本發(fā)明屬于生物
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種去除可得然膠生產(chǎn)過程中雜質(zhì)和菌體的方法。
背景技術(shù):
:可得然膠,又稱熱凝膠,凝結(jié)多糖,是由微生物產(chǎn)生的,以β-1,3-糖苷鍵構(gòu)成的水不溶性葡聚糖,是一類將其懸濁液加熱后既能形成硬而有彈性的熱不可逆性凝膠又能形成熱可逆性凝膠的多糖類的總稱?,F(xiàn)有技術(shù)在發(fā)酵過程中,殘留的發(fā)酵培養(yǎng)基、菌體細(xì)胞均會(huì)對(duì)產(chǎn)品的純度產(chǎn)生影響。專利2010100113529公開了一種可得然膠生產(chǎn)過程中去除菌體的方法,該發(fā)明使用堿量大,濃度高,不僅增加了生產(chǎn)成本,而且增加后道工序步驟,效率較低。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明目的在于提供一種去除可得然膠生產(chǎn)過程中雜質(zhì)和菌體的方法,通過本方法在去除雜質(zhì)和菌體的同時(shí)利用較少的氫氧化鈉用量和高分子聚合物,而獲得較高純度的可得然膠。本發(fā)明的技術(shù)解決方案:一種去除可得然膠生產(chǎn)過程中雜質(zhì)和菌體的方法,包括可得然膠發(fā)酵液和氫氧化鈉,其特征在于,所述方法包括如下步驟:步驟1)、利用分離因數(shù)至少8000以上的高速離心機(jī)對(duì)可得然膠發(fā)酵液進(jìn)行離心處理,去除可溶性雜質(zhì),收集沉淀;步驟2)、按原發(fā)酵液體積的1/2配置氫氧化鈉溶液,濃度為0.5-0.7mol/L,將分散在水中的高分子聚合物加入到氫氧化鈉溶液中,其中所述的高分子聚合物加入濃度為10-20g/L;步驟3)、將準(zhǔn)備好的氫氧化鈉與高分子聚合物混合溶液加入到步驟1)的沉淀中,充分?jǐn)嚢?5min(攪拌時(shí)間過短,可得然膠不能完全溶解,雜質(zhì)與聚合物不能充分接觸,會(huì)導(dǎo)致絮凝不徹底,攪拌時(shí)間過長,會(huì)導(dǎo)致最終產(chǎn)品的凝膠強(qiáng)度降低,達(dá)不到國標(biāo)要求。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn),75min是我們發(fā)明人實(shí)驗(yàn)最佳時(shí)間。)使沉淀完全溶解,并使不溶性雜質(zhì)(培養(yǎng)基殘?jiān)?、菌體細(xì)胞)與聚合物絮凝沉淀;步驟4)、利用高速離心機(jī),去除步驟3)的不溶性雜質(zhì),得到澄清的可得然膠堿溶液,再經(jīng)脫水沉淀,低溫干燥、粉碎包裝得到成品。作為優(yōu)選,所述步驟2)中的高分子聚合物為聚合硫酸鐵和/或殼聚糖和/或聚丙烯酰胺的一種和/或幾種組合物。作為優(yōu)選,所述高分子聚合物為聚合硫酸鐵和殼聚糖,其質(zhì)量比為3:1。作為優(yōu)選,所述高分子聚合物為聚合硫酸鐵和聚丙烯酰胺,其質(zhì)量比為2:1。作為優(yōu)選,所述高分子聚合物為殼聚糖和聚丙烯酰胺,其質(zhì)量比為1:1。作為優(yōu)選,所述高分子聚合物為聚合硫酸鐵、殼聚糖和聚丙烯酰胺,其質(zhì)量比為1:1:1。本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù),通過兩次離心和加入高分子聚合物可在較高的可得然膠濃度≥2.5%下,利用較少的氫氧化鈉用量和高分子聚合物除雜,相比現(xiàn)有濃度2.0%的情況下,提高了5個(gè)百分點(diǎn);在利用較少的氫氧化鈉用量和高分子聚合物的情況下本發(fā)明可以獲得高純的含量≥96%,可得然膠成品不僅減輕環(huán)境壓力,節(jié)約生產(chǎn)成本,還提高了經(jīng)濟(jì)效益。具體實(shí)施方式以下結(jié)合實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明實(shí)例一:1、1m3可得然膠發(fā)酵液(其中可得然膠含量為2.8g/100ml),通過高速管式離心機(jī)離心后,得沉淀,泵入5m3罐中;2、配置500L濃度為0.5mol/L的氫氧化鈉溶液;3、配置100L濃度為15g/L的聚合硫酸鐵溶液;4、將聚合硫酸鐵溶液泵入堿液中,形成混合溶液;5、將混合溶液泵入可得然膠沉淀中,并同時(shí)開啟攪拌、充分?jǐn)嚢?5min;6、將罐中溶液經(jīng)高速管式離心機(jī),除去不溶性雜質(zhì)和菌體,得到澄清的可得然膠堿溶液,再經(jīng)脫水沉淀,低溫干燥、粉碎包裝得到成品24kg。實(shí)例二:1、1m3可得然膠發(fā)酵液(其中可得然膠含量為2.8g/100ml),通過高速管式離心機(jī)離心后,得沉淀,泵入5m3罐中;2、配置500L濃度為0.6mol/L的氫氧化鈉溶液;3、配置100L濃度為15g/L的聚丙烯酰胺溶液;4、將聚丙烯酰胺溶液泵入堿液中,形成混合溶液;5、將混合溶液泵入可得然膠沉淀中,并同時(shí)開啟攪拌、充分?jǐn)嚢?5min;6、將罐中溶液經(jīng)高速管式離心機(jī),出去不溶性雜質(zhì)和菌體,得到澄清的可得然膠堿溶液,再經(jīng)脫水沉淀,低溫干燥、粉碎包裝得到成品20kg。實(shí)例三:1、1m3可得然膠發(fā)酵液(其中可得然膠含量為2.8g/100ml),通過高速管式離心機(jī)離心后,得沉淀,泵入5m3罐中;2、配置500L濃度為0.7mol/L的氫氧化鈉溶液;3、配置100L濃度為15g/L的殼聚糖溶液;4、將殼聚糖溶液泵入堿液中,形成混合溶液;5、將混合溶液泵入可得然膠沉淀中,并同時(shí)開啟攪拌、充分?jǐn)嚢?5min;6、將罐中溶液經(jīng)高速管式離心機(jī),出去不溶性雜質(zhì)和菌體,得到澄清的可得然膠堿溶液,再經(jīng)脫水沉淀,低溫干燥、粉碎包裝得到成品22kg。實(shí)施例四:一種去除可得然膠生產(chǎn)過程中雜質(zhì)和菌體的方法,包括可得然膠發(fā)酵液和氫氧化鈉,所述方法包括如下步驟:步驟1)、利用分離因數(shù)至少8000以上的高速離心機(jī)對(duì)1m3可得然膠發(fā)酵液(其中可得然膠含量為2.8g/100ml),進(jìn)行離心處理,去除可溶性雜質(zhì),收集沉淀;步驟2)、按原發(fā)酵液體積的1/2配置氫氧化鈉溶液,濃度為0.6mol/L,將分散在水中的高分子聚合物加入到氫氧化鈉溶液中,其中所述的高分子聚合物加入濃度為15g/L,具體聚合硫酸鐵、殼聚糖和聚丙烯酰胺的濃度均為5g/L;步驟3)、將準(zhǔn)備好的氫氧化鈉與高分子聚合物混合溶液加入到步驟1)的沉淀中,充分?jǐn)嚢?5min使沉淀完全溶解,并使不溶性雜質(zhì)(培養(yǎng)基殘?jiān)?、菌體細(xì)胞)與聚合物絮凝沉淀;步驟4)、利用高速離心機(jī),去除步驟3)的不溶性雜質(zhì),得到澄清的可得然膠堿溶液,再經(jīng)脫水沉淀,低溫干燥、粉碎包裝得到成品26kg。本發(fā)明的純度為多次試驗(yàn)的結(jié)果,試驗(yàn)檢測(cè)以國標(biāo)方法為準(zhǔn),數(shù)據(jù)如表1 所示序號(hào)樣品重量葡萄糖重量樣品OD值葡萄糖OD值含量10.1g0.1g0.3960.36896.85%20.1g0.1g0.2080.19198%30.1g0.1g0.2040.19196.1%40.1g0.1g0.4020.37696.22%50.1g0.1g0.3440.32296%本發(fā)明高分子聚合物的加入類型和量對(duì)產(chǎn)率的影響,如表2所示序號(hào)高分子聚合物類型加入濃度產(chǎn)量產(chǎn)率1聚合硫酸鐵15g/L24.0kg85.7%2聚丙烯酰胺15g/L20.0kg71.4%3殼聚糖15g/L22.0kg78.6%4聚合硫酸鐵:聚丙烯酰胺=3:115g/L25.0kg89.3%5聚合硫酸鐵:聚丙烯酰胺=2:115g/L24.6kg87.9%6殼聚糖:聚丙烯酰胺=1:115g/L24.4kg87.1%7聚合硫酸鐵:殼聚糖:聚丙烯酰胺=1:1:115g/L26.0kg92.9%從表2中我們可以看出當(dāng)高分子聚合物為聚合硫酸鐵:殼聚糖:聚丙烯酰胺=1:1:1的質(zhì)量比進(jìn)行混合時(shí),產(chǎn)率最高。以上所述,僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明所揭露的技術(shù)范圍內(nèi),可不經(jīng)過創(chuàng)造性勞動(dòng)想到的變化或替換,都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此,本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所限定的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。當(dāng)前第1頁1 2 3