技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及CYP101酶重組載體及構(gòu)建方法、CYP101酶高效表達(dá)純化方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明中構(gòu)建了PET28a?CYP101的高效表達(dá)載體，并將其轉(zhuǎn)化于BL21?plysS菌株中，誘導(dǎo)表達(dá)后，利用簡單兩步純化方法：即親和層析和離子交換層析，得到純度大于95％的高純酶。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明對CYP101生產(chǎn)簡單高效，成本低廉，純化方便，每升培養(yǎng)基可獲得23mg純度95％以上的目的蛋白。本發(fā)明可用于CYP101酶的表達(dá)純化，極大地提高了實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)的效率，同時(shí)極大的降低了實(shí)驗(yàn)成本。對于大規(guī)模生產(chǎn)純化CYP101酶具有很好的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：黃娟;徐沁;洪亮
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海交通大學(xué)
文檔號碼：201610938377
技術(shù)研發(fā)日：2016.10.25
技術(shù)公布日：2017.03.15