一種半仿生提取香菇多糖的方法
【專利摘要】一種半仿生提取香菇多糖的方法，其方法的主要步驟為：（1）原料預(yù)處理；（2）弱酸性水提取；（3）弱堿性水提取；（4）中性水提??；（5）制備洗脫液；（6）制備截留液；（7）減壓濃縮；（8）離心去除沉降物；（9）沉淀真空干燥；（10）粉碎包裝。本發(fā)明的半仿生提取香菇多糖的方法，用半仿生提取代替單純水提取，最后采用HD-3樹(shù)脂柱脫色脫蛋白和超濾膜超濾分級(jí)，使多糖提取收率高、純度好。
【專利說(shuō)明】一種半仿生提取香菇多糖的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種多糖提取方法，特別是一種半仿生提取香菇多糖的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]香菇又名香蕈，是著名的食用兼藥用真菌，早在一千多年前就開(kāi)始采集利用?！侗静菥V目》中有:香菇“甘、平、無(wú)毒”；《醫(yī)林纂要》記載:香菇“甘、寒”，“可托痘毒”；《日月本草》認(rèn)為香菇“益氣、不饑、治風(fēng)破血”;《本經(jīng)逢原》認(rèn)為香菇“為補(bǔ)償維生素D的要?jiǎng)?，預(yù)防佝僂病，并治貧血”。香菇含有多種有效藥用成分，所含麥角留醇(維生素D原，其含量比一般食物高)被人體吸收后，在光照下能轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D，可增強(qiáng)人體的抵抗力，并能促進(jìn)兒童骨骼和牙齒的生長(zhǎng)，預(yù)防佝僂病。
[0003]香菇多糖是香菇子實(shí)體中最主要的有效活性成分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β — (I一3)一D一匍聚糖，主鏈由β — (I一3)一連接的匍萄糖基組成，沿主鏈隨機(jī)分布著由β —(I一6)連接的葡萄糖基，呈梳狀結(jié)構(gòu)。研究表明香菇的活性多糖成分β —(1-3)-D-葡聚糖對(duì)抑制異源的、同源的、甚至是遺傳性的腫瘤都有效。香菇多糖能刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)，使免疫功能得到恢復(fù)和提高，從而起到防癌、抗癌作用。
[0004]香菇多糖原有的提取方法主要襲用真菌多糖的傳統(tǒng)制各方法，用熱水提取后，直接合并提取液濃縮，再用酒精沉淀，將沉淀部分離心分離出后，通過(guò)真空干燥或水溶解后噴霧干燥獲得粗多糖制品。用單一的水提法只能提出其中的水溶性多糖，還有很多胞壁中的多糖難以提取出。要進(jìn)一步利用香菇，制備其深加工產(chǎn)品，只有在原有基礎(chǔ)上改進(jìn)提取工藝，才能制備高濃度的猴頭菌粗多糖提取物。傳統(tǒng)水提醇沉方法的不足主要有:1、提取的粗多糖得率低，對(duì)原科的利用率不高；2、香菇中有許多果膠質(zhì)類粘性物質(zhì)，提取時(shí)增加了提取液的得到的提取物中多糖含量不高，影響其功效作用的發(fā)揮。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種半仿生提取香菇多糖的方法，用半仿生提取代替單純水提取，最后采用HD-3樹(shù)脂柱脫色脫蛋白和超濾膜超濾分級(jí)，使多糖提取收率高、純度好。
[0006]本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn):一種半仿生提取香菇多糖的方法，所述的半仿生提取香菇多糖的方法按下列步驟順序進(jìn)行:
(1)原料預(yù)處理:取干燥香菇，粉碎，過(guò)50?120目篩，得香菇干燥粉末；
(2)弱酸性水提取:用弱酸調(diào)節(jié)提取用水至ρΗ4.0-5.5之間，稱取適量(I)步驟的香菇干燥粉末，按料液比為1:5-1:25的比重加入弱酸性水，加溫并控制溫度在50-60°C，常壓狀態(tài)提取1-2小時(shí)，離心分離，得濾液I和濾渣；
(3)弱堿性水提取:用弱堿調(diào)節(jié)提取用水至PH7-8之間，按料液比為1:5-1:25的比重向(2)步驟得到的濾渣加入弱堿性水，加溫并控制溫度在50-60°C，常壓狀態(tài)提取1-2小時(shí)，離心分離，得濾液2和濾渣；
(4)中性水提取:用酸調(diào)節(jié)提取用水pH中性，按料液比為1:5-1:25向(3)步驟得到的濾渣加入中性水，加溫并控制溫度在95-100°C，常壓狀態(tài)提取I小時(shí)，板框壓濾，濾液放入儲(chǔ)罐，離心分離，得濾液3和濾渣，殘?jiān)鼦壢ィ?br> (5)制備洗脫液:合并濾液1、濾液2、濾液3，用稀鹽酸調(diào)節(jié)濾液pH為4.0?4.5，上層析柱，柱內(nèi)填充介質(zhì)為HD-3樹(shù)脂，4?5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6?7BV洗脫液；
(6)制備截留液:調(diào)節(jié)洗脫液pH為6.5?7.5，在0.1?0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和1KD的陶瓷膜進(jìn)行超濾，收集中間截留液；
(7)減壓濃縮:將(6)步驟的截留液進(jìn)行減壓濃縮，濃縮溫度65-70°C，壓力小于0.1MPa，濃縮至于500°C熱測(cè)時(shí)，比重為1.050-1.080 ；
(8)離心去除沉降物:4000rmp高速離心，除去沉淀物，上清液進(jìn)一步做酒精沉淀用；
(9)沉淀真空干燥:將沉淀物均勻地裝入高盤(pán)子，料高不超過(guò)盤(pán)高的1/3，先置于60-65°C烘箱內(nèi)干燥4小時(shí)，再抽真空干燥，溫度控制65°C，負(fù)壓0.1MPa，真空干燥8小時(shí)；
(10)粉碎:取出干燥物，用循環(huán)水冷卻的粉碎機(jī)將物料粉碎，過(guò)80目篩，即得到香菇多糖。
[0007]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明用半仿生提取代替單純水提取，最后采用HD-3樹(shù)脂柱脫色脫蛋白和超濾膜超濾分級(jí)，使多糖提取收率高、純度好。
[0008]1.半仿生是從生物藥劑學(xué)角度，模擬口服給藥及藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)的原理，為經(jīng)消化道給藥的中藥制劑設(shè)計(jì)的一種新的提取工藝，其特點(diǎn)保留更多的有效成分。
[0009]2.應(yīng)用樹(shù)脂層析柱進(jìn)行脫色脫蛋白，除去了蛋白質(zhì)等分子雜質(zhì)，使提取的多糖含量更高、更純。

【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例1
(O:取干燥香菇(可由新鮮香菇經(jīng)自然風(fēng)干得到)，粉碎，80目篩，得香菇干燥粉末；
(2)弱酸性水提取:用弱酸調(diào)節(jié)提取用水至PH4.0，稱取適量(I)步驟的粉末，按料液比為1:8加入弱酸性水，加溫并控制溫度在50-60°C，常壓狀態(tài)提取I小時(shí)，離心分離，得濾液I和濾渣；
(3)弱堿性水提取:用堿調(diào)節(jié)提取用水至PH8.0，按料液比為1:8向(I)步驟的濾渣加入弱堿水，加溫并控制溫度在50-60°C，常壓狀態(tài)提取I小時(shí)，離心分離，得濾液2和濾渣；
(4)中性水提取:用酸調(diào)節(jié)pH中性，按料液比為1:8向(3)步驟的濾渣加入中性水，力口溫并控制溫度在95-100°C，常壓狀態(tài)提取I小時(shí)，板框壓濾，濾液15放入儲(chǔ)罐。離心分離，得濾液3和濾渣，殘?jiān)鼦壢ィ?br> (5)合并三次提取液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)濾液pH為4.0?4.5，上層析柱，柱內(nèi)填充介質(zhì)為HD-3樹(shù)脂，4?5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6?7BV洗脫液；
(6)調(diào)節(jié)洗脫液pH為6.5?7.5，在0.1?0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和1KD的陶瓷膜進(jìn)行超濾，收集中間截留液；
(7)減壓濃縮:將(6)步驟的截留液進(jìn)行減壓濃縮，濃縮溫度65-70°C，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重 1.050-1.080(500°C熱測(cè))；
(8)離心去除沉降物:4000rmp高速離心，除去沉淀物，上清液進(jìn)一步做酒精沉淀用；
(9)沉淀真空干燥:將沉淀物均勻地裝入高盤(pán)子，料高不超過(guò)盤(pán)高的1/3，先置于60-65°C烘箱內(nèi)干燥4小時(shí)，再抽真空干燥，溫度控制65°C，負(fù)壓0.1MPa，真空干燥8小時(shí)；
(10)粉碎:取出干燥物，用循環(huán)水冷卻的粉碎機(jī)將物料粉碎，過(guò)80目篩，即得到香菇多糖。
[0011]提取的香菇多糖得率為21.32%。
[0012]實(shí)施例2
(1)取干燥香菇(可由新鮮香菇經(jīng)自然風(fēng)干得到)，粉碎，過(guò)80目篩，得香菇干燥粉末；
(2)弱酸性水提取:用弱酸調(diào)節(jié)提取用水至PH4.0，稱取適量(I)步驟的粉末，按料液比為1:8加入弱酸性水，加溫并控制溫度在50-60°C，常壓狀態(tài)提取2小時(shí)，離心分離，得濾液I和濾渣；
(3)弱堿性水提取:用堿調(diào)節(jié)提取用水至PH8.0，按料液比為1:8向(I)步驟的濾渣加入弱堿水，加溫并控制溫度在50-60°C，常壓狀態(tài)提取2小時(shí)，離心分離，得濾液2和濾渣；
(4)中性水提取:用酸調(diào)節(jié)pH中性，按料液比為1:8向(3)步驟的濾渣加入中性水，力口溫并控制溫度在95-100°C，常壓狀態(tài)提取I小時(shí)，板框壓濾，濾液15放入儲(chǔ)罐，離心分離，得濾液3和濾渣，殘?jiān)鼦壢ィ?br> (5)合并三次提取液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)濾液pH為4.0?4.5，上層析柱，柱內(nèi)填充介質(zhì)為HD-3樹(shù)脂，4?5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6?7BV洗脫液；
(6)調(diào)節(jié)洗脫液pH為6.5?7.5，在0.1?0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和1KD的陶瓷膜進(jìn)行超濾，收集中間截留液；
(7)減壓濃縮:將(6)步驟的截留液進(jìn)行減壓濃縮，濃縮溫度65-70°C，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重 1.050—1.080(500°C熱測(cè))；
(8)離心去除沉降物:4000rmp高速離心，除去沉淀物，上清液進(jìn)一步做酒精沉淀用；
(9)沉淀真空干燥:將沉淀物均勻地裝入高盤(pán)子，料高不超過(guò)盤(pán)高的1/3，先置于60-65°C烘箱內(nèi)干燥4小時(shí)。再抽真空干燥，溫度控制65°C，負(fù)壓0.1MPa，真空干燥8小時(shí)；
(10)粉碎:取出干燥物，用循環(huán)水冷卻的粉碎機(jī)將物料粉碎，過(guò)80目篩，即得到香菇多糖；
提取的香菇多糖得率為24.21%。
【權(quán)利要求】
1.一種半仿生提取香菇多糖的方法，其特征在于:所述的半仿生提取香菇多糖的方法按下列步驟順序進(jìn)行: (1)原料預(yù)處理:取干燥香菇，粉碎，過(guò)50?120目篩，得香菇干燥粉末； (2)弱酸性水提取:用弱酸調(diào)節(jié)提取用水至0-5.5之間，稱取適量(1)步驟的香菇干燥粉末，按料液比為1:5-1:25的比重加入弱酸性水，加溫并控制溫度在50-60【，常壓狀態(tài)提取1-2小時(shí)，離心分離，得濾液1和濾渣； (3)弱堿性水提取:用弱堿調(diào)節(jié)提取用水至邱7-8之間，按料液比為1:5-1:25的比重向(2)步驟得到的濾渣加入弱堿性水，加溫并控制溫度在50-601，常壓狀態(tài)提取1-2小時(shí)，離心分離，得濾液2和濾渣； (4)中性水提取:用酸調(diào)節(jié)提取用水邱中性，按料液比為1:5-1:25向(3)步驟得到的濾渣加入中性水，加溫并控制溫度在95-1001，常壓狀態(tài)提取1小時(shí)，板框壓濾，濾液放入儲(chǔ)罐，離心分離，得濾液3和濾渣，殘?jiān)鼦壢ィ? (5)制備洗脫液:合并濾液1、濾液2、濾液3，用稀鹽酸調(diào)節(jié)濾液邱為4.0?4.5，上層析柱，柱內(nèi)填充介質(zhì)為冊(cè)-3樹(shù)脂，4?58^/11流速下層析脫色脫蛋白，收集6?78乂洗脫液； (6)制備截留液:調(diào)節(jié)洗脫液邱為6.5?7.5，在0.1?0.251%壓力下，用超濾膜為50X0和101(0的陶瓷膜進(jìn)行超濾，收集中間截留液； (7)減壓濃縮:將(6)步驟的截留液進(jìn)行減壓濃縮，濃縮溫度65-701，壓力小于.0.1，濃縮至于5001熱測(cè)時(shí)，比重為1.050-1.080 ； (8)離心去除沉降物:40001'即高速離心，除去沉淀物，上清液進(jìn)一步做酒精沉淀用； (9)沉淀真空干燥:將沉淀物均勻地裝入高盤(pán)子，料高不超過(guò)盤(pán)高的1/3，先置于60-651烘箱內(nèi)干燥4小時(shí)，再抽真空干燥，溫度控制651，負(fù)壓0.，真空干燥8小時(shí)； (10)粉碎:取出干燥物，用循環(huán)水冷卻的粉碎機(jī)將物料粉碎，過(guò)80目篩，即得到香菇多糖。
【文檔編號(hào)】C08B37/00GK104403020SQ201410700171
【公開(kāi)日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月28日
【發(fā)明者】戴路 申請(qǐng)人:哈爾濱墨醫(yī)生物技術(shù)有限公司