專(zhuān)利名稱：利福昔明的新多晶型形式,它們的制備方法及其在藥物制劑中的用途的制作方法
背景技術(shù)：
利福昔明(INN；參見(jiàn)The Merck Index，第13版，8304)是一種屬于利福霉素類(lèi)的抗生素，準(zhǔn)確地說(shuō)，是在意大利專(zhuān)利IT 1154655中描述和要求保護(hù)的吡啶并咪唑并利福霉素，而歐洲專(zhuān)利EP 0161534描述和要求保護(hù)了其從利福霉素O(The Merck Index，第13版，8301)起始的制備方法。
這兩篇專(zhuān)利均以概括的方式描述了利福昔明的純化，披露稱結(jié)晶可以在適宜的溶劑或溶劑系統(tǒng)中進(jìn)行，并在一些實(shí)施例中概略地說(shuō)明了反應(yīng)所得的產(chǎn)物可以用乙醇/水7∶3的混合物結(jié)晶，并且在大氣壓力和真空下均可進(jìn)行干燥，但沒(méi)有以任何方式披露結(jié)晶和干燥的實(shí)驗(yàn)條件，也沒(méi)有披露所獲得的產(chǎn)物的任何特征性結(jié)晶學(xué)特性。
由于先前沒(méi)有注意到存在不同多晶型物，因此這兩篇專(zhuān)利中所描述的實(shí)驗(yàn)條件均旨在得到從化學(xué)觀點(diǎn)來(lái)看具有合適純度的均勻產(chǎn)物，未涉及產(chǎn)物自身的結(jié)晶學(xué)方面。
現(xiàn)在已經(jīng)出乎意料地發(fā)現(xiàn)存在一些多晶型形式，它們的形成除溶劑外還取決于進(jìn)行結(jié)晶和干燥的時(shí)間和溫度條件。
基于本發(fā)明中所報(bào)道的它們各自特殊的衍射圖，這些有序的多晶型形式在下文中將被照例指定為利福昔明δ(

圖1)和利福昔明ε(圖2)。
利福昔明的多晶型形式通過(guò)粉末X-射線衍射技術(shù)來(lái)表征。
對(duì)于一種作為用于人用和獸用的藥物制劑出售的具有藥理學(xué)活性的化合物如利福昔明而言，這些多晶型形式的鑒定和表征以及同時(shí)對(duì)獲得它們的實(shí)驗(yàn)條件的確定均是非常重要的。實(shí)際上，已知能包含在藥物制劑中用作活性成分的化合物的多晶現(xiàn)象能夠影響藥物的藥理學(xué)-毒理學(xué)性質(zhì)。作為口服或局部形式的藥物被施用的活性成分的不同多晶型形式可以改變它們的許多性質(zhì)，如生物利用度、溶解度、穩(wěn)定性、顏色、可壓性、流動(dòng)性和可加工性，從而改變毒理學(xué)安全性、臨床有效性和生產(chǎn)效率特性。
上述內(nèi)容可以被如下事實(shí)權(quán)威地確證即管理藥品上市許可的批準(zhǔn)授權(quán)的管理當(dāng)局要求活性成分的生產(chǎn)方法要以就生產(chǎn)批次的多晶現(xiàn)象而言產(chǎn)生均勻和正確結(jié)果的方式進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化和控制(CPMP/QWP/96，2003-新活性物質(zhì)的化學(xué)指導(dǎo)原則；CPMP/ICH/367/96-指導(dǎo)規(guī)范注解新藥成分和新藥產(chǎn)品化學(xué)成分的檢測(cè)方法和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)；實(shí)施日期2000年5月)。
在利福霉素抗生素領(lǐng)域，對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)化的要求已經(jīng)被Henwood S.Q.，deVilliers M.M，Liebenberg W.和 A.P.，Drug Development and IndustrialPharmacy，26(4)，403-408，(2000)進(jìn)一步加強(qiáng)，他們證實(shí)由不同生產(chǎn)商制造的不同生產(chǎn)批次的利福平(INN)具有差異，因?yàn)樗鼈兙哂胁煌亩嗑吞匦裕⒁虼孙@示出不同的溶解特性和各自藥理學(xué)性質(zhì)的相應(yīng)改變。
通過(guò)使用在先專(zhuān)利IT1154655和EP0161534中所概括性披露的結(jié)晶和干燥方法，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在一些實(shí)驗(yàn)條件下獲得利福昔明的不充分結(jié)晶類(lèi)型，而在其它實(shí)驗(yàn)條件下獲得利福昔明的其它結(jié)晶多晶型形式。而且，還發(fā)現(xiàn)一些在上述專(zhuān)利中絕對(duì)沒(méi)有被披露的參數(shù)如保存條件和周?chē)h(huán)境的相對(duì)濕度對(duì)決定多晶型物的形式具有令人驚訝的影響。
本專(zhuān)利申請(qǐng)的目的、即利福昔明的多晶型形式從未被發(fā)現(xiàn)或假設(shè)過(guò)，而是認(rèn)為在所述的條件范圍內(nèi)，無(wú)論選擇何種方法，總是可以獲得單一的均勻產(chǎn)品，與用于結(jié)晶、干燥和保存的條件無(wú)關(guān)。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)δ和ε形式的形成取決于結(jié)晶溶劑中水的存在、產(chǎn)物結(jié)晶的溫度和干燥階段結(jié)束時(shí)存在于產(chǎn)物中的水量。
現(xiàn)合成了利福昔明的δ形式和ε形式，它們是本發(fā)明的目的。
具體而言，δ形式的特征在于在干燥的固體物質(zhì)中水的殘留量為2.5％至6％(w/w)，更優(yōu)選為3％至4.5％，而ε形式是在控制條件下從δ形式轉(zhuǎn)變的多晶型轉(zhuǎn)化的結(jié)果。在干燥物質(zhì)中其水含量小于4.5％(w/w)。
這些結(jié)果具有顯著的重要性，因?yàn)樗鼈兇_定了可能被認(rèn)為不是決定產(chǎn)物多晶現(xiàn)象的關(guān)鍵的一些處理步驟的工業(yè)制備條件，例如將結(jié)晶產(chǎn)物的水量維持在嚴(yán)格范圍值內(nèi)，或其中一種形式、即在繼續(xù)干燥以獲得ε形式之前獲得δ形式的干燥終產(chǎn)物的方法，或終產(chǎn)物的保存條件，或保存產(chǎn)物的容器的性質(zhì)。
利福昔明在胃腸道中發(fā)揮其廣譜抗菌活性，對(duì)抗包括厭氧菌菌株在內(nèi)的引起感染性腹瀉的集中于胃腸的細(xì)菌。據(jù)報(bào)道利福昔明的特征在于可以忽略的全身吸收，這是由其化學(xué)和物理性質(zhì)造成的(Descombe J.J.等.口服施用于健康志愿者后利福昔明的藥動(dòng)學(xué)研究.Int J C in.Pharmacol.Res.，14(2)，51-56，(1994))。
現(xiàn)在我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在兩種鑒定的利福昔明多晶型形式的基礎(chǔ)上調(diào)整其全身吸收水平是可能的，并且這是本發(fā)明的一部分，實(shí)現(xiàn)的方法是施用利福昔明的不同的多晶型形式，即利福昔明δ和利福昔明ε?？赡芫哂醒袧舛葹?.001-0.3μg/ml的幾乎100倍的吸收差異。
所證明的生物利用度差異是重要的，因?yàn)樗軌騾^(qū)分利福昔明兩種多晶型物δ和ε的藥理學(xué)和毒理學(xué)性質(zhì)。
事實(shí)上，利福昔明ε通過(guò)口服途徑的吸收可以忽略而利福昔明δ具有少量的吸收。
利福昔明ε基本上不被吸收，可能僅通過(guò)包括胃腸道的情況在內(nèi)的局部作用起作用，優(yōu)點(diǎn)是毒性非常低。
另一方面，可以發(fā)現(xiàn)被少量吸收的利福昔明δ具有對(duì)抗能隱藏它們自己并部分逃避局部抗生素作用的全身性微生物的有利應(yīng)用。
關(guān)于與利福昔明的治療應(yīng)用相關(guān)的可能不良事件，值得注意的相關(guān)是誘導(dǎo)細(xì)菌對(duì)抗生素的抗藥性。一般而言，在用抗生素進(jìn)行的治療實(shí)踐中，通過(guò)抗藥性菌株的選擇而誘導(dǎo)細(xì)菌對(duì)該種抗生素或其它抗生素產(chǎn)生抗藥性一直是可能的。
對(duì)于利福昔明，這一方面是尤其相關(guān)的，因?yàn)槔Ｎ裘鲗儆诶Ｃ顾丶易?，該族的一個(gè)成員利福平在結(jié)核病的治療中被大理使用。目前結(jié)核病的短療程治療是包括四種活性藥物成分的組合療法利福平、異煙肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺，其中利福平起關(guān)鍵作用。因此，任何通過(guò)選擇對(duì)利福平的抗藥性而危害治療有效性的藥物都將是有害的。(Kremer L.等.“結(jié)核病再度出現(xiàn)對(duì)策和治療”，ExpertOpin.Investig.Drugs，11(2)，153-157，(2002))。
原則上，看看利福昔明和利福平之間的結(jié)構(gòu)相似性，就可能通過(guò)使用利福昔明來(lái)選擇結(jié)核分支桿菌的抗藥性菌株和誘導(dǎo)對(duì)利福平的交叉抗藥性。為了避免這一負(fù)性事件，關(guān)鍵是控制全身吸收的利福昔明量。
在這一觀點(diǎn)下，所發(fā)現(xiàn)的利福昔明的δ和ε形式在全身性吸收方面的差異是有意義的，因?yàn)檫€在低于利福昔明抑制濃度的濃度如0.1-1μg/ml下證實(shí)抗藥性突變菌株的選擇是可能的(Marchese A.等.利福昔明、甲硝唑和萬(wàn)古霉素抗難辨梭狀芽孢桿菌的體外活性和包括產(chǎn)氨種類(lèi)在內(nèi)的代表性厭氧菌和需氧菌的自發(fā)抗藥性突變菌株的選擇速度。Chemotherapy，46(4)，253-266，(2000))。
根據(jù)上述內(nèi)容，清楚地強(qiáng)調(diào)了本發(fā)明的重要性，本發(fā)明給出了上述利福昔明多晶型形式存在的知識(shí)和用于制備具有不同藥理學(xué)性質(zhì)的純單一形式的各種工業(yè)途徑。
上述δ和ε形式可以作為純的和均質(zhì)的產(chǎn)品被有利地用于制備包含利福昔明的藥物制劑。
如已經(jīng)描述的那樣，從所獲得的產(chǎn)物的純化和鑒定角度來(lái)看，EP 0161534中所公開(kāi)的和要求保護(hù)的由利福霉素O制備利福昔明的方法是有缺陷的；從合成觀點(diǎn)來(lái)看也具有一些局限，例如需要16-72小時(shí)的非常長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間、很不適于工業(yè)應(yīng)用，此外還因?yàn)槠湮刺峁┛稍诜磻?yīng)混合物中形成的氧化利福昔明的原位還原。
因此，本發(fā)明的另一目的是本文中以產(chǎn)物形式要求保護(hù)且可以如所述的那樣使用的利福昔明的δ和ε形式的改進(jìn)的工業(yè)制備方法以及用于制備包含這種活性成分的藥物制劑的均質(zhì)的活性成分。
發(fā)明概述如已經(jīng)描述的那樣，稱為利福昔明(INN)的抗菌劑的δ形式和ε形式、它們的制備方法以及它們?cè)谥苽溆糜诳诜蚓植客緩降乃幬镏苿┲械挠猛臼潜景l(fā)明的目的。
本發(fā)明的方法目的包括使1摩爾當(dāng)量的利福霉素O與過(guò)量的2-氨基-4-甲基吡啶、優(yōu)選2.0至3.5摩爾當(dāng)量在由水和乙醇以1∶1至2∶1的體積比組成的溶劑混合物中于40℃至60℃的溫度下反應(yīng)2至8小時(shí)。
反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)物冷卻至室溫并在劇烈攪拌下加入抗壞血酸在水、乙醇和含水濃鹽酸混合物中的溶液，以便將反應(yīng)過(guò)程中形成的少量氧化的利福昔明還原，最后通過(guò)進(jìn)一步加入濃鹽酸水溶液將pH調(diào)至約2.0以便更好地除去反應(yīng)中所使用的過(guò)量的2-氨基-4-甲基吡啶。過(guò)濾混懸液，用反應(yīng)中所用的相同的溶劑混合物水/乙醇洗滌所得固體。所得的半成品被稱為“利福昔明粗品”。
利福昔明粗品可直接進(jìn)行隨后的純化步驟?；蛘撸绻ＭL(zhǎng)時(shí)間保存半成品，則可以將利福昔明粗品在低于65℃的溫度下真空干燥6至24小時(shí)，這樣制得的半成品被稱為“干燥的利福昔明粗品”。
如此獲得的利福昔明粗品和/或干燥的利福昔明粗品可以通過(guò)以下方法純化在45℃至65℃的溫度下將它們?nèi)芙庠谝掖贾?，通過(guò)加入水使它們結(jié)晶，優(yōu)選加入的水重量為用于溶解的乙醇重量的15％至70％，并在攪拌下將所得的混懸液保持在50℃至0℃的溫度下4至36小時(shí)。
過(guò)濾混懸液，將所得的固體用水洗滌并在真空或常壓下、于室溫至105℃的溫度下、在存在或不存在干燥劑的情況下干燥2至72小時(shí)。
δ和ε形式的獲得取決于所選擇的結(jié)晶條件。特別是已經(jīng)證明用于進(jìn)行結(jié)晶的溶劑混合物的組成、結(jié)晶后保持反應(yīng)混合物的溫度以及保持該溫度的時(shí)間是至關(guān)重要的。
更準(zhǔn)確地說(shuō)，在以下條件下獲得利福昔明δ和ε形式首先將溫度調(diào)整至28℃至32℃以便使結(jié)晶開(kāi)始，然后將混懸液溫度調(diào)整至40℃至50℃并在該溫度值下保持6至24小時(shí)，然后在15分鐘至1小時(shí)內(nèi)將混懸液快速冷卻至0℃，過(guò)濾，用水洗滌固體，然后干燥。
在利福昔明的δ和ε多晶型形式的獲得中，干燥步驟具有重要作用，并且必須通過(guò)適于測(cè)定水含量的適宜方法來(lái)檢測(cè)，例如Karl Fisher方法，以便檢查干燥后產(chǎn)品中的殘余水量。
實(shí)際上在干燥過(guò)程中利福昔明δ的獲得取決于水的最終殘留量，其應(yīng)該為2.5％(w/w)至6％(w/w)，更優(yōu)選3％至4.5％，且水的最終殘留量不是由達(dá)到這一關(guān)鍵的水百分比限度所用的壓力和溫度實(shí)驗(yàn)條件來(lái)確定的。
為了獲得吸收差的ε形式，必須從δ形式開(kāi)始，并且必須在真空或大氣壓力下、于室溫或高溫下、在存在或不存在干燥劑的情況下繼續(xù)干燥，條件是干燥長(zhǎng)達(dá)完成向ε形式轉(zhuǎn)化所必需的時(shí)間。
利福昔明的δ和ε形式均是吸濕性的，它們?cè)谥車(chē)h(huán)境中于適宜的壓力和濕度條件下在一段時(shí)間中以可逆的方式吸收水并且易于轉(zhuǎn)化成其它形式。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，從一種形式向另一種形式的轉(zhuǎn)化非常重要，因?yàn)樗鼈兛梢猿蔀橛糜讷@得藥物制劑生產(chǎn)所需形式的可供選擇的制備方法。因此，以有效的工業(yè)方式使利福昔明δ轉(zhuǎn)化成利福昔明ε的方法是本發(fā)明的重要部分。
關(guān)于利福昔明δ向利福昔明ε轉(zhuǎn)化的方法包括在真空或在大氣壓力下、于室溫或高溫下、在存在或不存在干燥劑的情況下干燥利福昔明δ并將其保持一段時(shí)間，直至獲得轉(zhuǎn)變，該時(shí)間通常為6至36小時(shí)。
從上述內(nèi)容可以看出，這導(dǎo)致在產(chǎn)品的保存階段必需特別小心以使周?chē)h(huán)境條件不會(huì)改變產(chǎn)物的水含量，方法是將產(chǎn)物保存在不會(huì)使水與外部環(huán)境有顯著交換的具有控制濕度的環(huán)境中或密閉容器中。
被稱作利福昔明δ的多晶型物的特征是水含量為2.5％至6％，優(yōu)選3.0％至4.5％，其粉末X-射線衍射圖(參見(jiàn)圖1)顯示在值為5.7°±0.2，6.7°±0.2，7.1°±0.2，8.0°±0.2，8.7°±0.2，10.4°±0.2，10.8°±0.2，11.3°±0.2，12.1°±0.2，17.0°±0.2，17.3°±0.2，17.5°±0.2，18.5°±0.2，18.8°±0.2，19.1°±0.2，21.0°±0.2，21.5°±0.2的2θ衍射角處有峰。被稱為利福昔明ε的多晶型物的特征是其粉末X-射線衍射圖(參見(jiàn)圖2)顯示在值為7.0°±0.2，7.3°±0.2，8.2°±0.2，8.7°±0.2，10.3°±0.2，11.1°±0.2，11.7°±0.2，12.4°±0.2，14.5°±0.2，16.3°±0.2，17.2°±0.2，18.0°±0.2，19.4°±0.2的2θ衍射角處有峰。
衍射圖用能進(jìn)行Bragg-Brentano幾何學(xué)處理的Philips X’Pert儀器并在以下工作條件下完成X-射線管銅使用的放射物K(α1)，K(α2)發(fā)生器的電壓和電流KV40，mA40單色儀石墨步長(zhǎng)0.02
每步時(shí)間1.25秒起始和最終角2θ值3.0°÷30.0°總是通過(guò)Karl Fisher方法評(píng)估所分析的樣品中存在的水含量。
利福昔明δ和利福昔明ε彼此不同也因?yàn)樗鼈冊(cè)谏锢枚确矫骘@示出重大差異。
已經(jīng)用Beagle雌性犬進(jìn)行了兩種多晶型物的生物利用度研究，通過(guò)口服途徑用多晶型物中的一種的膠囊劑以100mg/kg的劑量對(duì)它們進(jìn)行處理，在每次給藥前和每次給藥后1、2、4、6、8和24小時(shí)從每只動(dòng)物的頸靜脈采集血樣，將血樣轉(zhuǎn)移入含有肝素的試管中，通過(guò)離心分離血漿。
用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的LC-MS/MS方法分析血漿中的利福昔明含量，計(jì)算出最大實(shí)測(cè)血漿濃度(Cmax)、達(dá)到Cmax的時(shí)間(tmax)和濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)。
在以下表1中報(bào)告的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)清楚地顯示利福昔明ε吸收非常少，而利福昔明δ以0.1至1.0μg/ml的值(Cmax＝0.308μg/ml)被吸收。
表1用膠囊劑單次口服給予雌性犬100mg/kg后利福昔明多晶型物的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步指出了兩種利福昔明多晶型物之間存在的差異。
附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明圖1表示根據(jù)上述方法所記錄的多晶型物δ的粉末X-射線衍射圖；圖2表示根據(jù)上述方法所記錄的多晶型物ε的粉末X-射線衍射圖。
δ和ε形式能有利地用于制備口服和局部使用的包含利福昔明的具有抗菌活性的藥物制劑。用于口服使用的藥物制劑包含利福昔明δ和ε以及常規(guī)賦形劑如稀釋劑例如甘露醇、乳糖和山梨醇；粘合劑例如淀粉、明膠、蔗糖、纖維素衍生物、天然樹(shù)膠和聚乙烯吡咯烷酮；潤(rùn)滑劑例如滑石粉、硬脂酸鹽、氫化植物油、聚乙二醇和膠態(tài)二氧化硅；崩解劑例如淀粉、纖維素、藻酸鹽、樹(shù)膠和網(wǎng)狀聚合物；著色劑、矯味劑和甜味劑。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，可以使用可通過(guò)口服途徑施用的所有固體制劑，例如包衣和未包衣的片劑、軟和硬明膠制得的膠囊劑、糖衣丸劑、錠劑、糯米紙囊劑、小丸和在密封袋中的散劑。
用于局部使用的藥物制劑包含利福昔明δ和ε以及常規(guī)賦形劑例如白凡士林、白蠟、羊毛脂及其衍生物、硬脂醇、丙二醇、十二烷基硫酸鈉、脂族聚氧乙烯醇的醚、脂族聚氧乙烯酸的酯、失水山梨糖醇單硬脂酸酯、甘油單硬脂酸酯、丙二醇單硬脂酸酯、聚乙二醇、甲基纖維素、羥甲基丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、膠態(tài)硅酸鋁和硅酸鎂、藻酸鈉。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，可以使用所有局部用制劑，例如軟膏劑、香膏劑、乳膏劑、凝膠劑和洗劑。
下文將通過(guò)一些不應(yīng)認(rèn)為是限制本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行舉例說(shuō)明從實(shí)際上描述的結(jié)果可明顯看出δ和ε形式能通過(guò)在合適地組合上述結(jié)晶和干燥條件而獲得。
實(shí)施例1利福昔明粗品和干燥的利福昔明粗品的制備在室溫下，在裝配有機(jī)械攪拌器、溫度計(jì)和回流冷凝器的三頸瓶中，按順序加入120ml軟化水、96ml乙醇、63.5g利福霉素O和27.2g 2-氨基-4-甲基吡啶。加料結(jié)束后，將混合物在47±3℃下加熱，保持在該溫度下攪拌5小時(shí)，然后冷卻至20±3℃，在30分鐘內(nèi)加入另外制備的由9ml軟化水、12.6ml乙醇、1.68g抗壞血酸和9.28g含水濃鹽酸組成的混合物。加料結(jié)束后，在內(nèi)部溫度20±3℃下持續(xù)攪拌混合物30分鐘，然后在同樣的溫度下，滴加7.72g濃鹽酸直至pH等于2.0。
加料結(jié)束后，將混合物一直處于內(nèi)部溫度20℃下攪拌30分鐘，然后過(guò)濾沉淀物并用由32ml軟化水和25ml乙醇組成的混合物洗滌。將如此得到的“利福昔明粗品”(89.2g)在室溫下真空干燥12小時(shí)，得到64.4g“干燥的利福昔明粗品”，其具有等于5.6％的水含量。將該產(chǎn)物通過(guò)進(jìn)一步真空干燥得到62.2g重量的干燥的利福昔明粗品，其具有等于3.3％的水含量，它的衍射圖相應(yīng)于多晶型形式δ，特征是粉末X-射線衍射圖顯示在值為5.7°±0.2，6.7°±0.2，7.1°±0.2，8.0°±0.2，8.7°±0.2，10.4°±0.2，10.8°±0.2，11.3°±0.2，12.1°±0.2，17.0°±0.2，17.3°±0.2，17.5°±0.2，18.5°±0.2，18.8°±0.2，19.1°±0.2，21.0°±0.2，21.5°±0.2的2θ角處有峰。該產(chǎn)物是吸濕性的。
實(shí)施例2利福昔明ε的制備重復(fù)實(shí)施例1的操作并在獲得δ形式后，將固體粉末在65℃的溫度下進(jìn)一步真空干燥24小時(shí)。獲得的產(chǎn)物是利福昔明ε，其特征是粉末X-射線衍射圖顯示在值為7.0°±0.2，7.3°±0.2，8.2°±0.2，8.7°±0.2，10.3°±0.2，11.1°±0.2，11.7°±0.2，12.4°±0.2，14.5°±0.2，16.3°±0.2，17.2°±0.2，18.0°±0.2，19.4°±0.2的2θ角處有峰。
實(shí)施例3通過(guò)口服途徑施用在犬中的生物利用度將8只20周齡且體重5.0-7.5kg的純種Beagle雌性犬分成2組，每組4只。
按照下述方法用利福昔明δ處理第一組，用利福昔明ε處理第二組。
對(duì)每只犬通過(guò)口服途徑施用在明膠膠囊中的利福昔明多晶型物中的一種，并在每次給藥前和給藥后1、2、4、6、8和24小時(shí)從每只動(dòng)物的頸靜脈各采集2ml血樣。
將每個(gè)血樣轉(zhuǎn)移入含有肝素作為抗凝劑的試管中并離心；將血漿分成2等份，每份500μl，在-20℃下冷凍。
用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的LC-MS/MS方法分析血漿中包含的利福昔明，并按照標(biāo)準(zhǔn)非隔室分析計(jì)算下述參數(shù)Cmax＝血漿中利福昔明的最大實(shí)測(cè)血漿濃度Tmax＝達(dá)到Cmax的時(shí)間
AUC＝通過(guò)線性梯形法則計(jì)算的濃度-時(shí)間曲線下面積在以下表1中報(bào)告的結(jié)果清楚地顯示利福昔明δ是的吸收非常多，比利福昔明ε多40倍，后者基本上不被吸收。
表1用膠囊劑單次口服給予雌性犬100mg/kg后利福昔明多晶型物的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
權(quán)利要求
1.稱作利福昔明δ的抗菌劑利福昔明的多晶型物，其特征在于水含量為2.5％(w/w)至6％(w/w)，優(yōu)選3.0％至4.5％，并且特征在于粉末X-射線衍射圖顯示在值為5.7°±0.2，6.7°±0.2，7.1°±0.2，8.0°±0.2，8.7°±0.2，10.4°±0.2，10.8°±0.2，11.3°±0.2，12.1°±0.2，17.0°±0.2，17.3°±0.2，17.5°±0.2，18.5°±0.2，18.8°±0.2，19.1°±0.2，21.0°±0.2，21.5°±0.2的2θ衍射角處有峰。
2.稱作利福昔明ε的抗菌劑利福昔明的多晶型物，其水含量低于4,5％(w/w)且特征在于粉末X-射線衍射圖顯示在值為7.0°±0.2，7.3°±0.2，8.2°±0.2，8.7°±0.2，10.3°±0.2，11.1°±0.2，11.7°±0.2，12.4°±0.2，14.5°±0.2，16.3°±0.2，17.2°±0.2，18.0°±0.2，19.4°±0.2的2θ衍射角處有峰。
3.制備利福昔明δ和ε的方法，其特征在于使1摩爾當(dāng)量的利福霉素O與過(guò)量的2-氨基-4-甲基吡啶、優(yōu)選2.0至3.5摩爾當(dāng)量在由水和乙醇以1∶1至2∶1的體積比組成的溶劑混合物中于40℃至60℃的溫度下反應(yīng)2至8小時(shí)；將反應(yīng)物在室溫下用抗壞血酸在水、乙醇和含水濃鹽酸混合物中的溶液處理，然后用濃鹽酸水溶液調(diào)至pH 2.0，過(guò)濾混懸液，用反應(yīng)中所用的相同的水/乙醇混合物洗滌固體；將如此獲得的利福昔明粗品進(jìn)行純化，方法是在45℃至65℃的溫度下將利福昔明粗品溶解在乙醇中，通過(guò)加入水使其沉淀，優(yōu)選加入的水重量為溶解所用的乙醇重量的15％至70％；然后在攪拌下將混懸液的溫度降低至50℃-0℃達(dá)4至36小時(shí)；最后過(guò)濾混懸液，將固體用水洗滌并在真空或常壓條件下、于室溫至105℃的溫度下、在存在或不存在干燥劑的情況下干燥2至72小時(shí)。
4.權(quán)利要求3的制備利福昔明δ的方法，其特征在于在向利福昔明粗品的乙醇溶液中加入水后，將溫度降低至28℃至32℃以引發(fā)結(jié)晶；在攪拌下將獲得的混懸液保持在40℃至50℃下6至24小時(shí)，然后將其在15分鐘至1小時(shí)內(nèi)冷卻至0℃，然后過(guò)濾，將固體干燥直至水含量為2.5％(w/w)至6％(w/w)，優(yōu)選3％至4.5％。
5.權(quán)利要求3的制備利福昔明ε的方法，其特征在于在真空或大氣壓力下、于室溫或高溫下、在存在或不存在干燥劑的情況下干燥利福昔明δ，條件是干燥長(zhǎng)達(dá)獲得ε形式所必需的時(shí)間。
6.利福昔明δ與常規(guī)賦形劑如稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、矯味劑和甜味劑一起在制備用于口服使用的藥物制劑中的用途，所述的制劑具有抗菌活性。
7.利福昔明ε與常規(guī)賦形劑如稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、矯味劑和甜味劑一起在制備用于口服使用的藥物制劑中的用途，所述的制劑具有抗菌活性。
8.權(quán)利要求6和7中任一項(xiàng)的用途，其特征在于用于口服使用的制劑選自包衣和未包衣的片劑、硬和軟明膠膠囊劑、糖衣丸劑、錠劑、糯米紙囊劑、小丸和在小袋中的散劑。
9.利福昔明δ在制備具有抗菌活性的用于局部使用的藥物制劑中的用途。
10.利福昔明ε在制備具有抗菌活性的用于局部使用的藥物制劑中的用途。
11.權(quán)利要求9和10中任一項(xiàng)的用途，其特征在于用于局部使用的制劑選自軟膏劑、香膏劑、乳膏劑、凝膠劑和洗劑。
全文摘要
本發(fā)明的目的是抗菌劑利福昔明(INN)的結(jié)晶多晶型形式，它們被稱為利福昔明δ和利福昔明ε，可用于制備用于口服和局部使用的包含利福昔明的藥物制劑，并且可用如下進(jìn)行的結(jié)晶方法獲得將利福昔明粗品熱溶解在乙醇中，通過(guò)在規(guī)定溫度下加入水而使產(chǎn)物結(jié)晶并持續(xù)規(guī)定的時(shí)間，然后在控制條件下進(jìn)行干燥，直到達(dá)到終產(chǎn)品中規(guī)定的水含量。
文檔編號(hào)C07D221/00GK1900077SQ20051008512
公開(kāi)日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2005年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月3日
發(fā)明者G·C·維斯科米, M·坎帕納, D·孔福爾蒂尼, M·M·巴爾班蒂, D·布拉加 申請(qǐng)人:阿爾法瓦塞爾曼有限公司