dāng)根據(jù)任一種上述方法的變化形式制備式(i)、(ii)、(iii)和(iv)的化合物時(shí)，可能產(chǎn)生不需要的副反應(yīng)的原料或其中間體內(nèi)的任選的官能團(tuán)需要根據(jù)常規(guī)技術(shù)適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)。同樣，將后者轉(zhuǎn)化成游離的脫保護(hù)化合物可以根據(jù)已知方法進(jìn)行。

正如易于理解的，如果根據(jù)上述方法制備的式(i)、(ii)、(iii)和(iv)的化合物作為異構(gòu)體混合物得到，則使用常規(guī)技術(shù)將其分離成式(i)、(ii)、(iii)和(iv)的單一異構(gòu)體屬于本發(fā)明的范圍。

優(yōu)選將式(ii)的化合物，其中l(wèi)1如上文所定義但氫除外或

將式(iv)的化合物，其中rm和/或rm1均非不存在，且

r1、r2、r3、r4、r6、t、bm、a’、l、w、z、l1、w1和z1如上文所定義，

g)與式(xxii)的化合物反應(yīng)

r17-rm(xxii)

其中r17如上文所定義，且rm如上文所定義、但并非不存在，得到相應(yīng)的式(iv)的化合物，其中rm如上文所定義、但并非不存在，

然后任選地

h)與式(xxii)′的化合物反應(yīng)

r17-rm1(xxii)′

其中r17如上文所定義，且rm1如上文所定義、但并非不存在，得到相應(yīng)的式(iv)的化合物，其中rm1如上文所定義、但并非不存在。

必須強(qiáng)調(diào)g)和h)中描述的步驟可任選地以相反的順序發(fā)生，即首先進(jìn)行步驟h)，然后進(jìn)行步驟g)。

根據(jù)步驟g)和h)，偶聯(lián)反應(yīng)如上文b)中所述進(jìn)行。

式(xxii)和(xxii)′的化合物為商購(gòu)可得的，或者是已知的化合物，或者可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法或如anticanceragentsinmedchem2008,(8)第618-637頁(yè)中或wo2010/009124中報(bào)道的方法制備。

優(yōu)選將式(xix)的化合物，其中a’是-oh，且t和bm如上文所定義，

i)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19不存在，

l是式(xf’)或(xg’)的基團(tuán)

其中r9是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r9不存在且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

得到式(xi)的化合物

其中a’是–o-，l是式(xf)或(xg)的基團(tuán)，t、w、z和rm如上文所定義，且bm是式(v)’的基團(tuán)；

或

j)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19不存在,

l是式(xh’)或(xi’)的基團(tuán)

其中r9是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r9不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

得到式(xxi)的化合物

其中a’是–o-，l是式(xh)或(xi)的基團(tuán)，且t、bm、l、w、z和rm如上文所定義；

或

k)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19是活化的nh基團(tuán)、優(yōu)選甲苯磺?；?，

l是式–nhcor9(xa)、-nhconh-r9(xb)、-nhcoo-r9(xc),或-nh-r9(xd)的基團(tuán)；

其中r9是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基，且

w、z和rm不存在

或

r9不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

得到式(xxi)的化合物

其中a’是–o-，l是式(xa)至(xd)的基團(tuán)，且t、bm、w、z和rm如上文所定義；

或

l)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19是r17，其中r17是-oh，

l是式(xe)的基團(tuán)

其中

r9和r10各自獨(dú)立地是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r9或r10之一不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

得到式(xxi)的化合物

其中a’是–o-，l是式(xe)的基團(tuán)，且t、bm、w、z和rm如上文所定義。

根據(jù)步驟i)和j)，反應(yīng)在有機(jī)溶劑、優(yōu)選dcm或dmf中、在ptsa的存在下、在20℃至回流的溫度范圍進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。使用文獻(xiàn)中報(bào)道的已知的方法進(jìn)行保護(hù)基團(tuán)的移除(參見例如protectivegroupsinorganicsynthesis；theodoraw.greeen,peterg.m.wuts)。

根據(jù)步驟k)，反應(yīng)在有機(jī)溶劑、優(yōu)選在醚、二噁烷或它們與lihmds的混合物中、在-10℃至50℃的溫度范圍進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。使用文獻(xiàn)中報(bào)道的已知的方法進(jìn)行保護(hù)基團(tuán)的移除(參見例如protectivegroupsinorganicsynthesis；theodoraw.greeen,peterg.m.wuts)。

根據(jù)步驟l)，反應(yīng)在有機(jī)溶劑、優(yōu)選dcm,thf,ch3cn或ccl4中、任選地在堿、優(yōu)選dipea的存在下、在-10℃至50℃的溫度范圍進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。

優(yōu)選將式(xix)的化合物，其中a’是-oh或-nh2，且t和bm如上文所定義

m)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19是r17，其中r17是羧基的活化的部分、優(yōu)選吡咯烷-2,5-二酮-1-基,

l是式(xj)或(xk)的基團(tuán)

其中r9是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r9不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

得到式(xxi)的化合物

其中a’是–o-或-nh，l是式(xj)或(xk)的基團(tuán)，且t、bm、w、z和rm如上文所定義。

根據(jù)步驟m)，偶聯(lián)反應(yīng)在有機(jī)溶劑、優(yōu)選dcm中、在堿性條件、例如tea、dmap中進(jìn)行。該反應(yīng)在0℃至回流的溫度范圍進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。

優(yōu)選將式(xix)的化合物，其中a’是-cooh，且t和bm如上文所定義，

n)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19是氫，

l是式(xm)或(xn)的基團(tuán)

其中

r9和r10各自獨(dú)立地是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r9或r10之一不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

得到式(xxi)的化合物

其中a’是–co-，l是式(xm)或(xn)的基團(tuán)，且t、bm、w、z和rm如上文所定義；

或

o)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中l(wèi)不存在,

w式(xia)至(xie)、(xih)至(xij)是的基團(tuán)

其中r9是氫，

r10是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r10不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

r11和r12如上文所定義,

a1是-ch2-、-ch2n(r12)-或-nr12-，其中r12如上文所定義,得到式(xxi)的化合物

其中a’是–co-，l不存在，w是式(xia)至(xie)、(xih)和(xij)的基團(tuán)，t、bm、w、z和rm如上文所定義。

根據(jù)步驟n)，反應(yīng)在有機(jī)溶劑、優(yōu)選dcm中、在堿性條件、例如tea中、并任選地在縮合劑、例如dcc、edc的存在下、在0℃至回流的溫度范圍進(jìn)行30分鐘至約24小時(shí)。

根據(jù)步驟o)，偶聯(lián)反應(yīng)使用文獻(xiàn)中眾所周知的條件進(jìn)行(參見例如scott,c.j.等j.med.chem.2005,48,1344-1358；aminoacids,peptidesandproteinsinorganicchemistry:buildingblocks,catalysisandcouplingchemistry,第3卷；andrewb.hughes,aymanel-faham,fernandoalbericio)。

優(yōu)選將式(xix)的化合物，其中a’是-oh或-nh2，且t和bm如上文定義，

p)與式(xx)的化合物反應(yīng)

其中r19不存在,

l不存在，

w是式(xia)至(xij)的基團(tuán)

其中r10是-oh,

r9是氫、羥基或選自以下的任選被取代的基團(tuán)：直鏈或支鏈的c1-c4烷基、直鏈或支鏈的c1-c4羥烷基、直鏈或支鏈的c1-c4巰基烷基和直鏈或支鏈的c1-c4氨基烷基且

w、z和rm不存在

或

r9不存在，且

w、z或rm中的至少一個(gè)并非不存在，

r11、r12、m和a1如上文所定義,

得到式(xxi)的化合物

其中a’是–o-或–nh-，l不存在，w是式(xia)至(xii)的基團(tuán)，t、bm、w、z和rm如上文所定義。

根據(jù)步驟p)，偶聯(lián)反應(yīng)如上文o)中所述進(jìn)行。

步驟i)至m)和p)還可以用于將式(iv)′的化合物轉(zhuǎn)化為式(iv)″的化合物(通過(guò)與式(xx)’的化合物反應(yīng)(步驟f))，或者用于將式(xv)的化合物轉(zhuǎn)化為式(iv)″'的化合物(通過(guò)與式(xx)′的化合物反應(yīng)(步驟e″))，或者用于將式(ii)′的化合物轉(zhuǎn)化為式(ii)″的化合物(通過(guò)與式(xviii)的化合物反應(yīng)(步驟c))，或者將式(xv)的化合物轉(zhuǎn)化為式(iv)’的化合物(通過(guò)與式(xx)的化合物反應(yīng)(步驟e’))，或者用于將式(iv)”’的化合物轉(zhuǎn)化為式(iv)”的化合物(通過(guò)與式(xx)的化合物反應(yīng)(步驟f”))。

藥理學(xué)

本發(fā)明的化合物可用作抗腫瘤劑。

因此可通過(guò)包括向其施用藥物有效量的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物的方法治療哺乳動(dòng)物、例如人或動(dòng)物。

以該方法可改進(jìn)或改善人或動(dòng)物的病癥。

如下文所述進(jìn)行式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物的細(xì)胞毒性的評(píng)價(jià)。

體外細(xì)胞增殖試驗(yàn)

將a2780人卵巢細(xì)胞和mcf7人乳腺癌細(xì)胞(1250細(xì)胞/孔)接種于白色384孔板完全培養(yǎng)基(rpmi1640或emem加10％胎牛血清)中，在接種后24h用溶解于0.1％dmso中的化合物處理。將細(xì)胞在37℃和5％co2下溫育，72小時(shí)后，按照生產(chǎn)商的指示celltiter-gloassay(promega)處理板。

celltiter-glo是基于對(duì)存在的atp(是代謝活性細(xì)胞的指示物)定量的同源方法。使用基于熒光素酶和導(dǎo)致光產(chǎn)生的d-熒光素的系統(tǒng)將atp定量。熒光信號(hào)與存在于培養(yǎng)物中的細(xì)胞數(shù)成比例。

簡(jiǎn)單而言，將25μl/孔的試劑溶液加入至每孔，振蕩5分鐘后通過(guò)光度計(jì)讀取微量培養(yǎng)板。熒光信號(hào)與存在于培養(yǎng)物中的細(xì)胞數(shù)成比例。

在上文所述的特異性的體外細(xì)胞增殖試驗(yàn)中測(cè)試本發(fā)明的代表性的式(i)或(ii)的化合物。

所有測(cè)試的化合物在a2780人卵巢癌細(xì)胞中具有<0.5μm(<500nm)的ic50值。

具體而言，化合物7、9、23、6、1和5具有<50nm的ic50值；化合物22、17和20具有<0.1nm的ic50值；化合物18、8和37具有<0.01nm的ic50值。

如本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的，所有這些代表性的化合物因此在抗腫瘤治療法中特別有利。

此外，本發(fā)明的官能團(tuán)化的式(iii)或(iv)的化合物適用于綴合。

已經(jīng)通過(guò)將式(iii)或(iv)的官能團(tuán)化的衍生物與親核基團(tuán)、諸如半胱氨酸氨基酸的sh基團(tuán)綴合評(píng)價(jià)了式(iii)或(iv)的官能團(tuán)化的衍生物綴合的能力。

綴合物的制備

將2nmol半胱氨酸(mw121da)與2nmol官能團(tuán)化的式(iv)的化合物、即化合物54(mw1221da)反應(yīng)。

將該反應(yīng)混合物在21℃、在borate緩沖液(50mmph8)、2mmdtpa、50mmnacl的存在下溫育1h，得到綴合物a1(m/z＝1343(mh+))，然后在配備agilent1946單四極質(zhì)譜檢測(cè)器(具有正交式esi源)的1100agilenthplc裝置上使用反相hplc方法(plrp-s柱，1000a8um150x2.1mm)進(jìn)行hplcesi-ms分析。

圖1顯示綴合物a1的質(zhì)譜圖，并在x軸報(bào)道了分子量(m/z)，而在y軸報(bào)道了表示為每秒計(jì)數(shù)(cps)的強(qiáng)度。

圖2顯示綴合物a1的hplc圖，并在x軸報(bào)道了時(shí)間(min)，而在y軸報(bào)道了uv吸光度(mau)。

藥物部分從綴合物的釋放

舉例來(lái)說(shuō)，即不意欲顯示本發(fā)明的范圍，如下文所報(bào)道在組織蛋白酶的存在下進(jìn)行式(ii)的化合物從綴合物的釋放。

將綴合物a1用0.2單位的組織蛋白酶b在醋酸鈉緩沖液(ph5.5)和1mmcys中在40℃溫育2小時(shí)。

綴合物a1的消失和相應(yīng)的式(ii)的化合物、即化合物37、及其前體a3的釋放證實(shí)綴合物的z肽連接基的破裂。

通過(guò)hplcesi-ms分析觀測(cè)到了式(ii)的化合物從綴合物完全釋放。

圖3顯示在用組織蛋白酶處理綴合物a1達(dá)2h后的hplc圖，并在x軸上報(bào)道了時(shí)間(min)，而在y軸上報(bào)道了uv吸光度(mau)。

圖4a顯示釋放的化合物37的質(zhì)譜圖，并在x軸上報(bào)道了分子量(m/z)，而在y軸上報(bào)道了表示為每秒計(jì)數(shù)(cps)的強(qiáng)度。

圖4b顯示釋放的化合物a3、37的前體的質(zhì)譜圖，并在x軸上報(bào)道了分子量(m/z)，而在y軸上報(bào)道了表示為每秒計(jì)數(shù)(cps)的強(qiáng)度。

本發(fā)明化合物可以作為單獨(dú)活性劑施用，或者，與已知的抗癌治療例如與下述藥劑組合的放射治療或化學(xué)療法組合：細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑或細(xì)胞毒活性劑、抗生素類藥、烷化劑、抗代謝劑、激素藥劑、免疫劑、干擾素類藥、環(huán)氧化酶抑制劑(例如cox-2抑制劑)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑、端粒酶抑制劑、酪氨酸激酶抑制劑、抗生長(zhǎng)因子受體劑、抗her劑、抗egfr劑、抗血管生成藥(例如血管生成抑制劑)、法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、ras-raf信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、其它c(diǎn)dk抑制劑、微管蛋白結(jié)合劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶i抑制劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶ii抑制劑等。

如果制成固定劑量，所述組合產(chǎn)品在下述劑量范圍內(nèi)使用本發(fā)明的化合物，并在批準(zhǔn)的劑量范圍內(nèi)使用其它藥學(xué)活性劑。

當(dāng)組合制劑不合適時(shí)，式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物可以與已知抗癌藥依次使用。

適合于給哺乳動(dòng)物(例如人)施用的本發(fā)明的式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的化合物可以通過(guò)常用途徑施用，并根據(jù)患者的年齡、體重、情況及施用途徑來(lái)決定劑量水平。

例如，口服施用式(i)化合物的合適劑量可以為約1至約300mg/劑，每天1至5次?？梢砸愿鞣N劑型施用本發(fā)明化合物，例如口服，以片劑、膠囊、糖衣片劑或膜包衣片劑，液體溶液或混懸劑的形式；直腸，以栓劑形式；腸胃外，例如皮下、肌肉內(nèi)、或通過(guò)靜脈內(nèi)和/或鞘內(nèi)和/或脊柱內(nèi)注射或灌輸。

本發(fā)明還包括藥物組合物，其包括式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的賦形劑(可以為載體或稀釋劑)。

含有本發(fā)明化合物的藥物組合物通常根據(jù)常規(guī)方法制備并以合適的藥學(xué)形式施用。例如，固體口服形式可以包含活性化合物與稀釋劑(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、纖維素、玉米淀粉或馬鈴薯淀粉)；潤(rùn)滑劑(例如硅石、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂或硬脂酸鈣和/或聚乙二醇)；粘合劑(例如淀粉、阿拉伯膠、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮)；崩解劑(例如淀粉、藻酸、藻酸鹽或羥乙酸淀粉鈉)；泡騰混合物；染料；甜味劑；潤(rùn)濕劑(例如卵磷脂、聚山梨醇酯、十二烷基硫酸鹽)；和通常在藥學(xué)制劑中使用的無(wú)毒和藥學(xué)惰性物質(zhì)。這些藥學(xué)制劑可以用已知的方法制備，例如通過(guò)混合、成粒、壓片、糖包衣或膜包衣方法。

口服施用的液體分散劑例如可以是糖漿、乳劑和混懸液。例如，糖漿劑包含蔗糖、或蔗糖與甘油和/或甘露糖醇和山梨醇作為載體。

混懸液和乳劑可以包含例如天然膠、瓊脂、藻酸鈉、果膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素、或聚乙烯醇作為載體實(shí)例。肌肉內(nèi)注射的混懸液或溶液可以包含活性化合物與藥學(xué)上可接受載體，例如無(wú)菌水、橄欖油、油酸乙酯、二醇(例如丙二醇)、和如果需要的話，合適量的鹽酸利多卡因。靜脈內(nèi)注射或輸注用溶液可以包含無(wú)菌水作為載體，或優(yōu)選可以以無(wú)菌等滲水性鹽溶液的形式或可以包含丙二醇作為載體。栓劑可以包含活性化合物與藥學(xué)上可接受的載體，例如可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯表面活性劑或卵磷脂。

為了更好的闡明本發(fā)明而不對(duì)其進(jìn)行任何限制，現(xiàn)在給出下述實(shí)施例。

實(shí)施例

在以下實(shí)施例中描述了本發(fā)明式(i)的一些化合物的合成制備。如下列實(shí)施例制備的本發(fā)明化合物還通過(guò)¹h-nmr和/或確切的質(zhì)譜數(shù)據(jù)esi(+)進(jìn)行表征。

在25℃的恒溫、在裝備有5mm¹h{¹³c,¹⁵n}z軸pfgindirectdetectioncold-probe的或可選擇地裝備有5mm¹h{¹³c-¹⁵n}z軸pfgtripleresonanaceprobe的varianinova500光譜儀(對(duì)于¹h在499.8mhz運(yùn)行，對(duì)于¹³c在125.8mhz運(yùn)行，且對(duì)于¹⁵n在50.6mhz運(yùn)行)上記錄¹h-nmr光譜。

化學(xué)位移參照殘余溶劑信號(hào)。將數(shù)據(jù)報(bào)道如下：化學(xué)位移(δ)，峰裂數(shù)(s＝單峰、d＝二重峰、t＝三重峰、q＝四重峰、br.s＝寬單峰、td＝雙三重峰、dd＝雙二重峰、ddd＝雙雙二重峰、m＝多重峰)、偶合常數(shù)(hz),和質(zhì)子數(shù)。

精確質(zhì)量數(shù)esi(+)經(jīng)直接連接于如前所述的agilent1100micro-hplc系統(tǒng)的watersq-tofultima質(zhì)譜儀獲得(m.colombo,f.riccardi-sirtori,v.rizzo,rapidcommun.massspectrom.2004,18,511-517)。

在如下實(shí)施例和本申請(qǐng)的上下文中，下列縮寫具有如下含義。如果不定義，則術(shù)語(yǔ)具有其普遍可接受的含義。

實(shí)施例1

步驟b，步驟a

n-(6-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-3-基)-1h-吲哚-6-甲酰胺[(ii)](化合物1)

步驟b

將如gb2344818中報(bào)道制備的(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-醇(xvii)(14.2mg，0.0563mmol)的溶液溶于干燥的dmf(1.5ml)中，并用edci(43mg，4當(dāng)量)和3-[(1h-吲哚-6-基羰基)氨基]-1h-吲哚-6-甲酸(xvi)(27mg，1.5當(dāng)量)處理。將該混合物在室溫?cái)嚢?6h，然后通過(guò)加入飽和的nacl水溶液淬滅。通過(guò)以下步驟進(jìn)行產(chǎn)物分離：用etoac萃取(x4)，隨后將合并的有機(jī)層用2mhcl水溶液(x3)、飽和的na2co3水溶液(x3)和飽和的nacl水溶液(x3)洗滌。將有機(jī)層干燥(na2so4)，在真空下濃縮。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(己烷-丙酮6:4)，得到標(biāo)題化合物(18.7mg，60％)。

esims:m/z555(mh+)

類似地，通過(guò)使用相應(yīng)的羧酸，制備了以下化合物:

n-(5-{[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-1-甲基-4-{[(1-甲基-4-硝基-1h-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1h-吡咯-2-甲酰胺[(ii)](化合物2)

esims:m/z650(mh+)

(2e)-1-[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮[(ii)](化合物3)

esims:m/z424(mh+)

(2e)-1-[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮[(ii)](化合物4)

esims:m/z424(mh+)

n-(3-{(1e)-3-[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(ii)](化合物13)

esims:m/z582(mh+)

n-(3-{(1e)-3-[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(ii)](化合物14)

esims:m/z582(mh+)

(2e)-1-[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]-3-(1h-吲哚-3-基)丙-2-烯-1-酮[(ii)](化合物43)

esims:m/z423(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm2.60(d,j＝1.0hz,3h)3.58(m,1h)3.88(m,j＝11.2,1.9hz,1h)4.2(m,1h)4.46(t,j＝9.5hz,1h)4.63(d,j＝10.6hz,1h)7.07(d,j＝15.4hz,1h)7.24(m,2h)7.32(m,1h)7.53(m,1h)7.91(m,1h)8.02(m,2h)8.13(br.s.,1h)9.26(br.s.,1h)10.81(br.s.,1h)

n-(2-{[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1-甲基-1h-吲哚-5-基)-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酰胺[(ii)](化合物44)

esims:m/z583(mh+)

步驟a

n-(6-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-3-基)-1h-吲哚-6-甲酰胺[(i)](化合物5)

將化合物1(25mg，0.045mmol)溶于dmf(2ml)中，并用nahco3在水中的溶液(1ml，15mgnahco3/ml)處理。將該反應(yīng)混合物攪拌2h，加入etoac，并將得到的有機(jī)層用鹽水洗滌(x4)，干燥(na2so4)，并在真空下濃縮。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(己烷-丙酮6:4)，得到化合物5(19mg，82％)。

esims:m/z519(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.75(t,j＝4.8hz,1h)2.27(s,3h)2.32(dd,j＝7.6,4.6hz,1h)3.40(dt,j＝7.5,4.9hz,1h)4.13(d,j＝11.3hz,1h)4.30(dd,j＝11.1,4.7hz,1h)5.78(s,1h)6.57(br.s.,1h)7.32(dd,j＝8.4,0.7hz,1h)7.44(s,1h)7.52(t,j＝2.7hz,1h)7.67(d,j＝8.2hz,1h)7.79(m,2h)8.00(d,j＝8.2hz,1h)8.22(d,j＝2.7hz,2h)9.51(s,1h)10.45(br.s,1h)10.61(br.s,1h)

類似地，通過(guò)使用相應(yīng)的羧酸，制備了以下化合物:

1-甲基-n-(1-甲基-5-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吡咯-3-基)-4-{[(1-甲基-4-硝基-1h-吡咯-2-基)羰基]氨基}-1h-吡咯-2-甲酰胺[(i)](化合物6)

esims:m/z614(mh+)

¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm1.52(t,j＝4.9hz,1h)2.21(s,3h)2.28(dd,j＝7.6,4.3hz,1h)3.43(dt,j＝7.8,5.2hz,1h)3.76(s,3h)3.86(s,3h)3.96(s,3h)4.16(d,j＝10.7hz,1h)4.29(dd,j＝10.6,4.8hz,1h)6.30(s,1h)6.77(d,j＝1.7hz,1h)7.08(d,j＝1.8hz,1h)7.25(d,j＝1.7hz,1h)7.48(d,j＝1.7hz,1h)7.58(t,j＝1.9hz,2h)8.19(d,j＝1.8hz,1h)10.00(s,1h)10.30(s,1h)

(3bs,4ar)-3-甲基-6-[(2e)-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯?；鵠-4,4a,5,6-四氫-8h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮[(i)](化合物7)

esims:m/z388(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.45(t,j＝4.8hz,1h)2.19(dd,j＝7.6,4.5hz,1h)2.26(d,j＝0.7hz,3h)3.44(dt,j＝7.7,4.8hz,1h)4.40(dd,j＝10.4,4.8hz,1h)4.51(d,j＝10.3hz,1h)6.98(d,j＝15.4hz,1h)7.08(br.s.,1h)7.24(dd,j＝7.9,4.7hz,1h)7.44(s,1h)7.98(d,j＝15.4hz,1h)8.09(s,1h)8.34(dd,j＝4.8,1.5hz,1h)8.41(dd,j＝7.8,1.3hz,1h)11.30(s,1h)

(3br,4as)-3-甲基-6-[(2e)-3-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙-2-烯酰基]-4,4a,5,6-四氫-8h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-8-酮[(i)](化合物8)

esims:m/z388(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.45(t,j＝4.9hz,1h)2.16-2.21(m,1h)2.26(s,3h)3.44(dt,j＝7.7,4.9hz,1h)4.40(dd,j＝10.4,5.1hz,1h)4.51(d,j＝10.4hz,1h)6.98(d,j＝15.4hz,1h)7.08(br.s.,1h)7.24(dd,j＝7.8,4.5hz,1h)7.44(s,1h)7.98(d,j＝15.4hz,1h)8.09(s,1h)8.34(dd,j＝4.7,1.1hz,1h)8.41(d,j＝7.8hz,1h)11.29(br.s.,1h)

n-(3-{(1e)-3-[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物15)

esims:m/z546(mh+)

n-(3-{(1e)-3-[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物16)

esims:m/z546(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1,58(m,1h)2,24(m,1h)2.27(s,3h)3.47(dt,j＝7.6,4.9hz,1h)4.39(dd,j＝10.2,4.9hz,1h)4.48(m,1h)6.96(d,j＝15.1hz,1h)7.01(s,1h)7.12(m,2h)7.28(m,1h)7.40(d,j＝1.8hz,1h)7.45(s,1h)7.61(d,j＝8.3hz,1h)7.70(d,j＝8.1hz,1h)7.98(m,1h)8.09(d,j＝2.8hz,1h)8.76(d,j＝2.0hz,1h)8.87(d,j＝2.0hz,1h)9.76(br.s.,1h)10.97(br.s.,1h)11.32(br.s.,1h)

1-甲基-n-(1-甲基-2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物45)

esims:m/z547(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.65(t,j＝4.9hz,1h)2.27(d,j＝12.4hz,1h)2.27(d,j＝0.7hz,3h)3.43(dt,j＝7.6,4.89hz,1h)3.93(s,3h)4.12(s,3h)4.38(d,j＝11.1hz,1h)4.51(dd,j＝10.8,4.8hz,1h)6.52(s,1h)7.08(s,1h)7.13(m,1h)7.26(s,1h)7.32(td,j＝7.7,1.0hz,1h)7.47(d,j＝1.0hz,1h)7.54(m,2h)7.66(d,j＝7.8hz,1h)7.71(dd,j＝9.1,2.0hz,1h)8.29(d,j＝2.0hz,1h)9.54(s,1h)

實(shí)施例2

{2-[(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲?；鵠-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯[(ii)](化合物18)

步驟b，脫保護(hù)，步驟a

步驟b

將如gb2344818中報(bào)道制備的(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-醇((xvii)，11.4mg，0.045mmol)的溶液溶于干燥的dmf(1ml)中，并用edci(35mg，4當(dāng)量)和5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-甲酸(xvi)(29mg，1.5當(dāng)量)處理。將該混合物在室溫?cái)嚢?6h，然后通過(guò)加入飽和的nacl水溶液淬滅。通過(guò)以下步驟進(jìn)行產(chǎn)物分離：用etoac萃取(x4)，隨后將合并的有機(jī)層用2mhcl水溶液(x3)、飽和的na2co3水溶液(x3)和飽和的nacl水溶液(x3)洗滌。將有機(jī)層干燥(na2so4)，在真空下濃縮，得到標(biāo)題化合物18，然后將其經(jīng)快速色譜純化(己烷-丙酮1:1)。

esims:m/z670(mh⁺)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.50(s,9h)1.79(dt,j＝6.4,3.3hz,1h)2.61(s,2h)3.53-3.66(m,1h)3.89(dd,j＝11.4,2.8hz,1h)4.25(m,1h)4.73(m,1h)4.84(d,j＝10.6hz,1h)7.21(s,1h)7.26(s,1h)7.34(m,2h)7.49(d,j＝8.8hz,1h)7.56(m,1h)7.61(m,1h)7.96(br.s.,2h)8.21(br.s.,1h)8.34(s,1h)9.28(s,1h)9.52(s,1h)10.73(br.s.,1h)10.80(br.s.,1h)。

通過(guò)脫保護(hù)獲得了以下的化合物:

5-氨基-n-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-5a,7,8,8a-四氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(ii)](化合物19)

將化合物18(18mg，0.0268mmol)在3.5mhcl-etoac(5ml)中的溶液攪拌30分鐘，隨后在穩(wěn)定的氮?dú)饬飨鲁ト軇玫交衔?的鹽酸鹽衍生物(15mg，89％)。

esims:m/z570(mh⁺)

步驟a

{2-[(2-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯[(i)](化合物20)

將化合物18(30mg，0.045mmol)溶于dmf(1ml)中，并用nahco3水溶液(0.5ml，15mgnahco3/ml)處理。將該反應(yīng)混合物攪拌2h，加入etoac，并將得到的有機(jī)層用鹽水洗滌(x4)，干燥(na2so4)，并在真空下濃縮。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(己烷-丙酮6:4)，得到最終化合物20(9mg，31％)。

esims:m/z634(mh⁺)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.41(s,9h)1.56(t,j＝4.8hz,1h)2.22(m,1h)2.29(d,j＝0.9hz,3h)3.52(m,1h)4.69(m,2h)7.06(s,1h)7.26(d,j＝1.5hz,1h)7.28(d,j＝1.8hz,1h)7.36(dd,j＝8.8,1.8hz,1h)7.48(m,1h)7.49(d,j＝8.8hz,1h)7.58(m,1h)7.63(m,1h)7.96(br.s.,1h)8.26(br.s.,1h)8.35(s,1h)9.55(s,1h)10.77(br.s.,1h)10.95(br.s.,1h)

通過(guò)脫保護(hù)，制備了以下的化合物:

5-氨基-n-(2-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物21)

esims:m/z534(mh⁺)

通過(guò)類似的方法、并使用適合的原料制備了以下的化合物:

{2-[(2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲酰基]-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯[(i)](化合物25)

esims:m/z634(mh⁺)

5-氨基-n-(2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物26)

esims:m/z534(mh⁺)

n-(2-{[(3br,4as)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-硝基-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物29)

esims:m/z564(mh⁺)

n-(2-{[(3bs,4ar)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-硝基-1h-吲哚-2-甲酰胺[(i)](化合物30)

esims:m/z564(mh⁺)

實(shí)施例3

步驟b，脫保護(hù)，步驟a

步驟b

中間體

(8r)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-4-(芐基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺

將如j.med.chem.2004,47,2611-2623中報(bào)道制備的4-氨基-n-[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺(155mg，0.341mmol)、三乙胺(0.048ml，0.341mmol)和cdi(300mg，1.71mmol)在干燥的dmf(5ml)中的溶液在室溫?cái)嚢?h。將溶劑蒸發(fā)后，將殘余物用thf處理，并攪拌過(guò)夜。將沉淀物(化合物xvi)過(guò)濾，在真空下在50℃干燥，在nahco3(4mg，0.047mmol)的存在下用在干燥的dmf(2ml)中的(8r)-4-(芐基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚(化合物(xvii)(15.5mg，0.045mmol，如gb2344818中報(bào)道制備)處理，并在氮?dú)夥障略谑覝財(cái)嚢?6h。將溶劑蒸發(fā)后，將殘余物經(jīng)快速色譜純化(dcm-meoh95:5)，得到中間體(30mg，80％)。

esims:m/z824(mh+)

¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm2.31(t,j＝7.2hz,2h)2.53(s,3h)3.53(t,j＝10.4hz,1h)3.80(s,3h)3.85(s,3h)3.87(s,3h)4.12(m,1h)4.18(m,1h)4.32(d,j＝10.4hz,1h)5.27(s,2h)6.83(d,j＝1.7hz,1h)6.84(m,1h)7.05(m,2h)7.13(d,j＝1.5hz,1h)7.20(d,j＝1.5hz,1h)7.25(d,j＝1.5hz,1h)7.36(m,2h)7.41(s,1h)7.43(m,2h)7.50(d,j＝7.3hz,2h)7.99(m,2h)8.77(s,1h)9.91(s,1h)9.93(s,1h)

類似地，通過(guò)使用相應(yīng)的?；苌?，制備了以下的化合物:

(8s)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-4-(芐基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺

esims:m/z824(mh+)

n-(2-{[(8s)-4-(芐基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-甲酰胺

esims:m/z758(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.74(m,4h)2.59(m,4h)2.63(d,j＝1.0hz,3h)2.86(m,2h)3.65(dd,j＝11.4,9.6hz,1h)3.93(dd,j＝11.4,2.4hz,1h)4.12(t,j＝6.1hz,2h)4.29(m,1h)4.77(m,1h)4.87(m,1h)5.36(m,2h)6.94(dd,j＝8.8,2.3hz,1h)7.15(d,j＝2.3hz,1h)7.25(m,2h)7.35(m,1h)7.38(d,j＝1.0hz,1h)7.43(m,2h)7.49(d,j＝9.1hz,1h)7.58(m,3h)7.63(m,1h)8.18(br.s.,1h)8.37(d,j＝1.3hz,1h)9.52(s,1h)10.77(br.s.,1h)10.87(br.s.,1h)

[(8s)-4-(芐基氧基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}甲酮鹽酸鹽

esims:m/z600(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm2.06(m,4h)2.62(d,j＝1.0hz,3h)3.02-3.32(m,2h)3.56(br.s.,2h)3.63(dd,j＝11.4,9.6hz,1h)3.91(dd,j＝11.4,2.4hz,1h)4.27(m,1h)4.57(br.s.,2h)4.73(dd,j＝10.2,8.2hz,1h)4.84(m,1h)5.35(m,2h)7.05(dd,j＝8.8,2.3hz,1h)7.16(d,j＝1.7hz,1h)7.31(d,j＝1.8hz,1h)7.35(m,1h)7.38(d,j＝1.0hz,1h)7.43(m,2h)7.52(d,j＝9.1hz,1h)7.57(d,j＝7.6hz,2h)8.16(br.s.,1h)10.80(br.s.,1h)13.38(br.s.,1h)

脫保護(hù)

(8r)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲酰基]-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲酰基}-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺[(ii)](化合物10)

將中間體(15mg，0.0182mmol)、25％hco2nh4水溶液(0.15ml)和10％pd-c(15mg)在thf(3ml)中的溶液在氮?dú)夥障聰嚢?h。將該反應(yīng)混合物經(jīng)celite過(guò)濾，濃縮，色譜純化(dcm-meoh10:1)后，得到化合物10(6.7mg，50％)。

esims:m/z734(mh+)

類似地制備了以下的化合物:

(8s)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲?；?-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-甲酰胺[(ii)](化合物11)

esims:m/z734(mh+)

n-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-甲酰胺[(ii)](化合物17)

esims:m/z668(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm2.19-2.25(m,4h)2.60(s,3h)3.39(br.s.,2h)3.81(m,2h)3.88(dd,j＝11.1,2.5hz,1h)3.91-3.96(br.s,2h)4.24(m,1h)4.51(m,1h)4.72(dd,j＝10.8,7.8hz,1h)4.80-4.82(d,j＝10.8,1h)7.01(dd,j＝8.9,2.4hz,1h)7.22(s,1h)7.26(d,j＝2.3hz,1h)7.28(s,1h)7.33(s,1h)7.49(d,j＝8.9hz,1h)7.55(m,1h)7.60(m,1h)7.90(br.s.,1h)8.29(d,j＝1.8hz,1h)

[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}甲酮鹽酸鹽[(ii)](化合物37)

esims:m/z510(mh+)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm2.10-2.29(m,4h)2.58(d,j＝1.3hz,3h)3.33(m,2h)3.54(dd,j＝11.4,10.1hz,1h)3.80(m,2h)3.89(m,3h)4.20(m,1h)4.51(m,2h)4.68(dd,j＝10.2,8.2hz,1h)4.77(m,1h)7.04(dd,j＝8.9,2.4hz,1h)7.12(s,1h)7.29(d,j＝2.3hz,1h)7.31(d,j＝0.5hz,1h)7.49(d,j＝8.9hz,1h)7.87(br.s.,1h)

[(8r)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}甲酮鹽酸鹽[(ii)](化合物38)

esims:m/z510(mh+)

步驟a

將化合物10(5mg，0.0068mmol)在dmf(5ml)中的溶液用nahco3的水溶液(3ml，15mgnahco3/ml)處理。將該反應(yīng)混合物攪拌4h，加入etoac，并將得到的有機(jī)層用鹽水洗滌(x4)，干燥(na2so4)，并在真空下濃縮。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(dcm-meoh10:1)，得到化合物9(3.9mg，82％)。

(3bs,4ar)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-甲酰胺[(i)](化合物9)

esims:m/z698(mh+)

¹hnmr(500mhz,二氯甲烷-d2)δppm1.37(m,1h)2.12(dd,j＝7.6,4.6hz,1h)2.18(d,j＝0.9hz,3h)2.47(t,j＝6.6hz,2h)3.26(dt,j＝7.6,5.0hz,1h)3.53(t,j＝6.6hz,2h)3.85(s,3h)3.88(s,6h)4.05(d,j＝10.4hz,1h)4.14(m,1h)6.64(d,j＝2.1hz,1h)6.73(s,1h)6.82(m,2h)6.99(d,j＝1.8hz,1h)7.17(d,j＝1.8hz,1h)7.20(d,j＝1.8hz,1h)7.29(d,j＝0.9hz,1h)

類似地制備了以下的化合物:

(3br,4as)-n-(5-{[5-({5-[(3-氨基-3-氧代丙基)氨基甲?；鵠-1-甲基-1h-吡咯-3-基}氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基]氨基甲?；鶀-1-甲基-1h-吡咯-3-基)-3-甲基-8-氧代-4a,5-二氫-4h-環(huán)丙并[c]噻吩并[3,2-e]吲哚-6(8h)-甲酰胺[(i)](化合物12)

esims:m/z698(mh+)

實(shí)施例4

步驟c，脫保護(hù)

步驟c

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物22)

向{2-[(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)氨基甲?；鵠-1h-吲哚-5-基}氨基甲酸叔丁酯(化合物18)(42mg，0.064mmol)在干燥的dcm(6ml)中的溶液中加入4-甲基哌嗪-1-羰基氯鹽酸鹽(xiii)(39mg，0.193mmol)和n,n-二甲基氨基吡啶(27mg，0.212mmol)。將該反應(yīng)混合物在室溫在氮?dú)夥障聰嚢?6h。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物溶于etoac中，將得到的有機(jī)層用鹽水洗滌(x3)，干燥(na2so4)，并在真空下濃縮。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(dcm-meoh95:5)，得到化合物22(30mg，59％)。

esims:m/z796(mh⁺)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm2.22(s,3h)2.65(d,j＝0.9hz,3h)2.39–2.91(m,4h)3.72(dd,j＝11.6,9.5hz,1h)3.96(dd,j＝11.6,3.1hz,1h)3.49-4.14(m,4h)4.37(m,1h)4.79-4.85(m,1h)4.87-4.93(m,1h)7.27(d,j＝1.5hz,1h)7.28(s,1h)7.34-7.38(m,1h)7.41(s,1h)7.50(d,j＝8.8hz,1h)7.56(d,j＝8.5hz,1h)7.62-7.65(m,1h)7.96(br.s.,1h)8.38(s,1h)9.60(s,1h)10.86(br.s.,1h)10.90(br.s.,1h)

通過(guò)類似的方法制備了以下的產(chǎn)物:

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-6-({5-[({5-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物27)

esims:m/z796(mh⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物31)

esims:m/z726(mh⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(5-{[(5-硝基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物32)

esims:m/z726(mh⁺)

脫保護(hù)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-6-[(5-{[(5-氨基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯鹽酸鹽[(ii)](化合物23)

將化合物22(22mg，0.0276mmol)在3.5mhcl-etoac(5ml)中的溶液攪拌30分鐘，隨后在穩(wěn)定的氮?dú)饬飨鲁ト軇?，得到所需產(chǎn)物，為鹽酸鹽(18mg，89％)。

esims:m/z696(mh⁺)

¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm2.59(s,3h)2.76(br.s,3h)3.05–3.42(m,4h)3.75(dd,j＝10.8,7.9hz,1h)3.95-4.01(m,1h)3.58–4.08(m,4h)4.32-4.40(m,1h)4.67(d,j＝11.1hz,1h)4.75-4.83(m,1h)6.92(br.s.,1h)7.21(br.s.,1h)7.23(s,1h)7.30(br.s.,1h)7.37(d,j＝8.4hz,1h)7.49-7.52(m,1h)7.55(s,1h)7.57-7.60(m,1h)8.16(s,1h)8.24(s,1h)10.15(br.s.,1h)11.67(br.s.,1h)11.70(s,1h)

通過(guò)類似的方法制備了以下的產(chǎn)物:

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-6-[(5-{[(5-氨基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-8-(氯甲基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯鹽酸鹽[(ii)](化合物28)

esims:m/z696(mh⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8s)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羥基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物33)

esims:m/z697(mh⁺)

4-甲基哌嗪-1-甲酸(8r)-8-(氯甲基)-6-[(5-{[(5-羥基-1h-吲哚-2-基)羰基]氨基}-1h-吲哚-2-基)羰基]-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物34)

esims:m/z697(mh⁺)

實(shí)施例5

步驟c，脫保護(hù)

步驟c

哌嗪-1,4-二甲酸叔丁酯(8s)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1h-吲哚-2-基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)]的制備

將如gb2344818中報(bào)道制備的n-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-1h-吲哚-2-甲酰胺(111mg,0.2mmol)溶于干燥的dcm(15ml)中，并向該溶液中加入4-(氯羰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.4mmol)和n,n-二甲基氨基吡啶(55mg，0.45mmol)。將該反應(yīng)混合物在室溫在氮?dú)夥障聰嚢?6h。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物溶于etoac中，將得到的有機(jī)層用鹽水洗滌(x4)，干燥(na2so4)，并在真空下濃縮。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(己烷-丙酮7:3)，得到標(biāo)題化合物(30mg，19％)。

esims:m/z767(mh⁺)

¹hnmr(500mhz,丙酮-d6)δppm1.48(s,9h)2.65(d,j＝1.01hz,3h)3.55(br.s.,4h)3.60(br.s.,2h)3.73(dd,j＝11.36,9.59hz,1h)3.79(br.s.,2h)3.97(dd,j＝11.36,2.78hz,1h)4.33-4.42(m,1h)4.80-4.86(m,1h)4.89-4.94(m,1h)7.10(t,j＝7.19hz,1h)7.23-7.27(m,1h)7.28(s,1h)7.34(d,j＝1.51hz,1h)7.42(s,1h)7.53-7.57(m,1h)7.60(d,j＝8.08hz,1h)7.61-7.65(m,1h)7.67(d,j＝8.08hz,1h)8.29(s,1h)8.38(d,j＝1.26hz,1h)9.56(s,1h)10.89(br.s.,2h)。

脫保護(hù)

哌嗪-1-甲酸(8s)-8-(氯甲基)-6-({5-[(1h-吲哚-2-基羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基酯[(ii)](化合物24)

將中間體(25mg，0.0326mmol)在3.5mhcl-etoac(5ml)中的溶液攪拌2h。將溶劑在穩(wěn)定的氮?dú)饬飨抡舭l(fā)后，將殘余物在真空下干燥，得到化合物9(11mg，48％)。

esims:m/z667(mh⁺)

實(shí)施例6

步驟e”’

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-纈氨酰-n～5～-氨基甲?；?n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物35)

步驟e”’

向n-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-甲酰胺(化合物17)(5mg，0.0071mmol)在dcm(1ml)和thf(0.5ml)中的溶液中加入氯甲酸4-硝基苯酯(3.1mg，0.0156mmol)和三乙胺(2.2ml，0.0156mmol)。將得到的混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。

加入n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-{4-[({[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基](甲基)氨基甲?；鶀氧基)甲基]苯基}-l-鳥氨酰胺(xx)’(16mg，0.018mmol)和三乙胺(3ml，0.021mmol)。將由此得到的混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，用dcm稀釋，并用飽和的nahco3水溶液洗滌。將粗制的殘余物經(jīng)快速色譜純化(dcm-meoh100:15)，得到標(biāo)題化合物(2mg，20％)。

esims:m/z1422(mh+)

¹hnmr(500mhz,甲醇-d3)δppm0.82–1.45(m29h)2.68(s,3h)2.90-3.61(m,20h)3.84–4.34(m,8h)4.49(m,1h)5.04–5.14(m,2h)6.70–6.77(m,2h)7.01(dd,j＝9.0,2.4,1h)7.18–7.71(m,11h)8.11(br.s.,2h)

類似地制備了以下的化合物:

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n～5～-氨基甲?；?n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物36)。

esims:m/z1422(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物39)。

esims:m/z1264(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{3-[({[(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物40)。

esims:m/z1264(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[(3-{[({(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2e)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}丙-2-烯?；鵠-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物41)。

esims:m/z1290(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[(3-{[({(8r)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-[(2e)-3-{5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}丙-2-烯?；鵠-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基}氧基)羰基](甲基)氨基}-2,2-二甲基丙基)(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物42)。

esims:m/z1290(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(iv)](化合物46)

esims:m/z1483(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{3-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]-2,2-二甲基丙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(iv)](化合物47)

esims:m/z1325(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(iv)](化合物48)

esims:m/z1441(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-苯基丙氨酰-l-亮氨酰-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]甘氨酰胺[(iv)](化合物49)

esims:m/z1283(mh+)

實(shí)施例7

步驟c，脫保護(hù)，步驟g

步驟c

n-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(ii)]

在0℃在氮?dú)夥障孪騨-(2-{[(8s)-8-(氯甲基)-4-羥基-1-甲基-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-6-基]羰基}-1h-吲哚-5-基)-5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-甲酰胺鹽酸鹽(13mg，0.02mmol)在thf/dcm1:1(2ml)中的溶液中加入氯甲酸4-硝基苯酯(20mg，0.1mmol)和三乙胺(20ml，0.14mmol)。將該混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，將溶劑蒸發(fā)，用乙醚處理后，將殘余物通過(guò)過(guò)濾分離。將得到的固體化合物用1mldcm(10％dmf)稀釋，并加入n-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-{4-[({甲基[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-l-鳥氨酰胺鹽酸鹽(38mg，0.05mmol)和三乙胺(7ml，0.05mmol)。將該混合物攪拌過(guò)夜，將溶劑蒸發(fā)，經(jīng)柱色譜純化(dcm/meoh8:2)分離出標(biāo)題化合物(12mg，42％收率)。

esims:m/z1409(mh+)

¹hnmr(500mhz,甲醇-d4)δppm2.07(br.s.,4h)2.58(s,3h)2.93-3.09(m,6h)3.40-3.69(m,8h)4.11-4.40(m,3h)4.43-4.81(m,3h)4.99-5.17(m,2h)6.92-7.44(m,14h)7.46-7.64(m,4h)7.75(br.s.,3h)8.01-8.22(m,2h)8.01-8.06(m,1h)

類似地制備了以下的化合物：

n-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺

esims:m/z1251(mh+)

¹hnmr(500mhz,甲醇-d4)δppm0.94-1.01(m,6h)1.51-1.95(m,4h)2.12(br.s.,5h)2.48-2.62(m,3h)2.89-3.05(m,4h)3.40-3.54(m,4h)3.46-3.65(m,4h)3.58-3.74(m,2h)3.75-4.05(m,1h)4.08-4.42(m,3h)4.50(m,1h)4.55-4.81(m,4h)4.96-5.20(m,2h)6.92-7.81(m,17h)8.04(br.s.,1h)

脫保護(hù)

l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(ii)](化合物50)

向n-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺(11mg，0.0078mmol)在dmf(1ml)中的溶液中加入哌啶(4ml，0.039mmol)。將該混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，將溶劑蒸發(fā)，并將得到的標(biāo)題化合物未經(jīng)進(jìn)一步純化地使用。

類似地制備了以下的化合物：

l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲?；鵠氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(ii)](化合物51)

步驟g

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物52)

向l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺(4.6mg，0.0039mmol)在1mldcm(10％dmf)中的溶液中加入1-{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}-1h-吡咯-2,5-二酮(3.6mg，0.0117mmol)和三乙胺(2.2ml，0.0156mmol)。將該混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，將溶劑蒸發(fā)，并通過(guò)柱色譜純化(dcm/meoh8:2)分離出標(biāo)題化合物(2.2mg，41％收率)。

esims:m/z1380(mh+)

¹hnmr(500mhz,甲醇-d4)δppm1.98(br.s.,4h)2.60-2.63(m,3h)2.89-3.11(m,6h)3.39–3.72(m,10h)4.07–4.75(m,7h)4.98-5.17(m,2h)6.74(br.s.,2h)7.00(m,2h)7.07-7.45(m,8h)7.52(br.s.,3h)8.07-8.11(m,1h)

類似地制備了以下的化合物:

n-[19-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)-17-氧代-4,7,10,13-四氧雜-16-氮雜十九烷-1-?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)氨基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物53)

esims:m/z1585(mh+)

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲?；?n-[4-({[{2-[({[(8s)-8-(氯甲基)-1-甲基-6-({5-[2-(吡咯烷-1-基)乙氧基]-1h-吲哚-2-基}羰基)-7,8-二氫-6h-噻吩并[3,2-e]吲哚-4-基]氧基}羰基)(甲基)氨基]乙基}(甲基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺[(iv)](化合物54)

esims:m/z1222(mh+)

¹hnmr(400mhz,dmf-d7)δppm0.95(t,j＝7.8hz,6h)2.16(m,1h)2.66(br.s.,3h)2.99-3.09(m,3h)3.09-3.29(m,3h)3.59(br.s.,2h)3.69(br.s.,2h)3.81(br.s.,2h)4.04(d,j＝10.7hz,1h)4.31-4.47(m,2h)4.61(br.s.,1h)4.83(br.s.,2h)5.11(d,j＝15.7hz,2h)5.60(s,2h)6.29(br.s.,1h)7.00(m,3h)7.30(m,2h)7.53(d,j＝8.5hz,2h)7.88(d,j＝8.2hz,1h)8.13(d,j＝7.8hz,1h)8.27(s,1h)10.1(m,1h)11.61(br.s.,1h)

中間體的制備

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-{4-[({[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基](甲基)氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-l-鳥氨酰胺(xx)’

步驟1

n,n'-(2,2-二甲基丙-1,3-二基)二甲酰胺

在圓底燒瓶中，將商購(gòu)得到的2,2-二甲基丙-1,3-二胺(851mg，8.32mmol)與甲酸乙酯(4.2ml)反應(yīng)。將該反應(yīng)混合物在60℃攪拌3小時(shí)，直至檢測(cè)不到原料(tlc分析，meoh:ch2cl2＝2:8)。然后將該反應(yīng)混合物在真空下蒸發(fā)，得到粗制的產(chǎn)物(1.4g，油狀物)。

esims:m/z159(mh+)

¹hnmr(600mhz,dmso-d6)0.79(s,6h)2.92(d,j＝6.41hz,4h)7.94(br.s.,2h)8.05-8.09(m,2h)

步驟2

n,n',2,2-四甲基丙-1,3-二胺

向含在0℃在氬氣氣氛下冷卻的n,n'-(2,2-二甲基丙-1,3-二基)二甲酰胺(1.4g，8.85mmol)的干燥的圓底燒瓶中加入氫化鋁鋰在四氫呋喃(1m)中的溶液(24ml)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。在0℃冷卻后，加入水在四氫呋喃中的溶液，并將得到的混合物經(jīng)celite墊過(guò)濾。將濾液經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，并將由此得到的產(chǎn)物的四氫呋喃溶液未經(jīng)進(jìn)一步純化地用于下一個(gè)步驟中。

步驟3

[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基]甲基氨基甲酸2-(聯(lián)苯-4-基)丙-2-基酯

將商購(gòu)的4-[({[2-(聯(lián)苯-4-基)丙-2-基]氧基}羰基)氧基]苯甲酸甲酯(5.54mmol，2.16g)加入n,n',2,2-四甲基丙-1,3-二胺的四氫呋喃溶液中。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?4小時(shí)。然后將溶劑在真空下蒸發(fā)，并將殘余物經(jīng)快速色譜純化(meoh:ch2cl2＝1:9)，得到所需產(chǎn)物(848mg)。

ms(esi):369(mh+)

¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δppm0.73-0.83(m,5h)0.91(br.s.,3h)1.65-1.77(m,6h)2.78(br.s.,1h)7.32-7.38(m,1h)7.41(d,j＝8.43hz,2h)7.46(t,j＝7.69hz,2h)7.58-7.69(m,4h)

類似地制備了以下的化合物：

甲基[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酸2-(聯(lián)苯-4-基)丙-2-基酯

ms(esi):327(mh+)

¹hnmr(401mhz,dmso-d6)δppm1.70-1.75(m,6h)2.23-2.39(m,3h)7.30-7.39(m,1h)7.40-7.49(m,4h)7.58-7.63(m,2h)7.63-7.68(m,2h)

步驟4

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n-{4-[11-(聯(lián)苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧雜-4,8-二氮雜十二烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲?；?l-鳥氨酰胺

向n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-纈氨酰-n5-氨基甲?；?n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鳥氨酰胺(0.492mmol，363mg)在無(wú)水二甲基亞砜(1.0ml)中的溶液中加入[2,2-二甲基-3-(甲基氨基)丙基]甲基氨基甲酸2-(聯(lián)苯-4-基)丙-2-基酯(0.393mmol，145mg)在無(wú)水二甲基亞砜(0.9ml)中的溶液和三乙胺(1.5mmol，150mg)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柚敝翙z測(cè)不到原料，然后用正己烷(3x6ml)處理，并將粗制的殘余物未經(jīng)進(jìn)一步純化地用于下一個(gè)步驟中。

ms(esi):967(mh+)。

類似地制備了以下的化合物

n-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-纈氨酰-n-{4-[10-(聯(lián)苯-4-基)-4,7,10-三甲基-3,8-二氧代-2,9-二氧雜-4,7-二氮雜十一烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲?；?l-鳥氨酰胺

ms(esi):954(mh+)

¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm0.86(dd,j＝13.34,6.79hz,6h)1.69(br.s.,6h)1.86-2.05(m,1h)2.76(m,j＝9.30hz,2h)2.92(d,j＝14.95hz,3h)3.01(m,j＝6.10hz,1h)3.15-3.15(m,0h)3.38-3.53(m,2h)3.93(t,j＝7.63hz,1h)4.18-4.26(m,2h)4.26-4.34(m,1h)4.42(br.s.,1h)4.92-5.06(m,2h)5.39(s,2h)5.96(t,j＝6.02hz,1h)7.18-7.48(m,12h)7.52-7.66(m,6h)7.70-7.77(m,2h)7.88(d,j＝7.47hz,2h)8.11(br.s.,1h)10.06(br.s.,1h)

步驟5

標(biāo)題中間體

將粗制的產(chǎn)物n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-纈氨酰-n-{4-[11-(聯(lián)苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧雜-4,8-二氮雜十二烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲?；?l-鳥氨酰胺用二氯乙酸(7.8mmol)處理。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?，直至檢測(cè)不到原料，然后經(jīng)硅膠快速柱色譜(etoh:ch2cl2＝1.5:8.5)純化，得到所需產(chǎn)物(44.0mg，白色固體)。

ms(esi):729(mh+)

¹hnmr(500mhz,甲醇-d4)δppm0.97(d,j＝4.42hz,3h)0.98(d,j＝4.27hz,3h)1.04(s,6h)1.23-1.35(m,4h)1.50-1.68(m,7h)1.76(dtd,j＝13.90,9.26,9.26,5.11hz,1h)1.86-1.95(m,1h)2.07(dq,j＝13.90,6.86hz,1h)2.26-2.31(m,2h)2.57(s,3h)2.67(s,2h)3.04(s,3h)3.11(dt,j＝13.50,6.67hz,1h)3.16-3.22(m,1h)3.23(br.s.,2h)3.48(t,j＝7.09hz,2h)4.14(d,j＝7.47hz,1h)4.49(dd,j＝9.07,5.11hz,1h)5.13(s,2h)5.94(s,3h)6.75-6.82(m,1h)7.36(d,j＝8.54hz,2h)7.60(d,j＝8.69hz,2h)。

中間體的制備

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-{4-[({甲基[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-l-鳥氨酰胺

步驟6

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-纈氨酰-n-{4-[11-(聯(lián)苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧雜-4,8-二氮雜十二烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲?；?l-鳥氨酰胺

向產(chǎn)物n-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-纈氨酰-n-{4-[10-(聯(lián)苯-4-基)-4,7,10-三甲基-3,8-二氧代-2,9-二氧雜-4,7-二氮雜十一烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲酰基-l-鳥氨酰胺[如上文步驟4中報(bào)道制備](0.063mmol，60mg)在無(wú)水二甲基甲酰胺(0.8ml)中的溶液中加入哌啶(0.32mmol，27.2mg)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柚敝翙z測(cè)不到原料。將溶劑在真空下蒸發(fā)，并將由此得到的粗品未經(jīng)進(jìn)一步純化地用于下一個(gè)步驟。

ms(esi):732(mh+)

步驟7

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n-{4-[10-(聯(lián)苯-4-基)-4,7,10-三甲基-3,8-二氧代-2,9-二氧雜-4,7-二氮雜十一烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲酰基-l-鳥氨酰胺

向粗制的產(chǎn)物n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1h-吡咯-1-基)己?；鵠-l-纈氨酰-n-{4-[11-(聯(lián)苯-4-基)-4,6,6,8,11-五甲基-3,9-二氧代-2,10-二氧雜-4,8-二氮雜十二烷-1-基]苯基}-n⁵-氨基甲?；?l-鳥氨酰胺(0.0629mmol)在無(wú)水二甲基甲酰胺(1.5ml)中的溶液中加入1-{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}-1h-吡咯-2,5-二酮(0.189mmol，58.3mg)和三乙胺(0.252mmol，25.5mg)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柚敝翙z測(cè)不到原料。將溶劑在真空下蒸發(fā)，并將粗品經(jīng)硅膠(230-400目)快速柱色譜(洗脫劑:etoh:ch2cl2＝1:9)純化,，得到所需產(chǎn)物(34mg，白色蠟狀物)

ms(esi):925(mh+)

¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δppm0.83(dd,j＝15.79,6.79hz,6h)1.31-1.40(m,1h)1.60(br.s.,1h)1.69(s,6h)1.90-2.02(m,1h)2.05-2.23(m,2h)2.89-2.96(m,3h)3.01(br.s.,1h)3.34-3.38(m,2h)3.46(m,j＝8.24hz,2h)4.19(t,j＝7.40hz,1h)4.38(br.s.,1h)4.95-5.05(m,2h)5.40(s,2h)5.97(d,j＝12.20hz,1h)6.98-7.02(m,2h)7.30(d,j＝8.85hz,2h)7.37(dd,j＝15.40,7.93hz,3h)7.45(m,j＝7.17hz,2h)7.52-7.67(m,6h)7.80(d,j＝8.24hz,1h)8.08(d,j＝6.71hz,1h)9.76-10.18(m,1h)

步驟8

標(biāo)題中間體

將步驟6中制備的中間體在上文步驟5中報(bào)道反應(yīng)條件下反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末。

ms(esi):687(mh+)