本發(fā)明屬于天然藥物提取領(lǐng)域，具體涉及一種從相思子屬植物中制備葫蘆巴堿的方法。
背景技術(shù)：
廣州相思子(Aburs cantoniensis Hance)、毛相思子(Abrus mollis Hance)和相思子(Abrus precatorius L.)均為豆科植物相思子屬植物，具有清熱解毒、疏肝止痛等作用，多用于治療急慢性肝炎等病癥。
葫蘆巴堿，化學(xué)名為N-甲基煙酸內(nèi)酯或N-甲基煙酸內(nèi)鹽，溶于水、甲醇、乙醇等水溶極性溶劑，分子式為C7H7NO2，分子量為137.14，結(jié)構(gòu)式為：
葫蘆巴堿存在于豆科植物相思子屬廣州相思子(Aburs cantoniensis Hance)、毛相思子(Abrus mollis Hance)和相思子(Abrus precatorius L.)等植物的全草中。藥理研究表明，葫蘆巴堿具有保肝，抗炎，鎮(zhèn)痛，降血脂，降血糖，促進(jìn)神經(jīng)組織再生，抗偏頭痛，抗癌宮頸癌和肝癌，抗菌等作用，無明顯的不良反應(yīng)，可用于肝病、糖尿病和高脂血癥等疾病的防治，也可用作營養(yǎng)型添加劑和醫(yī)藥中間體，為開發(fā)前景廣闊的天然藥物，一直為國內(nèi)外學(xué)者所關(guān)注。
目前，未見有針對廣州相思子、毛相思子和相思子中葫蘆巴堿開展提取純化制備工藝的方法，而其他植物中葫蘆巴堿單體成分的提取分離方法復(fù)雜，提取率低，所涉及溶劑毒性大，不適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
中國專利申請201310706466.9公開了野生葫蘆巴堿的新型提取方法，該方法利用超高壓技術(shù)和大孔樹脂吸附及柱層析耦聯(lián)技術(shù)富集純化葫蘆巴中葫蘆巴堿，采用梯度的乙醇對大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫，再采用不同配比的丙酮、石油醚對含葫蘆巴堿半成品的硅膠柱層析進(jìn)行梯度洗脫，該方法工藝復(fù)雜，所用的溶劑毒性較大。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明目的在于提供一種從相思子屬植物中制備葫蘆巴堿的方法，該方法對葫蘆巴堿的提取純化得率高，樣品純度高，安全穩(wěn)定，步驟簡便，成本低，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明提供一種從相思子屬植物中制備葫蘆巴堿的方法，其包括以下步驟：
(1)取廣州相思子、毛相思子或相思子，加入水溶性溶劑進(jìn)行提取，濾過，將濾液濃縮并回收溶劑，然后將濃縮液上氧化鋁柱，用水溶性溶劑洗脫至無色，收集全部洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入適量水溶性溶劑反復(fù)提取，超濾，濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿。
進(jìn)一步地，所述步驟(1)和(2)中的水溶性溶劑為水、乙醇、甲醇或丙酮中的至少一種。
進(jìn)一步地，所述步驟(1)中的提取方式為加熱回流、超聲、浸提中的一種。
進(jìn)一步地，所述步驟(1)中的氧化鋁為中性、酸性或堿性氧化鋁，所述氧化鋁的目數(shù)為60目以上。
優(yōu)選地，所述氧化鋁的目數(shù)為100-200目。
進(jìn)一步地，所述步驟(2)中的超濾的膜規(guī)格為3000分子量以下。
進(jìn)一步地，所述步驟(1)具體為：取廣州相思子、毛相思子或相思子，加入藥材重量5～200倍水溶性溶劑，加熱回流提取或超聲提取或浸泡提取1～5次，每次0.1～5小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量0.01～3g的水濃縮液，然后將水濃縮液上100～200目的氧化鋁柱，用2～10倍柱體積的水溶性溶劑洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物。
優(yōu)選地，所述步驟(1)具體為：取廣州相思子、毛相思子或相思子，加入藥材重量5～200倍純化水，加熱回流提取1～5次，每次0.1～5小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量0.01～3g的水濃縮液，然后將水濃縮液上100～200目的中性氧化鋁柱，用2～10倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物。
進(jìn)一步地，所述步驟(2)具體為：往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量5～50倍乙醇或甲醇提取1～5次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)勢在于：
(1)本發(fā)明提供的制備方法能夠較好地去除黃酮類等其他類成分，獲得高純度葫蘆巴堿。
(2)本發(fā)明方法穩(wěn)定性好，步驟簡便，且所用溶劑毒性低。
(3)本發(fā)明提供的方法成本低，周期短，制備量大，效率高，可應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施方式
以下通過具體實施方式進(jìn)一步描述本發(fā)明，但本發(fā)明不僅僅限于以下實施例。
實施例1
(1)取廣州相思子1000g，加入藥材重量15倍純化水，超聲提取3次，每次0.5小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量1g的水濃縮液，然后將水濃縮液上200目的中性氧化鋁柱，用3倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量10倍甲醇提取2次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿3.5g。
實施例2
(1)取毛相思子1000g，加入藥材重量10倍純化水，浸泡提取2次，每次3小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量0.2g的水濃縮液，然后將水濃縮液上100目的中性氧化鋁柱，用4倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量15倍甲醇提取2次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿3.2g。
實施例3
(1)取相思子1000g，加入藥材重量20倍純化水，加熱回流提取3次，每次2小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量0.1g的水濃縮液，然后將水濃縮液上200目的中性氧化鋁柱，用2倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量15倍乙醇提取3次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿3.8g。
實施例4
(1)取廣州相思子1000g，加入藥材重量30倍純化水，加熱回流提取2次，每次3小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量0.5g的水濃縮液，然后將水濃縮液上100目的中性氧化鋁柱，用8倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量30倍乙醇提取2次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿3.9g。
實施例5
(1)取廣州相思子1000g，加入藥材重量10倍濃度為25％乙醇溶液，加熱回流提取2次，每次3小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量1g的濃縮液，然后將濃縮液上100目的堿性氧化鋁柱，用5倍柱體積的濃度為25％乙醇溶液洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量20倍乙醇提取3次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿3.8g。
實施例6
(1)取毛相思子1000g，加入藥材重量15倍濃度為20％甲醇溶液，加熱回流提取2次，每次3小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮，制得每ml含藥材量0.5g的濃縮液，然后將濃縮液上100目的酸性氧化鋁柱，用10倍柱體積的濃度為20％甲醇溶液洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至干，得葫蘆巴堿粗純化物；
(2)往步驟(1)制得的葫蘆巴堿粗純化物中加入其重量15倍甲醇提取3次，合并提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結(jié)晶，得高純度的葫蘆巴堿3.7g。
以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出的是，上述優(yōu)選實施方式不應(yīng)視為對本發(fā)明的限制，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)當(dāng)以權(quán)利要求所限定的范圍為準(zhǔn)。對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。