專利名稱：一種新皂甙化合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新皂甙化合物，該化合物具有降糖、降脂和抗血小板凝聚作用，本發(fā)明還涉及該化合物的制備方法及其用途，尤其是在制備治療糖尿病藥物方面的用途。
匙羹藤為蘿摩科植物Gymnema sylvestre R.Br。由于它在印度民間用來抗腫毒、蛇傷、解瘧、利尿和降血糖等，所以人們對它所含的成分進(jìn)行了許多研究和報導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)其中所含的匙羹藤酸具有降糖活性。發(fā)明人在前人研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)在匙羹藤中還有一種新皂甙化合物，到目前為止，尚沒有發(fā)現(xiàn)有文獻(xiàn)報導(dǎo)。這種新皂甙化合物也具有降糖活性。
本發(fā)明的目的是提供一種新皂甙化合物。
本發(fā)明的另一目的是提供該皂甙化合物的制備方法。
本發(fā)明的又一目的是提供該皂甙化合物的用途。
本發(fā)明所述的新皂甙化合物具有下列通式(I)
或
；當(dāng)R1為
時，R2為氫原子或
本發(fā)明新皂甙化合物可通過下列方法得到a)匙羹藤干葉，粉碎，用60-95％的乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，減壓回收至無醇味，得到濃縮液，備用；b)把所得到的濃縮液用環(huán)己烷萃取3-6次，然后再用正丁醇萃取，把正丁醇部分減壓回收至干浸膏，備用；c)將步驟b)得到的干浸膏中拌入粗硅膠，處理后待上柱；使用硅膠H的薄層層析分離，用氯仿-甲醇比例為90∶10-50∶50的混合液在樣品上樣后加壓柱層析，分別得到式(I)的新皂甙化合物。
其中當(dāng)R1為氫原子并且R2為
時，這種新皂甙化合物(下稱化合物A)具有下列理化數(shù)據(jù)無定形粉末；mp 206-209℃；[α]20D-16.0°(c 0.11，MeOH)；IRνmax3424(OH)，1735(COOR)，1636(C＝C)，1457，1034cm-1，1H NMR(400MHz，pyridine-d5)δ0.82(3H，s，Me)，0.87(3H，s，Me)，0.91(3H，s，Me)，0.97(3H，s，Me)，1.07(3H，s，Me)，1.20(3H，s，Me)，1.23(3H，s，Me)，3.17(1H，dd，J＝3.5和10.2Hz，H-18)，3.30(1H，dd，J＝3.9和11.7Hz，H-3α)，5.37(1H，br s，H-12)；13C NMR(100 MHz，pyridine-d5)見表1與表2；FABMS m/z 943[M+H]+。
當(dāng)R1為
，R2為氫原子時，這種新皂甙化合物(下稱化合物B)具有下列理化數(shù)據(jù)無定形粉末；mp 202-204℃；[α]20D-3.2°(c0.15，MeOH)；IRνmax3410(OH)，1710(COOH)，1638(C＝C)，1458，1036cm-1，1H NMR(400MHz，pyridine-d5)δ0.87(3H，s，Me)，0.91(3H，s，Me)，0.96(3H，s，Me)，1.02(3H，s，Me)，1.10(3H，s，Me)，1.24(3H，s，Me)，1.29(3H，s，Me)，3.30(1H，dd，J＝4.5和11.5Hz，H-3α)，5.38(1H，brs，H-12)；13C NMR(100MHz，pyridine-d5)見表1與表2；FABMS m/z 935[M+Na]+。
當(dāng)R1為
，R2為
時，這種新皂甙化合物(下稱化合物C)具有下列理化數(shù)據(jù)無定形粉末；mp 212-215℃；[α]20D-9.6°(c 0.20，MeOH)；IRνmax3414(OH)，1740(COOR)，1636(C＝C)，1460，1364，1044，896cm-1，1H NMR(500MHz，pyridine-d5)δ0.85(3H，s，Me)，0.90(3H，s，Me)，0.94(3H，s，Me)，1.00(3H，s，Me)，3.19(1H，dd，J＝4.0和13.7Hz，H-18)，3.32(1H，dd，J＝4.4和11.7Hz，H-3α)，5.40(1H，br s，H-12)；13C NMR(125 MHz，pyridine-d5)見表1與表2；FABMS m/z 1097[M+Na]+。
當(dāng)R1為氫原子，R2為
時，這種新皂甙化合物(下稱化合物D)具有下列理化數(shù)據(jù)無定形粉末；mp 209-211℃；[α]20D-12.1°(c 0.12，MeOH)；IRνmax3424(OH)，1734(COOR)，1636(C＝C)，1458，1074cm-1，1H NMR(500MHz，pyridine-d5)δ0.87(3H，s，Me)，0.90(3H，s，Me)，0.92(3H，s，Me)，1.00(3H，s，Me)，1.09(3H，s，Me)，1.22(3H，s，Me)，1.26(3H，s，Me)，3.20(1H，dd，J＝3.5和13.6Hz，H-18)，3.33(1H，dd，J＝4.4和11.5Hz，H-3α)，5.39(1H，br s，H-12)；13C NMR(125 MHz，pyridine-d5)見表1與表2；FABMS m/z 1127[M+Na]+。
表1化合物A-D的糖甙配基部分的13C NMR的數(shù)據(jù)<
表2化合物A-D的糖部分的13C NMR數(shù)據(jù)
試驗證明，含有通式(I)的新皂甙化合物具有降糖、降脂和抗血小板凝聚的作用。
以下通過實施例和試驗例對本發(fā)明新皂甙化合物作詳細(xì)說明。實施例1匙羹藤葉粗粉1000g，用75％的乙醇回流提取三次，每次體積為6.0L，時間各2小時，合并乙醇提取液，把該乙醇提取液減壓回收至無醇味，把濃縮液用0.5L的環(huán)己烷丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，減壓回收，得到干浸膏狀物72.0g。取36.0g干浸膏狀物，拌入60-100目的粗硅膠60g，用水浴鍋蒸發(fā)至干，待上樣。用400g薄層層析用的200-400目的硅膠H，濕法裝柱，樣品上樣后，用90∶10-50∶50的氯仿—甲醇混合液進(jìn)行加壓柱層析，分別得到新皂甙化合物A(130mg)、化合物B(115mg)、化合物C(160mg)和化合物D(195mg)。試驗例1本發(fā)明新皂甙化合物對小鼠血糖升高的影響雄性昆明種小鼠，隨機(jī)分成實驗組，分別口服本發(fā)明新皂甙化合物50，100，200mg/kg，陽性對照組分別口服優(yōu)降糖50mg/kg，空白對照組及正常對照組口服等量蒸餾水，給藥體積為20ml/kg，連續(xù)7天，末次給藥前禁食10h，除正常對照組外，各組口服給予葡糖溶液2.5g/kg(10ml/kg)，分別于葡糖前和葡糖后30min，由眼眶采血100ul，按葡糖氧化酶法，測定血清中的葡糖含量。
結(jié)果，小鼠口服葡糖30min，血糖明顯升高，本發(fā)明新皂甙化合物100，200mg/kg及優(yōu)降糖50mg/kg均顯著抑制小鼠血糖升高，本發(fā)明新皂甙化合物200mg/kg的降糖作用與優(yōu)降糖50mg/kg相近，見下表3。
表3
ΔΔP＜0.01，與正常組比較；**P＜0.01，與對照組比較。試驗例2本發(fā)明新皂甙化合物對高脂血癥大鼠血清甘油三酯、膽固醇含量的影響雄性SD大鼠，體重130-170g，正常組給予普通飼料，其它各組給予高脂飼料(1％膽固醇、10％豬油、0.3％膽酸、0.2％甲硫基咪唑和88.5％普通飼料，自制成塊狀飼料)。連續(xù)14天，大鼠禁食12小時后，按試劑盒法測定大鼠血清甘油三酯及膽固醇含量，然后，按血脂值進(jìn)行隨機(jī)分組。實驗組口服給予50、100、200mg/kg，陽性對照組分別口服安妥明100mg/kg，對照組給予蒸餾水，給藥體積為10ml/kg，連續(xù)10天，各組在給藥前5天仍飼以高脂飼料，后5天飼以普通飼料，末次給藥前禁食11小時，給藥后1小時采血測血清中甘油三酯及膽固醇含量。
結(jié)果，大鼠給予高脂飼料10天后，血清甘油三酯及膽固醇含量明顯升高，本發(fā)明新皂甙化合物50、100、200mg/kg及安妥明100mg/kg均使高脂血癥大鼠血清甘油三酯及膽固醇水平明顯下降，本發(fā)明新皂甙化合物200mg/kg的降血脂作用與安妥明100mg/kg相近，見表4。表4本發(fā)明化合物對高脂血癥大鼠血脂含量的影響(X±SD，n＝9-10)<
>ΔΔP＜0.01，與正常組比較；**P＜0.01，與對照組比較試驗例3本發(fā)明新皂甙化合物對體外家兔血小板聚集的影響家兔心臟穿刺取血，3.8％枸櫞酸鉀抗凝(1∶9)1000rpm離心5min，取上層作為富血小板血漿(PRP)，再以4000rpm離心10min，上清夜為貧血小板血漿(PPP)。將終濃度分別為250，500，1000ug/ml，陽性對照管加入阿斯匹林生理鹽水溶液10ul，終濃度為250 ug/ml，空白對照管加入生理鹽水10ul，終濃度為1.0×10-5M，在PAM-1型血小板聚集儀上觀察3min內(nèi)的最大聚集率。
結(jié)果，本發(fā)明新皂甙化合物500，1000ug/ml，阿斯匹林250ug/ml顯著抑制家兔血小板聚集，結(jié)果見表5。表5本發(fā)明新皂甙化合物對體外家兔血小板聚集的影響(X±SD，n＝8)<t
>**P＜0.01，與對照組比較。
權(quán)利要求
1.一種通式為〔1〕的新皂甙化合物
R2為氫原子或
2.權(quán)利要求1的新皂甙化合物的制備方法，包括下列步驟a)匙羹藤干葉，粉碎，用60-95％的乙醇回流提取三次，每次2小時，合并提取液，減壓回收至無醇味，得到濃縮液，備用；b)把所得到的濃縮液用環(huán)己烷萃取3-6次，然后再用正丁醇萃取，把正丁醇部分減壓回收至干浸膏，備用；c)將步驟b)得到的干浸膏中拌入粗硅膠，處理后待上柱；使用硅膠H的薄層層析分離，用氯仿-甲醇比例為90∶10-50∶50的混合液在樣品上樣后加壓柱層析，分別得到式(I)的新皂甙化合物。
3.權(quán)利要求1的新皂甙化合物在制備藥物方面的用途。
4.根據(jù)權(quán)利要求3，其中所述的藥物具有降糖、降脂或抗血小板聚集的功效。
5.根據(jù)權(quán)利要求3，其中所述的藥物能夠治療糖尿病。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種通式為(Ⅰ)的新皂甙化合物,該新皂甙化合物具有降糖、降脂或抗血小板凝聚的作用。此外本發(fā)明還涉及該新皂甙化合物的制備方法及其在制藥方面的用途,尤其是在制備治療糖尿病藥物方面的用途。
文檔編號C07J9/00GK1263102SQ9910072
公開日2000年8月16日 申請日期1999年2月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月11日
發(fā)明者葉文才, 戴岳, 叢曉東, 朱興祥, 趙守訓(xùn) 申請人:山東綠葉制藥股份有限公司