一種低溫下綜合提取藤茶中二氫楊梅素和多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種在40-60℃的相對低溫下綜合提取藤茶中二氫楊梅素和多糖的方法。本發(fā)明通過以下技術(shù)手段和工藝流程實現(xiàn)：藤茶莖葉干燥后粉碎過篩，以水為溶劑，一定溫度和超聲功率下處理一定時間，自然冷卻后4℃下靜置12-24h使二氫楊梅素結(jié)晶沉淀，料液混合物離心，得到的上清液濃縮、乙醇沉淀、洗滌干燥后得藤茶粗多糖；離心后的殘渣加沸水?dāng)嚢璨⒈丶s10min使結(jié)晶的二氫楊梅素復(fù)溶，然后立即離心，上清液冷卻后在4℃下靜置12-24h使二氫楊梅素結(jié)晶。離心、沉淀干燥后得二氫楊梅素粗提物。本發(fā)明利用超聲波的增溶和細(xì)胞破碎作用實現(xiàn)了低溫下快速、高效的同步提取藤茶中的兩種活性物質(zhì)，產(chǎn)品得率高且粗提物性狀佳，有效減少后續(xù)純化步驟，從而節(jié)省能耗和成本。
【專利說明】一種低溫下綜合提取藤茶中二氫楊梅素和多糖的方法
[0001] 【技術(shù)領(lǐng)域】
本發(fā)明涉及一種低溫下綜合提取藤茶中多糖和二氫楊梅素的方法，屬于中藥活性成分提取【技術(shù)領(lǐng)域】。
[0002]【背景技術(shù)】
藤茶，俗稱霉茶、藤婆茶、龍須茶等，學(xué)名為顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata),廣泛分布于我國南方各省區(qū)。民間自古就有用藤茶葉來治療感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、黃疸型肝炎等疾病的方法。現(xiàn)代藥理研究表明，藤茶中的黃酮(主要成分為二氫楊梅素)具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗炎鎮(zhèn)痛、廣譜抗菌、降血糖、降血脂、保肝等作用。藤茶中的多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗腫瘤、降血糖等多種生物活性。
[0003]藤茶中的總黃酮含量很高(20-40%)，主要成分為二氫楊梅素，現(xiàn)有的提取方法一種是有機溶劑提取法，是用一定濃度的乙醇溶液，在一定溫度下進行提?。涣硪环N方法是熱水提取，為使提取率提高，常規(guī)方法下加熱時間需l_4h，提取次數(shù)為1-3次，利用超聲則可縮短提取時間在半小時左右，但目前報道的方法也需要高溫加熱。
[0004]藤茶多糖是一種高分子量的雜多糖，在藤茶中含量為5_10%，現(xiàn)有的提取方法多為水提醇沉法，加熱溫度一般在90°C _100°C之間。在較高溫度下提取得到的藤茶多糖粗提物常為棕褐色，后續(xù)純化需通過脫色處理，可能造成多糖結(jié)構(gòu)的破壞，同時高溫也會對多糖大分子的構(gòu)象和結(jié)構(gòu)造成破壞，影響其生物活性。
[0005]藤茶黃酮和多糖產(chǎn)品的性狀好壞和提取溫度、提取時間有很大的關(guān)系，一般提取時間越長、提取溫度越高，粗產(chǎn)品的顏色就越深，常規(guī)的水熱提取法(90-100°C)得到的藤茶黃酮為灰色、藤茶多糖為深褐色。在對產(chǎn)品精制時，二氫楊梅素需重結(jié)晶3-4次以上才能使純度達到90%以上，重結(jié)晶次數(shù)越多，產(chǎn)品的損失就越大。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的是，針對現(xiàn)有藤茶多糖和二氫楊梅素提取存在的問題，本發(fā)明提供一種在40到60°C之間的相對低溫下綜合提取藤茶中多糖和二氫楊梅素的方法。
[0007]本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)，提取藤茶中多糖和二氫楊梅素的方法步驟為:
①藤茶新鮮莖葉或干莖葉充分干燥后粉碎并過篩；
②粉碎料加20-40倍重量的水，在特定超聲功率和溫度下進行提取，提取混合物轉(zhuǎn)移至離心罐中自然冷卻后4°C下靜置12-24h ；
③提取混合物離心，得上清液和殘渣，上清液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中50-60°C下減壓濃縮至原提取液體積的1/10，然后加乙醇沉淀，離心或抽濾后干燥，得藤茶粗多糖。
[0008]④提取混合物離心后的殘渣加入原料物重10倍的90-100°C的熱水，攪拌并保溫5-15分鐘，使二氫楊梅素充分復(fù)溶，復(fù)溶后立即離心，收集上清液，殘渣再加10倍熱水重復(fù)操作一次。合并上清液，自然冷卻后4°C下靜置12-24h，離心后得到二氫楊梅素粗提物。
[0009]所述特定超聲波功率為200-1000W，超聲提取時間為5_30分鐘；所述的提取溫度為 40。。至 60。。。[0010]所述藤茶莖葉干燥粉碎過篩為40目。
[0011]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果，本發(fā)明在保證提取產(chǎn)率的情況下，利用超聲波的增溶作用，大大縮短了提取時間、降低了提取溫度，粗產(chǎn)品顏色佳，減化或減少了后續(xù)脫色、提純等步驟。藤茶中的二氫楊梅素低溫下水溶性差，利用常規(guī)方法在低溫下的提取率很低，而本發(fā)明利用超聲波的細(xì)胞破碎和增溶作用使二氫楊梅素首先從藤茶細(xì)胞中暫時溶出，待與藤茶多糖分離后，再用沸水使其溶出，從而既保證了兩種活性物質(zhì)的提取率，又使藤茶多糖的提取、純化過程始終在60°C以下進行，最大程度的保證多糖的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象不被破壞。
[0012]本發(fā)明方法適用藤茶多糖和二氫楊梅素的提取。
[0013]【專利附圖】

【附圖說明】
圖1為本發(fā)明藤茶多糖和二氫楊梅素的低溫-超聲提取工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0014]實施例1:
(1)新鮮藤茶莖葉充分干燥，然后粉碎至通過40目篩，準(zhǔn)確稱取100g。
[0015](2)加40°C的水3L，保溫狀態(tài)下攪拌3_5min使物料在水中分散均勻后開啟超聲，超聲波功率1000W，超聲20min后，使物料混合液自然冷卻后，放置于4°C下12_24h，使溶液中的黃酮(主要成分為二氫楊梅素)結(jié)晶析出。
[0016](3)混合液離心，上清液為藤茶多糖的提取液，旋蒸濃縮至500mL-600mL后，加3倍無水乙醇沉淀，4°C下靜置4h后抽濾并用無水乙醇洗滌，濾渣干燥后得藤茶粗多糖，產(chǎn)率約為 5% -7%。
[0017](4)混合液離心后的殘渣，加入IL沸水，保溫下充分?jǐn)嚢?_15min使結(jié)晶的二氫楊梅素復(fù)溶到水中，復(fù)溶后立即離心，離心后的殘渣再次加入IL沸水重復(fù)操作一次，合并兩次離心后的上清液，自然冷卻至室溫后在4°C環(huán)境下靜置12-24h，使二氫楊梅素結(jié)晶析出。再次離心，棄去上清液，沉淀干燥后得二氫楊梅素粗產(chǎn)品，產(chǎn)率約為19% -22%。
[0018]實施例2:
(I)新鮮藤茶莖葉充分干燥，然后粉碎至通過40目篩，準(zhǔn)確稱取100g。
[0019](2)加50°C的水3L，保溫狀態(tài)下攪拌3_5min使物料在水中分散均勻后開啟超聲，超聲波功率800W，超聲20min后，使物料混合液自然冷卻后，放置于4°C下12_24h，使溶液中的黃酮(主要成分為二氫楊梅素)結(jié)晶析出。
[0020](3)混合液離心，上清液為藤茶多糖的提取液，旋蒸濃縮至500mL-600mL后，加3倍無水乙醇沉淀，4°C下靜置4h后抽濾并用無水乙醇洗滌，濾渣干燥后得藤茶粗多糖，產(chǎn)率約為 5% -7%。
[0021](4)混合液離心后的殘渣，加入IL沸水，保溫下充分?jǐn)嚢?_15min使結(jié)晶的二氫楊梅素復(fù)溶到水中，復(fù)溶后立即離心，離心后的殘渣再次加入IL沸水重復(fù)操作一次，合并兩次離心后的上清液，自然冷卻至室溫后在4°C環(huán)境下靜置12-24h，使二氫楊梅素結(jié)晶析出。再次離心，棄去上清液，沉淀干燥后得二氫楊梅素粗產(chǎn)品，產(chǎn)率約為20% -23%。
[0022]實施例3
(I)新鮮藤茶莖葉充分干燥，然后粉碎至通過40目篩，準(zhǔn)確稱取100g。[0023](2)加60°C的水3L，保溫狀態(tài)下攪拌3_5min使物料在水中分散均勻后開啟超聲，超聲波功率600W，超聲20min后，使物料混合液自然冷卻后，放置于4°C下12_24h，使溶液中的黃酮(主要成分為二氫楊梅素)結(jié)晶析出。
[0024](3)混合液離心，上清液為藤茶多糖的提取液，旋蒸濃縮至500mL-600mL后，加4倍95%乙醇沉淀，4°C下靜置4h后抽濾并用無水乙醇洗滌，濾渣干燥后得藤茶粗多糖，產(chǎn)率約為 5% -8%。
[0025](4)混合液離心后的殘渣，加入IL沸水，保溫下充分?jǐn)嚢?_15min使結(jié)晶的二氫楊梅素復(fù)溶到水中，復(fù)溶后立即離心，離心后的殘渣再次加入IL沸水重復(fù)操作一次，合并兩次離心后的上清液，自然冷卻至室溫后在4°C環(huán)境下靜置12-24h，使二氫楊梅素結(jié)晶析出。再次離心，棄去上清液，沉 淀干燥后得二氫楊梅素粗產(chǎn)品，產(chǎn)率約為21% -23%。
【權(quán)利要求】
1.一種低溫下綜合提取藤茶中多糖和二氫楊梅素的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: ①藤茶新鮮莖葉或干莖葉充分干燥后粉碎并過篩； ②粉碎料加20-40倍重量的水，在特定超聲功率和溫度下進行提取，提取混合物轉(zhuǎn)移至離心罐中自然冷卻后4°C下靜置12-24h ； ③提取混合物離心，得上清液和殘渣，上清液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中50-60°C下減壓濃縮至原提取液體積的1/10，然后加乙醇沉淀，離心或抽濾后干燥，得藤茶粗多糖； ④提取混合物離心后的殘渣加入原料物重10倍的90-100°C的熱水，攪拌并保溫5-10分鐘，使二氫楊梅素復(fù)溶，復(fù)溶后立即離心，收集上清液，殘渣再加10倍熱水重復(fù)操作一次；合并上清液，自然冷卻后4°C下靜置12-24h，離心后得到二氫楊梅素粗提物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低溫下綜合提取藤茶中多糖和二氫楊梅素的方法，其特征在于，所述特定超聲波功率為200-1000W，超聲提取時間為5-30分鐘；所述的提取溫度為40°C至 60°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低溫下綜合提取藤茶中多糖和二氫楊梅素的方法，其特征在于，所述藤茶莖葉干燥粉碎過篩為 40目。
【文檔編號】C08B37/00GK103467427SQ201310391546
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月2日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月2日
【發(fā)明者】王慧賓, 李雄輝, 熊偉, 胡居吾, 付建平, 袁菊如, 徐國良 申請人:江西省科學(xué)院應(yīng)用化學(xué)研究所