含芳環(huán)的胺類化合物及其制備方法和應(yīng)用本申請是申請?zhí)枮椤?01410362592.1”，發(fā)明名稱為“含芳環(huán)的胺類化合物及其制備方法和應(yīng)用”的發(fā)明專利申請的分案申請。技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及含芳環(huán)的胺類化合物。

背景技術(shù)：
惡性腫瘤是影響人們健康的主要疾病。據(jù)WHO統(tǒng)計，全世界惡性腫瘤每年發(fā)病1100多萬人，病死800多萬人，發(fā)達(dá)國家腫瘤年發(fā)病率高于300/10萬。據(jù)統(tǒng)計，近兩年來我國城市居民惡性腫瘤占死亡原因的第1位，且每年新增患者約160-170萬人，占致死疾病的25.47％。WHO最新發(fā)表的《世界癌癥報告》說，到2020年，全球癌癥發(fā)病率可能比現(xiàn)在增長50％以上，新增腫瘤患者將達(dá)2000萬人。惡性腫瘤的治療以化療為主要手段，但目前化療所使用的藥物對腫瘤、癌癥細(xì)胞的殺滅活性不高、選著性不強(qiáng)，且需要大劑量的藥物，從而對人體產(chǎn)生了很大的毒副作用，因此開發(fā)新的抗腫瘤藥物是目前急需解決的問題。癌癥轉(zhuǎn)移是腫瘤患者死亡的最主要原因：臨床上約有50％的腫瘤病人在確診時已發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移，在臨床治療(手術(shù)、放化療)后的3個月內(nèi)轉(zhuǎn)移的比例更高達(dá)69％，而一年內(nèi)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的比例幾乎達(dá)到整個轉(zhuǎn)移病例的90％以上。其結(jié)果是90％腫瘤病人的最終死亡原因都是由于腫瘤的復(fù)發(fā)、侵襲和轉(zhuǎn)移。防治腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移是降低腫瘤死亡率的有效途徑之一，是抗腫瘤的關(guān)鍵。前列腺癌是指發(fā)生在前列腺的上皮性惡性腫瘤。2012年我國腫瘤登記地區(qū)前列腺癌發(fā)病率為9.92/10萬，列男性惡性腫瘤發(fā)病率的第6位。前列腺癌的癥狀表現(xiàn)為壓迫癥狀和轉(zhuǎn)移癥狀。壓迫癥狀表現(xiàn)為逐漸增大的前列腺腺體壓迫尿道可引起進(jìn)行性排尿困難，表現(xiàn)為尿線細(xì)、射程短、尿流緩慢、尿流中斷、尿后滴瀝、排尿不盡、排尿費力，此外，還有尿頻、尿急、夜尿增多、甚至尿失禁。腫瘤壓迫直腸可引起大便困難或腸梗阻，也可壓迫輸精管引起射精缺乏，壓迫神經(jīng)引起會陰部疼痛，并可向坐骨神經(jīng)放射。轉(zhuǎn)移癥狀表現(xiàn)為可侵及膀胱、精囊、血管神經(jīng)束，引起血尿、血精、陽痿。盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可引起雙下肢水腫。前列腺癌常易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，引起骨痛或病理性骨折、截癱。前列腺癌也可侵及骨髓引起貧血或全血象減少。乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤，是威脅女性身心健康的常見腫瘤。美國8名婦女一生中就會有1人患乳腺癌。據(jù)中國癌癥中心和衛(wèi)生部疾病預(yù)防控制局2012年公布的2009年乳腺癌發(fā)病數(shù)據(jù)顯示：全國腫瘤登記地區(qū)乳腺癌發(fā)病率位居女性惡性腫瘤的第1位，女性乳腺癌發(fā)病率(粗率)全國合計為42.55/10萬，城市為51.91/10萬，農(nóng)村為23.12/10萬。由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性，細(xì)胞之間連接松散，容易脫落。癌細(xì)胞一旦脫落，游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉(zhuǎn)移，危及生命。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個目的是提供一類含芳環(huán)的胺類化合物。本發(fā)明的另一目的是提供一類含芳環(huán)的胺類化合物藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的又一個目的是提供一類含芳環(huán)的胺類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。本發(fā)明的再一目的是提供一類含芳環(huán)的胺類化合物在制備預(yù)防或治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：本發(fā)明I-V結(jié)構(gòu)如下所示：上述含芳環(huán)的胺類化合物，其藥學(xué)上可接受的鹽可為鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫氟酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽或磷酸鹽；也可為甲酸鹽、丙酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、苦味酸鹽、甲磺酸鹽或乙磺酸鹽；還可為與酸性氨基酸的酸加成鹽以及與堿性氨基酸形成的鹽。上述酸性氨基酸優(yōu)選天東氨酸或谷氨酸。上述堿性氨基酸優(yōu)選賴氨酸、精氨酸或鳥氨酸。上述含芳環(huán)的胺類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，包括以下步驟：其中：I-IV結(jié)構(gòu)具有前述所給定義。進(jìn)一步，所述VI-a和VII-a-c的摩爾比為1：2。進(jìn)一步，所述VI-b和VII-e的摩爾比為2：1。進(jìn)一步，所述偶聯(lián)反應(yīng)在溶劑二甲亞砜(DMSO)、或四氫呋喃(THF)中進(jìn)行。進(jìn)一步，所述VI-b和VII-c的偶聯(lián)反應(yīng)用到?；噭槎葋嗧俊⒒蛉然?、或三溴化磷。上述含芳環(huán)的胺類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用：尤其是在前列腺癌、乳腺癌方面的應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明提供了一類含芳環(huán)的胺類化合物，作為VGSCs配體，經(jīng)檢測具有較好的抑制腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移的活性，尤其是對前列腺癌細(xì)胞以及乳腺癌細(xì)胞有明顯抑制作用，是優(yōu)良的抗腫瘤先導(dǎo)化合物，可以進(jìn)一步開發(fā)成抗腫瘤藥物，用于腫瘤轉(zhuǎn)移灶、晚期腫瘤、非實體腫瘤等癌癥，在腫瘤治療領(lǐng)域具有潛在、廣闊的應(yīng)用前景。本發(fā)明所述化合物采用鹵代部分和伯胺部分在DMSO類溶劑里進(jìn)行胺的烴化反應(yīng)制備得到，方法簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明所述含芳環(huán)的胺類化合物及其鹽的抑制腫瘤細(xì)胞活性測定如下：體外抗腫瘤細(xì)胞活性及抗腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移活性：實驗用細(xì)胞株：人類前列腺癌細(xì)胞株DU145、PC3，人類乳腺癌細(xì)胞株MCF-7。細(xì)胞株均購自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,ATCC)。檢測化合物：5種化合物用DMSO配置成50mmol/L的儲備液，于-20℃儲存。檢測方法：MTT分析方法用于檢測腫瘤細(xì)胞存活率MTT工作液(5mg/ml)用無菌PBS緩沖液配制。細(xì)胞接種于96孔板，每孔3000-5000個細(xì)胞培養(yǎng)于100μl培養(yǎng)基中，培養(yǎng)過夜(10-12小時)后，加入各化合物，處理濃度為0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、25.0、50.0、100.0μmol/L，每個濃度設(shè)三個平行對照孔。各組DMSO終濃度均為1/1000，同時設(shè)立1/1000DMSO對照組及培養(yǎng)基對照組。受試化合物作用72小時后，去除培養(yǎng)基，每孔細(xì)胞加入含10μlMTT溶液的新鮮培養(yǎng)基100μl，使MTT濃度為0.5mg/ml。細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)3-5小時，去除含MTT的培養(yǎng)基，每孔加入100μlDMSO，輕搖培養(yǎng)板，使紫色結(jié)晶溶解后，用酶標(biāo)儀(TECANmagellanInfinite200,TECAN,Switzerland)于570nm波長處檢測吸光度，通過計算各組相對于DMSO溶劑對照的吸光度計算細(xì)胞相對于正常組細(xì)胞的存活率。Transwell方法用于檢測腫瘤細(xì)胞的侵襲按照8：1比例將無血清培養(yǎng)基和與MatrigelMatrix(美國BD公司)于冰浴上混勻，每個Transwell培養(yǎng)小室(美國Corning公司)的上室加入50ul該混合液，于37℃CO2培養(yǎng)箱中孵育過夜(不超過24h)。消化培養(yǎng)好的PC3細(xì)胞成細(xì)胞懸液計數(shù)，每個Transwell小室的上室加入100ul細(xì)胞懸液(1×105個細(xì)胞)，CO2培養(yǎng)箱中過夜使細(xì)胞貼壁，次日上室換為無血清培養(yǎng)基并加入不同濃度藥物處理，以1/1000DMSO為溶劑對照；下室中加入600ul無血清條件培養(yǎng)基；37℃培養(yǎng)箱中孵育48h；取出Transwell小室用PBS洗2遍，用棉球擦去上表面細(xì)胞，10％多聚二醛固定小室膜，加入0.1％結(jié)晶紫染色，室溫0.5h后，PBS洗2遍，小心去下膜，于顯微鏡下觀察。數(shù)據(jù)分析：計算各化合物殺傷各種腫瘤細(xì)胞的IC50，見表1。表1各化合物對前列腺癌細(xì)胞DU145、PC3及乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB231的直接殺傷效果(IC50/μM)結(jié)論：實驗顯示這些化合物對前列腺癌細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞有很好的抑制作用,作為新型的抗腫瘤藥物具有很大的開發(fā)前景。Transwell方法檢測化合物I-V對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力的影響，參見說明書附圖1-6(化合物I-V的用量為10μmol/L)。在各種前列腺癌細(xì)胞系中，PC3的轉(zhuǎn)移能力最強(qiáng)。圖1結(jié)果顯示，1/1000DMSO對照組觀察到大量細(xì)胞穿過transwell小室，出現(xiàn)于小室膜的下室側(cè)；同樣，10μmol/LIV處理PC3細(xì)胞后，大量細(xì)胞穿過transwell小室；而10μmol/LII和V處理的小室下室側(cè)見極少量細(xì)胞穿過transwell小室；而10μmol/LI和III處理的小室下室側(cè)未見任何細(xì)胞，表明該濃度的I-III和V能抑制高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞PC3細(xì)胞的侵襲，從而抑制腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。附圖說明圖1是觀察1/1000DMSO對照組對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力。圖2是觀察化合物I對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力。圖3是觀察化合物II對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力。圖4是觀察化合物III對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力。圖5是觀察化合物IV對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力。圖6是觀察化合物V對前列腺癌細(xì)胞PC3的侵襲能力。具體實施方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。主要試劑和原料：伯胺和鹵代試劑(Sigma-AldrichCo.)；核磁共振儀(AV400，Bruker,TMS為內(nèi)標(biāo))；質(zhì)譜儀(LC-MSD-1100型，Aglent)。本發(fā)明所用試劑均為市售產(chǎn)品。實施例1：化合物I的制備：將4，4-雙(4-氟代苯基)-1-氯丁烷(化合物VI-a，0.56g，2.0mmol)和L-苯丙氨酸甲酯(VII-a，0.72g，4.0mmol)加到25mL帶磁力攪拌的單口反應(yīng)瓶中的DMSO(10mL)中，在80℃攪拌10小時。反應(yīng)物轉(zhuǎn)移到250mL的分液漏斗中，加入150mL乙酸乙酯稀釋，然后用50mL的5％的Na2CO3水溶液洗兩次，在用60mL的水洗兩次，最后用飽和60mL的NaCl水溶液洗一次。然后有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析純化，得化合物I(0.97g，88％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz):7.32～7.23(m,5H),7.20-7.10(m,4H),7.01-6.95(m,4H),4.08(t,J＝7.7Hz,1H),3.64(s,3H),3.48(m,1H),2.94(m,2H),2.63-2.46(m,2H),2.03-1.96(m,3H),1.41-1.36(m,2H)。13C-NMR(CD3OD,100MHz):178.3,162.4(d,J＝240Hz),147.9,141.8(d,J＝3Hz),128.2(d,J＝8Hz),129.1,126.1,125.7,116.4(d,J＝21Hz),64.9,51.8,50.2,49.8,48.6,32.6,27.6。MS(ES)m/z424(M+1)。實施例2：化合物II的制備：將4，4-雙(4-氟代苯基)-1-氯丁烷(化合物VI-a，0.84g，3.0mmol)和L-亮氨酸甲酯(VII-b，0.87g，6.0mmol)加到50mL帶磁力攪拌的單口反應(yīng)瓶中的DMSO(20mL)中，在80℃攪拌16小時。反應(yīng)物轉(zhuǎn)移到300mL的分液漏斗中，加入200mL乙酸乙酯稀釋，然后用80mL的5％的Na2CO3水溶液洗兩次，在用80mL的水洗兩次，最后用飽和80mL的NaCl水溶液洗一次。然后有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析純化，得化合物II(0.95g，81％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz):7.16-7.12(m,4H),6.98-6.92(m,4H),3.85(t,J＝7.8Hz,1H),3.69(s,3H),3.22(t,J＝6.9Hz,1H),2.56(m,1H),2.24(m,1H),2.03-1.98(m,2H),1.67(m,1H),1.46-1.41(m,5H),0.91(d,J＝6.6Hz,3H),0.88(d,J＝6.6Hz,3H)。13C-NMR(CD3OD,100MHz):173.3,161.2(d,J＝244Hz),142.7(d,J＝3Hz),129.3(d,J＝8Hz),116.5(d,J＝21Hz),61.5,52.9,50.9,47.8,40.5,36.2,29.6,24.6,23.1,23.0。MS(ES)m/z290(M+1)。實施例3：化合物III的制備：將4，4-雙(4-氟代苯基)-1-氯丁烷(化合物VI-a，0.28g，1.0mmol)和化合物VII-c(0.22g，2.0mmol)加到15mL帶磁力攪拌的單口反應(yīng)瓶中的DMSO(5mL)中，在80℃攪拌12小時。反應(yīng)物轉(zhuǎn)移到100mL的分液漏斗中，加入50mL乙酸乙酯稀釋，然后用20mL的5％的Na2CO3水溶液洗兩次，在用20mL的水洗兩次，最后用飽和20mL的NaCl水溶液洗一次。然后有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析純化，得化合物III(0.27g，76％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz):7.76(d,J＝7.3Hz,1H),7.21-7.11(m,4H),7.07-6.98(m,4H),6.50(m,1H),6.28(d,J＝7.2Hz,1H),4.11(t,J＝7.6Hz,1H),3.71(s,2H),2.98(d,J＝7.3Hz,2H),2.61(s,3H),2.53-2.48(m,2H),2.07-1.99(m,2H),1.48-1.37(m,2H)。13C-NMR(CD3OD,100MHz):163.1(d,J＝241Hz),149.2,143.9,141.2(d,J＝3Hz),129.1(d,J＝8Hz),116.4(d,J＝21Hz),111.2,110.6,60.1,57.8,51.1,43.6,33.5,26.5。MS(ES)m/z356(M+1)。實施例4：化合物IV的制備：將4，4-雙(4-氟代苯基)-1-氯丁烷(化合物VI-a，1.12g，4.0mmol)和化合物VII-d(0.69g，8.0mmol)加到50mL帶磁力攪拌的單口反應(yīng)瓶中的DMSO(20mL)中，在80℃攪拌11小時。反應(yīng)物轉(zhuǎn)移到300mL的分液漏斗中，加入200mL乙酸乙酯稀釋，然后用100mL的5％的Na2CO3水溶液洗兩次，在用100mL的水洗兩次，最后用飽和100mL的NaCl水溶液洗一次。然后有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析純化，得化合物IV(1.22g，92％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz):7.15(m,4H),6.96(m,4H),3.86(t,J＝7.8Hz,1H),3.68(t,J＝4.6Hz,4H),2.36-2.31(m,6H),2.01(m,2H),1.43(m,2H)。13C-NMR(CD3OD,100MHz):161.4(d,J＝243Hz),140.6(d,J＝3Hz),129.1(d,J＝8Hz),115.3(d,J＝21Hz),67.1,59.0,53.9,49.8,33.8,25.1。MS(ES)m/z332(M+1)。實施例5：化合物V的制備：將2-吲哚甲酸(化合物VI-b，2.1g，12mol)和二氯亞砜(SOCl2，20mL)加到50mL帶磁力攪拌的單口反應(yīng)瓶中，回流攪拌3小時。然后減壓移出過量的二氯亞砜，然后加入15mL的芐胺(VII-c，1.1g，10mmol)的四氫呋喃溶液和4-(N，N-二甲基)吡啶(DMAP，2.5g，20mmol)，反應(yīng)液室溫攪拌11小時。將反應(yīng)物轉(zhuǎn)移到100mL的分液漏斗中，加入40mL乙酸乙酯稀釋，然后用40mL的5％的Na2CO3水溶液洗兩次，在用20mL的水洗兩次，最后用飽和20mL的NaCl水溶液洗一次。然后有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析純化，得化合物VIII(2.1g，78％的收率)。將上述所得的化合物VIII(0.38g，1.0mmol)和四氫鋁鋰(LiAlH4，0.12g，3.1mmol)加入到25mL帶磁力攪拌和回流裝置及氮氣的雙口反應(yīng)瓶中的四氫呋喃(5mL)中，攪拌回流6小時后，用乙酸乙酯破壞過量的四氫鋁鋰。將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到50mL的分液漏斗中，加入20mL乙酸乙酯稀釋，用10mL的水洗兩次，最后用飽和10mL的NaCl水溶液洗一次。然后有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，柱層析純化，得化合物V(0.18g，71％)。1H-NMR(CDCl3,400MHz):7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.43-7.21(m,7H),7.18(m,1H),6.22(s,1H),3.89(s,2H),3.82(s,2H),3.71(s,3H),2.069s,1H)；MS(ES)m/z351(M+1)。