發(fā)明領(lǐng)域.本發(fā)明涉及從大環(huán)螯合劑的鑭系金屬絡(luò)合物中除去金屬離子雜質(zhì)例如鈣的方法。該方法使用清除劑樹脂除去金屬離子，通過過量的鑭系元素離子從螯合劑中替代所述金屬離子。還提供通過加入限定過量的螯合劑從純化的鑭系金屬絡(luò)合物制備mri造影劑的方法。發(fā)明背景.鑭系金屬(特別是釓)的金屬絡(luò)合物作為在體內(nèi)醫(yī)學(xué)成像領(lǐng)域中的mri造影劑具有重要意義?；卺彽慕饘俳j(luò)合物的mri造影劑已被廣泛地評(píng)述[見例如zhang等人,curr.med.chem.,12,751-778(2005)和aime等人,adv.inorg.chem.,57,173-237(2005)]。然而，游離釓離子確實(shí)在體內(nèi)顯示出明顯的毒性。us5,876,695通過在釓金屬絡(luò)合物的制劑中包含添加劑解決了這個(gè)問題，所述添加劑是例如具有鈣的“弱金屬螯合物絡(luò)合物”。想法是過量的“弱金屬螯合物絡(luò)合物”將有效地絡(luò)合可偶然地釋出或存在的任何釓離子，因而改進(jìn)了mri造影組合物的安全性。ep2513043b1公開了一種制備釓金屬絡(luò)合物的方法，其中先使釓與任選地用金屬配位基團(tuán)官能化的陽(yáng)離子交換樹脂絡(luò)合。固相結(jié)合的釓隨后與氨基羧酸螯合劑反應(yīng)以釋出所需的釓絡(luò)合物。任何過量的釓保持與固相的結(jié)合。ep2242515b9公開了一種制備含有大環(huán)螯合物與鑭系元素的絡(luò)合物和0.002%和0.4%之間的mol/mol量的游離大環(huán)螯合物的液體藥物制劑的過程，所述過程包括以下連續(xù)的步驟：b)通過混合游離大環(huán)螯合物的溶液和游離鑭系元素的溶液，以通過大環(huán)螯合物獲得鑭系元素的絡(luò)合，制備含有大環(huán)螯合物與鑭系元素的絡(luò)合物，和不在賦形劑x[x',l]的形式下的游離大環(huán)螯合物的液體藥物組合物，其中l(wèi)是大環(huán)螯合物和x和x'是金屬離子，特別是獨(dú)立地選自鈣、鈉、鋅和鎂，和游離鑭系元素，游離大環(huán)螯合物的量和游離鑭系元素的量使得并非所有鑭系元素被絡(luò)合；c)測(cè)量在步驟b)中獲得的藥物制劑中的游離鑭系元素的濃度clanl；游離大環(huán)螯合物的濃度cchl是等于0；d)通過將一定量的游離大環(huán)螯合物加入到步驟b)中獲得的制劑中來(lái)調(diào)節(jié)cchl和clanl，所述游離大環(huán)螯合物的量有必要首先完成游離鑭系元素的絡(luò)合以獲得clanl=0，且其次獲得cchl=ctchl，其中ctchl是最終液體藥物制劑中的游離大環(huán)螯合物的目標(biāo)濃度并在0.002%和0.4%mol/mol之間的范圍內(nèi)選擇，其中最終液體藥物制劑中的游離大環(huán)螯合物的量相當(dāng)于游離大環(huán)螯合物相對(duì)于最終液體藥物制劑中絡(luò)合的大環(huán)螯合物的量的比例。ep2242515b9教導(dǎo)了所述方法優(yōu)選還包括測(cè)定最終液體藥物制劑中的游離大環(huán)螯合物的理論目標(biāo)濃度ctchl的在先步驟a)。ep2242515b9教導(dǎo)該制劑應(yīng)含有小于50ppm的鈣，因此有必要仔細(xì)控制所有反應(yīng)物和溶劑的鈣含量。因此，ep2242515b9教導(dǎo)了大環(huán)螯合劑的鈣含量應(yīng)小于250ppm，首先是因?yàn)橛坞x螯合劑(例如dota)在體內(nèi)捕獲任何游離釓離子的動(dòng)力學(xué)中優(yōu)于含鈣dota物類。其次，ep2242515b9表明較高水平的鈣將絡(luò)合大環(huán)螯合劑，因此調(diào)節(jié)步驟(d)將不能基本上令人滿意。ep2242515b9教導(dǎo)了優(yōu)選測(cè)定制劑的鈣含量，并且如果需要，從其中除去鈣。然而，ep2242515b9不教導(dǎo)如何實(shí)現(xiàn)鈣除去，也不教導(dǎo)如何使反應(yīng)物的鈣含量最小化。us2012/0082624a1公開了與ep2242515b9類似的過程，不同之處在于以粉末形式獲得藥物制劑。ep2242515b9和us2012/0082624a1二者強(qiáng)調(diào)，對(duì)于工業(yè)規(guī)模的藥物制造過程，加入0.1mol%的游離大環(huán)螯合物難以單靠稱重達(dá)到所需的準(zhǔn)確度。這歸因于包含的量的1000倍差異，加上螯合劑的吸濕特性。要求保護(hù)的解決方案，如上所述的，是首先進(jìn)行與過量的鑭系金屬離子的金屬絡(luò)合，然后再準(zhǔn)確確定未絡(luò)合的、過量的鑭系元素的濃度。隨后該測(cè)定被用來(lái)精確計(jì)算多少額外的螯合劑必須加入以兼?zhèn)涫惯^量的鑭系元素絡(luò)合并達(dá)到所需的0.1%摩爾過量的大環(huán)螯合物。ep2242515b9的參考實(shí)施例3包括實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的制備，其通過使dota(10g,25mmol)與化學(xué)計(jì)量量的氧化釓(gd2o3,12.5mmol)在80℃，在水(ph6-7)中反應(yīng)來(lái)制備gd-dota。然后將ph調(diào)節(jié)至5，且殘余的游離釓?fù)ㄟ^與chelex樹脂一起攪拌2小時(shí)，接著過濾除去。ep2242515b9教導(dǎo)了gd-dota絡(luò)合物隨后從乙醇水溶液沉淀，得到80%分離產(chǎn)率的白色粉末。ep2242515b9未教導(dǎo)參考實(shí)施例3的方法如何可適合提供液體藥物組合物，其具有過量的在0.002%和0.4%mol/mol范圍內(nèi)的大環(huán)螯合劑，特別是在工業(yè)規(guī)模上。而且，如通過ep2242515b9的實(shí)施例3中教導(dǎo)的，chelex樹脂的使用將釋放鈉離子，其將污染產(chǎn)品，除非進(jìn)行進(jìn)一步的純化步驟。ep2242515b9的實(shí)施例3還描述具體的釓絡(luò)合物的制備，其需要不適合于制備液體藥物制劑的工業(yè)制造過程的純化和分離步驟。wo2014/114664提供一種制備gd-dota葡甲胺(釓特酸葡甲胺)的過程，其首先包括從輪環(huán)藤寧(cyclen)合成dota，接著經(jīng)由重結(jié)晶和陽(yáng)離子和陰離子交換層析二者的多步驟純化。然后使純化的dota與gd2o3反應(yīng)，得到gd-dota絡(luò)合物，接著加入葡甲胺，得到所需產(chǎn)物。然而，wo2014/114664未教導(dǎo)如何達(dá)到0.1%過量的dota的工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)和如何除去金屬離子雜質(zhì)。wo2014/161925教導(dǎo)，當(dāng)以工業(yè)規(guī)模制備gd-dota和類似的絡(luò)合物時(shí)，在使用和修正相應(yīng)使用的摩爾量之前，必須測(cè)定螯合劑的含水量。wo2014/161925指明，dota的含水量隨著相對(duì)濕度條件而變化。然而，wo2014/161925沒有教導(dǎo)如何制備這種不含鈣離子的gd-dota絡(luò)合物。因此，雖然現(xiàn)有技術(shù)提供關(guān)于gd-dota葡甲胺的藥物制劑的工業(yè)制備的各種教導(dǎo)，但都缺乏關(guān)于如何除去金屬離子雜質(zhì)的信息。因此，ep2242515b9特別教導(dǎo)了為了制備gd-dota葡甲胺的藥物制劑，沒有金屬離子雜質(zhì)的原料是必需的。因此，對(duì)制備結(jié)合過量的此類螯合劑和具有低水平的金屬離子雜質(zhì)的大環(huán)螯合劑的鑭系金屬絡(luò)合物的制劑的備選方法仍有需求。所述方法應(yīng)優(yōu)選地適合于工業(yè)規(guī)模的藥物制造，并且還適合于提供包含這樣的制劑的mri造影劑。本發(fā)明.本發(fā)明涉及從大環(huán)螯合劑的鑭系金屬絡(luò)合物中除去金屬離子雜質(zhì)例如鈣的方法。該方法使用過量的鑭系元素離子從螯合劑中替代金屬離子，以及清除劑樹脂以除去替代的金屬離子。該方法有助于液體藥物制劑的制備，所述制劑包含鑭系金屬與大環(huán)螯合劑的金屬絡(luò)合物，以及量為所述金屬的0.002和0.4mol/mol%且具有低水平的金屬離子雜質(zhì)特別是鈣的未絡(luò)合形式的所述螯合劑。這樣的制劑在提供mri造影劑中是有用的。本發(fā)明提供一種方法，其中將稍微過量的鑭系元素離子加入到含有大環(huán)螯合劑的溶液中，以便：首先使所有未絡(luò)合的大環(huán)螯合劑絡(luò)合，接著使所有金屬-大環(huán)螯合劑絡(luò)合物金屬轉(zhuǎn)移(transmetallate)，從而使配位金屬離子雜質(zhì)（m），例如鈣，可用于通過金屬離子清除樹脂除去。因此，如現(xiàn)有技術(shù)所教導(dǎo)，大環(huán)螯合劑在使用前不必經(jīng)過徹底的純化以除去鈣。本發(fā)明解決了使用清除劑樹脂除去金屬離子污染物的問題，而沒有額外裝載具有鈉離子的制劑產(chǎn)品。因此，提供能夠與葡甲胺鹽離子交換金屬離子雜質(zhì)的新型清除劑樹脂。常規(guī)的這種樹脂的操作原理是將清除的金屬離子與預(yù)裝載在樹脂上的反荷離子交換。市售可得的chelex?樹脂預(yù)裝載有鈉，且這種形式的chelex不適合當(dāng)前的方法，因?yàn)樗幬镏苿⒈烩c離子污染。本方法還提供一種方法，由此鑭系元素螯合劑金屬絡(luò)合物在不存在過量的鑭系元素離子的情況下獲得，因?yàn)楣滔嘟Y(jié)合的清除劑樹脂除去金屬離子雜質(zhì)（m）和鑭系元素離子二者。此外，鑭系元素螯合劑絡(luò)合物保持在水溶液中，因此不需要對(duì)絡(luò)合物的水分含量進(jìn)行修正。由于該方法提供鑭系金屬絡(luò)合物的中間體溶液，而沒有游離的鑭系元素離子，可容易地計(jì)算加入以給出具有限定過量的游離螯合劑的所需制劑的過量大環(huán)螯合劑的量。本方法還避免了對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的測(cè)量和調(diào)節(jié)步驟的需要，這可用于簡(jiǎn)化時(shí)間和精力二者。本發(fā)明的方法具有另外的優(yōu)點(diǎn)，即它可以工業(yè)規(guī)模進(jìn)行，且樹脂結(jié)合的清除劑可任選地在使用之后再循環(huán)以使適合于制造其它批次的藥物制劑的材料再生。發(fā)明詳述在第一方面，本發(fā)明提供一種從鑭系金屬與大環(huán)螯合劑的鑭系金屬絡(luò)合物中除去金屬離子雜質(zhì)的純化方法，所述方法包括以下步驟：（i）使包含所述金屬雜質(zhì)m的所述螯合劑與過量的所述鑭系金屬在合適的溶劑中絡(luò)合，得到含有過量的鑭系元素離子和m的所述鑭系金屬絡(luò)合物的第一溶液；（ii）通過使所述溶液與藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子有機(jī)鹽形式的清除劑樹脂接觸一次或多次，從而使過量的鑭系元素和m與所述樹脂絡(luò)合，從步驟（i）的第一溶液中除去過量的鑭系元素離子和m；（iii）從步驟（ii）的第一溶液中分離固相樹脂，得到包含不過量的鑭系元素和m的所述鑭系金屬絡(luò)合物的第二溶液；其中m是選自鈣、鎂和鋅的金屬離子，或其混合物；其中所述第二溶液包含小于10ppmm。術(shù)語(yǔ)“螯合劑(chelator)”或“螯合劑(chelatingagent)”具有其常規(guī)意義，并指形成配位金屬絡(luò)合物的配體，所述配位金屬絡(luò)合物包含多個(gè)排列的金屬供體原子，以致通常在配位時(shí)(通過使非配位骨架的碳原子或非配位雜原子連接金屬供體原子)，產(chǎn)生5-、6-或7-元螯合物環(huán)(優(yōu)選5-或6-元的此類環(huán))。術(shù)語(yǔ)“大環(huán)”具有其在配位化學(xué)領(lǐng)域中的常規(guī)意義，并指其中所述螯合劑的至少一些金屬供體原子作為環(huán)體系的一部分共價(jià)連接的螯合劑。短語(yǔ)“包含所述金屬雜質(zhì)m”是指與大環(huán)螯合劑配位的m離子。因此，本發(fā)明的方法容許使用這樣的螯合劑，而不需要徹底的預(yù)純化步驟以除去由現(xiàn)有技術(shù)所教導(dǎo)的鈣。短語(yǔ)“清除劑樹脂”是指共價(jià)綴合到在用于鑭系元素絡(luò)合的溶劑中不溶的固相材料或樹脂的陽(yáng)離子交換劑。清除劑樹脂與溶液中的游離金屬離子結(jié)合，因此能夠從溶液中除去或“清除”任何這樣的金屬離子。合適的清除劑樹脂是標(biāo)準(zhǔn)的陽(yáng)離子交換樹脂，例如puropack(purolite)，applexionxa2033，(novasep)和amberliteirp69(dow)或“清除劑螯合劑”，如下限定。所述清除劑樹脂優(yōu)選包含清除劑螯合劑?！扒宄齽蟿睘楣矁r(jià)綴合到固相材料或樹脂的螯合劑，選擇清除劑螯合劑以不同于“大環(huán)螯合劑”，因此適當(dāng)?shù)鼐哂斜取按蟓h(huán)螯合劑”更低的與鑭系金屬的形成常數(shù)。因此，適當(dāng)?shù)剡x擇“清除劑螯合劑”使得它不能替代來(lái)自本權(quán)利要求的大環(huán)螯合劑的鑭系金屬絡(luò)合物的鑭系金屬離子。優(yōu)選選擇清除劑螯合劑，使得捕獲溶液中的游離金屬離子的動(dòng)力學(xué)是快速的。因此，優(yōu)選線性(即非大環(huán))清除劑螯合劑。在結(jié)合到固相時(shí)，清除劑螯合劑通過過濾在任選的洗滌情況下容易與其所接觸的溶液分離。合適的固相材料包括合成的聚合物和共聚物。術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子有機(jī)鹽形式”是指在本發(fā)明的方法中使用之前，清除劑樹脂被適當(dāng)?shù)馗男?。清除樹脂的操作原理是將清除的金屬離子與預(yù)裝載在樹脂上的反荷離子交換。例如，市售可得的chelex?預(yù)裝載有鈉。這種鈉形式的chelex不適用于當(dāng)前的方法，因?yàn)樗a(chǎn)的藥物制劑將被鈉離子污染。本發(fā)明的一個(gè)基本方面在于樹脂預(yù)處理方法，其將不合適的反荷離子(鈉)與藥物制劑相容的離子交換。合適的這種藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子有機(jī)鹽是本領(lǐng)域已知的，包括：葡甲胺、水合氫、二甲基乙醇胺、二乙醇胺、二乙基乙醇胺、葡糖胺、乙醇胺、2-嗎啉乙醇、1-(2-羥乙基)-吡咯烷、三乙醇胺、氨丁三醇、哌嗪、哌啶、吡咯烷、三乙胺、三甲胺、三丙胺和乙基哌啶。優(yōu)選選擇鹽以分別與在第二和第三方面中制備的鑭系金屬絡(luò)合物藥物制劑和mri造影劑的鹽相同(參見下文)。優(yōu)選這種鹽是葡甲胺鹽、氨丁三醇鹽(trometromolium)或水合氫，最優(yōu)選葡甲胺鹽。使用本發(fā)明的清除劑樹脂方法，金屬離子雜質(zhì)和過量的鑭系元素離子可以與藥物制劑相容的離子交換。這種相容離子的實(shí)例是葡甲胺鹽、氨丁三醇鹽和水合氫。短語(yǔ)“含有小于10ppmm”是指與大環(huán)螯合劑配位的m離子。優(yōu)選地，第二溶液含有小于5ppmm，更優(yōu)選小于1ppmm。ep2242515b9的實(shí)施例3的方法具有將釋放鈉離子的問題。這樣的鈉離子將增加液體藥物制劑的摩爾滲透壓濃度(osmolality)。這對(duì)用于造影劑制造的中間體溶液或組合物是不合需要的，因?yàn)楦吣枬B透壓濃度造影劑與軟組織水腫、炎癥和組織損傷有關(guān)聯(lián)[cohan等人,radiology,200(3),593–604.doi:10.1148/radiology.200.3.8756899(1996)]。因此，造影劑生產(chǎn)過程不應(yīng)引入將影響產(chǎn)品的摩爾滲透壓濃度的離子物類。在dota的情況下，已知釓特酸(gadotericacid)的鈉鹽易于結(jié)晶[chang等人,inorg.chem.,32(16),3501-3508(1993)]，因此，重要的是保持鈉水平盡可能地低，以使gddota-葡甲胺沉淀為nagddota的風(fēng)險(xiǎn)降至最小。術(shù)語(yǔ)“包含”或“含有”在整個(gè)本申請(qǐng)中具有其常規(guī)意義并意味著試劑或組合物必須具有所列的基本特征或組分，但其它可能另外存在。術(shù)語(yǔ)“包含”包括“基本由…組成”作為優(yōu)選的子集，其意指組合物具有所列組分，而不存在其它特征或組分。用于步驟(i)的絡(luò)合的合適溶劑是本領(lǐng)域已知的[醫(yī)學(xué)磁共振成像中造影劑的化學(xué)(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)]，并且優(yōu)選地是水性的。鑭系元素通過大環(huán)螯合劑(例如dota)的絡(luò)合是涉及稍微穩(wěn)定的初始絡(luò)合物的多步驟過程，所述初始絡(luò)合物緩慢地成熟，得到最終的熱力學(xué)穩(wěn)定的金屬絡(luò)合物。在步驟(i)中，在進(jìn)行到步驟(ii)之前，優(yōu)選例如通過加熱、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，提高ph，或其組合，確保所述穩(wěn)定的鑭系元素絡(luò)合物生成，如本領(lǐng)域已知的[moreau等人,chem.eur.j.,10(20),5218–32(2004)]。通過已知鑭系元素大環(huán)螯合劑金屬絡(luò)合物的化學(xué)計(jì)量來(lái)計(jì)算摩爾比，獲得步驟(i)中的過量的鑭系金屬。通常是1:1的絡(luò)合物。這樣的信息在醫(yī)學(xué)磁共振成像中造影劑的化學(xué)(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)中給出；對(duì)于釓絡(luò)合物參見port等人[biometals,21,469-490(2008)]；和對(duì)于dota絡(luò)合物參見viola-villegas等人[coord.chem.rev.,253,1906-1925(2009)]。所用鑭系元素和提及的螯合劑二者的化學(xué)純度百分比也被考慮在內(nèi)。適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行步驟(ii)的接觸，以使全部“第一溶液”暴露于清除劑樹脂。這可通過兩個(gè)主要方法，或其組合進(jìn)行。第一選項(xiàng)是使清除劑樹脂與“第一溶液”混合。或者，樹脂可作為柱提供，而“第一溶液”通過柱洗脫。這本身不是一個(gè)層析方法，而是一個(gè)使“第一溶液”暴露于清除劑樹脂的方便方法。然后步驟(iii)的分離通過過濾溶液以除去鑭系元素結(jié)合的樹脂，或通過收集分別來(lái)自柱洗脫的洗脫液來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)于任何一種選項(xiàng)，“第一溶液”可多次暴露于清除劑樹脂。優(yōu)選地，過濾的樹脂或柱可用合適的溶劑洗滌，以確保更完全地回收“第二溶液”。第一方面的方法適合以實(shí)驗(yàn)室、中試設(shè)備或工業(yè)制造規(guī)模進(jìn)行。該方法特別適合于千克規(guī)模生產(chǎn)，從1kg至800kg，優(yōu)選100kg-650kg規(guī)模。第一方面的方法局限于，只有具有比所述鑭系元素更低的與所述大環(huán)螯合劑的形成常數(shù)的雜質(zhì)金屬才能金屬轉(zhuǎn)移并隨后被清除劑樹脂除去。這是因?yàn)椋缟纤?，鑭系元素絡(luò)合在“熱力學(xué)條件”下進(jìn)行，使得得到熱力學(xué)產(chǎn)物，鑭系金屬絡(luò)合物。此外，絡(luò)合反應(yīng)最初在其中動(dòng)力學(xué)平衡快速的酸性條件下進(jìn)行，以確保熱力學(xué)平衡[port等人，biometals，21(4)，469-490(2008)]。過量的鑭系元素誘導(dǎo)金屬轉(zhuǎn)移反應(yīng)，如在方案1對(duì)ca-dota和釓離子所說明的：方案1.生成游離鈣離子的cadota的金屬轉(zhuǎn)移反應(yīng)稍稍過量的釓將確保dota的完全絡(luò)合，得到gd-dota，和dota-配位的雜質(zhì)金屬離子(例如鈣)可借助于不太有利的熱力學(xué)穩(wěn)定性有效地金屬轉(zhuǎn)移到溶液中作為游離離子。對(duì)于各種dota-金屬離子絡(luò)合物和它們的熱力學(xué)穩(wěn)定性的列表見表1：金屬離子dota熱力學(xué)穩(wěn)定性常數(shù)*fe3+29.4dy3+24.8gd3+24.7tm3+24.4eu3+23.5pr3+23.0la3+22.9cu2+22.3zn2+20.8mn2+20.0ca2+17.2mg2+11.85na+4.2k+1.60表1：各種dota絡(luò)合物的熱力學(xué)穩(wěn)定性常數(shù).*數(shù)據(jù)來(lái)自：popov,k.felcman,j.delgado,r.arnaud-neu,f.anderegg,g.pureappl.chem.77,8,2005;cacheris,w.p,nickle,s.k.sherry,a.d;inorg.chem.2646,1986;toth,e.brucher,e;inorganicachimicaacta,221(1-2),1994,pp.165-167。因此，具有比gd-dota(例如鈉、鈣、錳、鋅、銅或鎂)更低的穩(wěn)定性常數(shù)的任何配位的金屬離子將通過gd金屬轉(zhuǎn)移釋放，然后在步驟(ii)和(iii)中被清除劑螯合劑除去。理論上，具有比gd-dota更大的熱力學(xué)穩(wěn)定性的金屬絡(luò)合物可以通過加入大過量的釓離子來(lái)促進(jìn)平衡而被金屬轉(zhuǎn)移，然而這可能在除去游離金屬離子所需的清除樹脂的量方面具有實(shí)際的局限性。如果鑭系元素離子不能從大環(huán)螯合劑中金屬轉(zhuǎn)移污染的金屬離子(m)，由于較高的穩(wěn)定性常數(shù)或由于溶液中存在亞化學(xué)計(jì)量量的鑭系元素，清除樹脂將無(wú)法除去污染金屬離子，因?yàn)樗墙j(luò)合形式。絡(luò)合的金屬離子將不具有與游離的未絡(luò)合形式相同的總陽(yáng)離子電荷，且這將使得金屬離子較不容易在清除樹脂上交換。優(yōu)選實(shí)施方案.在第一方面的方法中，m優(yōu)選為鈣。在第一方面的方法中，步驟(i)的過量的鑭系金屬優(yōu)選為0.01-5，更優(yōu)選為0.01-1，最優(yōu)選為0.05-0.5mol/mol%。當(dāng)使用chelex-100樹脂時(shí)，chelex樹脂對(duì)釓具有比鈣更高的親和力。這意味著在步驟(i)的絡(luò)合反應(yīng)中使用大過量的釓將導(dǎo)致較不經(jīng)濟(jì)可行的清除過程，因?yàn)閷⑿枰尤氪筮^量的清除劑樹脂，以首先除去游離釓，接著除去游離鈣(或類似的金屬離子)。因此，在步驟(i)的絡(luò)合反應(yīng)中使用極低過量的釓是有利的。如果認(rèn)為大環(huán)螯合劑含有如上所述的配位的鈣或類似的金屬離子，則在范圍(約0.01-0.1mol%或10-100ppm，在0.5mgddota溶液中)的極低過量的釓是優(yōu)選的。這樣的范圍低至足以確保對(duì)鈣(金屬)除去的足夠清除能力，但高至足以確保任何ca-dota絡(luò)合物(或相關(guān)物類)的完全的金屬轉(zhuǎn)移反應(yīng)。在該范圍內(nèi)(約0.01至0.1mol%)的過量的鑭系金屬的最低水平可以通過測(cè)量過量的鑭系元素的量，且如果需要，可用鑭系元素或游離螯合配體(cheland)調(diào)節(jié)(類似于ep2242515b9的教導(dǎo)，只是過量的鑭系元素和不過量的配體的端點(diǎn))獲得?；蛘?，在該范圍(約0.01至0.1mol%)內(nèi)的過量的鑭系金屬的最低水平可以通過增量加入這種鑭系元素的等分部分實(shí)現(xiàn)，直到觀察到存在游離金屬離子的陽(yáng)性試驗(yàn)。合適的等分部分大小將在絡(luò)合反應(yīng)中使用的總鑭系元素的0.01-0.1%范圍內(nèi)。這樣的“現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)”對(duì)存在/不存在問題給出是/否的回答，但未提供關(guān)于游離金屬離子濃度的信息?，F(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)可使用視覺著色，使用如本領(lǐng)域已知的二甲酚橙進(jìn)行[barge等人,contrastmed.mol.imaging,1,184-188(2006)]。barge等人教導(dǎo)指示游離gd3+的橙色著色的視覺檢測(cè)對(duì)檢測(cè)低至10μm或更少濃度的gd3+是有效的?；蛘?，過量的金屬離子可通過如本領(lǐng)域已知的二甲酚橙測(cè)定或偶氮胂iii測(cè)定來(lái)確定[分別在barge等人,contrastmed.mol.imaging,1,184-188(2006)和clogston等人,molec.biol.,697,101-108(2011)]。二甲酚橙和偶氮胂iii是可從例如sigma-aldrich市售獲得的。更高水平(>0.1mol%至最多5mol%)的過量的鑭系元素可通過單獨(dú)稱重實(shí)現(xiàn)。上述比色試驗(yàn)可能難以區(qū)分各種金屬離子，可因此給出關(guān)于與染料分子配位的游離金屬離子的總量的信息。如果將太少量的鑭系元素加入到含有太大量的金屬離子污染物的溶液中，則通過比色測(cè)定檢測(cè)的過量金屬離子可能僅由污染金屬離子而不是鑭系元素離子組成，而污染金屬離子保持絡(luò)合形式，不能通過離子交換樹脂除去。為了確保通過比色測(cè)定檢測(cè)的過量金屬離子也含有鑭系金屬，而不僅僅是污染金屬離子，設(shè)想通過元素分析(如icp-ms)表征絡(luò)合反應(yīng)。icp-ms分析不會(huì)從絡(luò)合金屬離子中區(qū)分游離金屬離子，只給出關(guān)于各種元素總量的信息。該信息可用于計(jì)算鑭系元素過量應(yīng)該多大，以便成功地金屬轉(zhuǎn)移所有金屬離子雜質(zhì)，并確保通過比色測(cè)定檢測(cè)的過量金屬離子因此也容納鑭系元素離子。在第一方面的方法中，所述鑭系金屬優(yōu)選地為釓、鐠、鏑、銪或銩，且最優(yōu)選為釓。大環(huán)螯合劑優(yōu)選地為七齒配位基(heptadentate)或八齒配位基(octadentate)，和更優(yōu)選地包含n和/或o供體原子。供體原子優(yōu)選地通過以下化合物提供：羧酸鹽、胺、醇或磷酸鹽供體基團(tuán)。大環(huán)螯合劑更優(yōu)選具有氨基羧酸類型。當(dāng)大環(huán)螯合劑具有氨基羧酸類型時(shí)，這樣的螯合劑優(yōu)選地包含：dota、nota、do3a、bt-do3a、hp-do3a或pcta。大環(huán)螯合劑最優(yōu)選地包含dota，或其鹽：。在生物醫(yī)學(xué)成像中的dota及其金屬絡(luò)合物已由stasiuk和long[chem.comm.,49,2732-2746(2013)]描述。在第一方面的方法中，優(yōu)選所述鑭系金屬是釓且大環(huán)螯合劑包含dota。更優(yōu)選地，釓-dota絡(luò)合物包含釓-dota的葡甲胺鹽。當(dāng)清除劑樹脂包含“清除劑螯合劑”時(shí)，所述清除劑螯合劑優(yōu)選地包含亞氨基二乙酸(ida)、edta或dtpa，更優(yōu)選ida。優(yōu)選的這種清除劑螯合劑是chelex?100，其是苯乙烯二乙烯基苯共聚物，具有綴合于其上的螯合劑ida。chelex?100以鈉鹽或銨鹽形式從bio-radlaboratories市售可得。商業(yè)供應(yīng)商提供關(guān)于用于除去給定量的金屬的合適量的樹脂的信息。在中性ph下，chelex作為陽(yáng)離子交換樹脂發(fā)揮功能，因此對(duì)帶負(fù)電荷的鑭系金屬絡(luò)合物例如gd(dota)沒有親和力。這具有使這樣的絡(luò)合物最小限度地非特異性結(jié)合到固相，因而最小限度地影響產(chǎn)率的優(yōu)點(diǎn)。步驟(i)的鑭系元素絡(luò)合過程在本質(zhì)上通常是多步驟的。對(duì)于釓，首先需要低ph(約2的ph)以溶解所有的gd2o3，得到在溶液中的游離釓離子。在這樣的低ph下，氨基羧酸鹽螯合劑(例如dota)的羧酸根基團(tuán)不能完全絡(luò)合全部釓離子，因?yàn)轸人岣鶊F(tuán)是部分質(zhì)子化的。然后通過加入堿(優(yōu)選葡甲胺)使ph升高(至約ph4-5)，以有利于羧酸根陰離子的形成，這繼而有利于金屬絡(luò)合。形成的初始gd-dota絡(luò)合物實(shí)際上是雙質(zhì)子化的，然后緩慢地成熟，得到高熱力學(xué)(和動(dòng)力學(xué))穩(wěn)定性的最終gd-dota絡(luò)合物[moreau等人,chem.eur.j.,10(20),5218–32(2004)]。通過更高的ph和加熱有利于成熟過程(通常在約ph5下，加熱數(shù)小時(shí)完成反應(yīng))。優(yōu)選地，避免超過7的ph，因?yàn)檫@有引起任何釓離子的水解的風(fēng)險(xiǎn)，伴有隨后的gd2o3的再形成。當(dāng)?shù)谝环矫娴蔫|系金屬絡(luò)合物作為葡甲胺鹽獲得時(shí)，步驟(i)的絡(luò)合優(yōu)選地通過使用葡甲胺將ph調(diào)節(jié)至4.5-5.5完成。步驟(ii)的去除優(yōu)選地在ph4.0-6，更優(yōu)選4.5-5.5下進(jìn)行，約ph5是理想的。為了確保除去過程完成，可以使用比色現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證所有金屬離子已被清除劑樹脂除去。這種“現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試”向存在/不存在問題給出是/否的答案，但不提供關(guān)于游離金屬離子濃度的信息?，F(xiàn)場(chǎng)測(cè)試可以使用視覺著色，使用如本領(lǐng)域已知的二甲酚橙進(jìn)行[barge等人，contrastmed.mol.imaging，1,184-188(2006)]。barge等人教導(dǎo)，指示游離gd3+的橙色著色的視覺檢測(cè)對(duì)檢測(cè)低至10μm或更低的濃度的gd3+是有效的。本發(fā)明的大環(huán)螯合劑可從一系列的供應(yīng)商市售可得。dota也可通過desreux的方法合成[inorg.chem.,19,1319-1324(1980)]。大環(huán)螯合劑合成的進(jìn)一步細(xì)節(jié)由kotel等人給出[第3章第83-155頁(yè)，在醫(yī)學(xué)磁共振成像中造影劑的化學(xué)(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)]。葡甲胺(n-甲基葡萄糖胺)和其它藥學(xué)上可接受的鹽可從一系列的供應(yīng)商市售可得。優(yōu)選地，使用藥用級(jí)材料。在第二方面，本發(fā)明提供一種制備液體藥物制劑的方法，所述制劑包含鑭系金屬與大環(huán)螯合劑的金屬絡(luò)合物，以及量在所述金屬絡(luò)合物的0.002和0.4mol/mol%范圍內(nèi)的未絡(luò)合形式的所述螯合劑，所述方法包括以下步驟：(a)進(jìn)行第一方面的過程以得到其中限定的第二溶液；(b)將如第一方面所限定的0.002和0.4mol/mol%范圍內(nèi)的未絡(luò)合形式的大環(huán)螯合劑加入到來(lái)自步驟(a)的所述第二溶液，得到所述液體藥物制劑；其中所述制劑包含小于10ppmm，其中m如第一方面所限定。第二方面中的鑭系元素、m、大環(huán)螯合劑和清除劑樹脂的優(yōu)選方面如第一方面(上文)所述。短語(yǔ)“未絡(luò)合形式的螯合劑”是指“游離螯合劑”，即沒有任何配位的金屬離子。因此，未絡(luò)合形式的螯合劑不具有任何配位的鑭系元素或其它金屬離子，因此完全可用于隨后的金屬絡(luò)合?！拔唇j(luò)合形式的螯合劑”可以含有離子形式的金屬離子，例如當(dāng)作為金屬供體基團(tuán)例如羧酸的鹽存在時(shí)。步驟(b)的加入優(yōu)選通過首先加入過量的螯合劑，然后中和至中性ph(約ph6.5-8.0)進(jìn)行。當(dāng)所需的鑭系元素大環(huán)絡(luò)合物是葡甲胺鹽時(shí)，該中和優(yōu)選使用葡甲胺進(jìn)行。步驟(b)中加入大環(huán)螯合劑可以在不具有游離鑭系元素在第一或第二溶液中的濃度/量的在先、過程中測(cè)定的情況下進(jìn)行。這是因?yàn)閷?duì)于本方法不需要這樣的步驟，即第一方面的步驟(ii)和(iii)的除去和分離給出具有已知(即有效地為零)濃度的游離鑭系元素的“第二溶液”。因此，基于假定在步驟(i)的絡(luò)合反應(yīng)中100%轉(zhuǎn)化，基于第一方面的步驟(i)中起始摩爾量的大環(huán)螯合劑，根據(jù)計(jì)算量的“未絡(luò)合形式的螯合劑”進(jìn)行螯合劑加入。100%轉(zhuǎn)化率與本領(lǐng)域關(guān)于這些反應(yīng)的效率已知的一致。存在于溶液中的鑭系金屬螯合物的量是從在加入鑭系元素之前加入的大環(huán)螯合劑的量和使用清除樹脂的純化方法得知的。這兩種操作，絡(luò)合和純化已知是高產(chǎn)量的，且為了建立計(jì)算待加入的未絡(luò)合螯合劑的量的基礎(chǔ)，假設(shè)是定量的。或者，可以測(cè)量鑭系金屬螯合物的量和相應(yīng)加入的過量螯合劑的量。游離螯合劑可以作為固體或作為溶液優(yōu)選加入，優(yōu)選作為溶液加入。當(dāng)制備大環(huán)螯合劑的溶液以進(jìn)行第一方面的步驟(i)時(shí)，那么最優(yōu)選的方法是在加入鑭系元素之前從該溶液中除去合適的體積分?jǐn)?shù)(例如從1000l反應(yīng)體積或等量除去約1l)。該體積分?jǐn)?shù)然后方便地用于第二方面的步驟(b)的加入。這種方法不需要制備多種溶液，和/或進(jìn)行多次計(jì)算來(lái)修正純度或含水量。在第二方面的方法中，未絡(luò)合形式的螯合劑的量?jī)?yōu)選相對(duì)于大環(huán)鑭系絡(luò)合物為0.025和0.25范圍，更優(yōu)選為0.05至0.20，最優(yōu)選為0.10至0.15mol/mol。未絡(luò)合形式的螯合劑適當(dāng)?shù)夭缓|系金屬離子，且優(yōu)選也不含配位的鈣、鋅和鎂離子。在第三方面，本發(fā)明提供一種制備mri造影劑的方法，其包括：(a)進(jìn)行第二方面的方法，得到如在其中限定的液體藥物制劑；(b)任選地用生物相容的載體稀釋來(lái)自步驟(a)的液體藥物制劑；(c)將來(lái)自步驟(b)的制劑分配到藥學(xué)上可接受的容器或注射器中，得到分配的容器或注射器；(d)在無(wú)菌制造條件下進(jìn)行步驟(a)-(c)，或?qū)?lái)自步驟(c)的分配的容器或注射器最終滅菌，得到呈適合于哺乳動(dòng)物給予形式的在所述藥學(xué)上可接受的容器或注射器中的mri造影劑;其中所述造影劑包含小于10ppmm。第三方面中的液體藥物制劑的優(yōu)選實(shí)施方案如第二方面(上文)中所限定。第三方面中的鑭系元素、大環(huán)螯合劑和步驟(a)的方法的優(yōu)選實(shí)施方案如第一方面(上文)所述。術(shù)語(yǔ)“造影劑”具有其在體內(nèi)醫(yī)學(xué)成像領(lǐng)域的常規(guī)意義，并指適合于哺乳動(dòng)物給予形式的試劑，其有助于在感興趣的區(qū)域或器官提供比可通過單獨(dú)使受試者成像獲得的圖像更清楚的圖像。“mri造影劑”通常為一種順磁性或鐵磁性物質(zhì)，適合于哺乳動(dòng)物給予，其縮短在受試者體內(nèi)成像感興趣的區(qū)域中相關(guān)核的t1和/或t2弛豫時(shí)間(例如對(duì)于1hnmr的1h)。術(shù)語(yǔ)“受試者”意指哺乳動(dòng)物體內(nèi)，優(yōu)選完整的哺乳動(dòng)物體內(nèi)，和更優(yōu)選活的人類受試者。短語(yǔ)“適合于哺乳動(dòng)物給予的形式”意指這樣的組合物，其是無(wú)菌的、無(wú)熱原的、缺乏產(chǎn)生毒性或不利作用的化合物，以及在可生物相容的ph(約ph4.0-10.5)下配制。這樣的組合物缺乏可能導(dǎo)致體內(nèi)栓子的風(fēng)險(xiǎn)的顆粒，并被配制以便在與生物液體(例如血)接觸時(shí)不會(huì)發(fā)生沉淀。這樣的組合物也含有僅生物相容的賦形劑，且優(yōu)選是等滲的。如同其它體內(nèi)成像劑，造影劑設(shè)計(jì)成對(duì)待成像的哺乳動(dòng)物受試者具有最小限度的藥理學(xué)作用。優(yōu)選地，造影劑可以最小限度的侵入方式給予哺乳動(dòng)物體內(nèi)，即當(dāng)在專業(yè)的醫(yī)療專門知識(shí)下進(jìn)行時(shí)，對(duì)受試者沒有實(shí)質(zhì)上的健康風(fēng)險(xiǎn)。這樣的最小限度的侵入給予優(yōu)選地經(jīng)靜脈內(nèi)給予到所述受試者的外周靜脈中，而不需要局部或全身麻醉。術(shù)語(yǔ)“生物相容的載體”意指一種流體，特別是液體，以使組合物是生理學(xué)上可容忍的，即可給予哺乳動(dòng)物體內(nèi)，而無(wú)毒性或過度的不適。生物相容的載體適合為一種可注射的載體液體例如供注射用的無(wú)菌的、無(wú)熱原的水；水溶液例如鹽水(其可有利地進(jìn)行平衡，以使供注射用的最終產(chǎn)品是等滲的)；包含生物相容的緩沖劑(例如磷酸鹽緩沖劑)的水性緩沖溶液；一種或多種滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)(例如等離子體陽(yáng)離子與生物相容的反荷離子的鹽)、糖(例如葡萄糖或蔗糖)、糖醇(例如山梨糖醇或甘露醇)、二醇(例如甘油)，或其它非離子多元醇材料(例如聚乙二醇、丙二醇等)的水溶液。優(yōu)選地，所述生物相容的載體是供注射用的無(wú)熱原的水(wfi)、等滲鹽水或磷酸鹽緩沖劑。短語(yǔ)“無(wú)菌制造”指在無(wú)菌制造，即無(wú)熱源條件下進(jìn)行相關(guān)過程步驟，例如在干凈室環(huán)境中。術(shù)語(yǔ)“滅菌”或“滅菌法”具有其常規(guī)意義，且指破壞微生物的過程，以獲得一種無(wú)菌、無(wú)熱源組合物。短語(yǔ)“最終滅菌”具有其常規(guī)意義，并指進(jìn)行符合gmp(良好制造實(shí)踐)的前面的步驟，但在整個(gè)過程中盡可能晚地執(zhí)行滅菌步驟。組分和試劑可通過本領(lǐng)域已知的方法滅菌，包括：無(wú)菌過濾、使用例如γ-輻射的最終滅菌、高壓滅菌法、干熱或化學(xué)處理(例如用環(huán)氧乙烷)或其組合。術(shù)語(yǔ)“高壓滅菌法”具有其常規(guī)意義，并指使用過熱蒸汽滅菌的一種特殊滅菌方法。高壓滅菌法和其它滅菌方法在醫(yī)學(xué)和藥物產(chǎn)品中實(shí)現(xiàn)滅菌(achievingsterilityinmedicalandpharmaceuticalproducts),n.halls(crcpress,1994)中描述。在第二方面的方法中，最終滅菌是優(yōu)選的。一種優(yōu)選的最終滅菌方法是高壓滅菌法。術(shù)語(yǔ)“分配的容器或注射器”指裝料的容器，即已將等分的組合物分配至其中的容器，即分配的小瓶。用于第二方面的方法的合適容器、小瓶和罩以及注射器是藥用級(jí)的并可廣泛經(jīng)市售可得。第二方面的造影劑優(yōu)選包含小于5ppmm，更優(yōu)選小于1ppmm。在第四方面，本發(fā)明提供一種包含陽(yáng)離子交換樹脂的清除劑樹脂，其中所述樹脂的陰離子官能團(tuán)作為所述官能團(tuán)的藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子有機(jī)鹽存在。第四方面的清除劑樹脂的優(yōu)選實(shí)施方案如第一方面(上文)中所述。當(dāng)清除劑樹脂例如用作葡甲胺鹽時(shí)，這些材料可以通過常規(guī)的離子交換色譜技術(shù)制備，以通過用濃酸洗滌來(lái)改變反荷離子(例如chelex?-100的鈉鹽或銨鹽)，接著用過量的葡甲胺溶液培養(yǎng)或洗脫。固相然后可以任選地在使用前具有降低的水分含量，但適合以潮濕形式使用?；蛘?，葡甲胺鹽清除劑樹脂可通過加入質(zhì)子化形式的樹脂(通過以與實(shí)施例1的程序類似的程序，用強(qiáng)酸洗滌例如市售的chelex獲得)原位生成。然后水合氫(hydroxonium)chelex樹脂在含有葡甲胺的絡(luò)合反應(yīng)混合物中原位形成相應(yīng)的葡甲胺鹽形式。使用這種方法，必須仔細(xì)監(jiān)測(cè)溶液，以確保ph不會(huì)變得過酸，就像水合氫清除劑樹脂最初與含葡甲胺的溶液接觸的情況一樣。然而，chelex樹脂的保存期限大大降低，且任何水合氫-chelex樹脂都必須在使用前立即制備。葡甲胺鹽形式的chelex是穩(wěn)定的，且可以長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存??。這樣的葡甲胺樹脂具有具體的優(yōu)點(diǎn)，即當(dāng)制備鑭系金屬絡(luò)合物的葡甲胺鹽時(shí)，產(chǎn)物的鈉離子/鹽含量減少。因此，在市售的chelex?樹脂中的清除劑螯合物(ida)的反荷離子是鈉，因此對(duì)于捕獲的每一個(gè)釓離子，3個(gè)鈉離子被釋放進(jìn)入反應(yīng)混合物中。為避免鈉污染，可制備chelex?樹脂以便所有的鈉離子交換葡甲胺鹽離子。因此，當(dāng)釓離子被清除劑樹脂捕獲時(shí)，釋出3個(gè)葡甲胺鹽離子。使用后，具有結(jié)合的金屬離子的清除劑樹脂可任選地再生，以通過用過量的葡甲胺或其它反荷離子處理隨后再使用。對(duì)于chelex，標(biāo)準(zhǔn)再生方法在由商業(yè)供應(yīng)商提供的操作指示手冊(cè)中描述。完全除去釓將通過在樹脂的酸性水洗滌后的洗脫液的icp-aes或icp-ms，或通過上文提及的“現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)”確定。在第五方面，本發(fā)明提供第四方面的清除劑樹脂在第一方面的純化方法、第二方面的藥物制劑的制備方法或第三方面的mri造影劑的制備方法中的用途。第五方面中的清除劑樹脂的優(yōu)選實(shí)施方案如第一方面(上文)所述。附圖描述.圖1顯示釓離子用鈉(na-chelex)或葡甲胺鹽(meg-chelex)離子替代，和氯離子含量不受用chelex樹脂處理氯化釓參考溶液的影響。圖2顯示本發(fā)明的相同的釓除去程序當(dāng)對(duì)gd-dota/過量的釓的混合物使用時(shí)是有效的。圖2也證實(shí)chelex不能從gd-dota除去釓，因?yàn)闆]有游離dota形成。本發(fā)明通過下文詳述的非限制性實(shí)施例說明。實(shí)施例1提供根據(jù)本發(fā)明的葡甲胺清除劑螯合劑樹脂的制備。實(shí)施例2顯示兩種不同的chelex樹脂成功地從gdcl3的參考溶液除去釓離子。鈉形式的樹脂顯示增加溶液的鈉含量且葡甲胺鹽形式的樹脂顯示增加溶液的葡甲胺鹽(megluminium)含量。實(shí)施例3顯示實(shí)施例2的兩種不同的chelex樹脂成功地從含有g(shù)d-dota絡(luò)合物(伴有過量的游離釓)的組合物除去釓離子。實(shí)施例3也證實(shí)chelex樹脂不能從gd-dota絡(luò)合物除去gd3+，因?yàn)樵趯游鲋袥]有游離dota存在(圖2)。zn-dota在28.1分鐘下洗脫。實(shí)施例4提供一種能夠在這樣的組分的混合物中分析gd-dota、游離dota和葡甲胺的hplc-cad方法。實(shí)施例5提供使用本發(fā)明制造gd-dota溶液的實(shí)例。實(shí)施例6說明清除樹脂如何在dota存在下不能除去鈣。實(shí)施例7說明將dota加入到gddota-葡甲胺溶液。實(shí)施例8提供根據(jù)本發(fā)明的葡甲胺清除劑樹脂的工業(yè)規(guī)模制備。實(shí)施例9說明使用根據(jù)本發(fā)明的葡甲胺清除劑樹脂的工業(yè)規(guī)模的鈣純化方法?？s寫.bt-do3a：10-(2,3-二羥基-1-羥基甲基丙基)-1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸；輪環(huán)藤寧：1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷；do3a：1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸；dota：1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸；dtpa：二亞乙基三胺-五乙酸；edta：乙二胺-四乙酸；gmp：良好制造實(shí)踐；hp-do3a：1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸-10-(2-羥基丙基)；hplc：高效液相層析；hplc-cad：hplc電霧式檢測(cè)器；icp-aes：電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜；icp-ms：電感耦合等離子體質(zhì)譜；mecn：乙腈；min：分鐘；mri：磁共振成像；nota：1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷-1,4,7-三乙酸；pcta：3,6,9,15-四氮雜雙環(huán)[9.3.1]十五烷-1,11,13-三烯-3,6,9,-三乙酸；ppm：百萬(wàn)分之一wfi：注射用水。實(shí)施例1：制備葡甲胺化chelex?樹脂(“meg-chelex”).將在燒結(jié)玻璃濾器上的chelex-100樹脂(sigma-aldrich;100g)用1mhcl(1l)按4份處理4h。然后用水洗滌樹脂直至洗脫液為ph6.5，且用樹脂平衡葡甲胺(10g)的水溶液(400ml)經(jīng)1h的時(shí)間段。再次用水洗滌樹脂至ph8，然后在真空下過濾并干燥1分鐘，得到潮濕的樹脂，其以該形式(“meg-chelex”)使用。實(shí)施例2：使用chelex?樹脂除去釓離子.氯化釓參考溶液用任一標(biāo)準(zhǔn)chelex(鈉離子形式；“na-chelex”或者葡甲胺化chelex(實(shí)施例1；“meg-chelex”)處理：向每個(gè)潮濕的chelex(na或葡甲胺)樹脂(0.5g)中加入5mlgdcl3參考溶液(1mg/ml)。然后在30℃將懸浮液放置在震蕩臺(tái)上過夜。懸浮液的hplc-cad分析(使用實(shí)施例4的方法)表明，用meg-chelex處理的釓溶液沒有鈉污染，而用na-chelex處理的溶液具有高得多的鈉離子濃度。用偶氮胂iii的比色測(cè)定表明在任一溶液中均無(wú)游離釓。結(jié)果示于圖1。實(shí)施例3：使用chelex?樹脂從gd-dota制劑除去釓離子.含有已知過量的游離釓(160μg/ml)的gd-dota-葡甲胺反應(yīng)混合物(濃度~380mg/ml)用標(biāo)準(zhǔn)(na-chelex)或葡甲胺化(meg-chelex)chelex處理：向0.5g潮濕的chelex樹脂(na-chelex或meg-chelex；實(shí)施例1)中加入5ml上述gd-dota-葡甲胺/游離gd混合物的等分部分。在30℃，將懸浮液放置在震蕩臺(tái)上過夜。所得的懸浮液的hplc-cad分析(使用實(shí)施例4的方法)表明meg-chelex處理的釓溶液沒有另外的鈉污染(使用含有一些鈉離子的dota)，而na-chelex處理的溶液具有增加水平的鈉。用偶氮胂iii的比色測(cè)定表明在任一溶液中均無(wú)游離釓。在meg-chelex處理的反應(yīng)混合物中的葡甲胺濃度稍有增加，表明釓交換。結(jié)果示于圖2。實(shí)施例4：hplc-cad方法：gddota-葡甲胺溶液中的dota測(cè)定.檢測(cè)器：esacorona，電霧式檢測(cè)器；柱：sequantzic-philic(5μm,150*4.6mm)。樣品制備：向20μl(約0.5m)反應(yīng)混合物中加入zn(oac)2(10μl,10mg/ml)，然后加入水(270μl)，接著加入mecn(700μl)*。注入體積：20μl；移動(dòng)相：100mm乙酸銨(a)、乙腈(b)。在樣品注入前，用初始組合物(15:85a:b)，以1ml/min的流速調(diào)節(jié)柱至少5分鐘。梯度：時(shí)間(min)流速(ml/min)%a%b曲線1.初始1.0015.085.02.50.001.0033.066.06其中曲線6指線性梯度。觀察到以下保留時(shí)間：保留時(shí)間(min)葡甲胺　　　　　　21.3gddota　　　　　23.2zndota*　　　　　28.1.*dota作為zndota絡(luò)合物間接分析。實(shí)施例5：gd-dota葡甲胺的工業(yè)制造使dota(211kg)溶于沸水(1600kg)并加入gd2o3(94.8kg)。溫度設(shè)置在70℃并將漿料攪拌過夜。通過比色滴定測(cè)定溶液中游離釓離子(1390ug/g)的存在。將溫度調(diào)節(jié)至50℃并在溶液中加入葡甲胺以達(dá)到ph5.5。初步加入94.8kg葡甲胺，用葡甲胺的水溶液(1.5m)進(jìn)行ph的最終調(diào)節(jié)。將puropackc150(50l,根據(jù)實(shí)施例8預(yù)調(diào)節(jié))置于柱中。在足以在2h內(nèi)通過全部體積的溶液的流速下，將gddota溶液泵送通過柱。游離釓的濃度(45ug/ml)使用比色滴定測(cè)定。gddota溶液的離子交換用通過柱一次以上進(jìn)行，以通過比色滴定確定低于檢測(cè)限度的游離釓的水平(4ug/g)，得到gddota-葡甲胺溶液。實(shí)施例6：使用清除劑樹脂除去金屬離子，dota對(duì)清除功效的影響.向30ml0.1m乙酸銨中加入葡萄糖酸鈣、氯化釓和dota螯合配體，其用量如下表所示。將溶液在50℃下加熱24小時(shí)，然后在室溫下用1g葡甲胺化chelex(根據(jù)實(shí)施例1制備)攪拌。在加入葡甲胺化chelex之前和之后1h，通過icp-ms分析鈣和釓的濃度。結(jié)果表明，由于形成穩(wěn)定的cadota絡(luò)合物，chelex在dota存在下不能除去鈣(入口1對(duì)2)。結(jié)果還表明，加入釓(入口2對(duì)4)將促進(jìn)鈣的除去，由于cadota的金屬轉(zhuǎn)移，隨后形成gddota絡(luò)合物和游離鈣離子。chelex樹脂將清除所有的金屬轉(zhuǎn)移鈣離子并留下所有dota絡(luò)合離子在溶液中(加入亞化學(xué)計(jì)量量的釓，剩余的dota會(huì)使鈣絡(luò)合：11-7.5=3.5μmol；3.5/7.5×10=5ppm)。實(shí)施例7：向gddota-葡甲胺溶液中加入dota.gddota(如實(shí)施例5所制備)的濃度通過ir測(cè)量以及溶液的重量測(cè)量確定，gddota的總量確定為269.8kg。然后加入游離dota(2.79升的101.1g/ml溶液；總量307.6g)。然后按小份加入葡甲胺溶液(1m)直至獲得7.2的ph。通過真空蒸發(fā)(140℃)，重量被減少至630kg。保持溶液在40℃下10h。gddota的濃度經(jīng)測(cè)定為1.06m，和游離dota的量經(jīng)測(cè)定為537ug/ml。實(shí)施例8：制備葡甲胺化puropackc150?樹脂(“meg-ppc”).puropackc150樹脂調(diào)節(jié)為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)程序的質(zhì)子形式。樹脂用水沖洗直至中性水從樹脂床洗脫。將葡甲胺的溶液(400g/kg樹脂)通過樹脂床循環(huán)10h，再次用水沖洗樹脂直至中性ph。實(shí)施例9：鈣除去過程含有鈣的dota(1.6ugca/gdota，根據(jù)icp-ms分析)用于制造gd-dota葡甲胺溶液(如實(shí)施例5中所述)。然后向gd-dota葡甲胺溶液中加入dota(如實(shí)施例7中所述)，得到藥物制劑。使用icp-ms分析鈣濃度，且確定低于檢測(cè)限度(<0.1ppm)。預(yù)期的鈣濃度(如果在制造中沒有采用純化方法)為0.6ppm。當(dāng)前第1頁(yè)12