本發(fā)明涉及n-{(2r)-2-[({[3,3-二丁基-7-(甲基硫基)-1,1-二氧代-5-苯基-2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜-8-基]氧基}乙酰基)氨基]-2-苯基乙?；?ethanolyl)}甘氨酸(依洛昔巴特(elobixibat))的晶體形式(crystalmodification)。

背景技術(shù)：

wo02/50051公開了化合物1,1-二氧代-3,3-二丁基-5-苯基-7-甲基硫基-8-(n-{(r)-1'-苯基-1'-[n'-(羧基甲基)氨基甲?；鵠甲基}氨基甲?；籽趸?-2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜(依洛昔巴特；iupac名稱：n-{(2r)-2-[({[3,3-二丁基-7-(甲基硫基)-1,1-二氧代-5-苯基-2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜-8-基]氧基}乙酰基)氨基]-2-苯基乙?；鶀甘氨酸)。該化合物是回腸膽汁酸轉(zhuǎn)運蛋白(ibat)抑制劑，其可用于治療或者預防疾病如血脂異常、便秘、糖尿病和肝病。根據(jù)wo02/50051的實驗部分，在制備依洛昔巴特中的最后合成步驟為在酸性條件下水解叔-丁氧基酯。粗化合物通過以下方法得到：在減壓下蒸發(fā)反應混合物并通過制備性hplc使用乙腈/乙酸銨緩沖液(50:50)作為洗脫劑純化殘余物(實施例43)。在凍干產(chǎn)物之后，未鑒定出結(jié)晶物質(zhì)。

希望發(fā)現(xiàn)足夠穩(wěn)健(robust)的依洛昔巴特的形式，其適用于作為藥物的制劑。

多種晶體形式可能有缺點，包括殘留溶劑、可變結(jié)晶度和處理和配制困難。因此，需要在穩(wěn)定性、批量處理(bulkhandling)和溶解度方面具有改善性質(zhì)的依洛昔巴特的晶體形式。因此，本發(fā)明的目的是提供具有良好結(jié)晶性和其它制劑性質(zhì)的依洛昔巴特的穩(wěn)定晶體形式。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了依洛昔巴特的多種晶體形式。本發(fā)明部分地基于以下發(fā)現(xiàn)：依洛昔巴特傾向于與許多溶劑形成高度結(jié)晶溶劑化結(jié)構(gòu)。如下面的實施例中所示，當將溶劑從晶體除去時許多晶體形式形成結(jié)晶非溶劑合物(ansolvate)。然后，在暴露于足夠潮濕環(huán)境后，這些晶體中的一些可形成水合物。意料不到的是，鑒于它們在無需溶解和重結(jié)晶的情況下失去和重新獲得溶劑合物分子的能力，這些晶體形式含有基本上化學計算量的溶劑。

在一個方面，所述晶體形式為依洛昔巴特的結(jié)晶形式，其能夠含有或者實際上含有基本上化學計算量(stoichiometricamount)的水。優(yōu)選地，所述基本上化學計算量的水并非每摩爾依洛昔巴特一摩爾水?；旧匣瘜W計算量的水是整個數(shù)值(wholenumbervalue)的相差不超過15mol％的量。因此，例如，二水合物在晶體中包括有1.7-2.3摩爾水與每摩爾依洛昔巴特結(jié)合。本文中計算的水量不包括吸附至晶體表面的水。本發(fā)明還包括依洛昔巴特的無水物(anhydrate)。

本發(fā)明還提供了治療本文中所述病癥的方法和本文中所述晶體形式在治療本文中所述病癥中的用途和在制備用于治療本文中所述病癥的藥物中的用途。

附圖說明

圖1顯示從甲基異丁基酮中制備的晶體形式f的x-射線粉末衍射圖。

圖2顯示從乙酸乙酯中制備的晶體形式f的x-射線粉末衍射圖。

圖3顯示從1:1v/v的丙酮:水中制備的晶體形式c的x-射線粉末衍射圖。

圖4顯示從乙酸乙酯中制備的晶體形式c的x-射線粉末衍射圖。

圖5顯示晶體形式l的x-射線粉末衍射圖。

圖6顯示晶體形式n的x-射線粉末衍射圖。

圖7顯示晶體形式e的x-射線粉末衍射圖。

圖8顯示晶體形式g的x-射線粉末衍射圖。

圖9顯示晶體形式h的x-射線粉末衍射圖。

圖10顯示晶體形式f的dvs等溫線圖。四個曲線顯示兩個連續(xù)的dvs循環(huán)的吸附和解吸。x-軸顯示％rh變化和y-軸顯示以重量％水計的樣品反應。

圖11顯示晶體形式c和e的dvs等溫線圖。四個曲線顯示兩個連續(xù)的dvs循環(huán)的吸附和解吸。x-軸顯示％rh變化和y-軸顯示以重量％水計的樣品反應。

圖12顯示晶體形式d的x-射線粉末衍射圖。

圖13顯示晶體形式m的x-射線粉末衍射圖。

圖14顯示晶體形式l和n的dvs等溫線圖。四個曲線顯示兩個連續(xù)的dvs循環(huán)的吸附和解吸。x-軸顯示％rh變化和y-軸顯示以重量％水計的樣品應答。

圖15顯示本文中所述的一些晶體形式的轉(zhuǎn)化圖。

發(fā)明詳述

本文中所述的發(fā)明涉及在依洛昔巴特的廣泛研究中發(fā)現(xiàn)的晶體形式。不希望被理論束縛，依洛昔巴特的結(jié)晶形式可以從具有至少一些極性特征的多種溶劑中形成。再次不希望被理論束縛，依洛昔巴特形成含有被占據(jù)的或者部分被占據(jù)的空隙體積(voidvolume)的晶體結(jié)構(gòu)，在所述空隙體積中所述溶劑分子居留。在許多這些晶體中所述空隙是不尋常的，因為它們持有基本上化學計算量的溶劑(例如，水)分子，而所述溶劑分子可在晶體無需溶解和重結(jié)晶的情況下被除去和替代。有利的是含有基本上化學計算量的水，因為晶體的水含量維持基本上恒定，即使在相對濕度改變的情況下仍然如此。在一些實施方案中，所述水含量在rh大于20％、30％、40％或者更高時維持基本上恒定。在其它實施方案中，所述水含量在rh小于20％或者10％時維持基本上恒定。

在一個方面，本發(fā)明涉及依洛昔巴特的結(jié)晶形式，其中所述形式包含空隙體積，所述空隙體積能夠含有基本上化學計算量的水，例如在10％rh和20℃、40％rh和20℃、58％rh和20℃、80％rh和20℃，或者75％rh和40℃的條件下。本發(fā)明包括相關(guān)晶體的水合物和無水物形式。優(yōu)選地，所述基本上化學計算量的水并非每摩爾依洛昔巴特一摩爾水(例如，每摩爾依洛昔巴特0.7-1.3mol、0.8-1.2mol或者0.9-1.1摩爾水)。基本上化學計算量的水是整個數(shù)值的相差不超過15mol％(例如，10mol％、5mol％、2.5mol％)的量。因此，例如，二水合物在晶體中包括有1.7-2.3、1.8-2.2、1.9-2.1或者1.95-2.05摩爾的水與每摩爾依洛昔巴特結(jié)合。對于無水物，小于0.15摩爾、小于0.10摩爾或者甚至小于0.05或者0.025摩爾的水與每摩爾依洛昔巴特結(jié)合。本文中計算的水量不包括吸附至晶體表面的水。本文中使用的空隙體積是指在晶體結(jié)構(gòu)中的通道、層或者或多或少分離的空隙。

在一些實施方案中，本發(fā)明包括依洛昔巴特的結(jié)晶無水物，其中所述無水物在10％或者更低或者20％或者更低的相對濕度(rh)在20℃的溫度是穩(wěn)定的。這種無水物在這些條件下可穩(wěn)定至少1小時、1天、1個月、3個月、6個月、1年、2年、3年或者更長。對于某些無水物，有利的是在不同貯存條件下穩(wěn)定這些時間，例如40％rh和20℃、58％rh和20℃、80％rh和20℃，或者75％rh和40℃。在10％rh(例如，在20℃或者40℃)穩(wěn)定的無水物特別適用于氣候帶iii條件(熱/干)或者在含有干燥劑(例如，硅膠、硫酸鈣、氯化鈣、磷酸鈣、氯化鈉、碳酸氫鈉、硫酸鈉、磷酸鈉、蒙脫石、分子篩(珠?；蛘叻蹱畹?、氧化鋁、氧化鈦、氧化鋯，和焦磷酸鈉)的制劑中，而在40％rh以上穩(wěn)定的無水物適用于氣候帶i(溫帶)、氣候帶ii(亞熱帶)和氣候帶iv(熱/潮濕)條件。

可將穩(wěn)定性評價為物理穩(wěn)定性、化學穩(wěn)定性或者二者?；瘜W穩(wěn)定性是指分子(即，依洛昔巴特)不反應形成新分子。物理穩(wěn)定性是指晶體結(jié)構(gòu)不隨時間改變，其可通過本文中討論的技術(shù)中的一種或者多種如xprd測得，并且任選通過dvs、tga和dsc補充。

在一個實施方案中，所述結(jié)晶無水物為晶體形式f，其在用cukα1-輻射得到的x-射線粉末衍射(xrpd)譜圖中，具有至少在°2θ位置6.1±0.2和/或5.9±0.2的特定峰。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式f，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2和5.9±0.2的特定峰和以下特征峰中的一個或者多個：6.6±0.2、8.3±0.2，和11.9±0.2。在更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式f，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、5.9±0.2、6.6±0.2、8.3±0.2，和11.9±0.2的特定峰。在又一實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式f，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、5.9±0.2、6.6±0.2、8.3±0.2，和11.9±0.2的特征峰，和以下中的一個或者多個：7.4±0.2、10.6±0.2、11.7±0.2、19.2±0.2，和19.8±0.2。在又一更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式f，其用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖基本上如圖1或者圖2中所示。

在一個實施方案中，所述結(jié)晶無水物為晶體形式c，其在用cukα1-輻射得到的x-射線粉末衍射(xrpd)譜圖中，具有至少在°2θ位置12.4±0.2和/或5.8±0.2的特定峰。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式c，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置12.4±0.2和5.8±0.2的特定峰和以下特征峰中的一個或者多個：4.8±0.2、8.2±0.2、9.9±0.2、10.9±0.2、16.6±0.2、19.8±0.2和20.6±0.2。在更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式c，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置12.4±0.2、5.8±0.2、4.8±0.2、8.2±0.2、9.9±0.2、10.9±0.2、16.6±0.2、19.8±0.2和20.6±0.2的特定峰。在又一實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式c，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置12.4±0.2、5.8±0.2、4.8±0.2、8.2±0.2、9.9±0.2、10.9±0.2、16.6±0.2、19.8±0.2和20.6±0.2的特征峰，和以下中的一個或者多個：4.1±0.2、6.7±0.2、9.5±0.2、12.6±0.2，和20.7±0.2。在又一更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式c，其用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖基本上如圖3或者圖4中所示。

在一個實施方案中，所述結(jié)晶無水物為晶體形式l，其在用cukα1-輻射得到的x-射線粉末衍射(xrpd)譜圖中，具有至少在°2θ位置6.4±0.2和/或12.7±0.2的特定峰。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式l，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.4±0.2和12.7±0.2的特定峰和以下特征峰中的一個或者多個：4.2±0.2、8.5±0.2、10.5±0.2、19.3±0.2和19.5±0.2。在更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式l，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.4±0.2、12.7±0.2、4.2±0.2、8.5±0.2、10.5±0.2、19.3±0.2和19.5±0.2的特定峰。在又一實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式l，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.4±0.2、12.7±0.2、4.2±0.2、8.5±0.2、10.5±0.2、19.3±0.2和19.5±0.2的特征峰，和以下中的一個或者多個：4.8±0.2、5.9±0.2、12.1±0.2、12.4±0.2、13.3±0.2、13.6±0.2、17.7±0.2、19.9±0.2和21.4±0.2。在又一更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式l，其用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖基本上如圖5中所示。

在第二方面，本發(fā)明包括依洛昔巴特的結(jié)晶二水合物。優(yōu)選地，所述二水合物包括1.7-2.3、1.8-2.2、1.9-2.1或者1.95-2.05摩爾的水與每摩爾依洛昔巴特晶體結(jié)合。本文中計算的水量不包括吸附至晶體表面的水。

在一個實施方案中，所述二水合物在與水(例如，水為溶劑的溶液)接觸時是穩(wěn)定的。這種二水合物也可在飽和的或者接近飽和的氣氛(即，90％、95％、100％rh)中是穩(wěn)定的或者替代地在飽和的或者接近飽和的氣氛(即，90％、95％、100％rh)中是穩(wěn)定的。這種二水合物在20℃、40℃、60℃或者甚至75℃的溫度可為穩(wěn)定的。穩(wěn)定性可存在1天、1周、1個月、3個月、6個月、1年、2年、3年或者更長時間。在一些實施方案中，所述二水合物在低達60％、40％或者甚至20％的rh在20℃、40℃、60℃或者甚至75℃的溫度也穩(wěn)定1天、1周、1個月、3個月、6個月、1年、2年、3年或者更長時間。

在另一實施方案(其可具有如上所示的穩(wěn)定性)中，二水合物可直接從漿液結(jié)晶。在一些實施方案中，結(jié)晶可在合成依洛昔巴特后在不純化的情況下發(fā)生。示例性條件包括用甲醇和水的1:1體積混合物或者2-丙醇和水的1:1體積混合物在5℃結(jié)晶。這種直接結(jié)晶的優(yōu)點包括更容易的純化和較不困難的分離，并且相關(guān)的殘留溶劑的風險較低。

在一個實施方案中，所述結(jié)晶二水合物為晶體形式n或者e，其在用cukα1-輻射得到的x-射線粉末衍射(xrpd)譜圖中，具有至少在°2θ位置6.1±0.2和/或12.0±0.4的特定峰。

在二水合物為晶體形式n的實施方案中，用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖具有在°2θ位置6.1±0.2、8.0±0.2和12.0±0.2的特定峰；在一些實施方案中，這些是最顯著的三個峰。在具體實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式n，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、8.0±0.2和12.0±0.2的特定峰和以下特征峰中的一個或者多個：4.0±0.2、10.1±0.2、20.1±0.2和21.0±0.2。在更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式n，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、8.0±0.2、12.0±0.2、4.0±0.2、10.1±0.2、20.1±0.2和21.0±0.2的特定峰。在又一實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式n，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、8.0±0.2、12.0±0.2、4.0±0.2、10.1±0.2、20.1±0.2和21.0±0.2的特征峰，和以下中的一個或者多個：10.8±0.2、11.4±0.2、13.3±0.2、18.0±0.2、18.5±0.2和19.7±0.2。在又一更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式n，其用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖基本上如圖6中所示。

在二水合物為晶體形式e的實施方案中，用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖具有在°2θ位置6.1±0.2、12.1±0.2和20.9±0.2的特定峰；在一些實施方案中，這些是最顯著的三個峰。在具體實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式e，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、12.1±0.2和20.9±0.2的特定峰和以下特征峰中的一個或者多個：8.1±0.2、10.1±0.2、11.4±0.2、22.3±0.2和22.5±0.2。在更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式e，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、12.1±0.2、20.9±0.2、8.1±0.2、10.1±0.2、11.4±0.2、22.3±0.2和22.5±0.2的特定峰。在又一實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式e，其在用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖中，具有在°2θ位置6.1±0.2、12.1±0.2、20.9±0.2、8.1±0.2、10.1±0.2、11.4±0.2、22.3±0.2和22.5±0.2的特征峰，和以下中的一個或者多個：4.0±0.2、18.6±0.2、19.4±0.2、21.1±0.2。在又一更具體的實施方案中，本發(fā)明涉及晶體形式e，其用cukα1-輻射得到的xrpd譜圖基本上如圖7中所示。

上述晶體形式可有利地包括以下特征中的一個或多個，例如關(guān)于無定形材料：較低吸濕性，較高化學穩(wěn)定性，較高物理穩(wěn)定性，改進的加工成制劑的能力，減少的殘留溶劑的風險，改進的從粗合成的依洛昔巴特制造的能力和可重現(xiàn)的溶解度。這些性質(zhì)中的許多是與藥物制劑中使用的化合物高度相關(guān)的，其中含有所述活性藥物成分的每一制劑應具有相同的藥理性質(zhì)。

依洛昔巴特是一種回腸膽汁酸轉(zhuǎn)運蛋白(ibat)抑制劑?；啬c膽汁酸轉(zhuǎn)運蛋白(ibat)是從胃腸道重新吸收膽汁酸的主要機制。ibat機制的部分或者完全阻斷將導致膽汁酸在小腸壁、門靜脈、肝實質(zhì)、肝內(nèi)膽道系統(tǒng)，和肝外膽道系統(tǒng)(包括膽囊)中濃度較低?？蓮膇bat機制的部分或者完全阻斷受益的疾病可為這樣的疾?。浩渚哂心懼嵩谘逯泻驮谏厦娴钠鞴僦袧舛冗^高的癥狀作為主要病理生理缺陷。

因此，在另一方面，本發(fā)明還涉及本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式，其用于治療。

本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式可用于預防或治療高膽固醇血癥、血脂異常、代謝綜合征、肥胖、脂肪酸代謝障礙、葡萄糖利用障礙、牽涉胰島素抗性的障礙、1型和2型糖尿病、肝病、在包含ibat抑制劑化合物的治療期間的腹瀉、便秘，包括慢性便秘，例如，功能性便秘，包括慢性特發(fā)性便秘(cic)和便秘型腸易激綜合征(ibs-c)。便秘的治療和預防描述在wo2004/089350中。

用本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式治療的其它潛在疾病選自肝實質(zhì)、肝的遺傳性代謝障礙、byler綜合征、膽汁酸(ba)合成的原發(fā)性缺陷如腦腱黃瘤病、繼發(fā)性缺陷如zellweger綜合征、新生兒肝炎、囊性纖維化(肝中的表現(xiàn))、algs(alagilles綜合征)、進行性家族性肝內(nèi)膽汁淤積(pfic)、自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化(pbc)、肝纖維化、非酒精性脂肪性肝病、nafld/nash、門靜脈高血壓、藥物導致的或者在懷孕期間的一般膽汁淤積如黃疸、肝內(nèi)和肝外膽汁淤積如遺傳性形式的膽汁淤積如pfic1、原發(fā)性硬化性膽管炎(psc)、膽石和膽總管結(jié)石病、導致膽道系統(tǒng)阻塞的惡性病、膽汁淤積/黃疸導致的癥狀(搔抓、瘙癢)、胰腺炎、導致進行性膽汁淤積的慢性自身免疫性肝病、膽汁淤積性肝病的瘙癢和與高脂血癥相關(guān)聯(lián)的疾病狀態(tài)。

用本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式治療的其它疾病選自肝障礙和與其相關(guān)的病癥、脂肪肝、肝性脂肪變性、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、酒精性肝炎、急性脂肪肝、妊娠脂肪肝、藥物誘發(fā)的肝炎、鐵超負荷障礙、肝纖維化、肝硬化、肝細胞瘤、病毒性肝炎和涉及肝、膽道和胰腺的腫瘤和新生物的問題。

因此，在一個實施方案中，本發(fā)明涉及本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式，其用于治療和/或預防上面列舉的疾病或者障礙。

在另一實施方案中，本發(fā)明涉及本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式在制備用于治療和/或預防上面列舉的疾病或者障礙的藥物中的用途。

在又一實施方案中，本發(fā)明涉及在溫血動物中治療和/或預防上面列舉的疾病或者障礙的方法，其包括向需要這種治療和/或預防的溫血動物給藥有效量的本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式。

本發(fā)明的其它方面涉及藥物組合物，其包含有效量的本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式以及藥學上可接受的稀釋劑或者載體。

本發(fā)明的其它方面涉及本文中所述的依洛昔巴特的晶體形式在制備藥物組合物中的用途，其包括將所述晶體形式與藥學上可接受的稀釋劑或者載體混合。

藥物組合物還可包含至少一種其它活性物質(zhì)，例如選自以下的活性物質(zhì)：ibat抑制劑；內(nèi)分泌肽或其增強物；二肽基肽酶-iv抑制劑；雙胍；腸降血糖素模擬物；噻唑烷酮；ppar激動劑；hmgco-a還原酶抑制劑；膽汁酸結(jié)合劑；tgr5受體調(diào)節(jié)劑；前列酮(prostone)類化合物的成員；鳥苷酸環(huán)化酶c激動劑；5-ht4血清素激動劑；或者任何這些活性物質(zhì)的藥學上可接受的鹽。這種組合的實例也描述在wo2012/064268中。

依洛昔巴特的晶體形式將通常以每平方米身體面積5至5000mg，即，近似0.1至100mg/kg或者0.01至50mg/kg范圍內(nèi)的單位劑量給藥于溫血動物，這通常提供治療有效劑量。單位劑量形式如片劑或者膠囊劑將通常含有約1至250mg活性成分，例如約1至100mg，或者約5至50mg，例如，約1至20mg。日劑量可作為單一劑量給藥或者分成一個、兩個、三個或者更多單位劑量。ibat抑制劑的口服給藥日劑量優(yōu)選為0.1至1000mg，更優(yōu)選為1至100mg，例如5至15mg。

當確定適合于特定患者的個體方案和劑量水平時，治療或預防治療所需的劑量將取決于給藥途徑，疾病的嚴重程度，患者的年齡和體重以及主治醫(yī)師通常考慮的其他因素。

定義

所述術(shù)語“晶體形式”是指有機化合物的結(jié)晶固相。晶體形式可為溶劑合物或者非溶劑合物。

所述術(shù)語“溶劑合物”是指有機化合物的結(jié)晶固相，其具有摻入至其晶體結(jié)構(gòu)中的溶劑分子?！八衔铩睘槠渲兴鋈軇樗娜軇┖衔铩?/p>

所述術(shù)語“漿液”是指添加了過量固體的飽和溶液，由此形成固體和飽和溶液的混合物，即“漿液”。

本文中使用的術(shù)語"治療"是指逆轉(zhuǎn)、緩解、延遲本文中所述的疾病或者障礙或其一個或者多個癥狀的發(fā)作，或者抑制本文中所述的疾病或者障礙或其一個或者多個癥狀的進展。在一些實施方案中，治療可在一個或者多個癥狀發(fā)展之后給藥。在其它實施方案中，治療可以在沒有癥狀的情況下給藥。例如，治療可以在癥狀發(fā)作之前給予易感個體(例如，鑒于癥狀史和/或根據(jù)遺傳或其它易感因素)。治療也可在癥狀已經(jīng)解決之后繼續(xù)，例如防止或者延遲它們的復發(fā)。

當在本文中提及結(jié)晶化合物時，優(yōu)選地，從x-射線粉末衍射數(shù)據(jù)估計的結(jié)晶度大于約70％，例如大于約80％，具體地，大于約90％，更具體地，大于約95％。在本發(fā)明實施方案中，通過x-射線粉末衍射數(shù)據(jù)估計的結(jié)晶度大于約98％，優(yōu)選大于約99％，其中所述％結(jié)晶度是指晶體占總樣品質(zhì)量的重量百分比。

優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的晶體形式基本上不含所述化合物的其它晶體形式。優(yōu)選地，所述的依洛昔巴特的晶體形式包含少于例如20％、15％、10％、5％、3％，或者具體地小于1％重量比的依洛昔巴特的其它晶體形式。因此，優(yōu)選地，所述的依洛昔巴特的晶體形式的固相純度為>80％、>85％、>90％、>95％、>97％，或者具體地>99％。

本發(fā)明現(xiàn)在將通過以下實施例進行描述，其不會在任何方面限制本發(fā)明。所有引用的文獻和參考文獻都通過引用并入。

實驗方法

x-射線粉末衍射(xrpd)分析

如果需要的話，將干燥樣品在瑪瑙研缽中輕輕研磨，然后在樣品保持器上涂抹。將漿液樣品以濕的狀態(tài)添加至樣品保持器并在濕和干的狀態(tài)下分析。xrpd數(shù)據(jù)在切割的硅零背景保持器(zbh)上或者在多孔氧化鋁過濾器樣品保持器上，使用配有x′celerator或者pixcel檢測器的panalyticalx′pertpro衍射儀收集。在分析期間旋轉(zhuǎn)樣品并使用cu-輻射。使用以下實驗設定：

管電壓和電流：40kv,50ma

波長α1(cukα1)：

波長α2(cukα2)：

波長α1和α2平均值(cukα)：

起始角度[2θ]：1-4°

結(jié)束角度[2θ]：30-40°

分析時間：50s(“1分鐘掃描”)、125s(“2分鐘掃描”)、192s(“3分鐘掃描”)、397s(“6分鐘掃描”)、780s(“13分鐘掃描”)、1020s(“17分鐘掃描”)、4560s(“1小時掃描”)

除非另有說明，當從xrpd數(shù)據(jù)計算峰位置時，首先將數(shù)據(jù)剝離cukα2的貢獻，然后根據(jù)內(nèi)標(al2o3)進行校正。

在本領(lǐng)域中已知，根據(jù)測量條件(例如設備、樣品制備或所使用的機器)，可以得到具有一個或多個測量誤差的x-射線粉末衍射譜圖。具體地，通常已知的是，xrpd譜圖中的強度可能根據(jù)測量條件和樣品制備而波動。例如，xrpd領(lǐng)域的技術(shù)人員將認識到，峰值的相對強度可以根據(jù)試驗中的樣品的取向以及使用的儀器的類型和設定而變化。技術(shù)人員還將意識到，通過樣品在衍射儀中的精確高度和衍射儀的零校準，可以影響反射位置。樣品的表面平面度也可能具有小的影響。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會意識到，本文中提出的衍射圖案不應被解釋為絕對的，并且粉末衍射譜圖基本上與本文中公開的粉末衍射譜圖相同的任何結(jié)晶形式落在本公開范圍內(nèi)(更多信息，請參見r.jenkins和r.l.snyder,“introductiontox-raypowderdiffractometry”,johnwiley&sons,1996)。

動態(tài)蒸氣吸附(dvs)

將大約2-16mg樣品稱重放入金屬容器中，然后釋放靜電。將金屬容器置于surfacemeasurementssystemltddvsadvantage儀器中。樣品經(jīng)過兩個連續(xù)的吸附-解吸循環(huán)，每次運行在0至95至0％相對濕度(％rh)。一個循環(huán)由21個步驟組成，在0–90％rh之間的那些步驟各自相差10％rh。在每一階段，使用以下平衡標準：歷時5分鐘的dm/dt<0,002％以及在每一階段的最小和最大時間分別為10和360分鐘。

起始原料1,1-二氧代-3,3-二丁基-5-苯基-7-甲基硫基-8-(n-{(r)-1'-苯基-1'-[n'-(叔-丁氧基羰基甲基)氨基甲?；鵠甲基}氨基甲?；籽趸?-2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜可如wo02/50051中所述制備。

實施例

形式a單水合物的制備

形式a單水合物可以根據(jù)2014年4月25日提交的pct申請?zhí)杙ct/ep2014/058432中描述的方法制備，其在該文獻中被稱為晶體形式iv。簡而言之，形式a可通過以下方法制備：在封閉容器中將100mg依洛昔巴特的任何干燥固體材料與2ml乙醇混合一周。然后將固體分離并在高溫真空干燥，直到將乙醇干燥除去。最后，固體暴露于室溫的潮濕空氣，直到大量形成了結(jié)晶形式a單水合物。

形式gmibk溶劑合物和形式f無水物的制備

在10ml試管中在60℃，將102mg依洛昔巴特形式a單水合物溶解在0.5ml甲基異丁基酮(mibk)中。然后，歷時2小時以0.1ml的小份多次添加正庚烷。當添加了0.6ml正庚烷時，出現(xiàn)沉淀。然后將容器攪拌4天，直到形成稠的白色漿液。然后將容器冷卻至21-22℃，然后，將漿液樣品用pasteur移液管取出并置于切割硅零背景保持器(zbh)上。將濕樣品用xrpd分析，其顯示，它由形式gmibk溶劑合物(圖8)組成。

將漿液樣品在100℃在真空中干燥過夜，然后用xrpd分析。這顯示，它現(xiàn)在是形式f無水物(圖1)。

形式h乙酸乙酯溶劑合物和形式f無水物的制備

將441mg依洛昔巴特形式a單水合物、0.6ml乙酸乙酯和0.6ml正庚烷添加至10ml試管。添加攪拌子，將容器關(guān)閉，然后在62℃攪拌2天。將漿液取樣至熱(60℃)的多孔氧化鋁xrpd基底并用xrpd分析，其顯示，它由形式h乙酸乙酯溶劑合物(圖9)組成。

將固體樣品在100℃在干燥氮氣中干燥，然后用xrpd分析。它由形式f無水物(圖2)組成?；蛘?，將樣品在100℃在真空中干燥7.5小時。

晶體形式f的dvs數(shù)據(jù)在圖10中給出?？煽闯?，吸濕是％rh的線性函數(shù)。

形式e二水合物和形式c無水物的制備

將111mg依洛昔巴特形式a單水合物稱重放入10ml試管中。添加磁性攪拌子(magneticflea)和2.0ml丙酮:水50:50％v/v混合物。這產(chǎn)生凝膠狀物質(zhì)，其不得不用手動攪拌并劇烈搖晃幾分鐘，然后可將試管關(guān)閉并在21–22℃進行磁性攪拌。兩天后，將白色漿液樣品用pasteur移液管取出并置于切割硅零背景保持器(zbh)上。將濕樣品用xrpd分析，其顯示，它由形式e二水合物(圖7)組成。

將試管的近似一半內(nèi)容物倒入結(jié)晶碗中，然后將其在60℃真空干燥2小時。然后將該樣品用xrpd分析，其顯示，它由形式c無水物(圖3)組成。

在晶體形式c和e之間轉(zhuǎn)換的dvs數(shù)據(jù)在圖11中示出。下部曲線是兩個吸附循環(huán)，其顯示在60–70％rh之間水分的顯著變化，從而指示從晶體形式c至e的相變。上部曲線是解吸曲線，其顯示在20–10％rh之間反向相轉(zhuǎn)變的水分變化。在吸附和解吸曲線之間的滯后是由于動力學原因。二水合物的理論水分量為4.9％w/w，其與四個曲線(約5％w/w)良好吻合。

形式d溶劑合物和形式c無水物的制備

將95mg依洛昔巴特形式a單水合物稱重放入10ml試管中。添加磁性攪拌子和2.0ml乙酸乙酯。這產(chǎn)生漿液，其在21–22℃進行磁性攪拌。兩天后，將白色漿液樣品用pasteur移液管取出并置于切割硅零背景保持器(zbh)上。將濕樣品用xrpd分析，其顯示，它由形式d溶劑合物(圖12)組成。將xrpd樣品在21-22℃和30％相對濕度貯存3天，然后再次用xrpd分析?，F(xiàn)在它含有形式c無水物(圖4)。

形式m乙腈溶劑合物和形式l無水物的制備

將99mg依洛昔巴特形式a單水合物稱重放入10ml試管中。添加磁性攪拌子和2.0ml乙腈。這溶解了固體，但是它再次迅速析出，由此形成漿液。將試管封閉并在21–22℃進行磁性攪拌。兩天后，將白色漿液樣品用pasteur移液管取出并置于切割硅零背景保持器(zbh)上。將濕樣品用xrpd分析，其顯示，它由形式m乙腈溶劑合物(圖13)組成。

將漿液倒入結(jié)晶碗中并在開放的實驗室空氣中干燥。然后將它在真空和100℃干燥6小時。在具有干燥硅膠的干燥器中冷卻之后，將它用xrpd分析。它由形式l無水物(圖5)組成。

形式n二水合物的制備

將形式l無水物的扁平樣品通過在其頂部上添加數(shù)滴水來濕潤。由于固體的疏水性質(zhì)，所述水滴被固體非常緩慢地吸收。當水已經(jīng)被樣品吸收時，將它用xrpd分析，然后發(fā)現(xiàn)由形式n二水合物(圖6)組成。

在晶體形式l和n之間轉(zhuǎn)換的dvs數(shù)據(jù)在圖14中給出。下部曲線是兩個吸附循環(huán)，其顯示在40–50％rh之間水分的顯著變化，從而指示從晶體形式l至n的相變。上部曲線是解吸曲線，其顯示在20–10％rh之間反向相轉(zhuǎn)變的水分變化。在吸附和解吸曲線之間的滯后是由于動力學原因。二水合物的理論水分量是4.9％w/w，其與四個曲線(約5％w/w)良好吻合。

直接從漿液制備形式n二水合物

將30mg依洛昔巴特稱重放入1.0ml試管中。添加磁性攪拌子和0.5ml2-丙醇:水50:50％v/v混合物。將試管封閉并在5℃磁性攪拌。一周后，將白色漿液樣品用pasteur移液管取出并置于多孔剛玉樣品保持器上。將濕樣品用xrpd分析，其與形式n二水合物一致。

結(jié)論

本申請中所述的依洛昔巴特的固態(tài)行為的總結(jié)示于圖15中。