專(zhuān)利名稱(chēng)：制備(2r,3s)－3－(4－低級(jí)烷氧基苯基)－縮水甘油酸酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯的不對(duì)稱(chēng)酰胺化作用制備(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯的方法和用同樣方式制備(2S，3S)-1.5-苯并噻唑品(benzothiazepine)衍生物的方法。
眾所周知，(2S，3S)-1.5-苯并噻唑品(benzothiazepine)衍生物類(lèi)，例如，鹽酸硫氮酮(diltiazem)鹽酸鹽(化學(xué)名稱(chēng)(2S，3S)-2-(4-甲氧基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲氨基)乙基]-2，3-二氫-1，5-苯并噻唑品(benzothiazzepine)4(5H)-酮鹽酸鹽)等。作為鈣通路阻滯劑它們廣泛地用于心絞痛、原發(fā)性高血壓的治療，利用(2R，3S)-3-苯基縮水甘油酸酯有利于制備這類(lèi)化合物(見(jiàn)日本專(zhuān)利公報(bào)No.13776/1985和No.145174/1996和美國(guó)專(zhuān)利No.4,885,375)。
同樣眾所周知，脂肪酶SP523(商品名，來(lái)自NoVo Nordisk，丹麥)作用外消旋反式-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油甲酯(PCT公報(bào)No.WO 95/07359)使(2S，3R)-3-(4-甲氧基苯基)-縮水甘油甲酯發(fā)生不對(duì)稱(chēng)酰胺作用，可是該方法中，酶的選擇性和活性是低的。
本發(fā)明仔細(xì)地研究了酰胺化的外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯類(lèi)，具有反應(yīng)速度快和好的立體選擇性。
根據(jù)本發(fā)明人研究，發(fā)現(xiàn)外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯與氨或低級(jí)烷基胺在沙雷氏菌屬(Serratia)產(chǎn)生的一種酶作用下發(fā)生不對(duì)稱(chēng)酰胺化作用，從反應(yīng)的混合液中收集和分離余留的酯，在很短的時(shí)間內(nèi)能高效地生產(chǎn)(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明提供了一種制備用下式(III)表示的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯的方法
其中，R1表示一種低級(jí)烷基和R表示一種酯殘基，該方法包括(a)將一種由(I)式表示的外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯
其中，R1和R具有與上文所述相同的定義，在由屬于沙雷氏屬(genus Serratia)微生物得到的一種能夠?qū)?2S，3R)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯化合物進(jìn)行不對(duì)稱(chēng)酰胺化作用，而將(2S，3R)異構(gòu)體進(jìn)行立體選擇性地酰胺化的酶的存在下，與一種由下式(II)表示的胺化合物作用R2NH2(II)其中，R2表示氫原子或一種低烷基。
(b)然后，分離，收集反應(yīng)混合液中余留的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯。
如下描述本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。
在本發(fā)明的方法中，(I)式中的R1表示的低烷基優(yōu)選包括具有1至4個(gè)碳原子的烷基，如甲基，乙基、丙基、正丁基等，最好為甲基。由R表示的酯基可以包括烷基，該烷基可以具有取代基。該烷基取代基可以包括具有1至4個(gè)碳原子的烷基，一種鹵素原子等。R表示的烷基可以包括具有1-6個(gè)碳原子的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、戊基、己基等。R最好是低級(jí)烷基，如甲基、乙基等，特別優(yōu)選甲基。
(II)式中R2表示的低烷基優(yōu)選包括具有1至4個(gè)碳原子的烷基，如甲基、乙基、丙基、正—丁基等，更優(yōu)選甲基。式(II)的胺化合物，優(yōu)選其中R2是氫原子的胺化合物。
本發(fā)明中，作為初始材料的外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯化合物(I)，不僅可以使用含有等量的(2R，3S)異構(gòu)體和(2S，3R)異構(gòu)體的化合物，也可使用含有任意比例的這兩種光學(xué)活性異構(gòu)體的化合物。
作為本發(fā)明方法中使用的酶，可使用那些來(lái)自微生物沙雷氏菌屬(genus Serratia)，如粘質(zhì)沙雷氏菌(Serrtia marcescens)產(chǎn)生的具有對(duì)(2S，3R)-3-(4-低級(jí)烷基苯基)-縮水甘油酸酯不對(duì)稱(chēng)酰胺化作用的能力的酶，例如脂肪酶、酯酶等。屬于沙雷氏菌屬的這些微生物可以是野生菌或變異菌，也可以是生物工程得到的菌，例如，基因重組和細(xì)胞融合得到的菌。
微生物在培養(yǎng)液中產(chǎn)生的酶，經(jīng)過(guò)分離純化，一般可被使用。也可使用這些微生物的培養(yǎng)液，微生物細(xì)胞，細(xì)胞抽提物，超聲波處理過(guò)的細(xì)胞等來(lái)代替這些分離的酶。
從沙雷氏菌屬(genus Serratia)獲得的酶也可經(jīng)過(guò)固定化后用于本發(fā)明，酶固定化通常所熟知的方法，例如聚丙烯酰胺法，含硫多糖膠法(即，鹿角菜膠法)、藻酸膠法、醇脂糖膠法、光交聯(lián)樹(shù)脂法、聚乙烯乙二醇法、硅藻土法(商品名，Celite公司出品，U.S.A)或類(lèi)似的酶固定化法。
本發(fā)明的不對(duì)稱(chēng)酰胺化作用由如下反應(yīng)式表示。
R，R1和R2的定義如前所示。
在酶和適當(dāng)?shù)娜軇┐嬖谙拢庀词?3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯化合物(I)作用于式(II)的胺化合物，酶是從沙雷氏菌屬(genusSerratia)得到的，它具有不對(duì)稱(chēng)酰胺化一種(2S，3R)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯類(lèi)化合物的能力，由此，立體選擇性的酰胺化(2S，3R)異構(gòu)體，然后，從反應(yīng)的混合液中分離、收集一種余留的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯類(lèi)化合物，由此，所期望的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯化合物能夠得到。
本發(fā)明的方法中，作為底物中的一種，外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯(I)在反應(yīng)混合液中的濃度一般為0.1-80％(W/W)，特別在1-20％(W/W)更好。同樣，胺化合物(II)是另外一種底物，其用量為0.5至3.0摩爾/摩爾外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯化合物(I)，用量在0.6至2.0摩爾范圍內(nèi)更好。此外，在反應(yīng)混合液中胺化合物的濃度大約是0.1至5％(W/W)，優(yōu)選0.2至2％(W/W)的濃度范圍更好。當(dāng)反應(yīng)液中胺化合物的量降低時(shí)，可以間斷地或連續(xù)地補(bǔ)加。本反應(yīng)適宜于室溫溫度或選擇10至50℃的溫度范圍，在20至40℃的溫度范圍更好。
作為溶劑，可以是芳香烴溶劑類(lèi)，它們可以是鹵化了的芳香烴熔劑，如苯、甲苯、二甲苯、氯苯等；脂肪烴溶劑類(lèi)，也可以是鹵代脂肪烴溶劑類(lèi)，如己烷、環(huán)己烷、庚烷、異辛烷、二氯乙烷、三氯乙烷、四氯甲烷等；酯溶劑類(lèi)，如乙酸乙酯、丁酸乙酯等；酮溶劑類(lèi)，如甲基異丁酮等；醚熔劑，如叔-丁基甲基醚；異丙基醚1，4-二噁烷、四氫呋喃等；腈溶劑類(lèi)，如乙腈等；醇溶劑類(lèi)，如異丙醇，叔丁醇等。在這些溶劑中，優(yōu)選使用芳香烴熔劑類(lèi)、酯溶劑類(lèi)和醚溶劑類(lèi)，特別是甲基，叔-丁基甲基醚、乙酸乙酯、丁酸乙酯更好。在本發(fā)明的方法中，反應(yīng)優(yōu)選在基本上不含有水分有機(jī)溶劑中進(jìn)行的，以免外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯化合物(I)水解。
按照常規(guī)的方法很容易從反應(yīng)液中進(jìn)行(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯化合物(III)的分離和收集。例如，酶的反應(yīng)完成后，酶被濾出，過(guò)濾液經(jīng)減壓濃縮，然后將殘留物溶解在芳香烴熔劑中(如，甲基)，沉淀物過(guò)濾出，由此，(2S，3R)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯化合物被除去。把溶劑從濾液中除去，把醇類(lèi)溶劑(如，甲醇)加入殘留物中，由此，形成結(jié)晶，然后過(guò)濾晶體得到(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯(III)，將這樣得到的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯(III)與下式(IV)表示的氨基噻酚化合物反應(yīng)，
其中A表示苯環(huán)，可以被取代；R3表示H原子或2-低級(jí)烷基氨基-紙級(jí)烷基基團(tuán)，如果必要時(shí)，水解產(chǎn)物的酯部分后，導(dǎo)致產(chǎn)物分子內(nèi)環(huán)化作用，得到一種(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品(benzothiazzepine)化合物，如下式(V)所示
其中，R1、R3和A環(huán)的定義同前所述。
(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯(III)和2-氨基噻酚化合物(IV)的反應(yīng)可以在含有鐵為催化劑或無(wú)鐵情況下在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中進(jìn)行。作為溶劑，可以是前述的芳香烴類(lèi)，鹵代芳香烴類(lèi)，(如苯甲基、二甲苯、三甲基、氯苯、二氯苯、三氯苯)；醇溶劑，(如甲醇、乙醇、丙醇)，特別是甲醇、二甲苯、氯苯和二氯苯更好。
作為鐵做催化劑，可以使用具有二價(jià)或三價(jià)的鐵離子的無(wú)機(jī)的，有機(jī)的鹽或復(fù)合物。這樣一些離子催化劑的特別例子可以包括硝酸鐵、三價(jià)氫氧化氧化鐵[FeO(OH)]，氯化鐵、氯化亞鐵、硫酸鐵、氧化鐵、溴化鐵、氟化亞鐵、氟化鐵等，特別使用氯化鐵、硫酸鐵、硝酸鐵效果更好。反應(yīng)過(guò)程適宜溫度范圍是60至200℃之間，特別在100至150℃范圍更好。產(chǎn)物酯的部分的水解可以按照通常已知的酯水解的方法進(jìn)行。例如，產(chǎn)物可以用堿水解，如堿金屬氫氧化物(氫氧化鈉、氫氧化鉀)，堿土金屬氫氧化物(氫氧化鈣)等，或用一種酸水解，如礦酸(鹽酸、硝酸、硫酸)。隨后，在含有一種酸或堿或者缺少一種酸或堿的適宜的溶劑中可以進(jìn)行分子內(nèi)的環(huán)化作用，溫度為0至250℃，但是，溫度為80至200℃的范圍更好。作為溶劑，只要不抑制該反應(yīng)，任何一種溶劑皆可采用。這樣一種溶劑可以包括芳香烴溶劑類(lèi)，也可以是鹵代的芳香烴溶劑，(如苯、甲苯、二甲苯、1，3，5-三甲基苯、氯苯、二氯苯、三氯苯、萘)；脂肪烴溶劑類(lèi)，也可以是鹵代的脂肪烴溶劑，(如，二氯甲烷、四氯甲烷、二氯乙烷、環(huán)己烷)；非質(zhì)子傳遞極性溶劑類(lèi)(如N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜)；酮溶劑類(lèi)，(如丙酮、甲基乙基酮)；酯溶劑類(lèi)，(如乙酸乙酯、丁酸乙酯)；醚熔劑類(lèi)(如二噁烷、四氫呋喃)；腈熔劑類(lèi)，(如乙腈)；醇溶劑類(lèi)，(如甲醇、乙醇、丙醇)?；蛘哳?lèi)同的其它溶劑。如果需要，這些溶劑中的一種或多種按照單相或二相的形式可以以適當(dāng)比例合并起來(lái)使用。在這些溶劑類(lèi)中，醇溶劑類(lèi)，芳香烴類(lèi)，可以是鹵代的芳香烴熔劑類(lèi)和醚類(lèi)是優(yōu)選溶劑，但是，其中氯苯、二氯苯、甲苯、二甲苯和三甲苯更好。分子內(nèi)環(huán)化反應(yīng)最好在無(wú)水情況下進(jìn)行，以免水解。
就酸而言，不管是布龍酸(Bronsted acid)還是路易斯酸(Lewis acid)都可使用。作為路易斯酸不論是有機(jī)的還是無(wú)機(jī)的酸都可使用。還有提及過(guò)的礦物酸(如鹽酸、硫酸、磷酸、膦酸R·PO(OH)2、氫氟酸、氫溴酸、高氯酸、丁酸)；低烷酸(如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸)；羥基取代的低烷酸(如檸檬酸)；鹵代低烷酸(如三氟乙酸)低烷磺酸(如甲磺酸、乙磺酸)；芳基磺酸(如；對(duì)甲苯磺酸、苯磺酸)；草酸或者類(lèi)似的酸?？梢员皇褂玫穆芬姿顾?Lewis acid)，例如四氯化鈦、氯化鋁、三氟化硼、氯化錫、或相類(lèi)似化合物。在這些酸類(lèi)中，礦酸、低烷酸或芳基磺酸為優(yōu)選的酸類(lèi)，可是甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、苯磺酸、鹽酸、和氫溴酸更好。
就堿而言，無(wú)機(jī)的有機(jī)的堿皆可采用，象這樣的堿有堿金屬碳酸氫鹽(如碳酸氫鈉、碳酸氫鉀)；堿金屬碳酸鹽(如碳酸鈉、碳酸鉀)；堿金屬氨化物(如氨基鈉、氨基鋰、氨基鉀)；堿金屬醇鹽(如甲醇鈉、乙醇鈉、甲醇鉀、乙醇鉀)；堿金屬(如金屬鋰、金屬鈉、金屬鉀)；堿土金屬(如鈣)；有機(jī)堿(如1，8-重氮-二環(huán)[5.4.0]十一-7-烯、二異丙胺、三乙胺、吡啶)或者類(lèi)似的堿。
(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯化合物(III)和2-氨基噻酚化合物(IV)、以及分子內(nèi)環(huán)化作用能夠在一個(gè)反應(yīng)釜中進(jìn)行。也就是說(shuō)，在(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯(III)和2-氨基噻酚(IV)反應(yīng)后，直接加入一種酸或一種堿到反應(yīng)混合液中去進(jìn)行分子內(nèi)的環(huán)化作用。
在上述的方法中，R是一種低烷基(如甲基、乙基)和A環(huán)是一個(gè)未取代的苯環(huán)或者是一個(gè)鹵代苯環(huán)的情況是優(yōu)選的，并且R和R1是甲基，R3是氫原子而且A環(huán)是一種未取代的苯環(huán)的情況是特別優(yōu)選的。將這樣得到的(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品((2S，3S)-1，5-benzothiazepine)進(jìn)行O-烷?；饔茫⑶覟镽3是氫原子、用常規(guī)的方法經(jīng)N-烷化作用，引入一個(gè)二-低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷基基團(tuán)，如果需要，通過(guò)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物能夠得到符合醫(yī)藥使用的，由下式(VI)所表示的化合物-(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品((2S，3S)-1，5-benzothiazepine)，或者是一種符合醫(yī)藥使用的一種鹽的形式的化合物。
其中，R4表示二-低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷基基團(tuán)；R5表示低烷酰基；R1和A環(huán)的定義同前述。
按照，例如日本專(zhuān)利所描述的方法(日本專(zhuān)利公開(kāi)No.16749/1971、No.13994/1988、No.28594/1990，日本專(zhuān)利公開(kāi)No.99471/1983或相類(lèi)似的方法、能夠容易地進(jìn)行O-烷酰化作用。同樣，R3是氫原子時(shí)，由N-烷基化作用，導(dǎo)入二-低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷基基團(tuán)是很容易進(jìn)行的，具體方法按照日本專(zhuān)利公開(kāi)No.16749/1971、No.13994/1988、No.28594/1990；日本專(zhuān)利公開(kāi)No.99471/1983、No.118377/1986、No.78673/1990、No.228117/1994和No.269026/1996，所描述的方法進(jìn)行。
在上述提及的轉(zhuǎn)化方法中，R1表示甲基，R3表示氫原子，R4表示二甲基氨乙基，R5表示乙?；?，和A環(huán)表示未取代的苯環(huán)的情況是優(yōu)選的。
在本說(shuō)明書(shū)中，低級(jí)烷基可以包括具有1至4個(gè)碳原子的一種直鏈或支鏈烷基，低級(jí)烷?；梢允前ň哂?至5個(gè)碳原子的一種直鏈或者支鏈烷?；?。
在工業(yè)中的實(shí)用性本發(fā)明所提供的方法，與PCT專(zhuān)利公開(kāi)No.Wo 95/07359所提供的用微生物沙雷氏菌屬(genus Serratia)產(chǎn)生的酶具有不對(duì)稱(chēng)酰胺化作用(2S，3R)-3-(4-低烷氧基苯)縮水甘油酸酯和(2R，3S)-3-(4-低烷氧基苯)縮水甘油酸酯的方法相比較，本發(fā)明具有明顯地快速、和很強(qiáng)的立體選擇性，反應(yīng)產(chǎn)物的分離、收集效率高。這樣得到的(2R，3S)-3-(4-低烷氧基苯)縮水甘油酸酯可用于制備(2S，3R)-1，5-苯并噻唑品((2S，3S)-1，5-benzothiazepine)化合物，例如，鹽酸硫氮酮(diltiazem)，這樣，利用本發(fā)明所提供的方法，由外消旋反式-3-(4-低烷氧基苯)縮水甘油酸酯有效地制備(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品((2S，3S)-1，5-benzothiazepine)。
實(shí)施例實(shí)施例1在200ml茄型長(zhǎng)頸瓶中，加入86ml甲苯；5g，外消旋反式-3-(4-甲氧基苯)縮水甘油酸甲酯(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“反式酯”)；14ml，2.65mole/L，叔-丁醇氨溶液；1g脂肪酶(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“脂肪酶SM”)來(lái)自粘質(zhì)沙雷氏Sr 41(國(guó)際保藏號(hào)No.FERM BP-487，保藏日2，20，1984，工業(yè)科學(xué)技術(shù)局發(fā)酵研究所，日本，現(xiàn)為生物傳感器和人類(lèi)技術(shù)國(guó)立研究院(NIBH)，地址1-3，Higashi 1-chome，Tsukuba-shi，IBARKI-KEN 305Japan)。在長(zhǎng)頸瓶密封后，混合液在30℃，轉(zhuǎn)速為300rpm反應(yīng)4.5小時(shí)，本反應(yīng)中所使用的脂肪酶SM，是按照日本臨時(shí)專(zhuān)利公開(kāi)No.78790/1994，參考例中所描述的方法制備的，用一種MF膜過(guò)濾殺菌(膜商品名EMP-313，Asahi Kasei)然后，冷凍干燥。前述日本專(zhuān)利參考例中所描述的橄攬油降解活性是4.95×105單位/g。在冰冷條件下，用氣體氨鼓泡注入正丁醇中，經(jīng)4小時(shí)，制備正-丁醇溶液氨(2.65mole/L)，用自動(dòng)電位滴定計(jì)(Kyoto Denshi Kogyo)測(cè)定氨的濃度。通過(guò)高壓液相色譜(HPLC)對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行分析，結(jié)果表明；50.4％的底物外消旋酯是被降解了(底物的摩爾數(shù)作為100％，下列相同)，而在反應(yīng)液中含有49.4％的(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯)縮水甘油酸甲酯(下述簡(jiǎn)稱(chēng)(2R，3S)酯)和49.6％的(2S，3R)-3-(4-甲氧基苯)縮水甘油酸酰胺(下述簡(jiǎn)稱(chēng)“(2S，3R)酰胺”)柱CHIRALCEL OB-H，Daicel Chemical Industries，Ltd.
流動(dòng)相正己烷∶異丙醇＝9∶1流速1.0ml/每分溫度40℃檢測(cè)235nm酶從反應(yīng)液經(jīng)過(guò)濾去除，過(guò)濾物用丙酮洗滌，濾液和洗滌液合并，通過(guò)減壓濃縮除去溶劑，將(26ml)甲苯加入余留物中，并溶解它，溶液通過(guò)玻璃纖維過(guò)濾，被過(guò)濾的物質(zhì)用甲苯洗滌。濾液和洗滌液合并并從混合液中除去甲苯，而得到類(lèi)似琥珀色的產(chǎn)物，加入甲醇(10ml)后形成結(jié)晶。晶體通過(guò)玻璃纖維過(guò)濾，而且用(5ml)甲醇洗滌二次，得到結(jié)晶的(2R，3S)酯2.07克，產(chǎn)率41％。濾液和洗滌液合并用冰冷卻，過(guò)濾收集沉淀的晶體，得到結(jié)晶的(2R，3S)酯0.15克，產(chǎn)率3％，如前所述，以同樣方式分析二種晶體，證明其光學(xué)純度為99.9％或更高。實(shí)施例2在直徑為1.5cm，長(zhǎng)度為12.3cm的六支試管中，每支都加入1.72cm的甲苯；100mg，外消旋酯；0.28ml，2.65mole/L的正-丁醇溶液氨、和20mg，脂肪酶SM，每支試管都用螺口帽封好，混合液在30℃，轉(zhuǎn)速300rpm下進(jìn)行反應(yīng)。從開(kāi)始反應(yīng)，在0分鐘、15分鐘、30分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、5小時(shí)時(shí)，分別取出一支試管，并在試管中加入N，N-二甲基甲酰胺終止酶反應(yīng)。每管取樣按上述同樣的方法進(jìn)行高壓液相色譜定量分析產(chǎn)物，結(jié)果表明從起始反應(yīng)經(jīng)2小時(shí)后，有49.9％的外消旋酯底物被降解，反應(yīng)液中含有49.9％的(2R，3S)酯，0.8％的(2S，3R)-3-(4-甲氧基苯)縮水甘油酸甲酯(如下稱(chēng)“(2S，3R)”酯)，和46.7％的(2S，3R)酰胺。
當(dāng)E值代表酶的立體選擇性，按照上述結(jié)果它可以按下列公式計(jì)算，由起始反應(yīng)2小時(shí)后從組分比率計(jì)算E值等于3457。
E＝1n[(1-C)(1-ee)]/1n[(1-C)(1+ee)]公式中1-C表示反式-3-(4-甲氧基苯)縮水甘油酸甲酯(含有二種光學(xué)異構(gòu)體，其后系指余留酯的量)的量。(根據(jù)所用過(guò)的外消旋酯的量作為1計(jì)算)，ee是(2R，3S)酯在余留酯中的光學(xué)純度，(根據(jù)底物光學(xué)純度100％作為1計(jì)算)。
不同間隔時(shí)間，在反應(yīng)混合液中，不同化合物的變化量列入下表1中，表1
實(shí)施例3在一支(1.5cm×12.3cm)的試管中裝入1.72ml的甲苯；100mg外消旋酯；0.28ml，2.65mlde/l的丁醇氨溶液；內(nèi)標(biāo)5μl，1，3-二甲氧基苯；和50mg，脂肪酶SM；試管用螺帽蓋封起來(lái)，反應(yīng)在40℃，300rpm，條件下進(jìn)行，反應(yīng)15分鐘，N，N-二甲基酰胺加入試管中以終止酶反應(yīng)，取部分反應(yīng)液樣品按上述相同方法，用HPLC定量測(cè)定產(chǎn)物，分析結(jié)果，表明作為底物的外消旋酯49.4％被降解，在反應(yīng)混合液中含有48.2％的(2R，3S)酯，僅含有2.3％的(2S，3R)酯。實(shí)施例4在一支試管(1.5×12.3cm)中，加入1.72ml有機(jī)溶劑；100mg，消旋酯；2.8ml，3.0mole/L的正-丁醇溶液氨；內(nèi)標(biāo)5μl 1，3-二甲氧基苯；和10mg的脂肪酶SM，試管用螺帽蓋封住，反應(yīng)液30℃，300rpm，反應(yīng)4小時(shí)。N，N-二甲基甲酰胺加入試管中終止酶反應(yīng)，以反應(yīng)樣液中取部分樣品，按前述的相同方法通過(guò)HPLC定量分析產(chǎn)物的量。反應(yīng)液中(2R，3S)酯和(2S，3R)酯的含量如表2所示。
權(quán)利要求
1.一種制備由式(III)表示的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯的方法
其中，R1表示一種低級(jí)烷基，R表示一種酯殘基，它包含(a)由下式(I)所示的一種外消旋反式-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯
其中，R1和R的定義與上相同，在來(lái)自屬于沙雷氏屬(genus Serratia)的一種微生物的能夠不對(duì)稱(chēng)酰胺化(2S，3R)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)-縮水甘油酸酯的酶的存在下和如下(II)式所表示的胺化合物作用，從而立體選擇性酰胺化(2S，3R)異構(gòu)體，R2NH2(II)其中，R2表示氫原子或一種低級(jí)烷基，(b)從反應(yīng)液中分離、收集余留的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯。
2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中R是一種低級(jí)烷基。
3.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中R2是氫原子。
4.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中R1和R都是甲基。
5.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中酶是脂肪酶或者是酯酶。
6.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于沙雷氏菌屬的微生物是粘質(zhì)沙雷氏菌。
7.一種制備由下式(V)所示的(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品((2S，3S)-1，5-benzothiazepine)的方法，
其中A環(huán)表示可以被取代的苯環(huán)；R1表示一種低級(jí)烷基，R3表示氫原子或一種二-低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷基基團(tuán)，包含將權(quán)利要求1所述的方法得到的(2R，3S)-3-(4-低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯作用于由下式(IV)所示的2-氨基噻酚。
其中，R3和A環(huán)表示的定義同前，當(dāng)需要時(shí)，產(chǎn)物的酯部分經(jīng)過(guò)水解后，產(chǎn)物要進(jìn)行分子內(nèi)的環(huán)化作用。
8.一種制備由下式(VI)所示的(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，
其中A環(huán)表示一種可以被取代的苯環(huán)；R1表示一種低級(jí)烷基；R4表示一種二低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷基基團(tuán)；R5表示一種低級(jí)烷?；?，將下式(V)代表的權(quán)利要求7的方法得到的化合物(2S，3S)-1，5-苯并噻唑品((2S，3S)-1，5-benzothiazepine)
其中R3表示氫原子或一種二低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷基基團(tuán)；A環(huán)和R1具有如上所述的定義，進(jìn)行O-烷?；饔茫?dāng)R3是氫原子時(shí)，進(jìn)行N-烷基化作用，引入一個(gè)二-低級(jí)烷基氨基-紙級(jí)烷基基團(tuán)，如果需要，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物成為一種制藥可接受的鹽。
9.按照權(quán)利要求8所述的方法，其中A環(huán)是一個(gè)未被取代的苯環(huán)；R1是甲基，R4是二甲基氨乙基；R5是乙酰基。
全文摘要
一種制備(2R,3S)－3－(4－低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯的新方法,和用提供同樣的方法制備(2S,3S)－1,5－苯并噻唑品((2S,3S)－1,5－benzothiazepine),這是一種有用的藥物,通過(guò)外旋反式－3－(4－低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯在酶的存在下與一種胺類(lèi)化合物作用,能夠生成(2R,3R)－3－(4－低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯,酶是從一種屬于沙雷氏屬(genus Serratia)的一種微生物得到的,具有不對(duì)稱(chēng)酰胺化(2S,3R)－3－(4－低級(jí)烷氧基苯基)－縮水甘油酯的能力,從而立體選擇性的酰胺化(2S,3R)異構(gòu)體,然后從反應(yīng)混合液中分離和收集殘留的(2R,3S)－3－(4－低級(jí)烷氧基苯基)縮水甘油酸酯,而且同樣,用產(chǎn)生的(2R,3S)－3－(4－低烷氧基苯基)縮水甘油酸酯與一種2－氨基苯酚化合物作用,水解產(chǎn)生的化合物,能夠制備(2S,3S)－1,5－苯并噻唑品((2S,3S)－1,5－benzothiazepine)。如果必要,使分子間環(huán)化作用和O－烷?；饔?以及,進(jìn)行烷化作用。
文檔編號(hào)C07D303/48GK1273608SQ9880981
公開(kāi)日2000年11月15日 申請(qǐng)日期1998年10月22日 優(yōu)先權(quán)日1997年10月27日
發(fā)明者柴谷武爾, 吉岡龍藏, 松前裕明, 出井晶子 申請(qǐng)人:田邊制藥株式會(huì)社