命名為人免疫缺陷病毒(HIV)的逆轉(zhuǎn)錄病毒，尤其稱為1型HIV(HIV-1)和2型HIV(HIV-2)的株系，已與稱為獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的免疫抑制疾病病因?qū)W關聯(lián)。HIV血清反應陽性的個體最初無癥狀，但通常發(fā)展AIDS相關癥候群(ARC)，隨后是AIDS。受影響的個體展現(xiàn)嚴重免疫抑制，這使其對致虛弱和最終致命的機會性感染高度易感。由宿主細胞復制HIV需要將病毒基因組整合至宿主細胞的DNA中。由于HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒，所以HIV復制周期需要經(jīng)由稱為逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)的酶將病毒RNA基因組轉(zhuǎn)錄成DNA。逆轉(zhuǎn)錄酶具有三種已知酶促功能：所述酶充當RNA依賴性DNA聚合酶、核糖核酸酶和DNA依賴性DNA聚合酶。在其作為RNA依賴性DNA聚合酶的作用中，RT轉(zhuǎn)錄病毒RNA的單鏈DNA拷貝。作為核糖核酸酶，RT破壞初始病毒RNA且使剛剛由初始RNA產(chǎn)生的DNA游離。且作為DNA依賴性DNA聚合酶，RT使用第一DNA鏈作為模板產(chǎn)生第二互補DNA鏈。兩條鏈形成雙鏈DNA，其通過整合酶整合至宿主細胞的基因組中。已知抑制HIVRT的酶促功能的化合物將抑制受感染細胞中的HIV復制。這些化合物可用于預防或治療人中的HIV感染。批準用于治療HIV感染和AIDS的化合物是核苷RT抑制劑(NRTI)，諸如3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷(AZT)、2',3'-雙脫氧肌苷(ddI)、2',3'-雙脫氧胞苷(ddC)、d4T、3TC、阿巴卡韋(abacavir)、恩曲他濱(emtricitabine)和富馬酸替諾福韋酯(tenofovirdisoproxilfumarate)，以及非核苷RT抑制劑(nNRTI)，諸如奈韋拉平(nevirapine)、地拉韋啶(delavirdine)和依法韋侖(efavirenz)。盡管前述藥物中的每一種都有效治療HIV感染和AIDS，但仍需要開發(fā)額外的HIV抗病毒藥物，包括額外的RT抑制劑。具體問題是產(chǎn)生對已知抑制劑耐藥的突變HIV株系。使用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療AIDS通常導致病毒對抑制劑較不敏感。該耐藥性通常是pol基因的逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)段中產(chǎn)生突變的結(jié)果。繼續(xù)使用抗病毒化合物預防HIV感染將不可避免地導致出現(xiàn)新耐藥的HIV株系。因此，持續(xù)需要有效針對突變HIV株系的新RT抑制劑。發(fā)明概述本發(fā)明涉及4'-取代的核苷衍生物和其抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、預防HIV感染、治療HIV感染以及預防、治療和延遲AIDS和/或ARC發(fā)作或進展的用途。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及具有結(jié)構(gòu)式I的化合物：或其藥學上可接受的鹽，其中：R是X是O、S、CH2或CF2；Y是-C≡C-R8或-C≡N；R1是-H、-C(O)R6、-C(O)OR6、-C(O)N(R6)2、或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式（modification）；R2是-H、-C(O)R6a、-C(O)OR6a或-C(O)N(R6a)2；R3是-H、-F或-OH；R4是-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、5或6元單環(huán)雜芳基、9或10元雙環(huán)雜芳基、鹵素、-CN、-NO2、-N(RX)2、-NH(C1-C6亞烷基)-(5或6元單環(huán)雜芳基)、-NH(C1-C6亞烷基)-(9或10元雙環(huán)雜芳基)、芳基、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b，其中所述-C1-C6烷基、所述-C2-C6烯基或所述-C2-C6炔基中的每一個可以任選地被鹵素取代；R5是-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、5或6元單環(huán)雜芳基、9或10元雙環(huán)雜芳基、鹵素、-ORX、-CN、-NO2、-N(RX)2、-NH(C1-C6亞烷基)-(5或6元單環(huán)雜芳基)、-NH(C1-C6亞烷基)-(9或10元雙環(huán)雜芳基)、芳基、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b，其中所述-C1-C6烷基、所述-C2-C6烯基或所述-C2-C6炔基中的每一個可以任選地被鹵素取代；R6、R6a和R6b在每次出現(xiàn)時各自獨立地選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、-(C1-C3亞烷基)m-(C3-C7環(huán)烷基)、-(C1-C3亞烷基)m-(芳基)、-(C1-C3亞烷基)m-(4至7元雜環(huán)烷基)、-(C1-C3亞烷基)m-(5或6元單環(huán)雜芳基)或-(C1-C3亞烷基)m-(9或10元雙環(huán)雜芳基)，其中所述-C1-C6烷基、所述C3-C7環(huán)烷基、所述芳基、所述4至7元雜環(huán)烷基、所述-(5或6元單環(huán)雜芳基或所述9或10元雙環(huán)雜芳基中的每一個可以任選地被R7取代；m是選自0(零)或1的整數(shù)；R7代表一個至五個取代基，其各自獨立地選自-C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、芳基或5-6元雜芳基；R8是-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、芳基、5或6元單環(huán)雜芳基或9或10元雙環(huán)雜芳基；R9是-H、鹵素、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、-CN、-ORY或-N(RY)2；RX在每次出現(xiàn)時獨立地選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、芳基或5或6元單環(huán)雜芳基；或者當R4或R5中的一個或兩個為-N(RX)2時，各RX可任選地連接并與它們兩者均連接的氮一起形成5或6元單環(huán)雜芳基或9或10元雙環(huán)雜芳基；且RY是-H、-C1-C6烷基或-C1-C6鹵代烷基；條件是當X是O、Y是-C≡CH或-C≡N、R1是-H、R2是-H、R4是-NH2、R5是-H、-F或-OH且R9是-F時，則R3不是-F。在本文中稱為式Ia的本發(fā)明的一個實施方案中的是式I化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R是；且其中所有其它變量(R1、R2、X、Y等)如式I中所定義。在本發(fā)明的一個實施方案中的是具有結(jié)構(gòu)式II的式I化合物或其藥學上可接受的鹽：其中，其中的所有變量(R1、R2、X、Y等)如式I中所定義。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是具有結(jié)構(gòu)式III的式I化合物或其藥學上可接受的鹽：其中，其中的所有變量(R1、R2、X、Y等)如式I中所定義。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是具有結(jié)構(gòu)式IV的式I化合物或其藥學上可接受的鹽：其中，其中的所有變量(R1,R2,X,Y等)如式I中所定義。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是具有結(jié)構(gòu)式V的式I化合物或其藥學上可接受的鹽：其中，其中的所有變量(R1、R2、X、Y等)如式I中所定義。在本發(fā)明的一個實施方案中，在本文中稱為實施方案A的是式I、Ia、II、III、IV或V化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：X是O、S、CH2或CF2；Y是-C≡C-R8或-C≡N；R1是-H或R2是-H；R3是-H、-F或-OH；R4是-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、5或6元單環(huán)雜芳基、9或10元雙環(huán)雜芳基、鹵素、-CN、-NO2、-N(RX)2、-NH(C1-C6亞烷基)-(5或6元單環(huán)雜芳基)、-NH(C1-C6亞烷基)-(9或10元雙環(huán)雜芳基)、芳基、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2、或-NHC(O)R6b，其中所述-C1-C6烷基、所述-C2-C6烯基或所述-C2-C6炔基中的每一個可以任選地被鹵素取代；R5是-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、5或6元單環(huán)雜芳基、9或10元雙環(huán)雜芳基、鹵素、-ORX、-CN、-NO2、-N(RX)2、-NH(C1-C6亞烷基)-(5或6元單環(huán)雜芳基)、-NH(C1-C6亞烷基)-(9或10元雙環(huán)雜芳基)或芳基，其中所述-C1-C6烷基、所述-C2-C6烯基或所述-C2-C6炔基中的每一個可以任選地被鹵素取代；R8是-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、芳基、5或6元單環(huán)雜芳基或9或10元雙環(huán)雜芳基；R9是-H、鹵素、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、-CN、-ORY或-N(RY)2；Rx在每次出現(xiàn)時獨立地選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、芳基或5或6元單環(huán)雜芳基；或者當R4或R5中的一個或兩個為-N(RX)2時，各RX可任選地連接并與它們兩者均連接的氮一起形成5或6元單環(huán)雜芳基或9或10元雙環(huán)雜芳基；且RY是-H、-C1-C6烷基或-C1-C6鹵代烷基；且所有其它變量，例如，R6、R6a、R6b、m等，如式I中所定義。在實施方案A的類別中的是式I、Ia、II、III、IV或V化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1是-H；或R1是或R1是。在本發(fā)明的一個實施方案中，在本文中稱為實施方案B的是式I、Ia、II、III、IV或V化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1是-H、-C(O)R6、-C(O)OR6或-C(O)N(R6)2、或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式；R2是-H、-C(O)R6a、-C(O)OR6a或-C(O)N(R6a)2；且R4是-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、5或6元單環(huán)雜芳基、9或10元雙環(huán)雜芳基、鹵素、-CN、-NO2、-N(RX)2、-NH(C1-C6亞烷基)-(5或6元單環(huán)雜芳基)、-NH(C1-C6亞烷基)-(9或10元雙環(huán)雜芳基)、芳基、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b，其中所述-C1-C6烷基、所述-C2-C6烯基或所述-C2-C6炔基中的每一個可以任選地被鹵素取代；R5是-H、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C1-C6鹵代烷基、-C3-C7環(huán)烷基、5或6元單環(huán)雜芳基、9或10元雙環(huán)雜芳基、鹵素、-ORX、-CN、-NO2、-N(RX)2、-NH(C1-C6亞烷基)-(5或6元單環(huán)雜芳基)、-NH(C1-C6亞烷基)-(9或10元雙環(huán)雜芳基)、芳基、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b，其中所述-C1-C6烷基、所述-C2-C6烯基或所述-C2-C6炔基中的每一個可以任選地被鹵素取代；條件是R1、R2、R4或R5中的一個或多個如下選擇：R1是-C(O)R6、-C(O)OR6、-C(O)N(R6)2或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式；和/或R2是-C(O)R6a、-C(O)OR6a或-C(O)N(R6a)2；和/或R4是-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b；和/或R5是-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b；且所有其它變量，例如，X、Y、R3、R6、R6a、R6b、m、R7、R8、R9、RX和RY，如式I中所定義。在本發(fā)明的另一個實施方案中，稱為實施方案C的是式I、Ia、II、III、IV或V化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：X是O；Y是-C≡CH或-C≡N；R1是-H、-C(O)R6、-C(O)OR6、-C(O)N(R6)2、或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式；R2是H、-C(O)R6a、-C(O)OR6a或-C(O)N(R6a)2，或具體地其為-H；R3是-H或-OH；或具體地R3是-H；R4是-N(RX)2、-NHC(O)OR6b或-NHC(O)N(R6b)2；或具體地R4是-N(RX)2；R5是-H、鹵素、-C1-C6烷基、-ORX或-N(RX)2；且具體地R5是-H、-Cl、-F或-NH2；R6、R6a和R6b在每次出現(xiàn)時各自獨立地選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、芳基(優(yōu)選苯基)或5或6元單環(huán)雜芳基，其中R6、R6a和R6b各自任選地被R7取代；R7是-C1-C6烷基、芳基(優(yōu)選苯基)或5-6元單環(huán)雜芳基；R8是-H；R9是-H、鹵素、-C1-C3烷基、-C1-C3鹵代烷基、-CN、-ORY或-N(RY)2，且具體地其為-H、-F、-Cl、-I、-Br或-CH3；RX在每次出現(xiàn)時獨立地選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、芳基或5或6元單環(huán)雜芳基；或者當R4或R5中的一個或兩個為-N(RX)2時，各RX可任選地連接并與它們兩者均連接的氮一起形成5或6元單環(huán)雜芳基或9或10元雙環(huán)雜芳基；且RY是-H、-C1-C6烷基或-C1-C6鹵代烷基。在本發(fā)明的另一個實施方案中，稱為實施方案D的是式I、Ia、II、III、IV或V化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：X是O；Y是-C≡CH或-C≡N；R1是-H、或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式;R2是-H；R3是-H；R4是-NH2；R5是-H、-Cl、-F或-NH2；R8是-H；且R9是-H、-F、-Cl、-I、-Br或-CH3。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窤或B的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中X是O。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窤或B的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中Y是-C≡C-R8。在另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V或?qū)嵤┓桨窤、B、C或D的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中Y是-C≡CH。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窤、B、C或D的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中Y是-C≡N.。在本發(fā)明的其它實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窧或C的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中：R1是-H、-C(O)R6、-C(O)OR6、-C(O)N(R6)2或以下的前藥修飾形式。在本發(fā)明的其它實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窤、B、C或D的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中(a)R1是-H；或(b)R1是(c)R1是。在本發(fā)明的其它實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窧、C或D的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中：(a)R1是-H或或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式；或(b)R1是或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式；或(c)R1是或三磷酸酯的前藥修飾形式；或(d)R1是以下的前藥修飾形式。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V、或?qū)嵤┓桨窧或C的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R1是-H、-C(O)R6、-C(O)OR6或-C(O)N(R6)2或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式。在其類別中，R1是-C(O)R6、-C(O)OR6或-C(O)N(R6)2,或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式。在本發(fā)明的其它實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窧或C的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中：R2是-H、-C(O)R6a、-C(O)OR6a或-C(O)N(R6a)2；或R2是-C(O)R6a、-C(O)OR6a或-C(O)N(R6a)2；或R2是-H。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窤、B或C的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R3是-H或-OH。在另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窤、B或C的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R3是-H。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窤或B的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R4是-N(RX)2、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b；且具體地R4是-N(RX)2。更具體地R4是-NH2。在本發(fā)明的其它實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窧的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中：R5是-H、鹵素、-C1-C6烷基、-ORX、-N(RX)2、-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b；或R5是-NHC(O)OR6b、-N(C(O)OR6b)2、-NHC(O)N(R6b)2或-NHC(O)R6b；或R5是-H、鹵素(優(yōu)選-F或-Cl)、-C1-C6烷基、-ORX或-N(RX)2；或R5是-H、-Cl、-F或-NH2。在本發(fā)明的其它實施方案中的是實施方案A或B的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R5是-H、鹵素(優(yōu)選-F或-Cl)、-C1-C6烷基、-ORX或-N(RX)2；或R5是-H、-Cl、-F或-NH2。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窧的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R6、R6a和R6b在每次出現(xiàn)時各自獨立地選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、芳基(優(yōu)選苯基)或5或6元單環(huán)雜芳基。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是實施方案A的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R6b在每次出現(xiàn)時選自-H、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵代烷基、芳基(優(yōu)選苯基)或5或6元單環(huán)雜芳基。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窤或B的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R7是-C1-C6烷基、芳基(優(yōu)選苯基)或5-6元單環(huán)雜芳基。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窤或B的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R8是-H。在本發(fā)明的另一個實施方案中的是式I、Ia、II、III、IV或V，或?qū)嵤┓桨窤或B的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中R9是-H、鹵素、-C1-C3烷基、-C1-C3鹵代烷基、-CN、-ORY或-N(RY)2；且具體地其為-H、-F、-Cl、-I、-Br或-CH3。本文所述的所有結(jié)構(gòu)式、其實施方案和類別包括其中定義的化合物的藥學上可接受的鹽。本文提及式I化合物涵蓋式I、Ia、II、III、IV或V中的每一個和其所有實施方案和類別的化合物。除非另外規(guī)定，否則作為特定式或?qū)嵤┓桨?例如式I、Ia、II、III、IV或V或其實施方案)或任何其它通用結(jié)構(gòu)式的化合物或本文描述或請求保護的特定化合物提及本發(fā)明化合物意欲涵蓋落入該式或?qū)嵤┓桨阜秶鷥?nèi)的一種或多種特定化合物，包括其鹽(尤其藥學上可接受的鹽)、此類化合物的溶劑合物(包括水合物)以及其溶劑化鹽形式，其中此類形式為可能的。本發(fā)明包括本文所述的各實施例和其藥學上可接受的鹽。本發(fā)明還涵蓋藥物組合物，其包含有效量的本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽，和藥學上可接受的載體。如本文所使用，術語"烷基"是指具有在指定范圍內(nèi)的數(shù)目的碳原子的單價直鏈或支鏈、飽和脂族烴基。因此，例如，"C1-6烷基"(或"C1-C6烷基")是指己基烷基和戊基烷基異構(gòu)體以及正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基、正丙基和異丙基、乙基和甲基中的任一種。作為另一個實例，"C1-4烷基"是指正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基、正丙基和異丙基、乙基和甲基。術語"烯基"是指含有一個碳-碳雙鍵且具有指定范圍內(nèi)的數(shù)目的碳原子的單價直鏈或支鏈脂族烴基。因此，例如，"C2-6烯基"(或"C2-C6烯基")是指己烯基和戊烯基異構(gòu)體以及1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、異丁烯基、1-丙烯基、2-丙烯基和乙烯基中的全部。術語"炔基"是指含有一個碳-碳三鍵且具有指定范圍內(nèi)的數(shù)目的碳原子的單價直鏈或支鏈脂族烴基。因此，例如，"C2-6炔基"(或"C2-C6炔基")是指己炔基和戊炔基異構(gòu)體以及1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-丙炔基、2-丙炔基和乙炔基中的全部。術語"亞烷基"是指具有指定范圍內(nèi)的數(shù)目的碳原子的任何二價直鏈或支鏈脂族烴基。因此，例如，"-C1-6亞烷基-"是指C1至C6直鏈或支鏈亞烷基中的任一種，且"-C1-3亞烷基-"是指C1至C3直鏈或支鏈亞烷基中的任一種。特定類別的亞烷基包括-(CH2)1-3-、-(CH2)2-3、-(CH2)1-2-和-CH2-、-CH(CH3)-和-C(CH3)2-。術語"環(huán)烷基"是指具有指定范圍內(nèi)的數(shù)目的碳原子的任何單環(huán)烷烴。因此，例如，"C3-7環(huán)烷基"(或"C3-C7環(huán)烷基")是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。式I化合物和其實施方案的特別受關注類別為C3-6環(huán)烷基。術語"鹵素"(或"鹵代")是指氟、氯、溴和碘(或者稱為氟代、氯代、溴代和碘代)。式I化合物和其實施方案的特別受關注類別氟代或氯代中的每一種。術語"鹵代烷基"是指如上文定義的烷基，其中一個或多個氫原子已替換為鹵素(即-F、-Cl、-Br和/或-I)。因此，例如，"C1-6鹵代烷基"(或"C1-C6鹵代烷基")是指具有一個或多個鹵素取代基的如上文定義的C1至C6直鏈或支鏈烷基。術語"氟代烷基"具有類似含義，除了鹵素取代基限于氟。合適的氟代烷基包括系列(CH2)0-4CF3(即三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、3,3,3-三氟正丙基等)。特別受關注的氟代烷基為CF3。術語"C(O)"是指羰基。術語"S(O)2"和"SO2"各自是指磺?；?。術語"S(O)"是指亞磺?；?。術語"芳基"(或"C6-C10芳基")是指(i)苯基，或(ii)9或10元雙環(huán)稠合碳環(huán)體系，其中至少一個環(huán)為芳族的。合適的芳基包括例如苯基、萘基、四氫萘基(四氫化萘基(tetralinyl))或茚基。在式I化合物和其實施方案的一個特定類別中，芳基為苯基或萘基，且更具體地芳基為苯基。術語"雜芳基"是指(i)含有1至4個獨立地選自N、O和S的雜原子的5或6元雜芳環(huán)，其中各N任選地為化學上可能程度的氧化物形式，(ii)9或10元雙環(huán)稠環(huán)體系，其中稠環(huán)體系含有1至6個獨立地選自N、O和S的雜原子，其中稠環(huán)體系中的各環(huán)含有零、一個或多于一個雜原子，且至少一個環(huán)是芳族的，且各N任選地為化學上可能程度的氧化物形式，且不是芳族的環(huán)中的各S任選地是S(O)或S(O)2。合適的5和6元雜芳族環(huán)包括，例如，吡啶基、吡咯基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、三唑基三唑基(即1,2,3-三唑基或1,2,4-三唑基)、四唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基(即1,2,3-、1,2,4-、1,2,5-(呋咱基)或1,3,4-異構(gòu)體)、噁三唑基、噻唑基、異噻唑基和噻二唑基。合適的9和10元雜雙環(huán)稠環(huán)體系包括，例如，苯并呋喃基、吲哚基、吲唑基、萘啶基、異苯并呋喃基、苯并哌啶基、苯并異噁唑基、苯并噁唑基、苯并呋喃基（chromenyl）、喹啉基、異喹啉基、噌啉、喹唑啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、異吲哚基、苯并二氧雜環(huán)戊基（dioxolyl）(例如，苯并-1,3-二氧雜環(huán)戊基：)、苯并哌啶基、苯并異噁唑基、苯并噁唑基、苯并二氫吡喃基、異苯并二氫吡喃基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、苯并三唑基、二氫吲哚基、二氫異吲哚基、吲唑基、吲哚啉基、異吲哚啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、2,3-二氫苯并呋喃基和2,3-二氫苯并-1,4-二氧雜環(huán)己烯基(即)。應理解適用于本發(fā)明中的特定環(huán)和環(huán)體系不限于前述段落中所列的那些。這些環(huán)和環(huán)體系僅為代表性的。除非在特定上下文中明確規(guī)定為相反，否則本文所述的多種環(huán)和環(huán)體系中的任一種可在任何環(huán)原子(即，任何碳原子或任何雜原子)處連接至化合物的其余部分，限制條件為該連接是化學允許的且導致穩(wěn)定化合物。除非另外明確描繪或描述，否則具有連接至環(huán)的"浮動（floating）"鍵的結(jié)構(gòu)式中描述的變量(諸如式I中的R9)被允許為變量所連接的環(huán)中的任何可用碳或氮原子上的取代基(或者，R9可以是-H)。當式I或其任何實施方案中的基團指示為"任選地取代"時，意指式I或其實施方案涵蓋在該基團上被指定一個或多個取代基取代的化合物和在該基團上不含指定一個或多個取代基(即其中該基團未取代)的化合物兩者。作為一個實例，當R4為可任選地被鹵素取代的-C1-C6烷基時，則R4可以是-C1-C6烷基或-C1-C6鹵代烷基。當任何變量(例如R7、RX、RY)在描繪和描述本發(fā)明化合物的任何組分或式I或任何其它式中出現(xiàn)多于一次時，其在每次出現(xiàn)時的定義獨立于其每一其它出現(xiàn)時的定義。另外，取代基和/或變量的組合僅當此類組合導致穩(wěn)定化合物時才是允許的。除非明確規(guī)定為相反，否則允許在環(huán)(例如環(huán)烷基、芳基或雜芳基)中任何原子上被指定取代基取代，只要此類環(huán)取代是化學允許的且導致穩(wěn)定化合物。除非明確規(guī)定為相反，否則本文引用的所有范圍均為包括性的。例如，描述為含有"1至4個雜原子"的雜芳環(huán)意指該環(huán)可含有1、2、3或4個雜原子。還應理解本文引用的任何范圍在其范圍內(nèi)包括該范圍內(nèi)的所有子范圍。因此，例如，描述為含有"1至4個雜原子"的雜環(huán)意欲包括以下作為其方面：含有2至4個雜原子、3或4個雜原子、1至3個雜原子、2或3個雜原子、1或2個雜原子、1個雜原子、2個雜原子、3個雜原子或4個雜原子的雜環(huán)。作為另一個實例，描述為任選地被R7取代的芳基或雜芳基(其中R7為"1至5個取代基")意欲包括以下作為其方面：被1至5個取代基、2至5個取代基、3至5個取代基、4至5個取代基、5個取代基、1至4個取代基、2至4個取代基、3至4個取代基、4個取代基、1至3個取代基、2至3個取代基、3個取代基、1至2個取代基、2個取代基和1個取代基取代的芳基或雜芳基。在實施方案B中，"R1、R2、R4或R5中的一個或多個如下選擇"僅包括一個如限制條件中所定義的R1、R2、R4或R5，或多于一個如限制條件中所定義的R1、R2、R4和/或R5的任何組合。例如，變量的以下組合可如實施方案B的限制條件中所定義：R1和R2；R1和R4；R1和R5；R2和R4；R2和R5；R4和R5；R1、R2和R4；R1、R2和R5；R1、R4和R5；R2、R4和R5；或R1、R2、R4和R5。如本領域普通技術人員所理解，某些本發(fā)明化合物可以作為互變異構(gòu)體存在。這些化合物的所有互變異構(gòu)形式，無論個別地分離還是在混合物中，都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，在雜芳環(huán)上允許-OH取代基且酮-烯醇互變異構(gòu)可能的情況下，應理解取代基實際上可以所有或部分以氧代(=O)形式存在。"穩(wěn)定"化合物是可制備和分離的化合物且其結(jié)構(gòu)和特性保持或可使其基本上保持不變，持續(xù)足以允許將化合物用于本文所述的目的的時間段(例如，向?qū)ο笾委熁蝾A防性給藥)。本發(fā)明化合物限于式I和其實施方案涵蓋的穩(wěn)定化合物。式I化合物可具有一個或多個手性(不對稱)中心。本發(fā)明涵蓋式I化合物的所有立體異構(gòu)形式。式I化合物中存在的不對稱中心可所有彼此獨立地具有(R)或(S)構(gòu)型。當至手性碳的鍵在本發(fā)明的結(jié)構(gòu)式中被描繪為直線時或當以不指明手性碳的(R)或(S)手性的情況下列舉化合物名稱時，應理解各此類手性碳的(R)和(S)構(gòu)型且因此各對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體和其混合物涵蓋于式或名稱中?？稍讷@得特定立體異構(gòu)體或混合物的實施例中，鑒定此類立體異構(gòu)體或其混合物的產(chǎn)生，但這不以任何方式限制將所有立體異構(gòu)體和其混合物包括于本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明包括所有可能對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體和兩種或更多種立體異構(gòu)體的所有比率的混合物，例如對映異構(gòu)體和/或非對映異構(gòu)體的混合物。因此，對映異構(gòu)體是本發(fā)明的主題，其為左旋和右旋對映體的對映異構(gòu)純形式、外消旋物形式和兩種對映異構(gòu)體的所有比率的混合物形式。在順/反異構(gòu)的情況下，本發(fā)明包括順式形式和反式形式以及這些形式的所有比率的混合物。如果需要，可以通過經(jīng)由慣用方法(例如通過色譜或結(jié)晶)分離混合物、通過使用立體化學性均勻的起始材料用于合成或通過立體選擇性合成來進行單獨立體異構(gòu)體的制備。任選地，可在分離立體異構(gòu)體之前進行衍生化?？稍谑絀化合物合成期間的中間步驟進行立體異構(gòu)體的混合物的分離，或者其可對最終外消旋產(chǎn)物進行。絕對立體化學可通過結(jié)晶產(chǎn)物或結(jié)晶中間體(如果必要)衍生的X-射線結(jié)晶學用含有已知構(gòu)型的立體對稱中心的試劑進行測定?；蛘撸赏ㄟ^振動圓二色性(VCD)光譜分析測定絕對立體化學。本發(fā)明包括所有此類異構(gòu)體以及此類外消旋物、對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體和互變異構(gòu)體和其混合物的鹽、溶劑合物(其包括水合物)和溶劑化鹽。式I化合物中的原子可展現(xiàn)其天然同位素豐度，或一種或多種原子可人工富集具有相同原子序數(shù)、但原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)與自然界中主要存在的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的特定同位素。本發(fā)明意欲包括通式I的化合物的所有合適同位素變體。例如，氫(H)的不同同位素形式包括氕(1H)和氘((2H)。氕是自然界中存在的主要氫同位素。針對氘的富集可提供某些治療優(yōu)勢，諸如增加體內(nèi)半衰期或減少劑量需求，或可提供可用作表征生物樣品的標準品的化合物。通式I內(nèi)的同位素富集化合物無需過度實驗即可通過本領域技術人員眾所周知的常規(guī)技術或通過與本文的方案和實施例中所述的方法類似的方法使用適當同位素富集試劑和/或中間體來制備?；衔锟梢运帉W上可接受的鹽的形式給藥。術語"藥學上可接受的鹽"是指生物或其它方面沒有不合需要的鹽(例如對其接受者既無毒又無害)。當式I化合物含有一個或多個酸性或堿性基團時，本發(fā)明還包括相應藥學上可接受的鹽。因此，含有酸性基團(例如-COOH或酚基)的式I化合物可根據(jù)本發(fā)明作為例如但不限于堿金屬鹽、堿土金屬鹽或銨鹽使用。此類鹽的實例包括但不限于鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽或具有氨或有機胺(例如乙胺、乙醇胺、三乙醇胺或氨基酸)的鹽。含有一個或多個堿性基團(即可質(zhì)子化的基團)的式I化合物可根據(jù)本發(fā)明以其與無機或有機酸的酸加成鹽形式使用，例如但不限于與以下物質(zhì)的鹽：鹽酸、溴化氫、磷酸、硫酸、硝酸、苯磺酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、三氟乙酸、酒石酸、乳酸、水楊酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、氨基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗壞血酸、異煙酸、檸檬酸、己二酸等。如果式I化合物在分子中同時含有酸性和堿性基團，則除了提及的鹽形式外，本發(fā)明還包括內(nèi)鹽或內(nèi)銨鹽（betaines）(兩性離子)?？赏ㄟ^本領域技術人員已知的慣用方法，例如通過與有機或無機酸或堿在溶劑或分散劑中組合，或通過與其它鹽陰離子交換或陽離子交換，由式I化合物獲得鹽。本發(fā)明還包括式I化合物的所有鹽，其由于低生理學相容性而不適于直接用于藥物中，但其可例如用作化學反應的中間體或用于制備藥學上可接受的鹽。本發(fā)明的另一個實施方案是式I化合物，其中該化合物或其鹽為基本上純形式。如本文所使用，"基本上純"意指合適地至少約60重量%，通常至少約70重量%，優(yōu)選至少約80重量%，更優(yōu)選至少約90重量%(例如，約90重量%至約99重量%)，甚至更優(yōu)選至少約95重量%(例如約95重量%至約99重量%，或約98重量%至100重量%)，且最優(yōu)選至少約99重量%(例如100重量%)的含有式I化合物或其鹽的產(chǎn)物(例如，從反應混合物分離、提供所述化合物或鹽的產(chǎn)物)由所述化合物或鹽組成。所述化合物和鹽的純度水平可使用標準分析方法(諸如薄層色譜、凝膠電泳、高效液相色譜和/或質(zhì)譜)測定。如果采用多于一種分析方法且所述方法提供測定的純度水平方面的實驗上的顯著差異，則以提供最高純度水平的方法為準。100%純度的化合物或鹽是如標準分析方法測定不含可檢測雜質(zhì)的化合物或鹽。關于具有一個或多個不對稱中心且可以作為立體異構(gòu)體的混合物存在的本發(fā)明化合物，基本上純的化合物可以是立體異構(gòu)體的基本上純的混合物或基本上純的單獨非對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體。此外，本發(fā)明化合物可以非晶形形式和/或一種或多種結(jié)晶形式存在，且因此式I化合物的所有非晶形和結(jié)晶形式和其混合物意欲包括于本發(fā)明的范圍內(nèi)。此外，本發(fā)明的一些化合物可與水(即水合物)或常見有機溶劑形成溶劑合物。本發(fā)明化合物的此類溶劑合物和水合物(尤其是藥學上可接受的溶劑合物和水合物)同樣與非溶劑化和無水形式一起涵蓋于本發(fā)明范圍內(nèi)。應理解，其中例如R1是-H、-C(O)R6、-C(O)OR6、-C(O)N(R6)2或單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式的式I化合物(或其任何實施方案和其藥學上可接受的鹽)可通過一種或多種機制(例如酶催化化學反應)胞內(nèi)/體內(nèi)轉(zhuǎn)化成相應核苷5'三磷酸酯(即其中R1是-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)2)。盡管不希望受任何特定理論束縛，但核苷5'三磷酸酯一般理解為對抑制HIVRT酶和向?qū)ο蠼o藥式I化合物后產(chǎn)生抗病毒活性負責。因此，本發(fā)明化合物的前藥涵蓋于本文中。前藥的討論提供在T.Higuchi和V.Stella,A.C.S.SymposiumSeries的Pro-drugsasNovelDeliverySystems(1987)14，和BioreversibleCarriersinDrugDesign,(1987)EdwardB.Roche,編，AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress中。本文的術語"前藥"意指化合物(例如藥物前體(precursor))，其可為藥學上可接受的鹽的形式，其可胞內(nèi)/體內(nèi)轉(zhuǎn)化以提供作為HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的4'-取代的核苷衍生物。核苷5'三磷酸酯是4'-取代的核苷衍生物的實例。體內(nèi)轉(zhuǎn)換可通過多種機制發(fā)生，例如酶催化化學反應、代謝化學反應和/或自發(fā)化學反應(例如溶劑分解)，例如通過在血液中水解。本發(fā)明涵蓋由于胞內(nèi)/體內(nèi)轉(zhuǎn)化而轉(zhuǎn)化為作為HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑的式I化合物的4'-取代的核苷衍生物的任何前藥。例如，式I的4'-取代的核苷衍生物包括但不限于式I化合物，其中：a)R1為-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)2；b).R1為-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)2且R2為-H；和/或c)R1為-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)-O-P(O)(OH)2，R2為-H，R4為-NH2且R5為-H或-NH2。式I化合物的前藥相比于化合物本身可展現(xiàn)增強的溶解度、吸收和/或親脂性，由此導致增加的生物利用度和效力。當化合物含有例如羥基時，前藥可以是羥基的衍生物，諸如酯(-OC(O)R)、碳酸酯(-OC(O)OR)、磷酸酯(-O-P(=O)(OH)2)、醚(-OR)或單磷酸酯前藥，諸如氨基磷酸酯(可體內(nèi)轉(zhuǎn)化成相應的核苷單磷酸酯)。例如，如果式I化合物含有醇官能團，則前藥可通過用以下基團替換醇基的一個或多個氫原子形成，所述基團為例如，(C1-C6)烷酰基氧基甲基、1-((C1-C6)烷?；趸?乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷?；趸?乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-C6)烷酰基、α-氨基(C1-C4)烷基、α-氨基(C1-C4)亞烷基-芳基、芳基?；挺?氨基酰基，或α-氨基?；?α-氨基?；?，其中各α-氨基?；毩⒌剡x自天然存在的L-氨基酸，或糖基(由去除半縮醛形式的碳水化合物的羥基產(chǎn)生的基團)。如本文所使用的術語"單、二或三磷酸酯的前藥修飾形式"包括但不限于5'-醇-衍生的前藥，諸如-P(O)(-O-C1-C6烷基)2；-P(O)(-NH-(α-氨基?；?)(-O-芳基)，稱為"McGuigan"型前藥；-P(O)(-O-(C1-C6亞烷基)-S-?；?(-NH-芳基烷基)；S-?；?2-硫乙基(SATE)前藥；在兩個核糖羥基之間形成橋的環(huán)磷酸酯，諸如：其中環(huán)磷酸酯在3'-OH基團與5'-OH基團之間形成橋；和美國專利7,879,815；國際公開WO2005/003047、WO2008/082602、WO2010/0081628、WO2010/075517和WO2010/075549；Mehellou,Chem.Med.Chem.,5:1841-1842(2005)；Bobeck等人,AntiviralTherapy15:935-950(2010)；Furman等人,FutureMedicinalChemistry,1:1429-1452(2009)；和Erion,MicrosomesandDrugOxidations,ProceedingsoftheInternationalSymposium,17th,SaratogaSprings,NY,UnitedStates,July6-10,2008,7-12(2008)中描述的那些。如果4'-取代的衍生物并入胺官能團，則前藥可通過用以下基團替換胺基中的氫原子形成，所述基團為例如，R-羰基-、RO-羰基-、NRR’-羰基-，其中R和R’各自獨立地是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芐基、天然α-氨基酰基、-C(OH)C(O)OY1，其中Y1為H、(C1-C6)烷基或芐基、-C(OY2)Y3，其中Y2為(C1-C4)烷基且Y3為(C1-C6)烷基；羧基(C1-C6)烷基；氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N,N-(C1-C6)烷基氨基烷基；-C(Y4)Y5，其中Y4為H或甲基且Y5為單-N-或二-N,N-(C1-C6)烷基氨基嗎啉基；哌啶-1-基或吡咯烷-1-基等。本發(fā)明化合物的藥學上可接受的酯包括以下組：(1)通過羥基化合物的羥基的酯化獲得的羧酸酯，其中酯基的羧酸部分的非羰基基團選自直鏈或支鏈烷基(例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、仲丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如，甲氧基甲基)、芳基(例如，芐基)、芳氧基烷基(例如，苯氧基甲基)、芳基(例如，任選地被例如鹵素、C1-4烷基、-O-(C1-4烷基)或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，諸如烷基-或芳烷基磺?；?例如，甲磺?；?；(3)氨基酸酯(例如，L-纈氨酰基或L-異亮氨?；?；(4)膦酸酯和(5)單、二或三磷酸酯。磷酸酯可進一步通過例如C1-20醇或其反應性衍生物或2,3-二(C6-24)酰基甘油酯化。如果4'-取代的脫氧核糖衍生物含有羧酸官能團，則前藥可包括通過用以下基團替換酸基的氫原子形成的酯，所述基團為例如：(C1–C8)烷基、(C2-C12)烷?；趸谆?、具有4至9個碳原子的1-(烷?；趸?乙基、具有5至10個碳原子的1-甲基-1-(烷?；趸?-乙基、具有3至6個碳原子的烷氧基羰基氧基甲基、具有4至7個碳原子的1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有5至8個碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有3至9個碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4至10個碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-苯并[c]呋喃酮基（3-phthalidyl）、4-巴豆酸內(nèi)酯基（4-crotonolactonyl）、γ-丁內(nèi)酯-4-基、二-N,N-(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(諸如β-二甲基氨基乙基)、氨基甲酰基-(C1-C2)烷基、N,N-二(C1-C2)烷基氨基甲?；?(C1-C2)烷基和哌啶基-、吡咯烷基-或嗎啉代(C2-C3)烷基等。其它實例包括以下：當式I化合物含有羧酸基時，前藥可以是酯或酰胺，且當式I化合物含有伯氨基或可衍生化的另一合適氮時，前藥可以是酰胺、氨基甲酸酯、脲、亞胺或曼尼希堿(Mannichbase)。用于選擇和制備合適前藥衍生物的常規(guī)程序描述于例如DesignofProdrugs,H.Bundgaard編,Elsevier，1985；J.J.Hale等人，J.Med.Chem.2000，第43卷，第1234-1241頁；C.S.Larsen和J.Ostergaard,TextbookofDrugDesignandDiscovery，第3版，C.S.Larsen編，2002，第410-458頁中的"Designandapplicationofprodrugs"；和Beaumont等人，CurrentDrugMetabolism2003，第4卷，第461-458頁中；其各自的公開內(nèi)容以其整體通過引用并入本文。因此，通用結(jié)構(gòu)式、實施方案范圍內(nèi)的化合物和本文描述和請求保護的特定化合物涵蓋其鹽、所有可能立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體、物理形式(例如非晶形和結(jié)晶形式)、溶劑合物和水合物形式和這些形式的任何組合，以及包括前藥的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑合物、水合物、鹽和/或物理形式的任何組合的其鹽、其前藥形式，其中除非另外規(guī)定，否則此類形式是可能的。本發(fā)明還涵蓋用于在有需要的對象中治療或預防HIV感染、抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、治療、預防或延遲AIDS發(fā)作的方法，其包括將有效量的本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽給藥至所述對象。本發(fā)明還涵蓋本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽，其用于制備用于在有需要的對象中治療或預防HIV感染、用于抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶或用于治療、預防或延遲AIDS發(fā)作的藥物。本發(fā)明還涵蓋藥物組合物，其包含有效量的本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽，和藥學上可接受的載體，且進一步包含有效量的額外抗HIV劑，其選自HIV抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑和抗感染劑。在該實施方案內(nèi)，抗HIV劑是選自以下的抗病毒劑：HIV蛋白酶抑制劑、HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV整合酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV進入抑制劑和HIV成熟抑制劑。式Ia、II、III、IV或V化合物各自形成式I中包括的化合物的子集。上文或隨后表示式I化合物的任何描述也適用于式Ia、II、III、IV或V各自和其各實施方案的化合物。本發(fā)明的其它實施方案包括以下：(a)藥物組合物，其包含有效量的如上文定義的式I化合物或其前藥或藥學上可接受的鹽，和藥學上可接受的載體。(b)藥物組合物，其包含通過組合(例如，混合)有效量的如上文定義的式I化合物或其前藥或藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體制備的產(chǎn)物。(c)(a)或(b)的藥物組合物，其進一步包含有效量的一種或多種選自HIV抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑和抗感染劑的抗HIV劑。(d)(c)的藥物組合物，其中所述抗HIV劑選自一種或多種選自以下的抗病毒劑：HIV蛋白酶抑制劑、核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV整合酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV進入抑制劑和HIV成熟抑制劑。(e)組合，其為(i)如上文定義的式I化合物或其前藥或藥學上可接受的鹽，和(ii)選自HIV抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑和抗感染劑的抗HIV劑；其中所述化合物和抗HIV劑各自以使組合有效抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、用于治療或預防HIV感染或用于治療、預防或延遲AIDS發(fā)作或進展的量采用。(f)(e)的組合，其中所述抗HIV劑是選自以下的抗病毒劑：HIV蛋白酶抑制劑、核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV整合酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV進入抑制劑和HIV成熟抑制劑。(g)用于抑制有需要的對象中的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的方法，其包括將有效量的式I化合物或其前藥或藥學上可接受的鹽給藥至對象。(h)用于預防或治療有需要的對象中的HIV(例如，HIV-1)感染的方法，其包括將有效量的式I化合物或其前藥或藥學上可接受的鹽給藥至對象。(i)(h)的方法，其中將式I化合物與有效量的至少一種選自以下的其它HIV抗病毒劑組合給藥：HIV蛋白酶抑制劑、HIV整合酶抑制劑、非核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV進入抑制劑和HIV成熟抑制劑。(j)用于預防、治療或延遲有需要的對象中的AIDS發(fā)作或進展的方法，其包括將有效量的式I化合物或其前藥或藥學上可接受的鹽給藥至對象。(k)(j)的方法，其中將所述化合物與有效量的至少一種選自以下的其它HIV抗病毒劑組合給藥：HIV蛋白酶抑制劑、HIV整合酶抑制劑、非核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV進入抑制劑和HIV成熟抑制劑。(l)用于抑制有需要的對象中的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的方法，其包括將(a)、(b)、(c)或(d)的藥物組合物或(e)或(f)的組合給藥至對象。(m)用于預防或治療有需要的對象中的HIV(例如，HIV-1)感染的方法，其包括將(a)、(b)、(c)或(d)的藥物組合物或(e)或(f)的組合給藥至對象。(n)用于預防、治療或延遲有需要的對象中的AIDS發(fā)作或進展的方法，其包括將(a)、(b)、(c)或(d)的藥物組合物或(e)或(f)中組合給藥至對象。本發(fā)明還包括式I化合物或其藥學上可接受的鹽，其(i)用于以下，(ii)用作用于以下的藥物或(iii)用于制備用于以下的藥物：(a)治療(例如，人體的治療)，(b)藥物，(c)抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶，(d)治療或預防HIV感染，或(e)治療、預防或延遲AIDS發(fā)作或進展。在這些用途中，本發(fā)明化合物可任選地與一種或多種選自HIV抗病毒劑、抗感染劑和免疫調(diào)節(jié)劑的抗HIV劑組合使用。本發(fā)明的其它實施方案包括上文(a)至(n)中所述的藥物組合物、組合和方法以及前述段落中所述的用途(i)(a)-(e)至(iii)(a)-(e)，其中采用的本發(fā)明化合物是上文所述的實施方案、方面、類別、子類或特征之一的化合物。在所有這些實施方案等中，所述化合物可任選地以前藥或藥學上可接受的鹽或前藥的藥學上可接受的鹽的形式使用。本發(fā)明的其它實施方案包括前述段落中所述的藥物組合物、組合、方法和用途中的每一種，其中其中采用的本發(fā)明化合物或其鹽是基本上純的。關于包含式I化合物或其前藥或鹽以及藥學上可接受的載體和任選一種或多種賦形劑的藥物組合物，應理解術語"基本上純的"是關于式I化合物或其前藥和/或鹽本身。本發(fā)明的還有其它實施方案包括上文(a)-(n)中所述的藥物組合物、組合和方法以及上文所述的用途(i)(a)-(e)至(iii)(a)-(e)，其中受關注的HIV是HIV-1。因此，例如，在藥物組合物(d)中，式I化合物以有效針對HIV-1的量采用，且抗HIV劑是選自以下的HIV-1抗病毒劑：HIV-1蛋白酶抑制劑、HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV-1整合酶抑制劑、HIV-1融合抑制劑和HIV-1進入抑制劑。式I化合物也可以是針對HIV-2的有用藥劑。關于式I化合物的術語"給藥(administration)"和其變體(例如"給藥(administering)"化合物)意指向需要治療或預防的個體提供化合物且包括自身給藥和由另一人向患者給藥。當化合物或其前藥與一種或多種其它活性劑(例如，可用于治療或預防HIV感染或AIDS的抗病毒劑)組合提供時，"給藥"和其變體各自理解為包括同時或在不同時間提供提供化合物或前藥和其它藥劑。當組合的藥劑同時給藥時，其可在單個組合物中一起給藥或其可分開給藥。如本文所使用，術語"組合物"意欲涵蓋包含指定成分的產(chǎn)物以及由組合指定成分產(chǎn)生的任何產(chǎn)物。適合于包含于藥物組合物中的成分是藥學上可接受的成分，這意指所述成分必須彼此相容且對其接受者無害。"藥學上可接受"意指藥物組合物的成分必須彼此相容且對其接受者無害。如本文所使用的術語"對象"是指動物，優(yōu)選哺乳動物，最優(yōu)選人，其已為治療、觀察或?qū)嶒灥哪繕?。如本文所使用的術語"有效量"意指足以在給藥后抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、抑制HIV復制、發(fā)揮預防作用和/或發(fā)揮治療作用的量。"有效量"的一個實施方案是"治療有效量"，其為化合物在患者中有效抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、抑制HIV復制(前述中的任一種也可在本文中稱為"抑制有效量")、治療HIV感染、治療AIDS、延遲AIDS發(fā)作和/或減緩AIDS進展的量。"有效量"的另一個實施方案為"預防有效量"，其為化合物在患者中有效預防HIV感染或預防AIDS的量。應理解，有效量可同時為治療有效量(例如，用于治療HIV感染)和預防有效量(例如，用于預防或降低發(fā)展AIDS的風險)兩者。當式I化合物作為鹽給藥時，所述化合物的量是指化合物的游離形式(即非鹽形式)。在本發(fā)明的方法(即，抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶、治療或預防HIV感染、抑制HIV復制、治療或預防AIDS、延遲AIDS發(fā)作或延遲或減緩AIDS進展)中，任選地為鹽形式的本發(fā)明化合物可通過使活性劑與藥劑作用部位產(chǎn)生接觸的方式給藥。其可作為單獨治療劑或以治療劑組合的形式通過適于與藥物結(jié)合使用的常規(guī)方式給藥。其可以單獨給藥，但通常與基于所選給藥途徑和標準藥學實踐選擇的藥學載體一起給藥。本發(fā)明化合物可例如以含有有效量的化合物和常規(guī)無毒藥學上可接受的載體、輔助劑和媒介物的藥物組合物的單位劑量形式經(jīng)口、腸胃外(包括皮下注射、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)注射或輸注技術)、吸入噴霧或經(jīng)直腸給藥，所述給藥方法中的任一種都可以單次劑量每天一次或以較低頻率(諸如每周一次或每月一次)以例如但不限于下文中描述的劑量范圍和量提供。適于經(jīng)口給藥的液體制劑(例如懸浮液、糖漿、酏劑等)可根據(jù)本領域中已知的技術制備，且可采用任何常見介質(zhì)，諸如水、二醇類、油類、醇類等。適于經(jīng)口給藥的固體制劑(例如，粉末、丸劑、膠囊和片劑)可根據(jù)本領域中已知的技術制備，且可采用固體賦形劑諸如淀粉、糖、高嶺土、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。腸胃外組合物可根據(jù)本領域中已知的技術制備且通常采用作為載體的無菌水和任選其它成分，諸如溶解助劑?？勺⑸淙芤嚎筛鶕?jù)本領域中已知的方法制備，其中所述載體包含鹽水溶液、葡萄糖溶液或含有鹽水與葡萄糖的混合物的溶液。適用于制備用于本發(fā)明的藥物組合物的方法以及適用于所述組合物的成分的進一步描述提供于Remington'sPharmaceuticalSciences，第18版，A.R.Gennaro編，MackPublishingCo.,1990以及Remington-TheScienceandPracticeofPharmacy，第22版，PharmaceuticalPressandPhiladelphiaCollegeofPharmacyatUniversityoftheSciences出版，2012,ISBN978085711-062-6和先前版本中。導致藥物過飽和和/或快速溶解的式I描述的化合物的配制可用于促進口服藥物吸收。引起藥物過飽和和/或快速溶解的配制方法包括但不限于納米顆粒系統(tǒng)、非晶形系統(tǒng)、固溶體、固態(tài)分散體和脂質(zhì)系統(tǒng)。用于其制備的此類配制方法和技術是本領域眾所周知的。例如，固態(tài)分散體可使用綜述(例如A.T.M.Serajuddin,JPharmSci,88:10，第1058-1066頁(1999))中所述的賦形劑和方法制備。基于研磨和直接合成兩者的納米顆粒系統(tǒng)也描述于綜述，諸如Wu等人(F.Kesisoglou,S.Panmai,Y.Wu,AdvancedDrugDeliveryReviews,59:7第631-644頁(2007))中。式I化合物和其藥學上可接受的鹽是HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。所述化合物可用于體外和體內(nèi)抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶和抑制HIV復制。更具體地，式I化合物抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的聚合酶功能。下文RT聚合酶測定中所述的測定法中的本發(fā)明的實施例的化合物的測試舉例說明本發(fā)明化合物抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的RNA依賴性DNA聚合酶活性的能力。式I化合物也可以是針對HIV-2的有用藥劑。式I化合物可以單次劑量或分次劑量，以每天0.001至1000mg/kg哺乳動物(例如人)體重的劑量范圍給藥，或根據(jù)需要以其它時間間隔給藥。劑量范圍的一個實例是以單次劑量或分次劑量經(jīng)口或經(jīng)由其它給藥途徑，每天0.01至500mg/kg體重給藥，或根據(jù)需要以其它時間間隔給藥。劑量范圍的另一個實例為以單次劑量或分次劑量經(jīng)口或經(jīng)由其它給藥途徑，每天0.1至100mg/kg體重給藥，或根據(jù)需要以其它時間間隔給藥。對于經(jīng)口(例如，片劑或膠囊)或其它給藥途徑，可提供含有1.0至500毫克活性成分，尤其是1、5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400和500毫克活性成分(針對待治療患者癥狀調(diào)整劑量)的組合物。用于任何特定患者的特定劑量水平和劑量頻率可變化且將取決于多種因素，包括所用特定化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用長度、年齡、體重、總體健康狀況、性別、飲食、給藥模式和時間、排泄速率、藥物組合、特定病況的嚴重程度和經(jīng)歷治療的主體。在一些情況下，根據(jù)化合物功效或個體反應，可必要向上或向下偏離給定劑量。本發(fā)明化合物可以作為單次劑量每天一次或以較低頻率(諸如每周一次或每月一次)以例如但不限于上文指出的劑量范圍和量給藥。此外，所述化合物可配制用于立即釋放或修改釋放(諸如延長或控制釋放)。如上所示，本發(fā)明還涉及式I化合物與一種或多種抗HIV劑的用途。"抗HIV劑"是直接或間接有效抑制HIV、治療或預防HIV感染和/或治療、預防或延遲AIDS的發(fā)作或進展的任何藥劑。應理解，抗HIV劑有效治療、預防或延遲HIV感染或AIDS和/或由其產(chǎn)生或與其相關的疾病或病況的發(fā)作或進展。例如，無論在暴露前和/或暴露后的時段，本發(fā)明化合物均可與有效量的一種或多種選自HIV抗病毒劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗感染劑或可用于治療HIV感染或AIDS的疫苗的抗HIV劑組合有效給藥。用于與本發(fā)明化合物組合使用的合適的HIV抗病毒劑包括例如下表1中所列的那些。表1用于治療HIV感染或AIDS的抗病毒劑名稱類型阿巴卡韋，ABC，Ziagen?nRTI阿巴卡韋+拉米夫定，Epzicom?nRTI阿巴卡韋+拉米夫定+齊多夫定，Trizivir?nRTI安普那韋，Agenerase?PI阿扎那韋，Reyataz?PIAZT，齊多夫定，疊氮胸苷，Retrovir?nRTI卡普韋林（capravirine）nnRTI地瑞那韋，Prezista?PIddC，扎西他濱，二脫氧胞苷，Hivid?nRTIddI，地達諾新，二脫氧肌苷，Videx?nRTIddI(腸溶包衣)，VidexEC?nRTI地拉夫定，DLV，Rescriptor?nnRTI度魯特韋，Tivicay?InIdoravirine，MK-1439nnRTI依法韋侖，EFV，Sustiva?，Stocrin?nnRTI依法韋侖+恩曲他濱+替諾福韋DF，Atripla?nnRTI+nRTIEFdA(4'-乙炔基-2-氟-2'-脫氧腺苷)nRTI埃替拉韋InI恩曲他濱，F(xiàn)TC，Emtriva?nRTI恩曲他濱+替諾福韋DF，Truvada?nRTI乙米韋林（emvirine），Coactinon?nnRTI恩夫韋地，F(xiàn)uzeon?FI腸溶包衣的地達諾新，VidexEC?nRTI依曲韋林，TMC-125nnRTI福沙那韋鈣，Lexiva?PI茚地那韋，Crixivan?PI拉米夫定，3TC，Epivir?nRTI拉米夫定+齊多夫定，Combivir?nRTI洛匹那韋PI洛匹那韋+利托那韋，Kaletra?PI馬拉韋羅，Selzentry?EI奈非那韋，Viracept?PI奈韋拉平，NVP，Viramune?nnRTIPPL-100(也稱為PL-462)(Ambrilia)PI雷特拉韋，MK-0518，IsentressTMInI利匹韋林nnRTI利托那韋，Norvir?PI沙奎那韋，Invirase?，F(xiàn)ortovase?PI司他夫定，d4T，二脫氫脫氧胸苷，Zerit?nRTI替諾福韋DF(DF=替諾福韋富馬酸酯(disoproxilfumarate))，TDF，Viread?nRTI替諾福韋，十六烷氧基丙基(CMX-157)nRTI替諾福韋艾拉酚胺富馬酸酯(GS-7340)nRTI替拉那韋，Aptivus?PIvicrivirocEIEI=進入抑制劑；FI=融合抑制劑；InI=整合酶抑制劑；PI=蛋白酶抑制劑；nRTI=核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑；nnRTI=非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。表中所列的一些藥物以鹽形式使用；例如阿巴卡韋硫酸鹽、地拉韋啶甲磺酸鹽、茚地那韋硫酸鹽、阿扎那韋硫酸鹽、奈非那韋甲磺酸鹽、沙喹那韋甲磺酸鹽。應理解，本發(fā)明化合物與抗HIV劑的組合的范圍不限于表A中所列的HIV抗病毒劑，但在原則上包括與可用于治療或預防AIDS的任何藥物組合物的任何組合。HIV抗病毒劑和其它藥劑通常將以這些組合以本領域中所報道的其常規(guī)劑量范圍和方案采用，包括例如Physicians'DeskReference,ThomsonPDR,ThomsonPDR，第57版(2003)，第58版(2004)或第59版(2005)以及現(xiàn)行Physicians'DeskReference(第68版).(2014),Montvale,NJ：PDRNetwork中所述的劑量。本發(fā)明化合物在這些組合中的劑量范圍可與上述劑量范圍相同。本發(fā)明化合物也可用于制備和執(zhí)行針對抗病毒化合物的篩選測定。例如，本發(fā)明化合物可用于分離酶突變體，其為較強力抗病毒化合物的優(yōu)異篩選工具。此外，本發(fā)明化合物可用于例如通過競爭抑制確定或測定其它抗病毒劑與HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的結(jié)合位點。本文采用的縮寫和首字母縮寫包括以下：本發(fā)明化合物可通過有機化學領域中眾所周知的方法制備。參見，例如，J.March,‘AdvancedOrganicChemistry’第6版，JohnWileyandSons。在合成順序期間，可必需和/或期望保護任何所涉及分子上的敏感或反應性基團。這借助常規(guī)保護基(諸如T.W.Greene和P.G.M.Wutts‘ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis’第4版，JohnWileyandSons中所述的那些)實現(xiàn)。保護基任選地在方便的后續(xù)階段使用本領域眾所周知的方法去除。本發(fā)明化合物可以容易地根據(jù)以下反應方案和實施或其修改方案，使用容易可得的起始材料、試劑和常規(guī)合成程序制備。在這些反應中，也可使用本身是本領域普通技術人員已知但未更詳細地提及的變體。此外，根據(jù)以下反應方案和實施例，用于制備本發(fā)明化合物的其它方法對于本領域普通技術人員將顯而易見。除非另外指明，否則所有變量均如上文定義。方案1內(nèi)半縮醛1-1可使用甲醇HCl轉(zhuǎn)化成1-2。中間體1-2的羥基然后可被保護，隨后使用HCl氣體將1'-OMe轉(zhuǎn)化成1'-Cl以提供1-4。中間體1-4可與不同取代的雜環(huán)(1-5)在合適堿存在下反應以提供中間體1-6。中間體1-6的6-氯可使用合適化學品轉(zhuǎn)化為R4，隨后羥基脫保護以提供中間體1-7。中間體1-7可被差別保護以提供1-8。1-8的氧化提供醛1-9，其然后可經(jīng)歷與甲醛的羥醛反應，隨后還原以提供1-10。選擇性氧化α面羥基，隨后將醛轉(zhuǎn)化為炔烴以提供1-11。3'-醇的最終脫保護提供目標物1-13。方案2：內(nèi)酯2-1可用不同雜環(huán)的陰離子處理以提供2-2型中間體。中間體2-2可通過在硅烷存在下用酸處理轉(zhuǎn)化成2-3。對2-3脫保護，隨后對3'和5'羥基進行差別保護，提供2-5。將2-5脫氧，提供2-6，其然后可脫保護，隨后進行差別保護以提供2-8。將末端醇氧化成2-9，隨后與甲醛發(fā)生羥醛反應且還原，提供2-10。選擇性氧化α面醇，提供醛2-11，其然后可轉(zhuǎn)化成乙炔2-12。整體脫保護提供2-13。方案3：將3-1型中間體(使用方案1中的方法合成)轉(zhuǎn)化成3-2型肟。將肟脫水產(chǎn)生化合物3-3，其可經(jīng)歷最終脫保護以提供目標物3-4。方案4：將4-1型中間體(使用方案2中的方法合成)轉(zhuǎn)化成4-2型肟。將肟脫水產(chǎn)生化合物4-3，其可經(jīng)歷最終脫保護以提供目標物4-4。方案5：5-1型中間體(使用來自前述方案的方法合成)可使用文獻已知方法轉(zhuǎn)化成三磷酸酯5-2。方案6：6-1型中間體(使用來自前述方案的方法合成)可使用文獻已知方法轉(zhuǎn)化成三磷酸酯6-2。通用化學程序：所有試劑均購自常見商業(yè)來源或根據(jù)文獻程序由市售試劑合成。市售試劑未經(jīng)進一步純化即使用。除非另外指示，否則百分比為鑒于組分和組合物總重量的重量百分比，溫度以℃計或為環(huán)境溫度，且壓力為大氣壓或接近大氣壓。在VarianVNMR系統(tǒng)400(400MHz)上獲得1HNMR波譜，且報道為從Me4Si向低場的ppm，其中在括號中指示質(zhì)子數(shù)、多樣性和偶聯(lián)常數(shù)=ants(以赫茲計)。當呈現(xiàn)LC/MS數(shù)據(jù)時，使用Agilent6110AMSD或AppliedBiosystemsAPI-100質(zhì)譜儀進行分析。給出母體離子。在裝配有WatersXselect.C18柱的Waters制備型HPLC系統(tǒng)上，通常使用以水/乙腈(含有0.075%三氟乙酸)的梯度洗脫進行制備型HPLC。使用來自Biotage,Inc.的預裝正相二氧化硅或來自FisherScientific的本體二氧化硅進行快速柱色譜。除非另外指示，否則使用石油醚100%至100%乙酸乙酯的石油醚/乙酸乙酯的梯度洗脫進行柱色譜。實施例中的術語"室溫"是指通常在約20℃至約26℃范圍內(nèi)的環(huán)境溫度。中間體A(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-氯-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(中間體A)步驟1：(2R,3S)-2-(羥基甲基)-5-甲氧基四氫呋喃-3-醇的合成在氬氣氣氛下，在0℃下，經(jīng)5分鐘在攪拌同時向(4S,5R)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2,4-二醇(7.0g,52.2mmol)于無水甲醇(105mL)中的攪拌溶液中逐滴添加乙酰氯(0.614g,7.83mmol)，并在0℃下攪拌所得混合物3小時。然后添加固體碳酸氫鈉以中和反應混合物。通過過濾收集有機相，然后在減壓下濃縮以得到作為糊漿的殘余物。通過硅膠(100-200目)色譜用二氯甲烷/甲醇(20/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ4.98-5.04(m,1H),4.21-4.23(m,0.4H),4.07-4.09(m,0.6H),3.83-3.89(m,1H),3.50-3.66(m,2H),3.27-3.32(m,3H),2.23-2.29(m,0.6H),2.08-2.12(m,0.4H),1.98-2.03(m,0.4H),1.77-1.83(m,0.6H)。步驟2：(2R,3S)-4-甲基苯甲酸5-甲氧基-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，在0℃下，經(jīng)15分鐘的時段向(2R,3S)-2-(羥基甲基)-5-甲氧基四氫呋喃-3-醇(6.5g,43.9mmol)于干燥吡啶(45mL)中的攪拌溶液中逐滴添加4-甲基苯甲酰氯(20.35g,132mmol)。將所得混合物逐漸溫熱至30℃，然后攪拌16小時。在減壓下濃縮所得溶液。將所得殘余物用乙酸乙酯(400mL)稀釋，然后用鹽酸水溶液(1mol/L,2x100mL)、碳酸氫鈉飽和水溶液(2×100mL)和鹽水(100mL)分別洗滌。收集有機相，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。通過硅膠(100-200目)色譜用石油醚/乙酸乙酯(20：1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ7.90-7.99(m,4H),7.20-7.26(m,4H),5.58-5.61(m,0.47H),5.39-5.42(m,0.55H),5.18-5.24(m,1H),4.46-4.65(m,3H),3.43(s,1.61H),3.36(s,1.33H),2.52-2.60(m,1H),2.17-2.43(m,7H)。步驟3:(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-氯-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(中間體A)向100mL三頸圓底燒瓶中的(2R,3S)-4-甲基苯甲酸5-甲氧基-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(4.0g,10.41mmol)于無水二乙醚(20mL)中的攪拌溶液中引入HCl(g)。在0℃下，產(chǎn)物經(jīng)40分鐘的時段逐漸沉淀出來。過濾固體并用干燥二乙醚(3×20mL)洗滌，在高真空下干燥2小時以得到作為固體的中間體A。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ7.96(d,J=9.0Hz,2H),7.90(d,J=8.1Hz,2H),7.19-7.27(m,4H),6.47(d,J=5.1Hz,1H),5.54-5.58(m,1H),4.85(dd,J=3.3Hz,J=7.2Hz,1H),4.68(dd,J=3.3Hz,J=12.0Hz,1H),4.59(dd,J=4.2Hz,J=12.0Hz,1H),2.83-2.92(m,1H),2.74(d,J=15.0Hz,1H),2.42(d,J=3.6Hz,6H)。實施例1：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(1)的合成步驟1：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，向250mL三頸圓底燒瓶中的氫化鈉(礦物油中的60%分散體,0.272g,6.79mmol)于無水乙腈(50ml)中的懸浮液中添加4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.948g,6.17mmol)，并在環(huán)境溫度下攪拌混合物30分鐘。在攪拌的同時分批添加(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-氯-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(2.4g,6.17mmol)。將反應混合物加熱至50℃并攪拌2小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。蒸發(fā)反應混合物，得到油性殘余物，將其通過硅膠色譜用乙酸乙酯/石油醚(1:6,v/v)純化以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.64(s,1H),7.98(d,J=8.1Hz,2H),7.92(d,J=8.1Hz,2H),7.43(d,J=3.6Hz,1H),7.20-7.30(m,4H),6.82(dd,J=5.7Hz,J=8.1Hz,1H),6.60(d,J=3.9Hz,1H),4.60-4.76(m,3H),2.86-2.96(m,1H),2.74-2.82(m,1H),2.43(d,J=5.4Hz,6H)。LC-MS:(ES,m/z):506.43[M+H]+。步驟2：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成將(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(2.18g,4.31mmol)添加至80ml鋼制儲罐（bomb）中并將其冷卻至-40℃。向其中添加異丙醇氨（isopropanolicammonia）(在-40℃下飽和，60mL)。在90℃下攪拌混合物15小時后，將其冷卻至室溫并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜用二氯甲烷/甲醇(4/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.04(s,1H),7.34(d,J=3.6Hz,1H),7.04(br,2H),6.58(d,J=3.6Hz,1H),6.48(dd,J=6.0Hz,J=8.0Hz,1H),5.24(d,J=3.6Hz,1H),5.16(t,J=4.2Hz,1H),4.34(d,J=2.0Hz,1H),3.82(dd,J=4.0Hz,J=6.4Hz,1H),3.48-3.58(m,2H),2.48-2.54(m,1H),2.13-2.17(m,1H)。步驟3：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成。在氬氣氣氛下，將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(950mg,3.796mmol)和咪唑(775.4mg,11.388mmol)添加至25mL圓底燒瓶中。向燒瓶中注入無水DMF(8mL)，隨后添加叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1716.4mg,11.388mmol)。在25℃下攪拌混合物3小時后，將其用乙酸乙酯(40mL)稀釋，用水(20mL×2)、NaHCO3水溶液(飽和,20mL×2)和鹽水(20mL×2)分別洗滌。收集有機層并經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮以得到粗產(chǎn)物。然后通過硅膠色譜用乙酸乙酯/石油醚(石油醚中的35%至42%乙酸乙酯)純化粗產(chǎn)物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.32(s,1H),7.32(d,J=3.9Hz,1H),6.69(t,J=6.6Hz,1H),6.39(d,J=3.6Hz,1H),5.29(br,2H),4.56-4.61(m,1H),3.96(dd,J=3.5Hz,J=7.0Hz,1H),3.74-3.84(m,2H),2.42-2.51(m,1H),2.30-2.38(m,1H),0.92(d,J=4.2Hz,18H),0.08-0.1(m,12H)。LC-MS:(ES,m/z):497.71[M+H]+。步驟4：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，經(jīng)10分鐘的時段向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(1.2g,2.506mmol)于THF(24mL)中的攪拌溶液中逐滴添加預先冷卻的三氟乙酸/水溶液(1/2,v/v,9mL)。將所得混合物在0℃下攪拌4小時，然后在低于25℃下與甲苯一起共蒸發(fā)三次以得到糊漿。通過硅膠柱色譜用乙酸乙酯/二氯甲烷(1/1)純化粗產(chǎn)物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.03(s,1H),7.34(d,J=3.9Hz,1H),7.03(brs,2H),6.58(d,J=3.6Hz,1H),6.46(dd,J=5.7Hz,1H),5.19(t,J=5.7Hz,1H),4.51-4.53(m,1H),3.79-3.83(m,1H),3.47-3.57(m,2H),2.55-2.64(m,1H),2.10-2.17(m,1H),0.9(s,9H),0.11(s,6H)。步驟5：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向25mL圓底燒瓶中的((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(100mg,0.274mmol)于無水乙腈(10mL)中的攪拌溶液中添加2-碘?；郊姿?230mg,0.823mmol)。將所得混合物回流0.5小時，然后冷卻至室溫。濾出固體并在減壓下濃縮濾液，以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):363.20[M+H]+,381.20[M+H+H2O]+。步驟6：((3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(100mg,0.276mmol,粗制)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(1mL)中的攪拌溶液中添加甲醛溶液(0.3mL,4.00mmol)，隨后在1分鐘內(nèi)逐滴添加氫氧化鈉溶液(0.3mL,0.600mmol,2M)。在25℃下攪拌所得混合物3小時。反應完成后，將反應混合物通過添加乙酸中和，用乙酸乙酯稀釋并用水、NaHCO3飽和水溶液和鹽水依次洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并在減壓下蒸發(fā)。將殘余物再溶解于無水乙醇(2mL)中并在0℃下分批添加硼氫化鈉(20.87mg,0.552mmol)。在25℃下攪拌1小時后，將反應混合物通過添加乙酸中和，用氯仿(20mL)稀釋，用水和鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥并在減壓下蒸發(fā)。通過制備型TLC用二氯甲烷/甲醇(20/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.03(s,1H),7.37(d,J=3.6Hz,1H),7.02(brs,2H),6.57(d,J=3.6Hz,1H),6.50(dd,J=5.7Hz,J=8.1Hz,1H),5.12(dd,J=5.1Hz,J=6.3Hz,1H),4.59-4.60(m,1H),4.38(dd,J=5.1Hz,J=6.3Hz,1H),3.46-3.61(m,4H),2.70-2.75(m,1H),2.13-2.20(m,1H),0.90(s,9H),0.09(s,6H)。LC-MS:(ES,m/z):395.20[M+H]+。步驟7：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向((3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(100mg,0.253mmol)于無水乙腈(20mL)中的攪拌溶液中添加2-碘?；郊姿?284mg,1.014mmol)。在30℃下攪拌所得混合物36小時。LCMS表明留下少部分起始二醇-核苷，且目標化合物為主要產(chǎn)物。過濾混合物，用二氯甲烷洗滌。收集濾液并在減壓下濃縮以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):393.28[M+H]+。步驟8：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(100mg,0.248mmol,粗制)于無水甲醇(10mL)中的攪拌溶液中添加碳酸鉀(68.04mg,0.492mmol)。將混合物冷卻至0℃，然后在2分鐘內(nèi)逐滴添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(94.56mg,0.492mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌過夜后，將其在減壓下濃縮。通過制備型TLC(甲醇/二氯甲烷=1/15)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.24(s,1H),7.04(d,J=3.6Hz,1H),6.35(d,J=3.6Hz,1H),6.31(dd,J=5.7Hz,J=9.3Hz,1H),5.48(br,2H),4.73(d,J=4.2Hz,1H),4.03(d,J=12.6Hz,1H),3.80(d,J=12.3Hz,1H),3.13-3.23(m,1H),2.58(s,1H),2.22-2.28(m,1H),0.95(s,9H),0.15(d,J=7.2Hz,6H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在氬氣氣氛下，在環(huán)境溫度下，在1分鐘內(nèi)向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(60mg,0.154mmol)于無水THF(2mL)中的攪拌溶液中逐滴添加1M氟化四丁銨THF溶液(0.309mL,0.309mmol)。在該溫度下攪拌所得溶液2小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。當起始核苷全部耗盡時，在減壓下濃縮混合物。通過制備型TLC(甲醇/二氯甲烷=1/9)純化殘余物以得到粗標題化合物，其通過具有以下條件的制備型HPLC進一步純化以得到作為固體的化合物1：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，X-selectCSH柱，19*150mm,5um;流動相，具有10mmol碳酸氫銨的水和乙腈(7.5分鐘內(nèi)5%乙腈升至20%，2分鐘內(nèi)升至95%)；檢測器，UV254&220nm。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.05(s,1H),7.31(d,J=3.6Hz,1H),7.03(brs,2H),6.58(d,J=3.6Hz,1H),6.50(t,J=6.3Hz,1H),5.40-5.49(m,2H),4.49(dd,J=6.0Hz,J=11.4Hz,1H),3.51-3.66(m,2H),3.46(s,1H),2.55-2.59(m,1H),2.28-2.39(m,1H)。LC-MS:(ES,m/z):275.20[M+H]+。實施例2：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(2)的合成步驟1：4-氯-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成在氬氣氣氛下將4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(5g,32.6mmol)和SELECTFLUOR?(1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮鎓雙環(huán)[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽))(17.30g,48.8mmol)置于500mL圓底燒瓶中。向上述中添加干燥乙腈(150mL)和干燥乙酸(50mL)。在70℃下加熱混合物并攪拌16小時。冷卻至室溫后，在減壓下去除溶劑并將殘余物與甲苯一起共蒸發(fā)。將粗固體溶解于二氯甲烷/乙酸乙酯的混合物(1:1)中并過濾通過硅膠墊。在減壓下蒸發(fā)合并的有機相。然后通過硅膠色譜用二氯甲烷/乙酸乙酯(5:1)純化粗產(chǎn)物以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ12.48(brs,1H),8.62(s,1H),7.71(t,J=2.6Hz,1H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-170.76(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):172.00[M+H]+。步驟2：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，向礦物油中的60%氫化鈉分散體(0.177g,4.41mmol)于無水乙腈(40mL)中的懸浮液中分批添加4-氯-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.688g,4.01mmol)，并在環(huán)境溫度下攪拌混合物30分鐘。然后分批添加中間體A(1.56g,4.01mmol)。將反應混合物加熱至50℃并攪拌2小時后，在減壓下去除揮發(fā)物，然后通過硅膠色譜用乙酸乙酯/石油醚(1/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.62-8.68(m,1H),7.91-7.99(m,4H),7.26-7.29(m,4H),7.16-7.18(m,2H),6.84-6.88(m,1H),5.74-5.76(m,1H),4.60-4.74(m,3H),2.74-2.79(m,2H),2.43-2.46(m,6H)。LC-MS:(ES,m/z):524.30[M+H]+。步驟3：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成向80mL鋼制儲罐中添加(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(2.0g,3.82mmol)。將介質(zhì)冷卻至-40℃。向其中添加氨飽和的異-PrOH(60mL)。將混合物加熱至80℃并攪拌18小時后，在減壓下濃縮所得混合物。通過硅膠色譜用二氯甲烷/甲醇(5/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.06(s,1H),7.33(d,J=2.0Hz,1H),6.99(brs,2H),6.54(t,J=6.0Hz,1H),5.24(d,J=4.4Hz,1H),4.99(t,J=5.6Hz,1H),4.30-4.33(m,1H),3.78-3.81(m,1H),3.47-3.56(m,2H),2.37-2.44(m,1H),2.12-2.17(m,1H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-167.49(s,1F)。步驟4：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成在氬氣氣氛下將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(538mg,2.006mmol)和咪唑(819mg,12.03mmol)添加至25mL圓底燒瓶中。向其中添加干燥DMF(5ml)，隨后分批添加叔丁基氯二甲基硅烷(1209mg,8.02mmol)。在25℃下攪拌所得混合物3小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。反應完成后，將混合物用乙酸乙酯(40mL)稀釋，用水(20mL×2)、NaHCO3飽和水溶液(20mL×2)和鹽水(20mL×2)分別洗滌。收集有機層，經(jīng)無水Na2SO4干燥并在減壓下濃縮。然后通過硅膠色譜用乙酸乙酯/石油醚(石油醚中的28%至41%乙酸乙酯)純化粗產(chǎn)物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.07(s,1H),7.27(s,1H),6.99(brs,2H),6.54(t,J=6.0Hz,1H),4.49(s,1H),3.60-3.78(m,3H),2.51-2.53(m,1H),2.16-2.20(m,1H),0.88(d,J=4.2Hz,18H),0.11(s,6H),0.04(s,6H)。LC-MS:(ES,m/z):497.71[M+H]+。步驟5：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(900mg,1.812mmol)于THF(12mL)中的攪拌溶液中逐滴添加三氟乙酸水溶液(三氟乙酸/水=1/1,v/v,6mL)。在0℃下攪拌所得混合物。通過TLC監(jiān)測反應進展。在反應完成之后，將所得混合物與甲苯(50mL×3)一起在真空下共蒸發(fā)，同時將溫度保持低于25℃以去除揮發(fā)物。通過硅膠色譜用乙酸乙酯/石油醚(石油醚中的52%至58%乙酸乙酯)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.07(s,1H),7.34(s,1H),6.99(brs,2H),6.53(t,J=6.9Hz,1H),5.04(t,J=5.6Hz,1H),4.47-4.51(m,1H),3.76-3.79(m,1H),3.44-3.57(m,2H),2.45-2.51(m,1H),2.11-2.16(m,1H),0.90(s,9H),0.11(s,6H)。LC-MS:(ES,m/z):383.26[M+H]+。步驟6：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(360mg,0.941mmol)于無水乙腈(12mL)中的攪拌溶液中添加2-碘?；郊姿?791mg,2.82mmol)。將所得混合物回流35分鐘。將反應物冷卻至室溫，并濾出固體。收集濾液，然后在真空下濃縮以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。步驟7：((3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(400mg,1.051mmol,粗制)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(4mL)中的攪拌溶液中添加甲醛溶液(1.2mL,16.01mmol)，隨后經(jīng)5分鐘逐滴添加氫氧化鈉溶液(1.2mL,2M,2.400mmol)。在25℃下攪拌所得混合物3小時，然后通過添加乙酸中和反應混合物。將所得混合物用乙酸乙酯稀釋，用水、NaHCO3飽和水溶液和鹽水依次洗滌。將有機相經(jīng)Na2SO4干燥并在減壓下蒸發(fā)。將殘余物溶解于乙醇(10mL)中并在0℃下分批添加硼氫化鈉(80mg,2.103mmol)。在25℃下攪拌1小時后，將反應混合物通過添加乙酸中和，然后用氯仿稀釋并用水和鹽水依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥并在減壓下蒸發(fā)。通過硅膠色譜用二氯甲烷/甲醇(30/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.06(s,1H),7.36(s,1H),6.99(brs,2H),6.57(t,J=3.6Hz,1H),4.99(t,J=4.8Hz,1H),4.55-4.59(m,1H),4.39(t,J=5.1Hz,1H),3.45-3.55(m,4H),2.57-2.65(m,1H),2.17-2.20(m,1H),0.90(s,9H),0.09(s,6H)。步驟8：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下向((3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(120mg,0.291mmol)于無水乙腈(8mL)中的攪拌溶液中添加2-碘?；郊姿?326mg,1.164mmol)。在30℃下攪拌所得混合物24小時，然后過濾并用二氯甲烷洗滌。收集濾液并在減壓下濃縮以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):411.43[M+H]+。步驟9：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在氬氣下向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(110mg,0.268mmol,粗制)于無水甲醇(8mL)中的攪拌溶液中添加碳酸鉀(111mg,0.804mmol)。將混合物冷卻至0℃，然后經(jīng)1分鐘逐滴添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(154mg,0.804mmol)。在25℃下攪拌混合物過夜后，在真空下濃縮所得混合物，然后通過制備型TLC(甲醇/二氯甲烷=1/15)純化以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.07(s,1H),7.34(s,1H),7.03(br,2H),6.56(t,J=6.3Hz,1H),5.43(t,J=6.0Hz,1H),4.61(t,J=5.4Hz,1H),3.58-3.67(m,1H),3.49-3.53(m,1H),3.47(s,1H),2.52-2.61(m,1H),2.23-2.31(m,1H),0.91(s,9H),0.11(d,J=2.4Hz,6H)。LC-MS:(ES,m/z):407.30[M+H]+。步驟10：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在氬氣氣氛下，在室溫下，在攪拌同時向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(40mg,0.098mmol)于無水THF(2mL)中的攪拌溶液中經(jīng)1分鐘逐滴添加TBAF/THF溶液(0.118mL,0.118mmol)，并在該溫度下攪拌所得溶液2小時。反應完成后，在真空下濃縮所得混合物，并通過制備型TLC(甲醇/二氯甲烷=1/10)純化殘余物以得到粗產(chǎn)物(28mg)。將粗產(chǎn)物通過具有以下條件的制備型HPLC進一步純化：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，X-selectCSH柱,19*150mm,5um；流動相，具有10mmol碳酸氫銨的水和乙腈(7.5分鐘內(nèi)5%乙腈升至35%，2分鐘內(nèi)升至95%)；檢測器，UV254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的化合物2。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.07(s,1H),7.30(d,J=1.6Hz,1H),7.02(br,2H),6.55(t,J=5.8Hz,1H),6.05(br,1H),5.31-5.45(m,1H),4.46(t,J=6.6Hz,1H),3.58(dd,J=11.8Hz,J=29.4Hz,2H),3.47(s,1H),2.44-2.51(m,1H),2.29-2.36(m,1H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-167.23(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):293.10[M+H]+,315.10[M+Na]+。實施例3：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(3)的合成步驟1:5-溴-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶在環(huán)境溫度下，在氬氣氣氛下將4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1g,6.51mmol)懸浮于干燥DCM(20mL)中，隨后添加NBS(N-溴代琥珀酰亞胺)(1.275g,7.16mmol)。將混合物加熱至回流并攪拌16小時。當起始脫氮-嘧啶全部耗盡時，將混合物冷卻至環(huán)境溫度并維持30分鐘。將沉淀物通過過濾收集，用DCM(2×20mL)洗滌，在真空下干燥以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):233.90[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ12.98(brs,1H),8.64(s,1H),7.96(s,1H)。步驟2：4-氯-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成在氬氣氣氛下將5-溴-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(232mg,0.998mmol)溶解于干燥THF(10mL)中并冷卻至-78℃。在攪拌同時在5分鐘內(nèi)向其中逐滴添加正丁基鋰己烷溶液(2.5M,0.88mL,2.196mmol)。攪拌混合物約40分鐘，隨后添加碘甲烷(212mg,1.497mmol)。然后將溶液在2小時內(nèi)緩慢溫熱至室溫。添加水(2mL)以淬滅反應。在低于40℃下在真空中去除揮發(fā)物以得到漿料。將漿料再溶解于EtOAc(50mL)中并用水(2×15mL)和鹽水(20mL)洗滌。收集有機層，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空中濃縮濾液以得到粉末，將其從MeOH重結(jié)晶以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):168.00[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ12.22(brs,1H),8.51(s,1H),7.43(s,1H),2.41(d,J=0.90Hz,1H)。步驟3：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，向氫化鈉(油中60%分散體,0.453g,11.32mmol)于無水ACN(50mL)中的攪拌懸浮液中分批添加4-氯-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1.724g,10.29mmol)并在25℃下攪拌混合物30分鐘。在25℃下向所得澄清溶液中逐份添加中間體A(4.0g,10.29mmol)。將所得混合物加熱至50℃并攪拌3小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。在真空下濃縮混合物以得到固體，將其通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(1:6,v/v)純化以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):520.25[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.55(s,1H),7.90-7.99(m,4H),7.20-7.30(m,4H),7.11(s,1H),6.81(dd,J=6.0Hz,J=8.4Hz,1H),5.76(dd,J=1.5Hz,J=3.6Hz,1H),4.73-4.79(m,1H),4.54-4.64(m,2H),2.79-2.88(m,1H),2.68-2.75(m,1H),2.43(d,J=3.0Hz,6H),2.33(d,J=0.9Hz,3H)。步驟4：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成向150mL鋼制儲罐中放入(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(4.5g,7.79mmol)。將介質(zhì)冷卻至-40℃。向其中添加2-丙醇氨(異-PrOH/液體NH3=1/1,v/v,120mL)。將儲罐密封并將混合物加熱至90℃并攪拌40小時。反應完成后，將混合物冷卻至0℃并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜使用DCM/MeOH(4/1)純化殘余物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):265.10[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.00(s,1H),7.08(s,1H),6.58(brs,2H),6.45(dd,J=6.0Hz,J=8.1Hz,1H),5.21(d,J=3.3Hz,1H),5.05(t,J=5.1Hz,1H),4.32-4.36(m,1H),3.78(d,J=2.1Hz,1H),3.44-3.57(m,2H),2.39-2.51(m,1H),2.33(s,3H),2.06-2.13(m,3H)。步驟5：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成在氬氣氣氛下，在25℃下，在攪拌同時向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(1.7g,6.43mmol)和1H-咪唑(1.752g,25.7mmol)于干燥DMF(10mL)中的攪拌溶液中添加叔丁基氯二甲基硅烷(2.91g,19.30mmol)。在25℃下攪拌所得混合物3小時，然后用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用水(2×30mL)、NaHCO3水溶液(飽和，2×30mL)和鹽水(30mL)分別洗滌。收集有機層并經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮以得到粗產(chǎn)物。然后通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的28%至41%EA)純化粗產(chǎn)物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):493.30[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.24(s,1H),7.02(s,1H),6.67(dd,J=6.3Hz,J=7.2Hz,1H),5.37(br,2H),4.54-4.57(m,1H),3.94(dd,J=3.3Hz,J=6.3Hz,1H),3.72-3.82(m,2H),2.37-2.46(m,4H),2.25-2.32(m,1H),0.91(2s,18H),0.10(s,12H)。步驟6：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，在攪拌同時在10分鐘內(nèi)向7-((2R,4S,5R)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(2.5g,5.07mmol)于THF(30mL)中的攪拌溶液中逐滴添加預先冷卻的三氟乙酸/水溶液(1/1,v/v,15mL)。在0℃下攪拌所得混合物3小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。將所得溶液與甲苯(3×100mL)一起共蒸發(fā)，同時將內(nèi)部溫度維持低于25℃。然后通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的50%至58%EA)純化所得粗產(chǎn)物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):493.30[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CD3OD,ppm):δ8.18(s,1H),7.41(s,1H),6.59(dd,J=6.0Hz,J=7.8Hz,1H),4.56-4.60(m,1H),3.93(dd,J=3.9Hz,J=6.6Hz,1H),3.65-3.70(m,2H),2.45-2.54(m,1H),2.42(d,J=0.9Hz,3H),2.23-2.31(m,1H),0.91(s,9H),0.11(s,6H)。步驟7：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)四氫呋喃-2-基)甲醇(600mg,1.585mmol)于無水ACN(12mL)中的攪拌懸浮液中添加IBX(888mg,3.17mmol)。將混合物加熱至回流并攪拌55分鐘。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將混合物冷卻至室溫，并濾出固體。收集濾液，然后在真空下濃縮以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):377.15[M+H]+,409.15[M+H+MeOH]+。步驟8：((3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向50mL圓底燒瓶中的(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)四氫呋喃-2-甲醛(420mg,粗制)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(12mL)和水(3mL)中的攪拌溶液中添加甲醛水溶液(37%w/w,6mL)，隨后在2分鐘內(nèi)逐滴添加氫氧化鈉溶液(2N,6mL,0.12mmol)。在25℃下攪拌所得混合物3小時。當起始核苷-醛全部耗盡時，通過添加AcOH(約0.8mL)中和反應混合物。將所得混合物用AcOEt(50mL)稀釋并用水(30mL)、NaHCO3飽和水溶液(20mL)和鹽水(20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。將殘余物再溶解于無水EtOH(8mL)中并在0℃下分批添加硼氫化鈉(84.4mg,2.23mmol)。在25℃下攪拌1小時后，通過添加AcOH中和反應混合物。在真空下濃縮混合物，分配于CHCl3(50mL)和水(30mL)之間。將水層用CHCl3(2×20mL)再萃取。將合并的有機層用水和鹽水依次洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜使用二氯甲烷/甲醇(DCM中的5.5%MeOH)純化殘余物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):409.35[M+H]+,431.35[M+Na]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.00(s,1H),7.11(s,1H),6.56(br,2H),6.48(dd,J=6.0Hz,J=8.4Hz,1H),6.45-6.47(m,1H),5.02(t,J=5.5Hz,1H),4.58(t,J=2.7Hz,1H),4.35(dd,J=4.5Hz,J=6.3Hz,1H),3.42-3.60(m,4H),2.58-2.63(m,1H),2.34(s,3H),2.09-2.16(m,1H),0.90(s,9H),0.09(s,6H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，將((3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(140mg,0.343mmol)懸浮于干燥ACN(15mL)中，隨后添加2-碘?；郊姿?240mg,0.857mmol)。在30℃下攪拌混合物20小時。濾出固體，用CHCl3(2×20mL)洗滌。在真空下濃縮合并的濾液以提供標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):407.25[M+H]+。步驟10：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(120mg,~0.236mmol,粗制)于干燥MeOH(15mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(82mg,0.590mmol)，隨后在0℃下在攪拌下，在2分鐘內(nèi)逐滴添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(91mg,0.472mmol)于MeOH(2mL)中的溶液。將所得混合物逐漸溫熱至25℃，并攪拌16小時。在真空下濃縮混合物。通過快速硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的30%-50%EA)純化殘余物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):403.25[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.01(s,1H),7.07(s,1H),6.60(br,2H),6.49(dd,J=6.0Hz,J=7.2Hz,1H),5.48(t,J=5.7Hz,1H)，4.62(t,J=5.7Hz,1H),3.57-3.68(m,1H),3.48-3.52(m,1H),3.45(s,1H),2.49-2.62(m,1H),2.33(s,3H),2.21-2.31(m,1H),0.91(s,9H),0.12(d,J=6.0Hz,6H)。步驟11：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(3)的合成在0℃下，在攪拌下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(27mg,0.067mmol)于干燥THF(1mL)中的攪拌溶液中逐滴添加氟化四丁銨THF溶液(1.0M,0.067mL,0.067mmol)。在25℃下攪拌所得混合物30分鐘。通過TLC監(jiān)測反應進展。在真空下濃縮所得溶液。通過具有以下條件的制備型HPLC純化粗產(chǎn)物：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，XBridgeTMC18柱,19*150mm,5um；流動相，具有10mmol碳酸氫銨的水和乙腈(10分鐘內(nèi)30%乙腈升至70%，2分鐘內(nèi)升至95%，1.5分鐘內(nèi)降至5%)；流速：20mL/min；檢測器，UV254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):289.05[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.00(s,1H),7.06(s,1H),6.58(br,2H),6.48(t,J=6.60Hz,1H),5.45(d,J=5.1Hz,1H),5.38(t,J=6.0Hz,1H),4.46(q,J=5.4Hz,1H),3.50-3.64(m,2H),3.44(s,1H),2.44-2.54(m,1H),2.33(s,3H),2.24-2.32(m,1H)。實施例4：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇（4）的合成步驟1：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，向氫化鈉(礦物油中60%分散體,0.509g,12.73mmol)于無水乙腈(125mL)中的攪拌懸浮液中分批添加2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.176g,11.57mmol)，并在環(huán)境溫度下攪拌混合物30分鐘。在攪拌下向上述澄清溶液中逐批添加中間體A(4.5g,11.57mmol)。將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。蒸發(fā)反應混合物以得到油性殘余物，其通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(1/6,v/v)純化以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):540.20[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ8.01(d,J=8.0Hz,2H),7.93(d,J=8.0Hz,2H),7.43(d,J=3.6Hz,1H),7.22-7.37(m,4H),6.80(dd,J=6.0Hz,J=8.0Hz,1H),6.61(d,J=4.0Hz,1H),5.76(t,J=2.8Hz,1H),4.76(dd,J=3.6Hz,J=12.0Hz,1H),4.63-4.69(m,2H),2.76-2.86(m,2H),2.47,2.45(2s,6H)。步驟2：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成向250mL鋼制儲罐中添加(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(5g,9.25mmol)。將介質(zhì)冷卻至-40℃。向其中添加異丙醇氨(異丙醇/液氨=1/3,v/v，150mL)。密封介質(zhì)，加熱至90℃并攪拌16小時。將所得混合物冷卻至室溫并在真空下濃縮。將殘余物再溶解于MeOH(100mL)中，隨后在0℃下逐滴添加甲醇鈉MeOH溶液(1.0M,16.89mL,16.89mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌2小時。反應完全后，通過添加乙酸(0.01mL)中和混合物并在真空下濃縮。將殘余物懸浮于DCM/MeOH(v/v,100/1,150mL)中。攪拌20分鐘后，沉淀固體。通過過濾收集固體，用DCM洗滌并在真空下干燥以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):285.20[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CD3OD,ppm):δ7.31(d,J=2.8Hz,1H),6.58(d,J=2.8Hz,1H),6.45(t,J=6.8Hz,1H),4.52-4.53(m,1H),3.98-4.01(m,1H),3.81(dd,J=2.4Hz,J=12.0Hz,1H),3.73(dd,J=3.2Hz,J=12.0Hz,1H),2.63-2.70(m,1H),2.29-2.34(m,1H)。步驟3：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成在氬氣氣氛下，在環(huán)境溫度下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(3.2g,6.74mmol)和咪唑(1.836g,27.0mmol)于干燥DMF(10mL)中的攪拌溶液中添加TBS-Cl(3.05g,20.23mmol)。將所得混合物攪拌過夜。將反應混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用水(2×20mL)、NaHCO3水溶液(飽和，2×20mL)和鹽水(2×20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的35%至42%EA)純化殘余物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):513.20[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.32(s,1H),6.61(t,J=6.8Hz,1H),6.38(s,1H),5.44(br,2H),4.59-4.61(m,1H),3.91-3.99(m,1H),3.77-3.88(m,2H),2.44-2.51(m,1H),2.34-2.37(m,1H),0.93-0.95(m,18H),0.11-0.12(m,12H)。1H-NMR:(400MHz,CD3OD,ppm):δ7.31(d,J=2.8Hz,1H),6.58(d,J=2.8Hz,1H),6.45(t,J=6.8Hz,1H),4.52-4.53(m,1H),3.98-4.01(m,1H),3.81(dd,J=2.4Hz,J=12.0Hz,1H),3.73(dd,J=3.2Hz,J=12.0Hz,1H),2.63-2.70(m,1H),2.29-2.34(m,1H)。步驟4：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)，向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(2.3g,4.48mmol)于THF(40mL)中的攪拌溶液中逐滴添加預先冷卻的三氟乙酸/水溶液(v/v,1/1,20mL)。在0℃下攪拌所得混合物2小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。將所得溶液與甲苯(3×60mL)一起共蒸發(fā)，同時維持內(nèi)部溫度低于25℃，得到粉紅色糊漿。通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/二氯甲烷(1/1)純化殘余物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):399.20[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.53(br,2H),7.35(d,J=3.2Hz,1H),6.60(d,J=3.2Hz,1H),6.35(t,J=6.8Hz,1H),4.95(t,J=5.4Hz,1H),4.51-4.54(m,1H),3.73-3.79(m,1H),3.46-3.55(m,2H),2.54-2.59(m,1H),2.16-2.20(m,1H),0.90(s,9H),0.11(s,6H)。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.53(br,2H),7.35(d,J=3.2Hz,1H),6.60(d,J=3.2Hz,1H),6.35(t,J=6.8Hz,1H),4.95(t,J=5.4Hz,1H),4.51-4.54(m,1H),3.73-3.79(m,1H),3.46-3.55(m,2H),2.54-2.59(m,1H),2.16-2.20(m,1H),0.90(s,9H),0.11(s,6H)。步驟5：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(600mg,1.504mmol)于無水DMSO(3mL)和乙腈(15mL)中的攪拌溶液中添加IBX(632mg,2.256mmol)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌2.5小時。將反應混合物用乙酸乙酯(20mL)稀釋，用鹽水(2×10mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在真空下濃縮濾液以提供標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟。LC-MS:(ES,m/z):415.40[M+H2O]+。步驟6：((3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(700mg,粗制)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(28mL)和水(7mL)中的攪拌溶液中添加甲醛溶液(7mL,93mmol)，隨后在5分鐘內(nèi)逐滴添加氫氧化鈉水溶液(7mL,2N,14.00mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌3小時。當起始核苷-醛全部耗盡時，通過添加乙酸(0.5mL)中和反應混合物。將混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋并用水(2×20mL)、NaHCO3飽和水溶液(20mL)和鹽水(20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。將殘余物再溶解于無水EtOH(4mL)中并在0℃下，在氬氣氣氛下分批添加硼氫化鈉(133mg,3.53mmol)。在25℃下攪拌1小時后，通過添加乙酸(1.0mL)中和混合物。在真空下濃縮混合物。將殘余物用CHCl3(100mL)稀釋并用水(2×20mL)和鹽水(1×20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜使用DCM/MeOH(30/1)純化殘余物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):429.30[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.51(br,2H),7.38(d,J=3.9Hz,1H),6.60(d,J=3.6Hz,1H),6.40(t,J=6.9Hz,1H),4.88(t,J=5.5Hz,1H),4.62(dd,J=3.3Hz,J=5.5Hz,1H),4.39(t,J=5.7Hz,1H),3.43-3.63(m,4H),2.61-2.70(m,1H),2.21-2.29(m,1H),0.90(s,9H),0.10(s,6H)。步驟7：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向((3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(150mg,0.350mmol)于干燥乙腈(15mL)中的攪拌溶液中添加IBX(294mg,1.049mmol)。將所得混合物在30℃下攪拌2小時。過濾混合物，用CHCl3(3×15mL)洗滌。收集濾液，然后在真空下濃縮以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟中。LC-MS:(ES,m/z):427.30[M+H]+。步驟8：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(200mg,0.468mmol)溶解于無水MeOH(9mL)中，隨后在0℃下，在氬氣氣氛下下，添加碳酸鉀(162mg,1.171mmol)。在攪拌下，在1分鐘內(nèi)，向懸浮液中逐滴添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(180mg,0.937mmol)于MeOH(1mL)中的溶液。將所得混合物溫熱至30℃并攪拌16小時。在真空下濃縮反應混合物。將殘余物分配于乙酸乙酯(30mL)與水(10mL)之間。收集有機層，用鹽水(2×10mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。然后通過制備型TLC(MeOH/DCM=1/15)純化殘余物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):423.60[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.55(br,2H),7.34(d,J=3.6Hz,1H),6.61(d,J=3.6Hz,1H),6.38(t,J=6.4Hz,1H),5.32(t,J=6.0Hz,1H),4.67(t,J=6.0Hz,1H),3.58-3.61(m,1H),3.48-3.52(m,1H),3.47(s,1H),2.60-2.63(m,1H),2.31-2.35(m,1H),0.91(s,9H),0.11(d,J=3.6Hz,6H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在環(huán)境溫度下，在攪拌下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(60mg,0.142mmol)于THF(1mL)中的攪拌溶液中逐滴添加TBAFTHF溶液(1M,0.28mL,0.284mmol)。將所得溶液在環(huán)境溫度下攪拌2小時。在真空下濃縮混合物。然后通過具有以下條件的制備型HPLC純化殘余物：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，SunFirePrepC18OBD柱，5um,19*150mm；流動相，水(具有10mmol碳酸氫銨)和乙腈(6分鐘內(nèi)8%乙腈升至40%，1.5分鐘內(nèi)升至95%，1分鐘內(nèi)降至5%)；檢測器，uv254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的化合物4。LC-MS:(ES,m/z):309.00[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.54(br,2H),7.33(d,J=4.0Hz,1H),6.60(d,J=3.6Hz,1H),6.41(t,J=6.4Hz,1H),5.52-5.53(m,1H),5.26(t,J=6.0Hz,1H),4.47-4.48(m,1H),3.61(dd,J=5.2Hz,J=11.6Hz,1H),3.53(dd,J=6.2Hz,J=11.8Hz,1H),3.48(s,1H),2.41-2.50(m,1H),2.32-2.38(m,1H)實施例5：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(5)的合成步驟1：(2R,3S,5S)-4-甲基苯甲酸5-(5-溴-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成將氫化鈉(0.479g,11.98mmol)添加至5-溴-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.32g,9.98mmol,如實施例3，步驟1中所述合成)于乙腈(30mL)中的攪拌溶液。將所得混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后添加(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-氯-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(4.27g,10.98mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌1小時后，將其用200mL乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉飽和水溶液(60mL)和氯化鈉飽和水溶液(60mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜用石油醚\乙酸乙酯(1:2)純化殘余物以得到標題化合物：1H-NMR(300MHz,DMSO)δ8.65(s,1H),8.22(s,1H),7.96(d,J=8.4Hz,2H),7.84(d,J=8.1Hz,2H),7.24-7.39(m,4H),6.76-6.79(m,1H),5.74-5.76(m,1H),4.51-4.68(m,3H),3.05-3.15(m,1H),2.74-2.79(m,1H),2.37(d,J=1.8Hz,6H)。步驟2：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在-60℃下，將(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(5-溴-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(4.50g,7.69mmol)添加至NH3飽和的異-PrOH(15mL)中。將所得混合物在80℃下攪拌12小時，然后冷卻至室溫并在真空下蒸發(fā)以得到作為固體的(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(4.2g,7.43mmol)。將該粗化合物溶解于30mLMeOH中，然后添加甲醇鈉(14.86mL,14.86mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌2小時后，將其用乙酸(0.1mL)淬滅并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜通過石油醚\乙酸乙酯(1:2)純化粗產(chǎn)物以得到標題化合物：1H-NMR(300MHz,DMSO)δ8.12(s,1H),7.78(s,1H),6.78(s,2H),6.48-6.51(m,1H),5.25(s,1H),5.01(s,1H),4.32(s,1H),3.81(s,1H),3.17(s,1H),2.35-2.50(m,1H),2.12-2.19(m,1H)。步驟3：5-溴-7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成將叔丁基氯二甲基硅烷(1.786g,11.85mmol)添加至(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(1.3g,3.95mmol)、1H-咪唑(1.076g,15.80mmol)于DMF(8mL)中的攪拌溶液。將所得混合物在室溫下攪拌4小時，然后用400mL乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉飽和水溶液(80mL)和氯化鈉飽和水溶液(80mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜用乙酸乙酯/石油醚(1:4)純化殘余物以得到標題化合物：1H-NMR(300MHz,DMSO)δ8.10(s,1H),7.55(s,1H),6.79(s,2H),6.48-6.53(m,1H),4.50(s,1H),3.62-3.76(m,3H),2.43-2.50(m,1H),2.17-2.16(m,1H),0.88(d,J=2.7Hz,18H),0.10(s,6H),0.05(s,6H)。步驟4：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)的合成將5-溴-7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(1.55g,2.78mmol)溶解于THF(4mL)中，然后在0℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)用預冷卻的三氟乙酸/水溶液(v/v=1/1,4mL)逐滴處理。將所得混合物在0℃下攪拌2小時后，將其與甲苯一起在低于25℃下共蒸發(fā)以得到粉紅色糊漿。將殘余物施加至硅膠柱上，用乙酸乙酯/二氯甲烷(1/1)洗脫以得到標題化合物：1H-NMR(300MHz,DMSO)δ8.19(s,1H),7.74(s,1H),7.28(s,2H),6.50(q,J=6.0Hz,2H),4.51(q,J=2.7Hz,1H),3.81(s,1H),3.47-3.57(m,2H),2.49-2.58(m,1H),2.17-2.22(m,1H),0.85(s,9H),0.09(s,6H)。步驟5：(2R,3S)-4-甲基苯甲酸2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-甲氧基-2-苯基四氫呋喃-3-基酯的合成將2-碘?；郊姿?839mg,3.00mmol)添加至((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(443mg,0.999mmol)于乙腈(45mL)中的溶液。將所得溶液在80℃下攪拌2小時，然后冷卻至0℃，過濾并在減壓下濃縮。這導致產(chǎn)生標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟：MS(ES,m/z):441.08[M+H]+。步驟6：((2S,4R)-4-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)環(huán)戊烷-1,1-二基)二甲醇的合成將氫氧化鈉(4.03mL,8.07mmol)添加至(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(445mg,1.008mmol)和甲醛(1009mg,10.08mmol)于二氧雜環(huán)己烷(6mL)中的攪拌溶液。將所得混合物在室溫下攪拌3小時，然后用150mL乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉飽和水溶液(30mL)和氯化鈉飽和水溶液(30mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并在真空下濃縮以得到固體。在0℃下，將硼氫化鈉(109mg,2.88mmol)添加至上述固體于乙醇(15mL)中的溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌2小時，然后用乙酸(0.1mL)淬滅并在減壓下濃縮。將粗產(chǎn)物施加至硅膠柱色譜上，通過石油醚\乙酸乙酯(1:2)以得到標題化合物。MS(ES,m/z):473.43[M+H]+。步驟7：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成將2-碘?；郊姿?302mg,1.077mmol)添加至((3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(170mg,0.359mmol)于乙腈(40mL)中的溶液。將所得溶液在0℃下攪拌12小時后，將其冷卻至0℃，然后在減壓下濃縮以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟中。MS(ES,m/z):471.43[M+H]+。步驟8：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，將(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(139mg,0.721mmol)添加至(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(170mg,0.361mmol)、碳酸鉀(125mg,0.902mmol)于甲醇(8mL)中的溶液。將所得溶液在室溫下攪拌12小時，然后過濾并在減壓下濃縮。通過制備型TLC，通過石油醚\乙酸乙酯(1:2)純化粗化合物以得到標題化合物。1H-NMR(300MHz,CD3OD,ppm)δ8.00(s,1H),7.39(s,1H),6.44-6.47(m,1H),4.62-4.66(m,1H),3.61-3.71(m,2H),2.90(s,1H),2.25-2.55(m,2H),0.88(s,9H),0.57(d,J=3Hz,6H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成將((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(40mg,0.086mmol)和TBAF(0.086mL,0.086mmol)溶解于THF(1mL)中。將所得溶液在30℃下攪拌2小時，然后蒸發(fā)且如以下條件純化：柱：XBridgeC18,19*150mm,5um；流動相A：水/0.05%TFA，流動相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：10分鐘內(nèi)30%B至70%B；254nm。這導致產(chǎn)生作為固體的化合物5：1H-NMR(300MHz,DMSO,ppm)δ8.11(s,1H),7.59(s,1H),6.52(t,J=6.6Hz,1H),4.48(t,J=6.6Hz,1H),3.53-3.64(m,2H),3.44(s,1H),2.33-2.52(m,2H);MS(ES,m/z):353.17[M+H]+。實施例6：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(6)的合成步驟1：4,5-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成在25℃下，向4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.5g,16.28mmol)于干燥DCM(100mL)中的混合物中添加NCS(N-氯代琥珀酰亞胺)(4.35g,32.6mmol)。在40℃下，在氬氣氣氛下，將所得混合物攪拌16小時。當4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶耗盡時，未經(jīng)冷卻直接過濾混合物。收集固體，用DCM(20mL)洗滌，在真空下干燥以得到作為固體的4,5-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶。LC-MS:(ES,m/z):188.01[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ12.90(br,1H),8.65(s,1H),7.93(d,J=2.7Hz,1H)。步驟2：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4,5-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，在250mL三頸圓底燒瓶中，向NaH(礦物油中的60%分散體，0.538g,13.46mmol)于無水ACN(100mL)中的懸浮液中分批添加4,5-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.3g,12.23mmol)，并在環(huán)境溫度下攪拌混合物30分鐘?；鞚峄旌衔镒兊贸吻?，然后在攪拌下，在5分鐘內(nèi)逐份添加(2R,3S)-4-甲基苯甲酸5-氯-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(中間體A,4.76g,12.23mmol)。將所得混合物加熱至50℃并攪拌2小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。在真空下去除揮發(fā)物。通過硅膠柱色譜使用石油醚中的10%-40%乙酸乙酯純化粗產(chǎn)物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):540.39[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.64(s,1H),7.91-7.99(m,4H),7.39(s,1H),7.25-7.30(m,4H),6.80(t,J=6.9Hz,1H),5.75(dd,J=3.6Hz,J=6.0Hz,1H),4.60-4.78(m,3H),2.76-2.80(m,2H),2.44(d,J=4.8Hz,6H)。步驟3：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成向150mL鋼制儲罐中放入(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4,5-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(3.6g,6.66mmol)。將介質(zhì)冷卻至-40℃。向其中添加異丙醇氨(異丙醇/液氨=1/3,v/v,120mL)。密封介質(zhì)，加熱至90℃并攪拌16小時。TLC指示起始核苷全部耗盡且觀察到目標產(chǎn)物作為主要產(chǎn)物。在真空下濃縮所得混合物。通過硅膠柱色譜使用二氯甲烷中的2%-10%甲醇純化粗產(chǎn)物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):284.70[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.09(s,1H),7.58(s,1H),6.87(br,2H),6.51(dd,J=6.3Hz,J=7.8Hz,1H),5.25(d,J=4.2Hz,1H),5.03(t,J=5.6Hz,1H),4.30-4.34(m,1H),3.81(dd,J=4.3Hz,J=6.8Hz,1H),3.46-3.60(m,2H),2.40-2.48(m,1H),2.13-2.20(m,1H)。步驟4.7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(1.7g,5.97mmol)于DMF(10mL)中的攪拌溶液中依次添加1H-咪唑(1.423g,20.90mmol)和TBDMS-Cl(2.70g,17.91mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌2小時。用乙酸乙酯(100mL)稀釋所得溶液并用水(100mL)洗滌。用乙酸乙酯(2×100mL)再萃取水層。合并有機層，用NaHCO3飽和水溶液(2×100mL)和鹽水(2×100mL)依次洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜使用石油醚中的2%-10%乙酸乙酯純化殘余物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):513.22[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.10(s,1H),7.50(s,1H),6.85(br,2H),6.51(t,J=6.8Hz,1H),4.48-4.52(m,1H),3.62-3.80(m,3H),2.55-2.60(m,1H),2.17-2.24(m,1H),0.89(s,18H),0.08(d,J=13.6Hz,12H)。步驟5.((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)，向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(2.42g,4.72mmol)于THF(48mL)中的攪拌溶液中逐滴添加預先冷卻的三氟乙酸/水溶液(1/1,v/v,24mL)。將所得混合物在0℃下攪拌4小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。將所得溶液與甲苯(3×100mL)一起共蒸發(fā)，同時保持內(nèi)部溫度低于25℃。通過硅膠柱色譜使用二氯甲烷中的2%-10%甲醇純化所得粗材料以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):398.96[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.28(s,1H),7.86(br,2H),7.78(s,1H),6.52(t,J=6.8Hz,1H),4.53(t,J=2.6Hz,1H),3.83(dd,J=4.5Hz,J=6.9Hz,1H),3.48-3.60(m,2H),2.50-2.58(m,1H),2.18-2.25(m,1H),0.90(s,9H),0.11(s,6H)。步驟6.(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(300mg,0.752mmol)于無水ACN(30mL)中的攪拌溶液中添加2-碘?；郊姿?632mg,2.256mmol)。將混合物加熱至85℃并攪拌20分鐘。濾出固體。在真空中濃縮濾液以提供標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):396.94[M+H]+。步驟7.((3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向100mL圓底燒瓶中的(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(434mg,0.820mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(25mL)中的攪拌溶液中添加甲醛溶液(5mL)，隨后在0℃下在5分鐘內(nèi)逐滴添加氫氧化鈉溶液(2N,5mL,10.00mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌3小時。當起始核苷-醛全部耗盡時，通過添加AcOH中和反應混合物。將混合物用乙酸乙酯(60mL)稀釋并用水(2×20mL)、NaHCO3飽和水溶液(2×20mL)和鹽水(2×20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥并在減壓下蒸發(fā)。將殘余物再溶解于無水EtOH(30mL)中并在0℃下，在氬氣氣氛下，分批添加四氫硼酸鈉(62.0mg,1.640mmol)。在25℃下攪拌16小時后，通過添加AcOH中和反應混合物。在真空下濃縮混合物。將殘余物懸浮于CHCl3(40mL)中并用水(2×15mL)和鹽水(2×15mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。通過硅膠柱色譜用二氯甲烷/甲醇(30/1)純化殘余物以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):428.99[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.10(s,1H),7.60(s,1H),6.86(br,2H),6.54(t,J=6.9Hz,1H),5.01(t,J=5.3Hz,1H),4.59(dd,J=3.0Hz,J=5.4Hz,1H),4.40(t,J=5.6Hz,1H),3.42-3.61(m,4H),2.60-2.69(m,1H),2.18-2.25(m,1H),0.89(s,9H),0.09(s,6H)。步驟8.(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，將((3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(166mg,0.387mmol)溶解于無水ACN(20mL)中，然后添加IBX(325mg,1.161mmol)。將所得混合物溫熱至30℃并攪拌20小時。濾出固體。在真空中濃縮濾液以提供標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟中。LC-MS:(ES,m/z):426.97[M+H]+。步驟9：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(160mg,0.375mmol)于干燥MeOH(8mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(129mg,0.937mmol)，隨后在0℃下，在氬氣氣氛下，在攪拌下逐滴添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(144mg,0.749mmol)。將所得混合物逐漸溫熱至25℃，并攪拌16小時。在真空下濃縮所得混合物。通過硅膠柱色譜使用石油醚中的30%-50%乙酸乙酯純化殘余物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):422.98[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.10(s,1H),7.58(s,1H),6.90(br,2H),6.52(t,J=6.6Hz,1H),5.42-5.46(m,1H),4.64(t,J=5.7Hz,1H),3.59-3.67(m,1H),3.50-3.54(m,1H),3.48(s,1H),2.59-2.64(m,1H),2.27-2.31(m,1H),0.91(s,9H),0.12(s,6H)。步驟10：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(6)的合成在氬氣氣氛下，在攪拌下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(64mg,0.151mmol)于THF(3mL)中的攪拌溶液中逐滴添加TBAF溶液(1.0M,151μl,0.151mmol)。將所得溶液在25℃下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物。將殘余物施加至硅膠柱上并用DCM/MeOH(20/1至5/1)洗脫以得到粗產(chǎn)物。通過使用以下條件的制備型HPLC進一步純化粗產(chǎn)物：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，SunFirePrepC18OBD(最佳床密度)柱,5um,19*150mm；流動相，水(具有10mmol碳酸氫銨)和乙腈(5分鐘內(nèi)10%乙腈升至45%，1.5分鐘內(nèi)升至95%，1分鐘內(nèi)降至5%)；檢測器，uv254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的化合物6。LC-MS:(ES,m/z):308.72[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.10(s,1H),7.54(s,1H),6.88(br,2H),6.52(t,J=6.4Hz,1H),5.39-5.52(m,2H),4.48(t,J=6.6Hz,1H),3.59(dd,J=12.0Hz,J=28.8Hz,2H),3.48(s,1H),2.47-2.54(m,1H),2.31-2.37(m,1H)。中間體B((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(中間體B)的合成步驟1：4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成在0℃下，在氬氣下，向4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(5g,32.6mmol)于DMF(60mL)中的混合物中添加NIS(N-碘代琥珀酰亞胺)(7.33g,32.6mmol)。在25℃下，在氬氣氣氛中，將所得混合物在黑暗中攪拌15小時。將反應混合物倒入冷水中并過濾混合物，將固體用冷水(3×50mL)洗滌并在25℃下干燥以得到作為固體的4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶。LC-MS:(ES,m/z):279.9[M+H]+1.1H-NMR:(400MHz,CD3SOCD3,ppm):12.96(brs,1H),8.62(s,1H),7.95(d,J=1.8Hz,1H)。步驟2：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣下，在20℃下，向氫化鈉(0.845g,21.13mmol)和4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(5.37g,19.21mmol)于乙腈(150mL)中的混合物中添加(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-氯-2-(((4-甲基苯甲酰基)氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(7.47g,19.21mmol)。在50℃下，將所得混合物在氬氣氣氛下攪拌2小時，然后在減壓下蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過硅膠100-200柱色譜純化，用EA/PE(1/5)洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):613.9[M+H]+1.1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):8.63(s,1H),8.00(d,J=8.4Hz,2H),7.95(d,J=8.4Hz,2H),7.60(s,1H),7.32-7.25(m,4H),6.82(t,J=7.2Hz,1H),5.77(dd,J=6.4Hz,4Hz,1H),4.80-4.76(m,1H),4.71-4.62(m,2H),2.46(s,6H),1.66-1.31(m,2H)。步驟3：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成將(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(12g,18.99mmol)添加至氨(120mL,240mmol)于2-丙醇(30mL)中的攪拌的冷卻-50℃的混合物，并將混合物在90℃下攪拌48小時。在減壓下蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過硅膠100-200柱色譜純化，用DCM/MeOH(10/1)洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):377.0[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CD3SOCD3,ppm):8.10(s,1H),7.81(s,1H),6.79(brs,2H),6.79-6.51(dd,J=8.1Hz,3Hz,1H),5.27(d,J=3.9Hz,1H),5.05(t,J=5.4Hz,1H),4.33(brs,1H),3.81(brs,1H),3.60-3.46(m,2H),2.51-2.44(m,1H),2.19-2.10(m,1H)。步驟4：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成在0℃下，在氬氣下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(6g,15.95mmol)和咪唑(4.34g,63.8mmol)于DMF(30mL)中的混合物中添加TBS-Cl(44.7mL,44.7mmol)。在23℃下，在氬氣氣氛下，將所得混合物攪拌2小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物用水(150mL)淬滅并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(5×200mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在減壓下濃縮濾液，將殘余物通過硅膠柱純化，用EA/PE(3:7)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):605.3[M+H]+1.1H-NMR:(400MHz,CD3SOCD3,ppm):8.10(s,1H),7.58(s,1H),6.67(brs.2H),6.49(t,J=6.8Hz,1H),4.50(t,J=2.4Hz,1H),3.88-3.81(m,1H),3.74(dd,J=10.8Hz,5.6Hz,1H),3.65(dd,J=10.8Hz,4Hz,1H),2.50-2.49(m,1H),2.25-2.14(m,1H),0.89(s,18H),0.10-0.07(m,12H)。步驟5：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(6.6g,10.92mmol)于THF(66mL)中的混合物中添加TFA(16mL,208mmol)于水(16mL)中的溶液。將所得混合物在0℃下攪拌4小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。在減壓下蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解于DCM/MeOH(10/1,150mL)中，并用碳酸氫鈉(5.0g)將溶液的pH值調(diào)節(jié)至7，過濾并在減壓下蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過硅膠100-200柱色譜純化，用PE中的40-50%EA洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):491.1[M+H]+1.1H-NMR:(400MHz,CD3SOCD3,ppm):8.14(s,1H),7.71(s,1H),6.88(brs,2H),6.47(dd,J=8.4Hz,6Hz,1H),4.51(t,J=2.4Hz,1H),3.80-3.79(m,1H),3.54-3.50(m,2H),2.57-2.53(m,1H),2.18-2.13(m,1H),0.89(s,9H),0.10(s,6H)。步驟6：(2S,3S,5R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-{4-[(二甲基-Si{4}-亞硫烷基（sulfanylidene）)氨基]-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基}氧雜環(huán)戊烷（oxolane）-2-甲醛的合成在0℃下，在氬氣下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(4.682g,9.55mmol)和DCC(N,N-二環(huán)己基碳二亞胺)(6.1g,29.6mmol)于DMSO(40mL)中的混合物中添加吡啶(0.850mL,10.51mmol)和TFA(0.515mL,6.68mmol)。在20℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌14小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物用水(150mL)淬滅并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(120mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在減壓下濃縮濾液以提供作為固體的粗標題產(chǎn)物。LC-MS:(ES,m/z):567.0[M+H2O+H]+步驟7：[(3S,5R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-{4-[(二甲基-Si{4}-亞硫烷基)氨基]-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-(羥基甲基)氧雜環(huán)戊烷-2-基]甲醇的混合物的合成在0℃下，向(2S,3S,5R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-{4-[(二甲基-Si{4}-亞硫烷基)氨基]-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基}氧雜環(huán)戊烷-2-甲醛(80mg,0.146mmol)和甲醛(0.5mL,0.146mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(4mL)中的混合物中添加2M氫氧化鈉(0.5mL,1.000mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌4小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物用乙酸(0.2mL)淬滅并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。將合并的有機層用飽和NaHCO3(30mL)、然后鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在減壓下濃縮濾液，將殘余物溶解于乙醇(4mL)中。在氬氣下，向該混合物添加四氫硼酸鈉(20mg,0.529mmol)。將該混合物在20℃下攪拌36小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物用乙酸(0.05mL)淬滅并用CHCl3(3×40mL)萃取。將合并的有機層用飽和NaHCO3(30mL)、然后鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在減壓下濃縮濾液，通過TLC純化，用DCM/MeOH(12:1)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):581.1[M+H]+1。1H-NMR:(300MHz,CD3SOCD3,ppm):8.09(s,0.6H),7.97(s,0.4H),7.69(s,0.6H),7.46(s,0.4H),6.66(brs,0.8H),6.53-6.42(m,1H),5.10(t,J=5.4Hz,0.4H),5.02(t,J=5.4Hz,0.6H),4.58(brs,1H),4.42-4.37(m,1H),3.58-3.49(m,4H),2.78(d,J=2.7Hz,3H),2.68-2.61(m,1H),2.23-2.16(m,1H),0.90(s,9H),0.10(s,6H)。步驟8：((3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成在0℃下，向[(3S,5R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-{4-[(二甲基-Si{4}-亞硫烷基)氨基]-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-(羥基甲基)氧雜環(huán)戊烷-2-基]甲醇(230mg,0.396mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(2mL,26.0mmol)。在20℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌3小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過硅膠柱純化，用DCM/MeOH(95：5)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):521.2[M+H]+1.1H-NMR:(400MHz,CD3SOCD3,ppm):8.12(s,1H),7.71(s,1H),7.10(brs,2H),6.43(t,J=6.8Hz,1H),4.50(dd,J=6Hz,3.2Hz,1H),3.50-3.37(m,4H),2.59-2.52(m,1H),2.17-2.11(m,1H),0.80(s,9H),0.00(s,6H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在18℃下，在氬氣下，向((3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(960mg,1.845mmol)于乙腈(25mL)中的溶液中添加IBX(1550mg,5.53mmol)。在18℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌18小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。過濾反應混合物。在減壓下濃縮濾液以提供作為固體的粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟中。LC-MS:(ES,m/z):519.1[M+H]+步驟10：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(中間體B)的合成在0℃下，在氬氣下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(190mg,0.366mmol)和K2CO3(127mg,0.916mmol)于MeOH(10mL)中的混合物中添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(141mg,0.733mmol)。在18℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌16小時?；旌衔锏念伾珡狞S色變?yōu)樗{色。通過LCMS/TLC監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過硅膠柱純化，用DCM/MeOH(97:3)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):515.1[M+H]+1.1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):8.22(s,1H),7.12(s,1H),6.25(dd,J=8.8Hz,5.6Hz,1H),5.84(brs,2H),4.71(dd,J=5.6Hz,2Hz,1H),4.01(d,J=12.4Hz,1H),3.80(d,J=16Hz,1H),3.17-3.10(m,1H),2.59(s,1H),2.27-2.21(m,1H),0.91(s,9H),0.11(s,6H)實施例7：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(7)的合成在18℃下，在氬氣下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(中間體B,20mg,0.039mmol)于四氫呋喃(3mL)中的溶液中添加TBAF(0.05mL,0.050mmol)。在18℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌0.5小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過硅膠柱純化，用CH2Cl2/MeOH(7:1)洗脫，以得到粗產(chǎn)物，將其通過具有以下條件的制備型-HPLC純化：儀器，Water-1(26)；柱：XbridgeRP18,5μm,19x150mm；流動相：水(0.05%碳酸氫銨+二氧化碳)和乙腈(8分鐘內(nèi)10%乙腈升至40%，維持100%持續(xù)2分鐘，2分鐘內(nèi)降至10%)；檢測器，UV220和254nm。將收集的部分合并并在減壓下濃縮以得到作為固體的化合物7。LC-MS:(ES,m/z):401.0[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CD3OD):δ8.10(s,1H),7.63(s,1H),6.68(s,2H),6.49(t,J=6.4Hz,1H),5.52(d,J=5.2Hz,1H),4.48(q,J=6.0Hz,1H),3.64-3.60(m,1H),3.57-3.52(m,1H),3.48(s,1H),2.53-2.47(m,1H),2.35-2.29(m,1H)。實施例8：(2R,3S,5R)-5-(2,4-二氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(8)的合成步驟1：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(2-氨基-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣下，在室溫下，將4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-胺(2.0g,11.86mmol)和NaH(0.524g,13.09mmol)于乙腈(60mL)中的混合物攪拌0.5小時。然后向混合物添加中間體A(4.628g,11.90mmol)，在室溫下攪拌10分鐘，然后在50℃下攪拌2小時。通過LCMS監(jiān)測進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過硅膠柱純化，用CH2Cl2/MeOH(92:8)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):521.1[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,DMSO-d6):δ7.93(dd,J=8.1Hz,4H),7.68-7.21(m,5H),6.78(s,2H),6.57(q,J=5.85Hz,1H),6.39(d,J=3.9Hz,1H),5.69(d,J=5.7Hz,1H),4.63-4.43(m,3H),3.04-2.94(m,1H),2.66(dd,J=4.95Hz,1H),2.41(d,J=7.8Hz,6H),1.99(s,1H)。步驟2：(2R,3S,5R)-5-(2,4-二氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在100℃下，將(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(2-氨基-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(1.0g,0.960mmol)和氨(50mL,0.960mmol)于2-丙醇(5mL)中的混合物攪拌20小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。將反應混合物冷卻至環(huán)境溫度，并在減壓下濃縮，將殘余物通過硅膠柱純化，用CH2Cl2/MeOH(82:18)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):266.0[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,DMSO-d6):δ6.93(d,J=3.6Hz,1H),6.76(s,2H),6.40(d,J=3.6Hz,1H),6.32(q,J=5.85Hz,1H),5.70(s,2H),5.20(d,J=3.6Hz,1H),4.29(d,J=2.4Hz,1H),3.78-3.74(m,1H),3.55-3.41(m,2H),3.16(s,1H),2.49-2.34(m,1H),2.08-2.01(m,1H)。步驟3：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺的合成在氬氣下，向(2R,3S,5R)-5-(2,4-二氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(1.39g,5.24mmol)和TBDMS-Cl(2.369g,15.72mmol)于DMF(6mL)中的混合物添加咪唑(1.784g,26.2mmol)。在20℃下，在氬氣氣氛下，將所得混合物攪拌16小時。通過LCMS/TLC監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過硅膠柱純化，用CH2Cl2/MeOH(92:8)洗脫，以提供作為固體的標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):494.4[M+H]+,1H-NMR:(300MHz,CDCl3):δ7.58(s,2H),7.04(d,J=3.9Hz,1H),6.54(d,J=3.9Hz,1H),6.52(s,2H),6.32(dd,J=6.0Hz,1H),4.45(t,J=2.4Hz,1H),3.78(d,J=2.1Hz,1H),3.68(t,J=5.5Hz,2H),3.17(d,J=3.0Hz,1H),2.49-2.42(m,1H),2.17-2.10(m,1H),0.89(s,18H),0.10-0.09(m,12H)。步驟4：N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺的合成在氬氣下，向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺(138mg,0.279mmol)和DMAP(5mg,0.041mmol)于吡啶(5mL)中的混合物中添加苯甲酰氯(158mg,1.124mmol)。在0℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌4小時。通過LCMS/TLC監(jiān)測反應進展。將反應混合物通過水(50mL)淬滅并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在減壓下濃縮濾液，將殘余物通過硅膠柱純化，用PE/EA(2:1)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):702.3[M+H]+,1H-NMR:(300MHz,CDCl3):δ11.11(s,1H),10.80(s,1H),8.09(d,J=7.2Hz,2H),7.73(d,J=7.2Hz,2H),7.66-7.43(m,8H),6.62-6.54(m,2H),4.56(s,1H),3.84-3.64(m,4H),2.81-2.72(m,1H),2.26-2.22(m,1H),0.90-0.83(m,18H),0.11-0.01(m,12H)。步驟5：N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺的合成在0℃下，向N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺(110mg,0.157mmol)于THF(4mL)中的混合物中添加TFA(0.5mL,6.49mmol)于水(0.5mL)中的溶液。將所得混合物在0℃下攪拌4小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過硅膠柱純化，用CH2Cl2/MeOH(95:5)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):588.6[M+H]+,1H-NMR:(300MHz,CDCl3):δ11.11(s,1H),10.81(s,1H),8.09(d,J=7.2Hz,2H),7.97(d,J=7.2Hz,2H),7.65-7.46(m,8H),6.62-6.56(m,2H),4.96(t,J=5.4Hz,1H),4.58(t,J=2.7Hz,1H),3.82-3.77(m,2H),3.56-3.51(m,2H),2.72-2.67(m,1H),2.27-2.21(m,1H),0.88(s,9H),0.09(s,6H)。步驟6：N,N'-(7-((2R,4S,5S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-甲酰基四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺的合成在氬氣下，向N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺(35mg,0.060mmol)于乙腈(5mL)中的混合物中添加IBX(42mg,0.150mmol)。在50℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌50分鐘。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物冷卻至環(huán)境溫度并過濾。在減壓下濃縮濾液，粗產(chǎn)物未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟中。LC-MS:(ES,m/z):618.3[M+CH3OH]+步驟7：N,N'-(7-((2R,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5,5-雙(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺的合成向N,N'-(7-((2R,4S,5S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-甲?；臍溥秽?2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺(35mg,0.060mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(5mL)中的溶液中添加甲醛(1mL,0.060mmol)、NaOH(1mL,2.000mmol)，將混合物在20℃下攪拌4小時，冷卻至0℃，用AcOH淬滅至pH6，添加水(40mL)并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并過濾。在減壓下濃縮濾液，將殘余物溶解于乙醇(5.00mL)中，在氬氣下添加NaBH4(5.65mg,0.149mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌16小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物冷卻至環(huán)境溫度，用AcOH淬滅至pH6，添加水(40mL)并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。將有機層濃縮并通過硅膠柱純化，用CH2Cl2/MeOH(20:1)洗脫，以提供作為固體的標題產(chǎn)物。LC-MS:(ES,m/z):618.2[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,CDCl3):δ11.11(s,1H),10.80(s,1H),8.09(d,J=7.2Hz,2H),7.73(d,J=7.2Hz,2H),7.66-7.43(m,8H),6.62-6.54(m,2H),4.56(s,1H),3.84-3.64(m,4H),2.81-2.72(m,1H),2.26-2.22(m,1H),0.90-0.83(m,18H),0.11-0.01(m,12H)。步驟8：N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-甲?；?5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺的合成在20℃下，在氬氣下，向N,N'-(7-((2R,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5,5-雙(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺(30mg,0.049mmol)于乙腈(10mL)中的溶液中添加IBX(40mg,0.143mmol)。在25℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌3小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物冷卻至環(huán)境溫度并過濾。在減壓下濃縮濾液以提供作為固體的粗產(chǎn)物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一步驟中。LC-MS:(ES,m/z):616.2[M+H]+步驟9：N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-乙炔基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺的合成在0℃下，在氬氣下，向N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-甲?；?5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺(70mg,0.114mmol)和K2CO3(39.3mg,0.284mmol)于MeOH(5mL)中的混合物中添加(2-重氮基-3-氧代丁酰基)膦酸二甲酯(50.0mg,0.227mmol)于MeOH(0.25mL)中的溶液。在25℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌16小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過TLC純化，用CH2Cl2/MeOH(20:1)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):612.4[M+H]+步驟10：(2R,3S,5R)-5-(2,4-二氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(8)的合成在20℃下，在氬氣下，向N,N'-(7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-乙炔基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二基)二苯甲酰胺(40mg,0.065mmol)于MeOH(4mL)中的溶液添加NaOCH3于MeOH中的溶液(0.065mL,0.065M)。在40℃下，在氬氣下，將所得混合物攪拌48小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物冷卻至環(huán)境溫度，并在減壓下濃縮，將殘余物通過TLC純化，用CH2Cl2/MeOH(20:1)洗脫，以提供作為固體的粗中間體(27mg)，將其在氬氣下稀釋于THF(3mL)中。在20℃下添加TBAF溶液(1M,0.040mL,0.04mmol)。在20℃下，將所得混合物在氬氣下攪拌0.5小時。通過LCMS/TLC監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮反應混合物，將殘余物通過TLC純化，用CH2Cl2/MeOH(5:1)洗脫，以提供粗產(chǎn)物(15mg)，其然后通過具有以下條件的制備型-HPLC純化：儀器，Waters-2767-制備型；柱：XbridgeRP18,5μm,19x150mm；流動相：水(0.05%碳酸氫銨(二氧化碳)和乙腈(8分鐘內(nèi)5%乙腈升至40%)；檢測器，UV220和254nm。將所收集的部分合并并在減壓下濃縮以得到作為固體的化合物8。LC-MS:(ES,m/z):618.2[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,CDCl3):δ6.85(d,J=3.6Hz,1H),6.55(s,2H),6.36(d,J=4.0Hz,2H),5.56(s,2H),5.48-5.43(m,2H),4.42(q,J=5.6Hz,1H),3.61-3.49(m,2H),3.44(s,1H),2.47-2.40(m,1H),2.26-2.21(m,1H)。實施例9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(9)的合成步驟1：4-疊氮基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-胺的合成在氬氣氣氛下，向4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-胺(3.5g,20.76mmol)于無水DMSO(35mL)中的攪拌溶液中添加疊氮化鈉(2.025g,31.1mmol)于水(3.50mL)中的溶液。將混合物加熱至100℃并攪拌過夜。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。將所得混合物冷卻至環(huán)境溫度。添加250g碎冰并將混合物在0℃下攪拌30分鐘。形成沉淀物。通過過濾收集沉淀物，用冷水洗滌并經(jīng)P2O5在真空下干燥過夜，以得到作為固體的4-疊氮基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-胺，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ11.91(brs,1H),7.96(brs,2H),7.13(t,J=3.0Hz,1H),6.72(dd,J=2.0Hz,J=3.2Hz,1H)。LC-MS:(ES,m/z):176.00[M+H]+。步驟2：4-疊氮基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的合成在氬氣氣氛下，將氟化氫-吡啶(30%Py中的70%HF)(12mL,133mmol)稱重至特氟龍瓶中。向其中添加4-疊氮基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-胺(3.1g,17.70mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌混合物直至其變成澄清溶液，然后冷卻至-60℃，隨后在10分鐘內(nèi)逐滴添加亞硝酸叔丁酯(2.5mL,21.02mmol)。將所得混合物在-60℃至-40℃之間攪拌2小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。將混合物倒入冷NaHCO3水溶液(150mL，飽和)中。將粗產(chǎn)物用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，用鹽水(100mL×2)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮濾液以得到殘余物。然后通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(1/4)純化殘余物以得到作為固體的4-疊氮基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ12.43(brs,1H),7.48(d,J=3.9Hz,1H),6.50(d,J=3.6Hz,1H)。F-NMR:(282MHz,d6-DMSO,ppm):δ-54.57(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):179.20[M+H]+。步驟3：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-疊氮基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，在50mL兩頸圓底燒瓶中，向礦物油中氫化鈉60%分散體(0.272g,6.79mmol)于無水DMF(20mL)中的攪拌懸浮液分批添加4-疊氮基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1.1g,6.18mmol)，并將混合物在該溫度下攪拌5分鐘。在攪拌下添加中間體A(2.4g,6.17mmol)。將反應混合物溫熱至25℃并攪拌2小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。將混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用水(70mL)洗滌。用乙酸乙酯(60mL×2)再萃取水層。將合并的有機層用鹽水(100mL×3)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(1/10)純化以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ8.00(d,J=8.4Hz,2H),7.95(d,J=8.0Hz,2H),7.32-7.23(m,4H),6.74(dd,J=6.4Hz,J=8.0Hz,1H),6.49(d,J=4.0Hz,1H),5.75-5.74(m,1H),4.75-4.54(m,3H),2.85-2.74(m,2H),2.47-2.43(m,6H)。F-NMR:(376MHz,CDCl3,ppm):δ-52.26(s,1F,β異構(gòu)體),-52.48(s,1F,α異構(gòu)體)。LC-MS:(ES,m/z):531.42[M+H]+。步驟4：(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯的合成在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-疊氮基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(2.0g,3.77mmol)于MeOH(10mL)和DCM(15mL)的混合物中的攪拌溶液中添加丙烷-1,3-二硫醇(0.816g,7.54mmol)，隨后在25℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)逐滴添加三乙胺(0.763g,7.54mmol)。將混合物在25℃下攪拌30分鐘。通過TLC監(jiān)測反應進展。在真空下濃縮所得混合物。然后通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的42%EA)純化殘余物以得到作為粉末的標題化合物。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ8.00(d,J=8.0Hz,2H),7.97(d,J=8.0Hz,2H),7.33-7.26(m,4H),7.12(d,J=4.0Hz,1H),6.72(dd,J=6.2Hz,J=8.2Hz,1H),6.38(d,J=3.6Hz,1H),5.75-5.72(m,1H),5.36(brs,2H),4.73-4.57(m,3H),2.79-2.74(m,2H),2.47(s,3H),2.44(s,3H)。F-NMR:(376MHz,CDCl3,ppm):δ-52.97(s,1F,β異構(gòu)體),-53.10(s,1F,α異構(gòu)體)。LC-MS:(ES,m/z):505.63[M+H]+。步驟5：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，在攪拌下，在5分鐘內(nèi)向(2R,3S,5R)-4-甲基苯甲酸5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(((4-甲基苯甲?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基酯(1.75g,3.47mmol)于無水MeOH(10mL)中的攪拌溶液中注入甲醇鈉MeOH溶液(1.0M,3.47mL,3.47mmol)。將所得混合物在0℃至10℃下攪拌4小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。通過添加AcOH中和所得混合物，然后在減壓下濃縮。然后通過硅膠柱色譜使用二氯甲烷/甲醇(DCM中的6%MeOH)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.55(brs,2H),7.31(d,J=3.6Hz,1H),6.61(d,J=3.6Hz,1H),6.34(dd,J=6.4Hz,J=8.0Hz,1H),5.26(d,J=3.6Hz,1H),4.92(t,J=5.0Hz,1H),4.32(d,J=2.4Hz,1H),3.82-3.79(m,1H),3.58-3.46(m,2H),2.48-2.41(m,1H),2.19-2.13(m,1H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-53.77(s,1F,β異構(gòu)體),-53.98(s,1F,α異構(gòu)體)。LC-MS:(ES,m/z):269.20[M+H]+。步驟6：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺的合成在氬氣氣氛下，將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(850mg,3.17mmol)和咪唑(863mg,12.68mmol)稱重至50mL圓底燒瓶中。向燒瓶中注入無水DMF(10mL)，隨后分批添加TBS-Cl(1433mg,9.51mmol)。將混合物在25℃下攪拌2小時。反應達到完全后，將混合物用乙酸乙酯(60mL)稀釋，用水(30mL×2)、NaHCO3水溶液(飽和，30mL×2)和鹽水(30mL×2)分別洗滌。收集有機層并經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮以得到粗產(chǎn)物。然后通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的20%EA)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.55(brs,2H),7.26(d,J=3.6Hz,1H),6.60(d,J=3.3Hz,1H),6.31(t,J=6.6Hz,1H),4.55-4.50(m,1H),3.80-3.61(m,4H),2.64-2.55(m,1H),2.23-2.17(m,1H),0.90-0.87(m,18H),0.11-0.06(m,12H)。F-NMR:(282MHz,d6-DMSO,ppm):δ-53.64(s,1F,β異構(gòu)體),-53.78(s,1F,α異構(gòu)體)。LC-MS:(ES,m/z):497.58[M+H]+。步驟7:((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇在0℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)向7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(1.4g,2.82mmol)于THF(24mL)中的攪拌溶液中逐滴添加TFA水溶液(TFA/H2O=1/1,v/v,12mL)。在0℃下攪拌所得混合物。通過TLC監(jiān)測反應進展。攪拌5小時后，起始二TBS保護的核苷全部耗盡，然后將反應混合物與甲苯(50mL×3)一起共蒸發(fā)。將殘余物再溶解于MeOH/DCM混合物(DCM中的15%MeOH，50mL)中。在0℃下添加固體NaHCO3(2g)，隨后添加水(1mL)。將所得混合物攪拌30分鐘。將pH值調(diào)節(jié)至7后，濾出固體，收集濾液并在減壓下濃縮。通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/石油醚(PE中的40%EA)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.57(brs,2H),7.32(d,J=3.6Hz,1H),6.61(d,J=3.6Hz,1H),6.32(dd,J=6.0Hz,J=8.0Hz,1H),4.99-4.96(m,1H),4.52(t,J=2.8Hz,1H),3.79(q,J=2.4Hz,1H),3.54-3.49(m,2H),2.57-2.53(m,1H),2.19-2.13(m,1H),0.91-0.88(m,9H),0.13-0.11(m,6H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-53.71(s,1F,β異構(gòu)體),-53.89(s,1F,α異構(gòu)體)。LC-MS:(ES,m/z):383.36[M+H]+。步驟8：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在室溫下，在氬氣氣氛下，在2分鐘內(nèi)將TFA(0.051mL,0.659mmol)注入((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(360mg,0.941mmol)、DCC(N,N-二環(huán)己基碳二亞胺)(602mg,2.92mmol)和吡啶(0.084mL,1.035mmol)于無水DMSO(2mL)中的攪拌溶液中，并攪拌混合物過夜。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。過濾混合物以去除二環(huán)已基脲，并將濾液分配于乙酸乙酯(30mL)和H2O(30mL)之間。收集有機層并用鹽水(20mL×2)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下蒸發(fā)濾液以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):381.20[M+H]+,413.20[M+MeOH+H]+。步驟9：((3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向50mL圓底燒瓶中的(2S,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(400mg,1.051mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(8mL)中的攪拌溶液中添加甲醛溶液(1.2mL,16.01mmol)，隨后在2分鐘內(nèi)逐滴添加氫氧化鈉溶液(1.2mL,2.400mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌7小時。當起始核苷全部耗盡時，通過添加AcOH中和反應混合物。將所得混合物用AcOEt(100mL)稀釋并用水(2×40mL)、NaHCO3飽和水溶液(2×40mL)和鹽水(50mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥并在減壓下蒸發(fā)。將殘余物再溶解于EtOH(3mL)中并在0℃下分批添加硼氫化鈉(199mg,5.26mmol)。在25℃下攪拌5小時后，通過添加AcOH中和反應混合物。在減壓下濃縮混合物，將殘余物分配于CHCl3(100mL)和水(50mL)之間。將有機層用水和鹽水依次洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，并在減壓下蒸發(fā)。通過硅膠柱色譜使用二氯甲烷/甲醇(30/1)純化殘余物以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.55(brs,2H),7.34(d,J=3.6Hz,1H),6.60(d,J=3.6Hz,1H),6.35(t,J=7.0Hz,1H),4.90(t,J=3.6Hz,1H),4.60(q,J=2.8Hz,1H),4.41(t,J=3.6Hz,1H),3.60-3.43(m,4H),2.69-2.62(m,1H),2.23-2.17(m,1H),0.92(s,9H),0.09(s,6H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-53.80(s,1F,β異構(gòu)體)。LC-MS:(ES,m/z):413.32[M+H]+,435.34[M+Na]+。步驟10：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣氣氛下，向50mL圓底燒瓶中的((3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(180mg,0.436mmol)于無水乙腈(15mL)和干燥DMSO(1.5mL)中的攪拌溶液中添加IBX(367mg,1.309mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌8小時。過濾反應混合物，用二氯甲烷洗滌。收集濾液并在減壓下濃縮。將殘余物再溶解于乙酸乙酯(40mL)中，用水(3×15mL)和鹽水(2×20mL)依次洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液以得到標題化合物，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ9.65(s,1H),7.60(d,J=3.6Hz,1H),6.43(dd,J=5.6Hz,J=9.6Hz,1H),6.39(d,J=3.6Hz,1H),5.56-5.43(m,3H),4.96(d,J=4.8Hz,1H),4.08(d,J=11.2Hz,1H),3.81(d,J=12.8Hz,1H),3.27-3.19(m,1H),2.25(dd,J=5.4Hz,J=13.0Hz,1H),0.91(s,9H),0.11(d,J=5.2Hz,6H)。F-NMR:(376MHz,CDCl3,ppm):δ-53.14(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):411.21[M+H]+。步驟11：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(190mg,0.463mmol)于無水MeOH(8mL)中的攪拌溶液中添加碳酸鉀(160mg,1.157mmol)。將混合物冷卻至0℃，然后在1分鐘內(nèi)逐滴添加(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(178mg,0.926mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌過夜。在減壓下濃縮反應混合物，然后通過硅膠柱色譜使用甲醇/二氯甲烷(DCM中的4.8%MeOH)純化以得到標題化合物。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ6.99(d,J=3.6Hz,1H),6.35(d,J=3.6Hz,1H),6.28(dd,J=6.0Hz,J=8.8Hz,1H),5.45-5.33(m,3H),4.76(q,J=2.8Hz,1H),4.03(dd,J=2.0Hz,J=12.4Hz,1H),8.16-3.79(m,1H),3.12-3.06(m,1H),2.70(s,1H),2.33-2.27(m,1H),0.94(s,9H),0.16(d,J=8.0Hz,6H)。F-NMR:(376MHz,CDCl3,ppm):δ-53.26(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):407.30[M+H]+。步驟12：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(9)的合成在環(huán)境溫度下，在氬氣氣氛下，在攪拌下，在1分鐘內(nèi)，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-2-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(15mg,0.037mmol)于無水THF(1mL)中的攪拌溶液中逐滴添加TBAFTHF溶液(0.037mL,0.037mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌介質(zhì)2小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。當起始核苷全部耗盡時，在真空下濃縮混合物，然后通過制備型TLC(MeOH/DCM=1/15)純化殘余物以得到粗產(chǎn)物(10mg)。通過具有以下條件的制備型HPLC進一步純化粗產(chǎn)物：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，X-bridgeC18柱,19*150mm,5um；流動相，具有10mmol碳酸氫銨的水和乙腈(5分鐘內(nèi)5%乙腈升至30%，2分鐘內(nèi)升至95%)；檢測器，uv254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的化合物9。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.57(brs,2H),7.28(d,J=3.6Hz,1H),6.61(d,J=3.6Hz,1H),6.35(t,J=6.4Hz,1H),5.51(d,J=5.6Hz,1H),5.27(t,J=6.0Hz,1H),4.48(dd,J=6.4Hz,J=12.0Hz,1H),3.61(dd,J=5.6Hz,J=11.6Hz,1H),3.53(dd,J=6.4Hz,J=12.0Hz,1H),3.48(s,1H),2.50-2.46(m,1H),2.37-2.31(m,1H)。F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-53.67(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):293.15[M+H]+,315.15[M+Na]+。實施例10：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-羥基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(10)的合成步驟1：5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛肟的合成在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(實施例1,中間體C,50mg,0.127mmol,1.0當量)于干燥吡啶(2.5mL)中的攪拌溶液中添加羥胺鹽酸鹽(26.6mg,0.382mmol,3.0當量)。將所得混合物在30℃下攪拌2小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。在真空下濃縮反應混合物，然后將殘余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，用水(2×30mL)和鹽水(35mL)依次洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾并在真空下濃縮濾液。通過制備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化殘余物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):408.20[M+H]+。步驟2：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的合成在20℃下，在氬氣氣氛下，在攪拌下，向5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛肟(40mg,0.098mmol)和三乙胺(105mg,1.038mmol)于干燥DCM(5mL)中的攪拌混合物中逐滴添加2,2,2-三氟乙酸酐(110mg,0.524mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌20小時。通過LCMS監(jiān)測反應進展。將反應混合物用DCM(30mL)稀釋，用NaHCO3飽和水溶液(25mL)和鹽水(25mL)依次洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮濾液。通過制備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化殘余物以提供標題化合物。LC-MS:(ES,m/z):390.11[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CD3OD,ppm):δ8.10(s,1H),7.30(d,J=3.6Hz,1H),6.68(t,J=6.9Hz,1H),6.64(d,J=3.6Hz,1H),4.90(t,J=6.3Hz,1H),3.85(dd,J=12.0Hz,J=21.6Hz,2H),2.85-2.94(m,1H),2.42-2.49(m,1H),1.02(s,9H),0.26(d,J=9.0Hz,6H)。步驟3：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-羥基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(10)的合成在15℃下，在氬氣氣氛下，在攪拌下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(35mg,0.090mmol)于干燥THF(5mL)中的攪拌溶液中逐滴添加TBAFTHF溶液(1.0M,0.108mL,0.108mmol)。將所得混合物在15℃下攪拌0.5小時。通過LCMS和TLC監(jiān)測反應進展。在真空下濃縮反應混合物。通過制備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化殘余物以得到糊漿。通過具有以下條件的制備型HPLC進一步純化粗產(chǎn)物：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，SunFireC18反相柱,19*150mm,5um；流動相，具有10mmol碳酸氫銨的水和乙腈(7.5分鐘內(nèi)5%乙腈升至20%，2分鐘內(nèi)升至95%，1分鐘內(nèi)降至5%)；檢測器，uv254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的標題化合物10。LC-MS:(ES,m/z):276.10[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.07(s,1H),7.34(d,J=3.6Hz,1H),7.33(br,2H),7.08(s,1H),6.64(t,J=7.0Hz,1H),6.61(d,J=3.6Hz,1H),6.27(d,J=4.8Hz,1H),5.82(t,J=6.0Hz,1H),4.61(dd,J=4.8Hz,J=10.0Hz,1H),3.75(dd,J=5.6Hz,J=12.0Hz,1H),3.62(dd,J=6.0Hz,J=11.6Hz,1H),2.74-2.81(m,1H),2.33-2.38(m,1H)。實施例11：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(11)的合成步驟1：4-(甲基硫基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成4-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成描述于WO2011/150356A1,2011中。向500mL圓底燒瓶中放置4-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(17g,110.70mmol)和(甲基硫烷基)鈉(15g,214.01mmol)于四氫呋喃(300mL)中的溶液。將所得溶液在室溫下攪拌1個過夜。濾出固體。在真空下濃縮所得混合物。將殘余物施加至硅膠柱上，使用乙酸乙酯/石油醚(1:10)。這導致產(chǎn)生標題化合物。LC-MS(ES,m/z):166[M+H]+步驟2:(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)-2-(4-(甲基硫基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)四氫呋喃-2-醇在78℃下，在氬氣氣氛下，向4-(甲基硫基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(1.650g,9.99mmol)于THF(30mL)中的溶液中添加二異丙基氨基鋰(7.5mL,15.00mmol)，并將所得混合物在-78℃下攪拌30分鐘。此后，在-78℃下，在氬氣氣氛下，添加THF(10mL)中的(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)二氫呋喃-2(3H)-酮(4.18g,9.99mmol)并在-78至-50℃下攪拌120分鐘。通過添加氯化銨(水溶液，10mL)淬滅反應物，然后用乙酸乙酯(300mL)萃取。將有機層用(3×50mL)鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1:5)洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:584.2[M+H]+。步驟3：7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-4-(甲基硫基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向（3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)-2-(4-(甲基硫基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)四氫呋喃-2-醇(3.00g,5.14mmol)于DCM(30mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(2.390g,20.56mmol)和三氟硼烷(0.697g,10.28mmol)。將所得溶液在0℃下攪拌30分鐘，然后通過添加碳酸氫鈉(水溶液，20mL)淬滅，通過DCM(200mL)萃取。將有機層用3×50mL鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上，用乙酸乙酯/石油醚(1:10)洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:568.4[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.21(s,1H),7.23-7.36(m,15H),6.81(d,J=4.5Hz,1H),6.70(d,J=4.5Hz,1H),5.69(d,J=4.2Hz,1H),4.37-4.62(m,7H),4.22-4.26(m,1H),4.10-4.13(m,1H),3.66-3.67(m,1H),3.62-3.63(m,1H),2.75(s,3H)。步驟4：7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成在-40.0℃下，在密封管中，向7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-4-(甲基硫基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4.6g,8.10mmol)于2-丙醇(5mL)中的溶液中沖入（flush）氨(1350mg,79mmol)，持續(xù)60分鐘。將所得混合物在80℃下攪拌16小時后，將其蒸發(fā)以得到標題化合物。LC-MS:537.3[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,DMSO,ppm):δ7.80(s,1H),7.69(s,2H),7.24-7.36(m,15H),6.88(d,J=4.5Hz,1H),6.80(d,J=4.2Hz,1H),5.44(d,J=5.4Hz,1H),4.49-4.62(m,6H),4.31(t,J=5.1Hz,1H),4.15-4.18(m,1H),4.09-4.12(m,1H),3.29-3.67(m,2H)。步驟5：(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇的合成在25℃下，在氫氣下，向7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(100mg,0.186mmol)于乙酸(2mL)中的溶液中添加Pd(OH)2(10mol%)/C(100mg,0.130mmol)，持續(xù)4小時。將混合物過濾通過硅藻土墊并蒸發(fā)濾液。將殘余物施加至硅膠柱上，用MeOH/DCM(1:8)洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:267.2[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,DMSO,ppm):δ7.79(s,1H),7.77(s,2H),6.84(d,J=4.2Hz,1H),6.68(d,J=4.2Hz,1H),5.10(d,J=6.6Hz,1H),4.95(d,J=6.6Hz,1H),4.84(d,J=4.8Hz,1H),4.76(t,J=5.4Hz,1H),4.20-4.25(m,1H),3.94(d,J=4.8Hz,1H),3.78(d,J=4.2Hz,1H),3.41-3.64(m,2H)。步驟6：(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇的合成在氬氣下，將(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(790mg,2.97mmol)和1H-咪唑(606mg,8.90mmol)溶解于DMF(20mL)中。在0℃下逐滴添加1,3-二氯-1,1,3,3-四異丙基二硅氧烷(936mg,2.97mmol)。將所得混合物在25℃下在氬氣下攪拌5小時后，添加水(10mL)并用乙酸乙酯(400mL)稀釋所得混合物。將有機相用(3×60mL)水和60mL鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠上，用MeOH/DCM(1:20)洗脫，以得到標題化合物。LC-MS:509.3[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.81(s,1H),7.70(s,2H),6.82(d,J=4.8Hz,1H),6.61(d,J=4.4Hz,1H),5.20(d,J=4.8Hz,1H),5.16(d,J=1.6Hz,1H),4.31-4.35(m,1H),4.12-4.15(m,1H),4.00-4.03(m,1H),3.88-3.91(m,1H),0.96-1.05(m,28H)步驟7：硫代碳酸O-((6aR,8S,9S,9aR)-8-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-基)O-苯基酯的合成在氬氣下，將(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇(210mg,0.413mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(202mg,1.651mmol)溶解于DCM(10mL)中。在0℃下逐滴添加硫代氯甲酸O-苯酯(O-phenylcarbonochloridothioate)(143mg,0.826mmol)。將反應物在25℃下在氬氣下攪拌2小時后，將所得混合物用DCM(100mL)稀釋，然后用3×30mL水和30mL鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上并用乙酸乙酯/石油醚(3：1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:645.2[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.83(s,2H),7.79(s,1H),7.48(t,J=8.0Hz,2H),7.33(t,J=7.2Hz,1H),7.14(d,J=7.6Hz,2H),6.80(d,J=4.4Hz,1H),6.71(d,J=4.4Hz,1H),6.16(dd,J=2.4Hz,J=5.6Hz,1H),5.46(d,J=2.0Hz,1H),4.90(dd,J=5.6Hz,J=8.8Hz,1H),3.95-4.06(m,2H),3.85-3.87(m,1H),0.96-1.06(m,28H)。步驟8：7-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成在氬氣下，將硫代碳酸O-((6aR,8S,9S,9aR)-8-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-基)O-苯基酯(1.45g,2.248mmol)、AIBN(0.738g,4.50mmol)和三丁基錫烷(3.93g,13.49mmol)溶解于甲苯(20mL)中。將反應物在80℃下在氬氣下攪拌3小時后，在真空下濃縮所得溶液。將殘余物施加至硅膠柱上并用乙酸乙酯/石油醚(2.5:1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:493.4[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.81(s,1H),7.79(s,2H),6.81(d,J=4.4Hz,1H),6.60(d,J=4.4Hz,1H),5.46(t,1H),4.58-4.62(m,1H),3.90-4.00(m,1H),3.75-3.80(m,2H),2.20-2.30(m,1H),2.30-2.40(m,1H),0.98-1.06(m,28H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在氬氣下，將7-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.0g,2.029mmol)溶解于THF(10mL)中。在20℃下，向反應溶液中逐滴添加TBAF(0.531g,2.029mmol)。將所得溶液在20℃下在氬氣下攪拌2小時后，將其在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上并用DCM/MeOH(20:1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:251.2[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.83(s,1H),7.81(s,2H),6.84(d,J=4.8Hz,1H),6.82(d,J=4.4Hz,1H),5.47-5.51(m,1H),5.06(d,J=4.0Hz,1H),4.73(t,J=6.0Hz,1H),4.22(m,1H),3.74-3.78(m,1H),3.32-3.45(m,2H),2.16-2.20(m,1H),2.09-2.14(m,1H)。步驟10：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成在氬氣下，將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(300mg,1.199mmol)、1H-咪唑(490mg,7.19mmol)和叔丁基氯二甲基硅烷(723mg,4.80mmol)溶解于DMF(4.0mL)中。將反應混合物在20℃下在氬氣下攪拌5小時后，將所得混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用(3×30mL)水和30mL鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上并用乙酸乙酯/石油醚(2:1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:479.3[M+H]+,1H-NMR:(300MHz,DMSO,ppm):δ7.82(s,1H),7.75(s,2H),6.82(d,J=4.5Hz,1H),6.61(d,J=4.5Hz,1H),5.48-5.53(m,1H),4.42(m,1H),3.78(m,1H),3.48-3.62(m,2H),2.22-2.27(m,1H),2.04-2.10(m,1H),0.78-0.89(m,18H),0.00-0.10(m,12H)步驟11：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成將7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(500mg,1.044mmol)溶解于THF(8.0mL)、H2O(2.0mL)和TFA(2.0mL)中并在0℃下攪拌4小時。用碳酸氫鈉將反應混合物調(diào)節(jié)至pH7，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，用(3×20mL)水和20mL鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上并用乙酸乙酯/石油醚(2:1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:365.3[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.82(s,1H),7.68(s,2H),6.82(d,J=4.4Hz,1H),6.65(d,J=4.4Hz,1H),5.46-5.50(m,1H),4.80(t,J=5.6Hz,1H),4.42(d,J=4.2Hz,1H),3.74-3.78(m,1H),3.32-3.44(m,2H),2.24-2.28(m,1H),2.02-2.06(m,1H),0.85-0.90(m,9H),0.00-0.10(m,6H)。步驟12：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣下，將((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(270mg,0.741mmol)和IBX(270mg,0.963mmol)溶解于乙腈(20.0mL)中。將反應混合物在80℃下在氬氣下攪拌1小時后，濾出固體并在真空下濃縮濾液以得到標題化合物，其直接用于下一步驟。LC-MS:363.2[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ9.59(s,1H),7.84(s,1H),7.73(s,2H),6.86(d,J=4.4Hz,1H),6.64(d,J=4.4Hz,1H),5.67-5.71(m,1H),4.71(d,J=4.4Hz,1H),4.25(s,1H),2.25-2.32(m,1H),2.12-2.17(m,2H),0.84-0.91(m,9H),0.00-0.13(m,6H)。步驟13：((3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成在20℃下，將(2S,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(200mg,0.552mmol)溶解于1,4-二氧雜環(huán)己烷(10mL)中。然后添加甲醛(2.0mL,0.552mmol)和氫氧化鈉(2.0mL,4.00mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌4小時后，用乙酸將其調(diào)節(jié)至pH7。將混合物用乙酸乙酯(150mL)稀釋，然后用3×30mL水和30mL鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，并在真空下濃縮。在0℃下將殘余物溶解于乙醇(10mL)中，然后在0℃下添加NaBH4(41.7mg,1.103mmol)。將所得混合物在20℃下攪拌16小時后，用乙酸將其調(diào)節(jié)至pH=7并將混合物用乙酸乙酯(150mL)萃取，然后用(3×30mL)水和30mL鹽水洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上并用DCM/MeOH(10:1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:395.2[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.82(s,1H),7.70(s,2H),6.82(d,J=4.4Hz,1H),6.66(d,J=4.4Hz,1H),5.50-5.60(m,1H),4.68(t,1H),4.52(d,J=4.4Hz,1H),4.22(t,1H),3.53-3.60(m,2H),2.35-2.45(m,1H),2.00-2.10(m,1H),0.90(s,9H),0.08-0.09(m,6H)。步驟14：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在氬氣下，將((3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(90mg,0.228mmol)和IBX(256mg,0.912mmol)溶解于乙腈(15.0mL)中。將反應混合物在30℃下在氬氣下攪拌48小時后，濾出固體。在真空下濃縮濾液以得到標題化合物，其直接用于下一步驟。步驟15：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在氬氣下，將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(80mg,0.204mmol)和K2CO3(85mg,0.611mmol)溶解于甲醇(10mL)中。在0℃下將(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(78mg,0.408mmol)逐滴添加至反應混合物。將反應混合物在25℃下在氬氣下攪拌16小時后，將其過濾并在真空下濃縮。將殘余物施加至硅膠柱上并用DCM/MeOH(10:1)洗脫以得到標題化合物。LC-MS:389.3[M+H]+步驟16：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(11)的合成在氬氣下，將((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(50mg,0.129mmol)和TBAF(33.6mg,0.129mmol)溶解于THF(5.0mL)中。將所得溶液在25℃下在氬氣下攪拌2小時后，在真空下濃縮反應混合物。通過具有以下條件的制備型-HPLC純化殘余物(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，XbridgePrepC18柱，19*150mm；流動相，水(10mmoL/LNH4HCO3)和乙腈(8分鐘內(nèi)5.0%乙腈升至25.0%，1.5分鐘內(nèi)升至95.0%，1.5分鐘內(nèi)降至5.0%)；檢測器，UV254&220nm)以得到作為固體的標題化合物11。LC-MS:275.1[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.82(s,1H),7.69(s,2H),6.82(d,J=4.4Hz,1H),6.69(d,J=4.0Hz,1H),5.60(t,J=7.6Hz,1H),5.28(d,J=4.2Hz,1H),5.06(d,J=6.8Hz,J=6.0Hz,1H),4.30-4.34(m,1H),3.45-3.56(m,2H),3.38(s,1H),2.30-2.37(m,1H),2.17-2.13(m,1H)。實施例12：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-羥基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(12)的合成步驟1：5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛肟的合成在25℃下，在氬氣下，向中間體D(參見實施例11)(70mg,0.178mmol)于吡啶(5mL)中的混合物中添加羥胺鹽酸鹽(37.17mg,0.543mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時后，在減壓下濃縮反應混合物。將殘余物用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用水(3×20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并在減壓下濃縮以提供標題化合物，其未經(jīng)純化即使用。LC-MS:408.2[M+H]+步驟2：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈的合成在25℃下，在氬氣下，向5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛肟(70mg,0.172mmol)于DCM(15mL)中的混合物中添加Et3N(69.5mg,0.687mmol)和2,2,2-三氟乙酸酐(72.2mg,0.344mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌16小時，然后將反應混合物用DCM(100mL)稀釋，用碳酸氫鈉飽和水溶液(3×20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并在減壓下濃縮。將殘余物通過硅膠柱純化，用DCM/MeOH(15:1)洗脫，以提供標題化合物。LC-MS:309.2[M+H]+。步驟3：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-羥基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(12)的合成在25℃下，在氬氣下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲腈(50mg,0.128mmol)于THF(10mL)中的混合物中添加TBAF(33.6mg,0.128mmol)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時，然后在減壓下濃縮。通過具有以下條件的制備型-HPLC純化粗產(chǎn)物：儀器，(1#-制備型-HPLC-011(waters))；柱：XbridgeC18,5um,19x150mm；流動相：水(0.05%NH4CO3)和ACN(10分鐘內(nèi)5.0%ACN升至40%，維持95%持續(xù)2分鐘，2分鐘內(nèi)降至5%)；檢測器，UV220和254nm。將所收集的部分合并并在減壓下濃縮以得到作為固體的標題化合物12。LC-MS:276.0[M+H]+,1H-NMR:(400MHz,DMSO,ppm):δ7.86(s,1H),7.74-7.84(s,2H),6.88(d,J=4.4Hz,1H),6.84(d,J=4.4Hz,1H),6.10(d,J=4.4Hz,1H),5.72-5.79(m,1H),5.62-5.63(m,1H),4.44-4.61(s,1H),3.53-3.62(m,2H),2.42-2.49(m,1H),2.19-2.24(m,1H)。實施例13:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(13)步驟1:2-((4,4,6,6-四氧化-1,3,5,2,4,6-三氧雜三次膦（phosphinan）-2-基)氧基)苯甲酸鹽(中間體E)在手套箱中，在氬氣氣氛下，將干燥三丁胺(0.4mL,1.679mmol)添加至容納有溶解于0.4mL二甲基甲酰胺(DMF)中的焦磷酸三丁銨(112mg,0.205mmol)的燒瓶中以得到澄清溶液。然后在劇烈攪拌下將澄清溶液注入容納有二甲基甲酰胺(0.4mL)中的干燥2-氯-4H-苯并[d][1,3,2]二氧雜膦嚀(phosphinin)-4-酮(27.6mg,0.136mmol)的燒瓶中。將所得混合物在30℃下攪拌30分鐘以得到中間體E的溶液，其未經(jīng)任何后處理即直接用于隨后反應中。步驟2：((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(13)的合成將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(化合物1,8mg,0.029mmol)置于圓底燒瓶(10mL)中，然后在高真空下經(jīng)P2O5干燥過夜。向該燒瓶中添加活化分子篩4?(100mg)。將介質(zhì)與氬氣一起裝入，然后通過注射器將中間體E(2.0當量，新鮮制備)于干燥DMF(0.15mL)中的溶液轉(zhuǎn)移至上述燒瓶中，并將混合物在25℃下攪拌3小時。通過TLC(乙腈:0.1M氯化銨=7:3)監(jiān)測反應進展。在大多數(shù)起始核苷耗盡時，將混合物冷卻至0℃，然后將碘溶液[0.1mL吡啶/水(9:1)中的3%]注入反應混合物中。隨著碘耗盡，繼續(xù)逐滴添加碘溶液，直至保持碘的持久褐色。15分鐘后，在10℃下在攪拌另外15分鐘下再添加碳酸氫三乙銨緩沖液(1.0M,2mL)。在真空下去除揮發(fā)物(內(nèi)部溫度不超過25℃)。將殘余物再溶解于水(2mL)中并用氯仿(2×2mL)萃取。然后將收集的含有粗產(chǎn)物的水層通過具有以下條件的制備型HPLC純化：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，XBridgeTMPrepOBD(最佳床密度)T3柱，19*150mm,5μm；流動相，具有50mmol碳酸氫銨的水和乙腈(5分鐘內(nèi)2%乙腈升至5.2%，2分鐘內(nèi)升至95%，1.5分鐘內(nèi)降至5%)；檢測器，UV254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的標題化合物13。LC-MS:(ES,m/z):512.90[M-H-4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ8.06(s,1H),7.38(d,J=3.6Hz,1H),6.63(t,J=7.6Hz,1H),6.58(d,J=3.6Hz,1H),4.06-4.14(m,2H),2.67-2.72(m,1H),2.54-2.59(m,1H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.86(s,1P),-11.49--11.39(d,J=15.13Hz,1P),-19.29(s,1P)。以下化合物14-21使用實施例13中所述的方法合成：實施例14:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(14)。LC-MS:(ES,m/z):530.85[M-H-4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ8.00(s,1H),7.14(s,1H),6.62(dd,J=4.8Hz,J=6.0Hz,1H),4.13(dd,J=5.6Hz,J=11.2Hz,1H),4.06(dd,J=5.0Hz,J=11.4Hz,1H),2.48-2.64(m,2H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.97--5.89(d,J=13.85Hz,1P),-11.52--11.43(d,J=14.81Hz,1P),-19.31(s,1P)。實施例15:(2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(15)。LC-MS:(ES,m/z):527.00[M-H-4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ7.96(s,1H),7.07(s,1H),6.55(t,J=6.6Hz,1H),4.11(dd,J=6.2Hz,J=11.4Hz,1H),4.05(dd,J=5.8Hz,J=12.0Hz,1H),2.59-2.66(m,1H),2.48-2.53(m,1H),2.78(s,3H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.90(s,1P),-11.48--11.39(d,J=14.49Hz,1P),-19.32(s,1P)。實施例16:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯雙-三乙銨(16)。LC-MS:(ES,m/z):546.95[M-H-2TEA]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ7.31(d,J=4.0Hz,1H),6.53(d,J=4.0Hz,1H),6.50(t,J=6.4Hz,1H),4.15(dd,J=5.8Hz,J=10.6Hz,1H),4.08(dd,J=4.8Hz,J=11.2Hz,1H),2.62-2.67(m,1H),2.53-2.58(m,1H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.86--5.77(d,J=14.81Hz,1P),-11.45--11.35(d,J=15.13Hz,1P),-19.24(s,1P)。實施例17:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(17)。LC-MS:(ES,m/z):546.70[M-H-4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ7.97(s,1H),7.34(s,1H),6.54(t,J=6.0Hz,1H),4.01-4.13(m,2H),2.52-2.62(m,2H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.81(s,1P),-11.42(s,1P),-19.25(s,1P)。實施例18:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-氰基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯雙-三乙銨(18)。LC-MS:(ES,m/z):514.35[M–H-2TEA]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ8.04(s,1H),7.29(d,J=3.2Hz,1H),6.70(t,J=6.8Hz,1H),6.55(d,J=3.2Hz,1H),4.87(t,J=6.0Hz,1H),4.21-4.16(m,2H),2.99(q,J=7.2Hz,15H),2.80-2.76(m,1H),2.58-2.54(m,1H),1.12(t,J=7.2Hz,26H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.85(s,1P),-11.84(d,J=15.30Hz,1P),-19.38(s,1P)。實施例19:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(19)。LC-MS:(ES,m/z):512.90[M-H-4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ7.73(s,1H),6.77(dd,J=4.4Hz,J=7.4Hz,2H),5.73(t,J=7.4Hz,1H),4.52-4.56(m,1H),3.98-4.03(m,2H),2.56-2.63(m,1H),2.34-2.40(m,1H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.79(s,1P),-11.24(s,1P),-19.21(s,1P)。實施例20:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(20)。LC-MS:(ES,m/z):513.95[M–H–4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ8.22(s,1H),7.99(s,1H),5.53(t,J=7.6Hz,1H),4.60-4.57(m,1H),4.12-4.03(m,2H),2.56-2.49(m,1H),2.35-2.29(m,1H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.82(s,1P),-11.32-11.23(d,J=13.69Hz,1P),-19.24(s,1P)。實施例21:((2R,3S,5R)-三磷酸5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯銨(21)。LC-MS:(ES,m/z):513.95[M-H-4NH3]-。1H-NMR:(400MHz,D2O,ppm):δ8.23(s,1H),7.98(s,1H),5.66(t,J=7.6Hz,1H),4.61-4.58(m,1H),4.05(brs,2H),2.68-2.61(m,1H),2.46-2.42(m,1H)。P-NMR:(161MHz,D2O,ppm):δ-5.81(s,1P),-11.33-11.24(d,J=13.85Hz,1P),-19.19(s,1P)?；衔?3-21的相應非鹽（salt-free）形式的名稱分別為：13)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；14)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；15)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基-5-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；16)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；17)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基-5-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；18)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-氰基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；19)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；20)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯；和21)((2R,3S,5R)-三磷酸四氫5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯。實施例22：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(22)的合成步驟1：(氨基氧基)二苯基膦氧化物的合成在0℃下，在攪拌下，在30分鐘內(nèi)，向羥胺鹽酸鹽(70g,1007mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(100mL)和水(100mL)的混合物中的攪拌溶液中逐滴添加NaOH(38.3g,957mmol)于水(400mL)中的溶液。將所得溶液在0℃下攪拌20分鐘。在0℃下，向上述中快速注入二苯基次膦酰氯(77mL,403mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(100mL)中的溶液。將所得混合物在環(huán)境溫度下劇烈攪拌10分鐘。形成沉淀物并通過過濾分離。將固體再懸浮于NaOH水溶液(0.25N,1000mL)中并在4℃下攪拌1.5小時。過濾混合物并將濾餅用水(3×1000mL)和乙醚(2×500mL)依次洗滌。將固體在真空下干燥過夜以得到(氨基氧基)二苯基膦氧化物。LC-MS:(ES,m/z):233.9[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.82-7.69(m,4H),7.58-7.40(m,6H)P-NMR:(121MHz,d6-DMSO,ppm):δ21.53(s,1P)。步驟2：1-氨基-1H-咪唑-2-甲酸乙酯的合成在-10℃下，在氬氣氣氛下，向1H-咪唑-2-甲酸乙酯(6g,30.9mmol)于DMF(250mL)中的攪拌溶液中逐滴添加LiHMDSTHF溶液(93mL,93mmol,1M)，持續(xù)60分鐘。將所得混合物在-10℃下再攪拌30分鐘，然后分批添加(氨基氧基)二苯基膦氧化物(21.63g,93mmol)，持續(xù)30分鐘，同時將溫度維持于0℃至10℃之間。將所得混合物溫熱至室溫并劇烈攪拌16小時。將反應物用冰水(600mL)淬滅并用EtOAc(2×800mL)萃取。將合并的有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液以得到1-氨基-1H-咪唑-2-甲酸乙酯，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):156.1[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ7.37(d,J=0.8Hz,1H),6.96(d,J=0.8Hz,1H),6.57(brs,2H),4.33-4.27(m,2H),1.31(t,J=7.2Hz,3H)。步驟3：咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮的合成在氬氣氣氛下，向1-氨基-1H-咪唑-2-甲酸乙酯(6g,30.9mmol)于EtOH(60mL)中的攪拌混合物中添加甲脒乙酸鹽(17.71g,170mmol)。將所得混合物加熱至回流，并攪拌過夜。將反應混合物冷卻到環(huán)境溫度并過濾。用水(3×10mL)和EtOAc(2×10mL)依次洗滌濾餅。將收集的固體在高真空下干燥過夜以得到咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮。LC-MS:(ES,m/z):136.9[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ12.31(brs,1H),8.09(s,1H),7.98(d,J=0.8Hz,1H),7.50(d,J=0.8Hz,1H)。步驟4：4-氯咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成在氬氣氣氛下，將咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮(2.4g,17.63mmol)稱重至100mL圓底燒瓶中，隨后在室溫下注入POCl3(20mL)。將混合物加熱至回流并攪拌16小時。在減壓下去除揮發(fā)物。將殘余物分配于EtOAC(100mL)和水(30mL)之間。將有機層用冷NaHCO3水溶液(飽和，3×20mL)和鹽水(20mL)依次洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(5/1)純化殘余物以提供4-氯咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪。LC-MS:(ES,m/z):155.0[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.81(s,1H),8.65(d,J=1.2Hz,1H),8.08(d,J=0.8Hz,1H)。步驟5.4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成在室溫下，在氬氣氣氛下，向4-氯咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(20g,129mmol)于THF(500mL)中的攪拌溶液中添加NaSMe(13.60g,194mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌72小時。將反應混合物用NH4Cl水溶液(飽和，200mL)淬滅并用EtOAc(2×500mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(2×200mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(1/1)純化殘余物以提供4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪。LC-MS:(ES,m/z):167.2[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ8.47(s,1H),7.90(d,J=0.8Hz,1H),7.76(d,J=0.4Hz,1H),2.73(s,3H)。步驟6：(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)-2-(4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)四氫呋喃-2-醇的合成在-78℃下，在氬氣氣氛下，在5分鐘內(nèi)，向4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(1g,6.02mmol)于THF(25mL)中的攪拌溶液中注入LDATHF溶液(4.5mL,9.0mmol,2M)。將所得混合物在-78℃下維持30分鐘，然后注入(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)二氫呋喃-2(3H)-酮(市售，3.27g,7.82mmol)于THF(15mL)中的溶液并將所得混合物在-78℃至-50℃下攪拌2小時。將反應物用NH4Cl水溶液(飽和，20mL)淬滅并用EtOAc(2×50mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(2×20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(5/1)純化殘余物以得到(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)-2-(4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)四氫呋喃-2-醇。LC-MS:(ES,m/z):585.1[M+H]+。步驟7：7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)-2-(4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)四氫呋喃-2-醇(1.7g,2.91mmol)于DCM(30mL)中的攪拌溶液中依次注入三氟化硼-二乙基醚合物(825.3mg,5.82mmol)和三乙基硅烷(1.35g,11.63mmol)。將所得混合物在0℃下再攪拌16小時。將反應物用NaHCO3水溶液(飽和，20mL)淬滅并用DCM(2×30mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(10/1)純化殘余物以得到7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪。LC-MS:(ES,m/z):570.0[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.38(s,1H),7.66(s,1H),7.37-7.26(m,15H),5.56(d,J=5.4Hz,1H),4.70-4.49(m,6H),4.39(q,J=4.2Hz,1H),4.34(t,J=5.4Hz,1H),4.15(t,J=5.1Hz,1H),3.70(dd,J=3.6Hz,J=10.5Hz,1H),3.60(dd,J=3.9Hz,J=10.8Hz,1H),2.70(s,3H)。步驟8：7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成向80mL鋼制儲罐中稱入7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-4-(甲基硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(1.4g,2.462mmol)。將介質(zhì)冷卻至-60℃。向其中添加異丙醇氨(異丙醇/液體氨=2/3，在-60℃下混合，50mL)。將所得混合物加熱至90℃并攪拌16小時。將反應混合物冷卻至室溫，然后在減壓下濃縮。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(1/1)純化殘余物以得到7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺。LC-MS:(ES,m/z):538.3[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.24(brs,1H),8.15(brs,1H),8.05(s,1H),7.49(s,1H),7.36-7.28(m,15H),5.35(d,J=5.2Hz,1H),4.63(s,2H),4.56(d,J=4.8Hz,2H),4.52(d,J=2.0Hz,2H),4.45(t,J=5.2Hz,1H),4.22-4.16(m,2H),3.65(dd,J=3.2Hz,J=10.8Hz,1H),3.58(dd,J=4.4Hz,J=10.8Hz,1H)。步驟9：(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇的合成向7-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.2g,2.232mmol)于AcOH(10mL)中的攪拌溶液中添加20%Pd(OH)2/C(1.2g)。向介質(zhì)裝入氫氣(2atm)并在25℃下攪拌24小時。濾出固體并用AcOH(2×15mL)洗滌。在減壓下濃縮合并的濾液。通過硅膠柱色譜使用DCM/MeOH(8/1)純化殘余物以提供(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇。LC-MS:(ES,m/z):290.0[M+Na]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.22(brs,1H),8.15(brs,1H),8.07(s,1H),7.64(s,1H),5.13-5.09(m,2H),5.03(d,J=6.4Hz,1H),4.78(brs,1H),4.32(t,J=6.0Hz,1H),3.99(t,J=4.8Hz,1H),3.81(q,J=4.4Hz,1H),3.56(dd,J=3.2Hz,J=11.2Hz,1H),3.46(dd,J=3.6Hz,J=11.2Hz,1H)。步驟10：(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(3.2g,11.97mmol)和1H-咪唑(3.26g,47.9mmol)于DMF(65mL)中的攪拌溶液中注入1,3-二氯-1,1,3,3-四異丙基二硅氧烷(3.97g,12.57mmol)。將所得混合物溫熱至30℃并攪拌5小時。將反應物用水(70mL)淬滅，并用EtOAc(3×100mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(3×100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(3/1)純化殘余物以得到(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇。LC-MS:(ES,m/z):510.4[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ8.12(s,1H),7.62(s,1H),7.03(brs,1H),6.39(brs,1H),5.31(d,J=3.2Hz,1H),4.68(dd,J=6.0Hz,J=7.0Hz,1H),4.47(q,J=2.8Hz,1H),4.10-4.05(m,3H),3.20(brs,1H),1.15-1.05(m,28H)。步驟11：硫代碳酸O-((6aR,8S,9S,9aR)-8-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-基)O-苯基酯的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇(4.0g,7.85mmol)和DMAP(3.83g,31.4mmol)于DCM(160mL)中的攪拌溶液中注入硫代氯甲酸O-苯酯(2.71g,15.69mmol)。將所得混合物在0℃下再攪拌3小時。在減壓下濃縮反應混合物。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(1/3)純化殘余物以得到硫代碳酸O-((6aR,8S,9S,9aR)-8-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-基)O-苯基酯。LC-MS:(ES,m/z):646.3[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.37(brs,1H),8.28(brs,1H),8.02(s,1H),7.67(s,1H),7.49(t,J=8.0Hz,2H),7.34(t,J=7.4Hz,1H),7.15(d,J=8.4Hz,2H),6.22(dd,J=2.0Hz,J=5.2Hz,1H),5.49(d,J=2.0Hz,1H),4.95(dd,J=5.2Hz,J=8.8Hz,1H),4.07-3.96(m,2H),3.91-3.88(m,1H),1.07-1.04(m,28H)。步驟12：7-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成在室溫下，在氬氣氣氛下，向硫代碳酸O-((6aR,8S,9S,9aR)-8-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-基)O-苯基酯(350mg,0.542mmol)和AIBN(133mg,0.813mmol)于脫氣甲苯(10mL)中的攪拌溶液中注入三-正丁基錫氫化物(314mg,1.084mmol)。將混合物加熱至80℃并攪拌3小時。在減壓下濃縮反應混合物。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(1/3)純化殘余物以得到7-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺。LC-MS:(ES,m/z):494.5[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.23(brs,1H),8.16(brs,1H),8.05(s,1H),7.56(s,1H),5.42(t,J=7.0Hz,1H),4.63(dd,J=5.8Hz,J=13.0Hz,1H),3.95(dd,J=3.2Hz,J=11.6Hz,1H),3.83(dd,J=6.8Hz,J=12.0Hz,1H),3.78-3.75(m,1H),2.55-2.51(m,1H),2.37-2.32(m,1H),1.07-1.01(m,28H)。步驟13：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在0℃下，向7-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(2.7g,5.47mmol)于THF(60mL)中的攪拌溶液中注入氟化氫-吡啶(5.42g,54.7mmol)。將混合物溫熱至環(huán)境溫度并攪拌20小時。將反應混合物冷卻至0℃，用固體NaHCO3中和，然后用MeOH(50mL)稀釋。濾出固體并在減壓下濃縮濾液。將殘余物用DCM/MeOH(20mL,100/1,v/v)處理并攪拌30分鐘。收集白色沉淀物并在真空下干燥過夜以得到(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.20(brs,1H),8.13(brs,1H),8.06(s,1H),7.60(s,1H),5.42(dd,J=5.8Hz,J=10.2Hz,1H),5.12(d,J=4.0Hz,1H),4.74(t,J=5.6Hz,1H),4.28-4.25(m,1H),3.81-3.78(m,1H),3.42(t,J=5.4Hz,2H),2.33-2.26(m,1H),2.13-2.09(m,1H)。步驟14：7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成在氬氣氣氛下，將(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(200mg,0.796mmol)和1H-咪唑(217mg,3.18mmol)稱重至10mL燒瓶中。向混合物中注入無水DMF(2.5mL)，隨后在0℃下添加叔丁基氯二甲基硅烷(360mg,2.388mmol)。將混合物在25℃下攪拌3小時。將所得混合物用EtOAc(50mL)稀釋，用NaHCO3水溶液(飽和，2×15mL)和鹽水(20mL)分別洗滌。收集有機層并經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。通過硅膠柱色譜使用石油醚/EtOAc(石油醚中的35%-52%EtOAc)純化殘余物以得到7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺。LC-MS:(ES,m/z):480.1[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.20(brs,1H),8.13(brs,1H),8.06(s,1H),7.57(s,1H),5.43(dd,J=5.6Hz,J=10.0Hz,1H),4.46-4.44(m,1H),3.81(t,J=4.5Hz,1H),3.63-3.51(m,2H),2.45-2.36(m,1H),2.16-2.10(m,1H),0.89(s,9H),0.86(s,9H),0.10(s,6H),0.02(d,J=3.6Hz,6H)。步驟15：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成將7-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(350mg,0.730mmol)稱重至25mL圓底燒瓶中，隨后注入THF(4mL)。將介質(zhì)冷卻至0℃。在0℃下，在攪拌下，在10分鐘內(nèi)，向其中逐滴添加預冷卻的三氟乙酸/水溶液(1/1,v/v,2mL)。將所得混合物在0℃下攪拌2小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。將所得溶液與甲苯(3×20mL)一起共蒸發(fā)并將殘余物再懸浮于NaHCO3水溶液(飽和，4mL)中，然后蒸發(fā)至干燥。通過硅膠柱色譜用EtOAc/DCM(1/1)純化殘余物以得到((2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇。LC-MS:(ES,m/z):366.2[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.09(brs,1H),8.03(brs,1H),7.96(s,1H),7.51(s,1H),5.31(q,J=5.4Hz,1H),4.70(t,J=5.7Hz,1H),4.34(d,J=5.1Hz,1H),3.69(t,J=4.5Hz,1H),3.33-3.28(m,2H),2.34-2.24(m,1H),2.01-1.96(m,1H),0.79(s,9H),0.01(s,6H)。步驟16：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在室溫下，在氬氣氣氛下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(280mg,0.766mmol)于無水乙腈(20mL)中的攪拌溶液中添加IBX(644mg,2.298mmol)。將混合物加熱至80℃并攪拌25分鐘。LCMS指示起始核苷全部耗盡。使所得混合物冷卻至室溫。濾出固體并在減壓下濃縮濾液以得到(2S,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):363.7[M+H]+。步驟17：((3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成在0℃下，向25mL圓底燒瓶中的(2S,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(300mg,粗制)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(4mL)中的攪拌溶液中注入37%甲醛水溶液(1.0mL)，隨后注入NaOH水溶液(1.0mL,2.0mmol,2N)。將所得混合物溫熱至環(huán)境溫度并攪拌16小時。當起始核苷全部耗盡時，用AcOH(~0.2mL)中和反應混合物。將混合物用EtOAc(100mL)稀釋并用水(2×25mL)、NaHCO3水溶液(飽和，25mL)和鹽水(20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液以得到粗產(chǎn)物。在氬氣氣氛下將粗產(chǎn)物再溶解于EtOH(5mL)中，并在0℃下分批添加硼氫化鈉(153mg,4.04mmol)。在環(huán)境溫度下攪拌16小時后，將反應混合物用AcOH(~0.2mL)中和并蒸發(fā)至干燥。將殘余物分配于CHCl3(50mL)和水(25mL)之間。將水層用CHCl3(2×25mL)再萃取。將合并的有機層用鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過硅膠柱色譜使用DCM/MeOH(30/1)純化殘余物以得到((3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇。LC-MS:(ES,m/z):395.8[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.18(brs,1H),8.12(brs,1H),8.07(s,1H),7.62(s,1H),5.47(q,J=5.2Hz,1H),4.68(t,J=5.6Hz,1H),4.53(d,J=3.6Hz,1H),4.27(t,J=5.6Hz,1H),3.60-3.55(m,1H),3.53-3.51(m,2H),3.34-3.31(m,1H),2.56-2.53(m,1H),2.11-2.07(m,1H),0.90(s,9H),0.09(d,J=2.8Hz,6H)。步驟18：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在室溫下，在氬氣氣氛下，向((3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(180mg,0.455mmol)于乙腈(20mL)和DMSO(2mL)中的攪拌混合物添加IBX(382mg,1.365mmol)。將所得混合物溫熱至30℃并攪拌2小時。濾出固體，用CHCl3(2×20mL)洗滌并在減壓下濃縮合并的濾液。將殘余物再溶解于EtOAc(30mL)中，用NaHCO3水溶液(飽和，2×15mL)和鹽水(20mL)依次洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液以得到(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):393.8[M+H]+。步驟19：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7aH-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(250mg,0.286mmol,粗制)和K2CO3(120mg,0.86mmol)于MeOH(10mL)中的攪拌混合物中注入(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(110mg,0.58mmol)于MeOH(1mL)中的溶液。將所得混合物溫熱至30℃并攪拌16小時。在減壓下濃縮反應混合物。通過硅膠柱色譜使用DCM/MeOH(30/1)純化殘余物以得到((2R,3S,5R)-5-(4-氨基-7aH-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇。LC-MS:(ES,m/z):390.2[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.23(brs,1H),8.15(brs,1H),8.08(s,1H),7.67(s,1H),5.54(t,J=7.8Hz,1H),5.16(t,J=6.2Hz,1H),4.53(dd,J=4.6Hz,J=6.2Hz,1H),3.55(dd,J=5.2Hz,J=11.6Hz,1H),3.45(dd,J=7.0Hz,J=11.8Hz,1H),3.42(s,1H),2.56-2.53(m,1H),2.23-2.17(m,1H),0.91(s,9H),0.10(d,J=3.2Hz,6H)。步驟20.(2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(22)的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(150mg,0.385mmol)于無水THF(5mL)中的攪拌溶液中注入TBAFTHF溶液(0.385mL,0.385mmol,1M)。將混合物溫熱至室溫并攪拌16小時。通過TLC和LCMS監(jiān)測反應進展。在減壓下濃縮所得混合物。通過硅膠柱色譜使用DCM/MeOH(24/1)純化殘余物以得到標題化合物22。LC-MS:(ES,m/z):309.00[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.21(brs,1H),8.14(brs,1H),8.07(s,1H),7.64(s,1H),5.53(t,J=7.6Hz,1H),5.34(d,J=5.2Hz,1H),5.07(t,J=6.4Hz,1H),4.35(q,J=6.0Hz,1H),3.56(dd,J=5.6Hz,J=12.0Hz,1H),3.48(dd,J=7.0Hz,J=11.8Hz,1H),3.41(s,1H),2.46-2.41(m,1H),2.28-2.21(m,1H)。實施例23：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(23)的合成步驟1：(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇的合成：在0℃下，在氬氣氣氛下，經(jīng)10分鐘向分散于礦物油中的60%NaH(1.878g,46.9mmol)于無水DME(二甲醚)(150mL)中的攪拌懸浮液中注入(氰基甲基)膦酸二乙酯(11.88g,67.1mmol)。將混合物溫熱至25℃并維持0.5小時，然后在0℃下，在攪拌下經(jīng)30分鐘逐滴添加(3R,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-醇(14.1g,33.5mmol)于干燥DME(100mL)中的溶液。將所得混合物再溫熱至25℃并維持2小時。將所得混合物用H2O(300mL)稀釋并用Et2O(3×500mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(500mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過快速硅膠柱色譜使用EtOAc/石油醚(石油醚中的5%-20%EtOAc)純化殘余物以提供2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)乙腈。LC-MS:(ES,m/z):444.21[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ7.33-7.31(m,15H),4.63-4.43(m,6H),4.25-4.13(m,2H),3.95(dd,J=3.0Hz,J=4.8Hz,1H),3.77(dd,J=5.4Hz,J=6.9Hz,1H),3.53-3.45(m,2H),2.78-2.75(m,0.4H),2.66(dd,J=4.8Hz,J=16.8Hz,0.8H),2.50(dd,J=4.8Hz,J=16.8Hz,0.8H)。步驟2：2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-3-(二甲基氨基)丙烯腈的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，經(jīng)5分鐘向2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)乙腈(12.6g,28.4mmol)于DCM(90mL)中的攪拌溶液中注入干燥DMF(2.54mL,32.8mmol)，隨后注入1-叔丁氧基-N,N,N',N'-四甲基甲二胺(19.80g,114mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌16小時。在減壓下濃縮所得混合物。通過快速硅膠柱色譜使用EtOAc/石油醚(石油醚中的15%-35%EtOAc)純化殘余物以提供2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-3-(二甲基氨基)丙烯腈。LC-MS:(ES,m/z):499.25[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ7.33-7.30(m,15H),6.47(s,1H),4.65-4.53(m,6H),4.32(d,J=7.2Hz,1H),4.19-4.15(m,1H),4.00-3.90(m,2H),3.59-3.46(m,2H),3.04(s,6H)。步驟3.2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-3-肼基丙烯腈的合成在室溫下，向2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-3-(二甲基氨基)丙烯腈(12.9g,25.9mmol)于MeOH(90mL)中的攪拌溶液中依次添加肼水合物(21.15g,647mmol)、H2O(3.0mL,167mmol)和肼鹽酸鹽(2.66g,38.8mmol)。將所得混合物加熱至65℃并攪拌16小時。在減壓下濃縮最終混合物。將殘余物用H2O(500mL)稀釋并用EtOAc(3×500mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(500mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液以提供2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-3-肼基丙烯腈，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):486.23[M+H]+。步驟4：4-[(2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-[(芐基氧基)甲基]氧雜環(huán)戊烷-2-基]-1H-吡唑-5-胺的合成將2-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-3-肼基丙烯腈(18g,37.1mmol)置于1000-mL圓底燒瓶中，隨后注入ACN(200mL)。將混合物回流48小時。在減壓下濃縮所得混合物。通過快速硅膠柱色譜使用MeOH/DCM(DCM中的2%至10%MeOH)純化殘余物以提供4-[(2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-[(芐基氧基)甲基]氧雜環(huán)戊烷-2-基]-1H-吡唑-5-胺。LC-MS:(ES,m/z):486.23[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.40-7.24(m,16H),4.97(d,J=6.8Hz,1H),4.68(d,J=12.0Hz,1H),4.62-4.44(m,5H),4.24-4.22(m,1H),4.10-4.04(m,2H),3.71(dd,J=3.0Hz,J=10.2Hz,1H),3.63-3.50(m,1H)。步驟5.8-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺的合成向氨氰的攪拌混合物(50g,1189mmol)中添加三甲氧基甲烷(505g,4757mmol)并將混合物加熱至105℃并攪拌5分鐘。在105℃下，經(jīng)5分鐘向上述中注入甲酸(4.38g,95mmol)。將所得溶液在105℃下攪拌5小時后，將反應混合物冷卻至室溫。濾出固體并在減壓下濃縮濾液。通過蒸餾(0.1mmHg,60℃至70℃)收集產(chǎn)物以得到(E)-N-氰基甲亞胺甲酯（（E）-methylN-cyanoformimidate）(50g,0.595mol)。在室溫下，在氬氣氣氛下，向(E)-N-氰基甲亞胺甲酯(21.82g,259mmol)于甲苯(150mL)中的攪拌溶液中添加4-((3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-胺(21g,43.2mmol)于甲苯(30mL)中的溶液。將所得混合物加熱至90℃并攪拌20小時。在減壓下濃縮所得溶液。通過快速硅膠柱色譜使用EtOAc/石油醚(石油醚中的30%-50%EtOAc)純化殘余物以提供8-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺。LC-MS:(ES,m/z):538.24[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.05(s,1H),7.99(s,1H),7.31-7.23(m,15H),6.67(brs,2H),5.33(d,J=5.4Hz,1H),4.67-4.50(m,6H),4.35-4.29(m,2H),4.15-4.11(m,1H),3.72(dd,J=3.9Hz,J=10.5Hz,1H),3.62(dd,J=4.2Hz,J=10.8Hz,1H)。步驟6：(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇的合成向8-((2S,3S,4R,5R)-3,4-雙(芐基氧基)-5-((芐基氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺(10g,18.60mmol)于AcOH(250mL)中的攪拌混合物中添加碳載20%氫氧化鈀。向混合物裝入氫氣(1.5-2atm)并在25℃下攪拌14小時。濾出固體。在減壓下濃縮濾液。用DCM(150mL)研磨殘余物以形成白色沉淀物。通過過濾收集沉淀物，用DCM洗滌并在真空中干燥過夜以得到(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇。LC-MS:(ES,m/z):268.10[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.76(brs,1H),8.41(brs,1H),8.19(s,1H),8.06(s,1H),4.96-4.91(m,2H),4.86-4.81(m,2H),4.20(q,J=6.0Hz,1H),3.98(q,J=4.5Hz,1H),3.78(q,J=3.9Hz,1H),3.61-3.55(m,1H),3.49-3.43(m,1H)。步驟7：(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，經(jīng)4分鐘向(2S,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-5-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(2.2g,8.23mmol)和1H-咪唑(1.681g,24.70mmol)于干燥DMF(100mL)中的攪拌溶液中注入1,3-二氯-1,1,3,3-四異丙基二硅氧烷(2.86g,9.06mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌3小時。將殘余物用H2O(50mL)稀釋并用EtOAc(3×50mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(2×50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過快速硅膠柱色譜使用EtOAc/石油醚(石油醚中的30%-50%EtOAc)純化殘余物以提供(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇。LC-MS:(ES,m/z):510.25[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.72(brs,1H),8.42(brs,1H),8.08(s,1H),8.02(s,1H),5.08(d,J=4.8Hz,1H),4.91(d,J=1.8Hz,1H),4.41(dd,J=5.4Hz,J=8.1Hz,1H),4.30-4.28(m,1H),3.99-3.86(m,3H),1.04-1.00(m,28H)。步驟8:.8-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺的合成在室溫下，在氬氣氣氛下，向(6aR,8S,9S,9aS)-8-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-9-醇(3.90g,7.65mmol)于干燥DCE(120mL)中的攪拌溶液中添加1,1'-硫羰基二咪唑(1.704g,9.56mmol)。將所得混合物加熱至85℃并攪拌1.5小時。TLC指示起始核苷全部耗盡。在減壓下濃縮所得溶液以得到粗咪唑基中間體，將其立即在氬氣氣氛下再溶解于脫氣甲苯(120mL)中。向上述中添加AIBN(1.88g,11.48mmol)，隨后在25℃下經(jīng)2分鐘注入三丁基錫烷(4.45g,15.30mmol)。將所得混合物加熱至80℃并攪拌3小時。在減壓下濃縮所得溶液。通過快速硅膠柱色譜使用EtOAc/石油醚(石油醚中的30%-50%EtOAc)純化粗殘余物以提供8-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺。LC-MS:(ES,m/z):494.25[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.18(s,1H),8.06(s,1H),6.61(brs,2H),5.40(t,J=7.5Hz,1H),4.70-4.65(m,1H),4.10(dd,J=3.0Hz,J=10.8Hz,1H),3.95-3.81(m,2H),2.52-2.38(m,2H),1.08-1.05(m,28H)。步驟9：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，經(jīng)5分鐘向8-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧雜二硅-8-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺(1.5g,3.04mmol)于無水THF(35mL)中的攪拌溶液中注入HF-吡啶溶液(1.5mL,11.65mmol)。將混合物溫熱至25℃并攪拌4小時。通過添加固體NaHCO3中和所得混合物，然后用MeOH(30mL)稀釋。濾出未溶解的固體。在減壓下濃縮濾液，然后用EtOAc(20mL)研磨。形成白色沉淀物并通過過濾收集，然后在真空下干燥過夜以提供(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇。LC-MS:(ES,m/z):252.10[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.71(brs,1H),8.39(brs,1H),8.19(s,1H),8.05(s,1H),5.25(q,J=5.4Hz,1H),5.03(d,J=3.9Hz,1H),4.87(t,J=6.0Hz,1H),4.26-4.24(m,1H),3.76-3.74(m,1H),3.52-3.40(m,2H),2.32-2.22(m,1H),2.04-1.98(m,1H)步驟10：8-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺的合成在0℃下，在氬氣氣氛下，經(jīng)1分鐘向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(540mg,2.149mmol)和1H-咪唑(512mg,7.52mmol)于DMF(10mL)中的攪拌溶液中添加TBS-Cl(972mg,6.45mmol)。將所得混合物溫熱至25℃并攪拌2小時。將所得溶液用H2O(50mL)稀釋并用EtOAc(3×50mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(2×50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過快速硅膠柱色譜使用EtOAc/石油醚(石油醚中的20%EtOAc)純化殘余物以提供8-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺。LC-MS:(ES,m/z):480.27[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,CDCl3,ppm):δ8.18(s,1H),8.10(s,1H),6.80(brs,2H),5.49(q,J=5.2Hz,1H),4.51(d,J=5.2Hz,1H),3.98(t,J=4.0Hz,1H),3.74(dd,J=3.8Hz,J=10.6Hz,1H),3.63(dd,J=6.4Hz,J=10.8Hz,1H),2.39-2.32(m,1H),2.22-2.17(m,1H),0.93-0.92(m,18H),0.11-0.05(m,12H)。步驟11：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在0℃下，經(jīng)5分鐘向8-((2R,4S,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-胺(800mg,1.667mmol)于THF(16mL)中的攪拌溶液中注入預先冷卻的TFA/H2O溶液(8mL,v/v,1/1)。將所得混合物在0℃下攪拌1.5小時。通過TLC監(jiān)測反應進展。將所得溶液與甲苯(3×50mL)一起在低于25℃下共蒸發(fā)，并將殘余物再溶解于MeOH/DCM(20mL,v/v，1/2)中并用固體NaHCO3中和混合物。濾出固體并在減壓下濃縮濾液。通過快速硅膠柱色譜使用MeOH/DCM(DCM中的2%至10%MeOH)純化粗產(chǎn)物以提供((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇。LC-MS:(ES,m/z):366.19[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.70(brs,1H),8.38(brs,1H),8.19(s,1H),8.05(s,1H),5.24(q,J=5.4Hz,1H),4.92(t,J=6.0Hz,1H),4.42(d,J=4.8Hz,1H),3.75(dd,J=3.6Hz,J=4.8Hz,1H),3.46-3.43(m,2H),2.39-2.30(m,1H),2.00-1.94(m,1H),0.90(s,9H),0.11(s,6H)。步驟12：(2S,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在25℃下，在氬氣氣氛下，向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-基)甲醇(350mg,0.958mmol)于無水ACN(40mL)中的攪拌懸浮液中添加IBX(804mg,2.87mmol)。將所得混合物加熱至80℃并攪拌1小時。濾出固體。在減壓下濃縮濾液以提供(2S,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):364.17[M+H]+。步驟13：((3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇的合成向100mL圓底燒瓶中的(2S,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2-甲醛(349mg,0.960mmol)于1,4-二氧雜環(huán)己烷(25mL)中的攪拌溶液中注入甲醛37%水溶液(5mL)，隨后在室溫下經(jīng)5分鐘注入NaOH水溶液(5mL,2N)。將所得混合物在室溫下攪拌5小時。當起始核苷全部耗盡時，用AcOH(~0.5mL)中和反應混合物。將混合物用EtOAc(50mL)稀釋并用H2O(2×20mL)、NaHCO3水溶液(飽和，2×20mL)和鹽水(20mL)依次洗滌。將有機層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。將殘余物再溶解于無水EtOH(40mL)中并在0℃下，在氬氣氣氛下，分批添加四氫硼酸鈉(72.6mg,1.920mmol)。在25℃下攪拌16小時后，將反應混合物用AcOH(~0.2mL)中和并在減壓下濃縮。將殘余物分配于CHCl3(30mL)和H2O(15mL)之間。將水層用CHCl3(2×15mL)再萃取。將合并的有機層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮濾液。通過快速硅膠柱色譜使用MeOH/DCM(DCM中的3.5%MeOH)純化殘余物以得到((3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇。LC-MS:(ES,m/z):396.20[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.70(brs,1H),8.38(brs,1H),8.20(s,1H),8.05(s,1H),5.30(dd,J=5.1Hz,J=11.1Hz,1H),4.84(t,J=6.0Hz,1H),4.50(d,J=4.2Hz,1H),4.22(dd,J=5.1Hz,J=6.3Hz,1H),3.62-3.48(m,3H),3.41-3.31(m,1H),2.57-2.50(m,1H),1.95(dd,J=5.1Hz,J=12.6Hz,1H),0.90(s,9H),0.11(s,6H)。步驟14：(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛的合成在25℃下，在氬氣氣氛下，向((3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-2,2-二基)二甲醇(190mg,0.480mmol)于ACN/DMSO(8mL,v/v,10/1)中的攪拌懸浮液中添加IBX(404mg,1.441mmol)。將所得混合物在30℃下攪拌7小時。濾出固體。在減壓下濃縮濾液以得到(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛，其未經(jīng)進一步純化即直接用于下一反應步驟。LC-MS:(ES,m/z):394.18[M+H]+。步驟15：((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇的合成在氬氣氣氛下，向(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥基甲基)四氫呋喃-2-甲醛(189mg,0.480mmol)于干燥MeOH(6mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(199mg,1.441mmol)，隨后在0℃下經(jīng)3分鐘注入(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(185mg,0.961mmol)于MeOH(1.5mL)中的溶液。將反應混合物緩慢溫熱至25℃，然后在25℃下攪拌16小時。在減壓下濃縮所得混合物。通過快速硅膠柱色譜使用MeOH/DCM(DCM中的2%至10%MeOH)純化殘余物以提供((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇。LC-MS:(ES,m/z):390.19[M+H]+。1H-NMR:(300MHz,CDCl3,ppm):δ8.17(s,1H),7.98(s,1H),6.43(brs,2H),5.54(dd,J=5.7Hz,J=10.5Hz,1H),4.61(d,J=4.2Hz,1H),3.97(d,J=12.3Hz,1H),3.76(d,J=12.0Hz,1H),2.70-2.61(m,1H),2.54(s,1H),2.20-2.14(m,1H),0.95(s,9H),0.12(d,J=6.0Hz,6H)。步驟16:(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(23)在0℃下，在氬氣氣氛下，經(jīng)2分鐘向((2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-乙炔基四氫呋喃-2-基)甲醇(120mg,0.308mmol)于THF(5mL)中的攪拌溶液中注入TBAFTHF溶液(0.462mL,0.462mmol,1.0M)。將混合物在20℃下攪拌26小時。在減壓下濃縮所得混合物。通過快速硅膠柱色譜使用MeOH/DCM(DCM中的5%至10%MeOH)純化殘余物以得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物(90mg)通過具有以下條件的制備型HPLC進一步純化：(1#-制備型-HPLC-011(Waters))：柱，X-bridgeC1819×150mm；流動相，具有NH4HCO3(10mmol/L)的水和ACN(6分鐘內(nèi)4%ACN升至9%，保持95%持續(xù)2分鐘，2分鐘內(nèi)降至5%)；檢測器，UV254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干過夜以得到(2R,3S,5R)-5-(4-氨基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇。LC-MS:(ES,m/z):276.10[M+H]+。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.71(brs,1H),8.43(brs,1H),8.20(s,1H),8.05(s,1H),5.36(t,J=7.6Hz,1H),5.26-5.22(m,2H),4.34(dd,J=4.8Hz,J=11.2Hz,1H),3.58(dd,J=5.2Hz,J=11.6Hz,1H),3.49(dd,J=7.6Hz,J=11.6Hz,1H),3.37(s,1H),2.44-2.37(m,1H),2.16-2.12(m,1H)。RT聚合酶測定在大腸桿菌BL21(DE3)細胞中表達全長野生型和2種突變RT蛋白并純化。簡而言之，通過將生物素化的DNA引物退火（annealing）至500核苷酸RNA模板來產(chǎn)生用于HIV-1RT聚合酶反應中的異二聚核酸底物。在測定緩沖液(62.5mMTris-HCl,pH7.8,1.25mM二硫蘇糖醇,7.5mMMgCl2,100mMKCl,0.03%CHAPS,0.125mMEGTA)中組合HIV-1RT酶(50pM的最終濃度)與抑制劑化合物或DMSO(最終反應混合物中的10%DMSO)。將該混合物在室溫下在微量滴定板中預培育30分鐘。通過添加模板/引物底物(最終濃度：16.6nM)和dNTP(最終濃度：2μMdCTP、dGTP、dATP和66.6nMRu-dUTP)來引發(fā)聚合反應。在37℃下培育90分鐘后，通過添加EDTA(25mM)來淬滅反應物。將所得混合物在室溫下再培育5分鐘，隨后將溶液(50μL)轉(zhuǎn)移至來自MesoScaleDiscovery(MSD)的封閉的抗生物素蛋白板中。在室溫下培育混合物60分鐘，然后經(jīng)由ECL6000成像儀器定量反應產(chǎn)物。所得數(shù)據(jù)顯示于表2中。表2實施例編號結(jié)構(gòu)dNTPIC50(nM)13933142101562371618201784218415019354220129221905Viking測定/CTGViking測定：在多輪HIV-1感染測定中評價抗病毒效力.使用MT4-gag-GFP克隆D3(下文命名為MT4-GFP)監(jiān)測HIV-1復制，所述MT4-gag-GFP克隆D3是經(jīng)修飾以攜帶（harbor）GFP報告基因（reportergene）的MT-4細胞，其表達取決于HIV-1表達的蛋白tat和rev。MT4-GFP細胞被HIV-1的生產(chǎn)性感染導致在感染后約24小時的GFP表達。將MT4-GFP細胞在37℃/5%CO2/90%相對濕度下維持在補充有10%胎牛血清、100U/mL青霉素/鏈霉素和400μg/mLG418的RPMI1640中以維持報告基因。對于感染，將MT4-GFP細胞放置于缺乏G418的相同培養(yǎng)基中并在相同培育條件下以約0.01感染復數(shù)用H9IIIB病毒感染過夜。然后將細胞洗滌并以1.6x105個細胞/mL再懸浮于含有10%或50%正常人血清的RPMI1640中(10%或50%NHS條件)或以2x105個細胞/mL再懸浮于100%正常人血清中(100%NHS條件)。通過使用ECHO聲學分配器將溶解于DMSO中的化合物分配至384孔聚D賴氨酸涂覆的板的孔(0.2μl/孔)中來制備化合物板。以10點連續(xù)3倍稀釋(典型最終濃度：8.4μM-0.43nM)測試各化合物。對照不包含抑制劑(僅DMSO)和三種抗病毒劑的組合(依法韋侖、茚地那韋和整合酶鏈轉(zhuǎn)移抑制劑，最終濃度各自為4μM)。將細胞添加(50μL/孔)至化合物板中并將感染的細胞維持在37℃/5%CO2/90%相對濕度下。在兩個時間點(感染后~48小時和~72小時)通過使用AcumeneX3掃描儀計數(shù)各孔中綠色細胞的數(shù)目來定量感染的細胞。綠色細胞數(shù)目經(jīng)~24小時時段的增加給出復制比率R0，其通常為5-15且已實驗顯示處于對數(shù)期(數(shù)據(jù)未顯示)。對各孔計算R0的抑制，并通過非線性4參數(shù)曲線擬合測定IC50。CTG測定：在CellTiter-Glo發(fā)光細胞生存力（viability）測定(CTG)中評價細胞毒性。在37℃/5%CO2/90%相對濕度下將MT4-GFP細胞接種于補充有10%胎牛血清、100U/mL青霉素/鏈霉素的RPMI1640中過夜。然后洗滌細胞并以0.8x105個細胞/mL的密度再懸浮于含有10%正常人血清的RPMI1640中。通過使用ECHO聲學分配器(0.2μl/孔)將溶解于DMSO中的化合物分配至384孔固體黑色板(Corning3571)的孔中來制備化合物板。以10點連續(xù)3倍稀釋(最終濃度：8.4μM-0.43nM)測試各化合物。對照包含DMSO。將細胞添加(50μL/孔)至化合物板并維持在37℃/5%CO2/90%相對濕度下。在48小時培育后，根據(jù)制造商的描述將CTG試劑(Promega，G7573)添加至細胞板中。在EnVision板讀取器（platereader）(PerkinElmer)上記錄發(fā)光信號。通過非線性4參數(shù)曲線擬合測定LD50。所得數(shù)據(jù)顯示于表3中，其中包括市售HIV核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑AZT(疊氮胸苷、齊多夫定)作為對照。表3結(jié)構(gòu)Viking,IC50(10%NHS)(nM)CTG(μM)AZT37>8.4實施例編號結(jié)構(gòu)Viking,IC50(10%NHS)(nM)CTG(μM)11.3>8.421.6>8.43485>8.444.0>8.45209>8.46128>8.471030>8.48194>8.4910.2>8.410128>8.41117.2>8.412735>8.42238>8.42364>8.4抗病毒持久性使用MT4-gag-GFP克隆D3(下文命名為MT4-GFP)監(jiān)測HIV-1復制，所述MT4-gag-GFP克隆D3是經(jīng)修飾以攜帶GFP報告基因的MT-4細胞，其表達取決于HIV-1表達的蛋白tat和rev。MT4-GFP細胞被HIV-1的生產(chǎn)性感染導致在感染后約24小時的GFP表達。將MT4-GFP細胞在37℃/5%CO2/90%相對濕度下維持于補充有10%胎牛血清、100U/mL青霉素/鏈霉素和400μg/mLG418的RPMI1640中以維持報告基因。對于72小時時間點持久性測定(72小時板)和24小時時間點對照測定(24小時板)，將MT4-GFP細胞洗滌并以1.6x105或2.4x105個細胞/mL再懸浮于含有10%正常人血清的RPMI1640中(10%NHS)。通過使用ECHO聲學分配器將溶解于DMSO中的化合物分配至384孔細胞培養(yǎng)板的孔(0.205μl/孔)中來制備化合物板。以10點連續(xù)3倍稀釋(典型最終濃度：4.2μM-0.21nM)測試各化合物。對照不包含抑制劑(僅DMSO)和三種抗病毒劑的組合(依法韋侖、茚地那韋和整合酶鏈轉(zhuǎn)移抑制劑，最終濃度各自為4μM)。將細胞添加(50μL/孔)至化合物板并在37℃/5%CO2/90%相對濕度下培育24小時。將細胞用5x40μL補充有10%NHS和100U/mL青霉素/鏈霉素的RPMI1640洗滌。將72小時板返回至37℃培育箱中持續(xù)額外48小時培育。來自24小時板或72小時板的各孔的40μL細胞(在洗滌后48小時培育之后)轉(zhuǎn)移至聚D-賴氨酸涂覆的板。細胞然后在相同培育條件下以約0.1的感染復數(shù)用H9IIIB病毒感染。通過使用AcumeneX3掃描儀計數(shù)各孔中的綠色細胞的數(shù)目，在感染后~24小時定量感染的細胞。表4中化合物的IC50通過非線性4參數(shù)曲線擬合測定?？共《境志眯詼y定意欲評價去除核苷后抗病毒活性的持久性。表4中的數(shù)據(jù)表明本發(fā)明化合物相比于市售核苷AZT的抗病毒持久性。出版物AIDSResearchandTherapy,2009,6:5強調(diào)了抗病毒持久性的價值。表4結(jié)構(gòu)IC5024h(nM)IC5072h(nM)倍數(shù)變換（foldshift）IC5072h/24hAZT374713127實施例編號結(jié)構(gòu)IC5024h(nM)IC5072h(nM)倍數(shù)變換IC5072h/24h10.8364526.619329347025005.349.636037.5522000>42000>1.96999709.871700017000188402900034.59372707.310170180010.51112.4195015712880250002822383509.2236470010.9腺苷脫氨酶(ADA)半衰期表5中的數(shù)據(jù)通過使底物化合物與1型人ADA在40℃下在Tris-HCl緩沖液(pH7.5)存在下反應并通過LCMS監(jiān)測起始材料的消耗來產(chǎn)生。50%轉(zhuǎn)化成相應肌苷產(chǎn)物所必需的時間在表5中標注為T1/2。已知腺苷脫氨酶的脫氨基作用尤其在體內(nèi)降低腺苷樣核苷抑制劑的治療潛力(參見以下參考文獻)。當與EDA((2R,3S,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇)和天然脫氧腺苷相比時，表5中顯示的化合物已顯示具有不同程度的對腺苷脫氨酶的穩(wěn)定性。對ADA更耐受的化合物可能將具有更好的藥代動力學特性。參考文獻：JournalofMedicinalChemistry1996,39,19,3847;ChemicalPharmaceuticalBulletin.1994,42,8,1688-1690;AntimicrobialAgentsandChemotherapy(2013),57(12),6254-6264;CollectionofCzechoslovakChemicalCommunications(2006),71(6),769-787Microbiologica(1995),18(4),359-70;JAntivirAntiretrovirS10.doi:10.4172/jaa.S10-002?；衔?轉(zhuǎn)化成肌苷產(chǎn)物2A7-((2R,4S,5R)-5-乙炔基-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-5-氟-3H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7H)-酮(2A)將Tris-HCl緩沖液(pH7.5,5mL)注入25-mL圓底燒瓶中。將混合物加熱至回流，持續(xù)30分鐘。然后，將混合物冷卻至30℃并添加(2R,3S,5R)-5-(4-氨基-5-氟-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3-醇(實施例化合物2,7mg,0.024mmol)，隨后添加腺苷脫氨酶(3mg，~33個單位)。在40℃下攪拌所得混合物并攪拌4天。在真空下濃縮反應混合物并通過具有以下條件的制備型HPLC純化殘余物：柱：X-BridgeC18,19*150mm,5um；流動相，具有10mmol碳酸氫銨的水和乙腈(5分鐘內(nèi)6%乙腈升至30%，保持95%持續(xù)2分鐘，2分鐘內(nèi)降至40%)；檢測器，uv254&220nm。收集含有產(chǎn)物的部分并凍干以得到作為固體的標題化合物2A。1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ11.58(brs,1H),7.86(s,1H),7.22(d,J=1.6Hz,1H),6.44(t,J=5.8Hz,1H),5.47(d,J=4.8Hz,1H),5.26-5.22(m,1H),4.39-4.35(m,1H),3.55-3.45(m,2H),3.42(s,1H),2.41-2.24(m,2H)。19F-NMR:(376MHz,d6-DMSO,ppm):δ-165.50(s,1F)。LC-MS:(ES,m/z):294.15[M+H]+。將上述用于將化合物2轉(zhuǎn)化成2A的通用程序應用于表5中的每種底物化合物，并導致產(chǎn)生對于脫氧腺苷和EDA所示的肌苷產(chǎn)物，以及肌苷產(chǎn)物1A、2A、11A、22A和23A。使用所述程序，檢測不到化合物4、8和9分別轉(zhuǎn)化至4A、8A和9A(NA=底物對腺苷脫氨酶不敏感)?；衔?A:7-((2R,4S,5R)-5-乙炔基-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-3H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7H)-酮:1H-NMR:(400MHz,CD3OD,ppm):δ8.31(s,1H),7.37(d,J=3.6Hz,1H),6.68(d,J=3.6Hz,1H),6.62(t,J=6.4Hz,1H),4.69(t,J=7.0Hz,1H),3.80(dd,J=12.0Hz,J=30.0Hz,2H),3.09(s,1H),2.67-2.54(m,2H)。LC-MS:(ES,m/z):276.00[M+H]+?；衔?1A:7-((2R,4S,5R)-5-乙炔基-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮:1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ10.25(brs,1H),7.86(s,1H),6.83(d,J=4.5Hz,1H),6.63(d,J=4.2Hz,1H),5.53(t,J=7.5Hz,1H),5.31-5.25(m,1H),5.09-5.05(m,1H),4.31-4.27(m,1H),3.55-3.45(m,2H),3.33(s,1H),2.35-2.18(m,2H)。LC-MS:(ES,m/z):298.00[M+Na]+?；衔?2A:7-((2R,4S,5R)-5-乙炔基-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4(3H)-酮:1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.12(s,1H),7.56(s,1H),5.45(t,J=7.4Hz,1H),5.35(d,J=4.0Hz,1H),5.06(brs,1H),4.33(brs,1H),3.56-3.46(m,2H),3.32(s,1H),2.42-2.33(m,1H),2.28-2.22(m,1H)。LC-MS:(ES,m/z):277.10[M+H]+。化合物23A:8-((2R,4S,5R)-5-乙炔基-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4(3H)-酮:1H-NMR:(400MHz,d6-DMSO,ppm):δ8.08(s,1H),7.98(s,1H),5.30(t,J=7.4Hz,1H),5.25(d,J=5.2Hz,1H),5.24-5.11(m,1H),4.32(q,J=5.2Hz,1H),3.53(dd,J1=11.6Hz,J2=32.0Hz,2H),3.36(s,1H),2.36-2.29(m,1H),2.16-2.10(m,1H)。LC-MS:(ES,m/z):274.80[M-H]-。表5結(jié)構(gòu)(底物)肌苷產(chǎn)物T1/2脫氧腺苷<10minEDA<60min實施例No.結(jié)構(gòu)(底物)肌苷編號肌苷產(chǎn)物T1/211A12天22A16h44ANA88ANA99ANA1111A3h2222A10min2323A10min盡管前述說明書教導本發(fā)明的原理(其中實施例出于舉例說明的目的提供)，但本發(fā)明的實踐涵蓋隨附權利要求書的范圍內(nèi)的所有通常變化、改編和/或修改。權利要求中無指定特定立體構(gòu)型或少于全部手性中心具有此類指定的特定化合物(即物質(zhì))的記載或描述意欲涵蓋化合物的外消旋物、外消旋混合物、各個別對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)混合物和各個別非對映異構(gòu)體，其中此類形式由于存在一個或多個不對稱中心而是可能的。本文引用的所有出版物、專利和專利申請均以其整體通過引用并入本公開。當前第1頁1 2 3