專利名稱：具有抗病毒活性的2－氨基－5,6－二氯苯并咪唑衍生物的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及苯并咪唑衍生物和它們在醫(yī)療中的應用，尤其是治療和預防病毒感染例如皰疹病毒引起的感染。本發(fā)明也涉及這些化合物的制備以及包含這些化合物的藥用制劑。
在DNA病毒中，皰疹病毒群是人類中非常普通的病毒性疾病的來源。該病毒群包括皰疹單純性病毒1型和2型(HSV)、水痘帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、非洲淋巴細胞瘤病毒(EBV)、人類皰疹病毒6型(HHV-6)和人類皰疹病毒7型(HHV-7)。HSV-1和HSV-2是一些人類最普遍的感染源。大多數(shù)這些病毒能夠存在于宿主的神經(jīng)細胞中；一旦感染，個體處于復發(fā)臨床感染表現(xiàn)狀態(tài)的危險中，該表現(xiàn)可能在體質(zhì)上和心理上是令人苦惱的。
同其它皰疹病毒一樣，CMV感染導致一種病毒與宿主終生的聯(lián)系。在懷孕期間來自母親感染的先天性感染可能產(chǎn)生一些臨床效應例如死亡或格羅斯病(小頭、肝脾大、黃疸、精神發(fā)育不全)，導致的失明的視網(wǎng)膜炎或一些不那么嚴重的形式，不能健康成長，以及易受胸部和耳部感染。在免疫力受損，例如由于惡性腫瘤、在器官移植手術(shù)中使用免疫抑制藥物處理或感染了人類免疫缺陷病毒的病人中。CMV感染可以導致視網(wǎng)膜炎、肺炎、胃腸道紊亂和神經(jīng)疾病。現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，一些下指的取代的苯并咪唑化合物具有抗病毒具體講抗CMV活性。根據(jù)這一方面，本發(fā)明提供式(Ⅰ)化合物，其立體異構(gòu)體或混合物；以及生理上的官能衍生物
其中R1代表H、C1-4烷基和C3-5環(huán)烷基；R2代表H、C1-4烷基；或R1和R2與氮一起形成一個4或5元的雜環(huán)；R3代表BR4或R4,其中B代表一個橋基-C(O)NH-、-C(O)NC1-4烷基或-C(O)O-；R4代表H、C1-4烷基、C2-6鏈烯基或鹵素(優(yōu)選為氟)；以及每個n獨立選自0、1或2的整數(shù)(優(yōu)選為0或1)。
優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物包括化合物，其中R1代表H、C1-4烷基和C3-5環(huán)烷基；R2代表H、C1-4烷基；或R1和R2與氮一起形成一個4或5元的雜環(huán)；R3代表I、Cl、Br、F、CH3或H；n為一個0、1或2的整數(shù)。優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物包括(a)其中R1為環(huán)丙基和R2為H的化合物；(b)其中R1或R2為H,而另一個為異丙基的化合物；(c)其中R1或R2為H，而另一個為叔丁基的化合物；(d)其中R1和R2與氮一起形成一個氮雜環(huán)丁烯基(azetidenyl)的化合物；(e)其中R3為F和n為0或1的化合物；(f)其中R3為C1-4烷基或C2-6鏈烯基和n為0或1的化合物。
可以接受式(Ⅰ)化合物可以以立體異構(gòu)體(α和β)和其混合物形式存在。
優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物的立體異構(gòu)體為1α、2α、4β異構(gòu)體(或相當?shù)?β、2β、4α異構(gòu)體)和1α、2β、4α(或相當?shù)?β、2α、4β異構(gòu)體)。優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物為(1b,2b,4a)-4-[5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1b,2b,4a)-4-[5,6-二氯-2-(氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1b,2b,4a)-4-[5,6-二氯-2-(叔丁基氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1α,2α,4β)-4-[5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(4-氟-5,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-4-碘-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊烷]二甲醇；
(1α,2α,4β)-[4-(4,5,6-三氯-2-(異丙胺)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-4-甲基-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(2-甲基-1-丙基)-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(包括其對映體)；和(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(包括其對映體)。
本發(fā)明進一步包括式(Ⅰ)化合物的每一可能的α和β異構(gòu)體和它們生理官能團衍生物，基本無任何其它幾何異構(gòu)體(就是說其它異構(gòu)體不超過約5％W/W，優(yōu)選不多于大約2％W/W，尤其不多于1％W/W)存在。接受除式(Ⅰ)化合物是以基本純的形式存在外(如上述)，它們也可以做為對映體、非對映異構(gòu)體、內(nèi)消旋結(jié)構(gòu)的混合物形式或一種外消旋混合物形式存在。所有這些幾何異構(gòu)體以及它們的任意組合的混合物都包括在本發(fā)明中。
在這里使用的術(shù)語“烷基”意思是直鏈或支鏈烷基。這些烷基基團優(yōu)選具有1到4個碳，具體講包括甲基、乙基、異丙基和叔丁基。
在本文中使用的術(shù)語“生理官能團衍生物”包括任何生理上可接受的鹽、醚、酯或式(Ⅰ)化合物的酯的鹽；或它們的溶劑化物；或在給予受體后能夠提供(直接或間接)此化合物或其抗病毒活性的代謝物或基團的任何其它化合物。例如，本發(fā)明的范圍也包括OH基中的H被一個潛在的可水解的基團如?；蛲榛〈?br> 按照本發(fā)明，優(yōu)選的酯獨立選自(1)羧酸酯，其中酯基團羧酸的非羰基的部分選自直鏈或支鏈烴基(例如甲基、正丙基、叔丁基或正丁基)、環(huán)烷基、烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(例如芐基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任選被以下基團取代的苯基如鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基)或氨基；(2)磺酸酯，例如芳基、烷基、烷芳基(alkylarl)或芳烷基磺?；?例如，甲苯磺?；图谆酋；?；(3)氨基酸酯(例如，L-纈氨?；騆-異亮氨酰)和(4)磷酸酯。在這些酯中，除非另加說明，任何烷基部分優(yōu)選包括1到18個碳原子，尤其是1到6個碳原子，更特別是含有1到4個碳原子。在這些酯中的任何環(huán)烷基部分優(yōu)選含有3到6個碳原子。在這些酯的中任何芳基部分優(yōu)選包括一個苯基。對以上任何化合物的所有參照也包括一個其生理上可接受的鹽的參照。
做為式(Ⅰ)化合物生理上可接受的鹽和它們的生理上可接受的衍生物的例子包括從一個合適堿衍生來的鹽，例如一個堿金屬(如鈉)、一個堿土金屬(如鎂)、銨和NX+4(其中X為C1-4烷基)。一個氫原子或一個氨基生理上可接受的鹽包括有機羧酸鹽如乙酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、羥乙磺酸鹽、乳糖酸鹽和琥珀酸鹽，有機磺酸鹽如甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽和無機酸鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽。磷酸鹽和氨基磺酸鹽。
從用于治療來說，式(Ⅰ)化合物的鹽是生理上可接受的，就是說它們是一個生理上可接受的酸或堿衍生的鹽。然而，不是生理上可接受的酸或堿所成的鹽也有用途，例如在制備或純化一個生理上可接受的化合物時。所有的鹽，不管是從一個生理上可接受的酸還是堿衍生來的鹽都在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
式(Ⅰ)化合物和它們的衍生物在下文中指根據(jù)本發(fā)明的化合物。當以后使用時(除非上下文另外需要)術(shù)語“活性組份”是指根據(jù)本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明進一步提供用于治療的根據(jù)本發(fā)明的化合物。
根據(jù)本發(fā)明可以治療的臨床疾病的例子包括那些上述討論的疾病，具體講是由HSV-1和2、HHV-6、VZV、EBV或CMV感染引起的疾病。
根據(jù)另一個方面，本發(fā)明提供(a)在感染的動物，例如哺乳動物(包括人)治療或預防病毒感染癥狀或后果的方法，該方法包括用有效治療量的本發(fā)明的化合物治療所述動物。按照本發(fā)明在這方面具體化的實例，所述病毒感染為一種皰疹病毒感染，如CMV、HSV-1、HSV-2、VZV、EBV或HHV-6。(b)根據(jù)本發(fā)明化合物在生產(chǎn)用于治療或預防病毒性感染，具體講一種包括CMV、HSV-1、HSV-2、VZV、EBV和HHV-6皰疹病毒感染的藥物中的用途。
式(Ⅰ)化合物除了用于上述病毒感染和相關(guān)疾病的治療或預防外，這些化合物還可以用于治療或預防心臟和血管疾病，具體地講再狹窄和血管成形術(shù)后的再狹窄。
按照本發(fā)明化合物可以通過下述任何合適的給藥途徑用于治療，這些途徑包括口服、直腸給藥、鼻腔給藥、局部給藥(包括透皮給藥、口腔含化給藥和舌下給藥)、陰道給藥和腸道外給藥(包括皮下、肌肉內(nèi)注射、靜脈給藥和皮內(nèi)注射)。接受優(yōu)選的給藥途徑隨著患者的疾病和年齡、感染的性質(zhì)和所選擇的活性組份變化。
一般而言對于上述每種疾病的合適的劑量是在每天每公斤體重患者0.01到250mg范圍內(nèi)，優(yōu)選是在每天每公斤體重0.1到100mg范圍內(nèi)，最優(yōu)選是在每天每公斤公重1.0到20mg范圍之內(nèi)。(除另加說明外，所有的活性組分的重量是按照式(Ⅰ)母體化合物計算的；對于它們的鹽或酯，重量按比例增加)。所需的劑量優(yōu)選在一天中以適當?shù)拈g隔以2、3、4、5、6或更多個亞劑量提供。這些亞劑量可以用單位劑量形式給藥，例如每單位劑量包含10到1000mg，優(yōu)選20到500mg，更優(yōu)選100到400mg活性成份。
理想地，給予活性組份使活性化合物的最高血漿濃度為約0.025到約100μM，優(yōu)選約0.1到70μM，更優(yōu)選約0.25到50μM。這一濃度可以達到，例如通過靜脈注射含活性組份的0.1到5％的溶液(任選在生理鹽水溶液中)或使用包含約0.1到約250mg/kg活性組份的藥團口服給藥。通過提供約0.01到約5.0mg/kg/h藥量的連續(xù)輸注或通過含有約0.4到約15mg/kg的活性組份藥量的間歇輸注維持所需的血液水平。
當活性組分作為原料服用是可能的時候，優(yōu)選作為一種藥用制劑提供。本發(fā)明的制劑包括至少一種活性組分，正像以上所定義的，與它的一種或更多種可接受的載體以及任選的其他治療藥物。每一種載體必須是“可接受的”，這意思是每一種載體要與制劑中的其他組份相容并且對患者無害。制劑包括適合于以下給藥方式口服、直腸給藥、鼻腔給藥、局部給藥(包括透皮給藥、口腔含化給藥和舌下給藥)、陰道給藥或非經(jīng)腸給藥(包括皮下給藥、肌內(nèi)注射、靜脈給藥和皮內(nèi)注射)。所述制劑可以以單位劑量形式方便地提供和可以通過制藥領域熟知的方法制備。這些方法包括將活性組份與包括一種或更多種附屬組份的載體混合。一般而言，制劑的制備是通過活性組分和液態(tài)載體或精細的固體載體或兩者均勻地和緊密地混合，然后如果必要將產(chǎn)物制成型。
適合于透皮給藥的組合物可以通過適于與患者的表皮層保持緊密接觸較長時間的區(qū)分的貼劑形式提供。此類貼劑適合包括下列形式的活性化合物1)在任選緩沖的水溶液中，或2)溶解和/或分散在粘附劑中，或3)分散在聚合物中?；钚曰衔锖线m的濃度為大約1％到25％，優(yōu)選大約3％到15％。作為一種特殊的可能性，活性化合物可以通過像在Pharmaceutical Research,3(6),318(1986)中一般描述的電子轉(zhuǎn)移或離子滲透法從貼劑上釋放出。
本發(fā)明適合于口服使用的組合物可以作為獨立單位如膠囊、caplets、小藥囊或片劑，這些劑型每一種都包含預定數(shù)量的活性組分；作為一種粉劑或顆粒劑；作為溶液或在水或非水液體中的懸浮劑；或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑等提供?；钚越M份也可以作為一種大丸劑、干糖漿劑或糊劑提供。
片劑可以通過壓片或鑄模制成，任選含有一種或多種附加組份。壓縮片可以通過在合適機器上壓縮活性成份制得，活性組份為自由流動形式如藥粉或顆粒，并任選同下列物質(zhì)混合粘合劑(如povidone、明膠、羥丙基甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(如羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)povidone、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑。鑄模片(molded)可以通過在合適機器上澆鑄用惰性液體稀釋劑濕潤的化合物制備。所述片劑可以任選包衣或刻字并用例如變化比例的羥丙基甲基纖維素制備制劑以提供緩釋或控釋活性組份得到所需的釋放。藥片可任選以腸溶衣提供能在腸內(nèi)釋放而不在胃內(nèi)釋放。
適合口中局部使用的制劑包括糖錠劑-含有在矯味介質(zhì)中的活性組份，矯味介質(zhì)通常為蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠；錠劑-含有在惰性基質(zhì)如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中的活性組分；漱口劑-含有在適當液體載體中的活性組份。
適合于直腸給藥的制劑可以做為栓劑使用，該栓劑是由合適的基質(zhì)包括例如可可脂或水楊酸鹽組成。
適合于陰道給藥的制劑可以作為陰道栓劑、塞子、乳膏劑、凝膠劑、糊劑、泡騰劑或噴霧劑形式提供，這些制劑除了包含活性組份外，也包括本領域已知適當?shù)妮d體。
適合于非腸道給藥的制劑包括水和無水等滲無菌注射溶液，該溶液可以包括抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和以及使制劑與治療的受體血液等滲的溶質(zhì)；及可以包括懸浮劑和增稠劑的水和非水性無菌懸浮液。這些制劑可以以單位劑量或封裝于容器例如安瓿和管制瓶中多劑量提供，并可以以凍干(冷凍干燥)條件儲存，使用前僅需要加入無菌液體載體例如注射用水。即時的注射溶液和懸濁液可以用無菌粉、顆粒和先前描述的片劑制備。
優(yōu)選的單位劑量制劑是那些包含一天的劑量或每天亞劑量單位(正像以前敘述的)或活性組份的適當?shù)牟糠值闹苿?br> 應該理解，除了上面提到的組份以外，本發(fā)明的制劑可以包括其他在該領域常規(guī)制劑中涉及的試劑，例如適合于口服給藥的還進一步包括像甜味劑、增稠劑和矯味劑。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可以單獨應用或與其他治療劑聯(lián)合使用治療上面提到的感染或疾病。根據(jù)本發(fā)明聯(lián)合治療方法包括給予至少一種式(Ⅰ)化合物或其生理官能團衍生物和至少一種其他生理上可接受的試劑。活性組份和生理上可接受的組份可以聯(lián)合給予或單獨給予，當單獨給藥時可以同時或以任何順序相繼給予。對活性組分和生理上可接受的組份的量和相對給藥時間進行選擇以達到所需的協(xié)同治療效果。優(yōu)選的聯(lián)合治療方法包括給予一種式(Ⅰ)化合物或其生理上的官能團衍生物和一種下述的試劑。
此類進一步的治療劑的實例包括對皰疹病毒感染治療有效的治療劑為阿昔洛韋、penciclovir、famciclovir(Penciclovir的二乙酸酯)、L-纈氨酸2-[(2-氨基-1,6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基]-乙酯、膦?；姿岷挽Ⅴ；宜?、丙氧鳥苷、(S)-1-(3-羥基-2-膦?；籽趸?-胞嘧啶(HPMPC)和OxetanocinG。
最優(yōu)選的聯(lián)療法包括以上列出的治療劑和式(Ⅰ)化合物之一(尤其在此列出的化合物)一起聯(lián)合使用。
本發(fā)明進一步提供制備式(Ⅰ)化合物或其生理官能團衍生物的方法(像在上文中定義的)，該方法包括(A)使式(Ⅱ)化合物
(其中R1、R2和R3如同上述所定義)與式(Ⅲ)化合物或其保護的形式反應
(其中L為離去基團和n為如上述所定義)；(B)使式(Ⅳ)一個化合物
(其中n和R3為上述所定義的)或其保護的形式與一種或多種合適的試劑反應，并/或在一定條件下使式(Ⅳ)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槭?Ⅰ)的化合物；(C)使式(Ⅴ)化合物或其保護的形式
(其中L1為離去基團，優(yōu)選為鹵素如Cl、Br、F和I，并且R3和n為上文中所定義的)反應；(D)使式(Ⅰ)或式(Ⅴ)或兩者之一的受保護的形式(其中化合物(Ⅰ)和(Ⅴ)為上文中定義的，其中R3代表H)與烷基鋰堿反應，并且隨后使中間體與選擇的親電試劑反應使R3(其中R3與上述定義的相同)轉(zhuǎn)化為不是H的任何基團。
優(yōu)選在步驟(D)中，和烷基鋰堿(優(yōu)選仲-丁基鋰)的初始反應是在低溫下(優(yōu)選-20℃以下)進行的，優(yōu)選和式(Ⅰ)或(Ⅴ)化合物的保護形式。將中間體化合物轉(zhuǎn)變成式(Ⅰ)的化合物的第二階段是用合適的親電基團產(chǎn)生所需的R3基團，例如，C1-4烷基或C2-6鏈烯基鹵化物、二氧化碳、鹵化劑或羰基化合物。這些步驟參照在V.Snieckus,Chem.Rev.,1990，第90卷，第879-933頁中描述的步驟可以進行。
優(yōu)選的保護基團為甲硅烷基保護基團，優(yōu)選叔-丁基二甲基硅烷基。
式(Ⅲ)化合物可以按照Depres和Greene(J.Org.Chem.1962年，27:2395-2398)中描述的步驟制備。
式(Ⅳ)化合物可以通過使式(Ⅲ)化合物和1,2,4-三氯-5-硝基苯(從Aldrich公司購買)反應制得。
式(Ⅴ)化合物可以通過使式(Ⅵ)的化合物(其中R3為在上文中定義的)和N-鹵代琥珀酰亞胺(從Aldrich公司購買)反應制備。
發(fā)現(xiàn)式(Ⅴ)中間體也有抗病毒活性并且代表本發(fā)明的另一方面，優(yōu)選其中L1為Br。
下面的實施例僅僅用來說明并且在任何方面都不打算限制本發(fā)明的范圍。用于這些實施例中的術(shù)語“活性組份”是指式(Ⅰ)化合物或其生理官能團衍生物。實施例1(1α,2α,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇a)(1α,2α,4α)-1,2-二甲醇環(huán)戊烷-4-醇向一個上口配有一機械攪拌、500ml加料漏斗、低溫溫度計和氮氣入口的3L燒瓶中，通過一插管加入1M溶于四氫呋喃中(Aldrich公司Sure Seal,1.1L)的氫化鋁鋰。將上述反應液攪拌并冷卻(干冰/丙酮浴)到10℃(內(nèi)部溫度)，將溶于四氫呋喃(Mallinckrodt,500ml)的順式-4-氧代-1,2-環(huán)戊二羧酸二甲酯(68.0g,0.340mol)溶液(Gais et al.,J.Org.Chem.1989,54:5115-5122)滴加到反應液中，以便內(nèi)部溫度不要上升超過0℃(大約2h)。將冷卻浴移去，然后將反應液升到室溫并攪拌2小時。將氟化鈉(Aldrich 99％,289g)分次加入到上述反應液中，將生成的淤漿在室溫下攪拌1小時，然后冷卻到0℃(NaCl/冰浴)，同時將水(205ml)在四氫呋喃(500ml)中所得的溶液加入以使內(nèi)部溫度始終保持在0℃。上述溶液加完以后(約3小時)，使反應液升至室溫并攪拌1小時。將淤漿抽濾，將濾餅打碎，于20∶4∶1的四氫呋喃-甲醇-水(1500ml)中攪拌直到固體成自由流動態(tài)，然后再抽濾。上述過程在加入1∶1甲醇-四氫呋喃(1L)后重復一次然后將合并的濾液在減壓下濃縮，和無水乙醇共蒸餾后得到一種粘稠油狀物。將該油狀物溶于5∶1氯仿-甲醇(500ml)中然后通過快速硅膠塞抽濾，用溶劑(大約500ml)洗脫直到在硅膠層析板過濾物的薄層層析(用10％甲醇-氯仿作展開劑)展開后，用磷鉬酸試劑(20％乙醇溶液，Aldrich)顯色表明無產(chǎn)物為止。將合并的濾液在減壓下濃縮，和無水乙醇共蒸發(fā)，得到為無色糖漿狀的標題化合物(50.5g,97％)；1H-NMR(DMSO-d6,200MHz)δ:4.58(m,3,3OH),4.01(m,1,CHOH),3.53T 3.38(兩個m，每個2H,2CH2OH),2.01,1.86,1.22(單m，每個2，環(huán)戊基CH)，通過在4.11(3OH)處的多重曲線積分算出包含約4％的4b-異構(gòu)體。計算值C7H14O3·0.35H2O:C,55.14；H,9.72。實測值C,55.02；H,9.78。(b)(5a’-α,8a’-α,7’-β)-六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因(oxepin))-7-醇將新蒸餾的環(huán)己酮(Aldrich,400ml)加入到含有(1α,2α,4α)-1,2-二甲醇環(huán)戊-4-醇(a部分，16.9g,0.116mmol)、對-甲苯磺酸一水合物(0.045g,0.236mmol,Aldrich,99％)和20g4分子篩(Davidson,8-12目，事先在800℃干燥)的1L燒瓶中。上述混合物用塞子塞住并在室溫下激烈攪拌24小時，此時，用硅膠層析板薄層析層用10％甲醇-氯仿作展開劑顯示反應完成。加入碳酸氫鈉(0.044g,0.525mmol)和氯仿(300ml)并且將混合物通過快速硅膠柱抽濾，用另一份氯仿(500ml)洗。減壓蒸發(fā)溶劑然后將剩余的固體用己烷-乙酸乙酯重結(jié)晶，得到為白色固體的標題化合物(22.53g,86％),m.p.92-95℃。計算值C13H22O3:C,68.99；H,9.80.實測值C,69.14；H,9.89.c)(5a’-α,7’-α,8a’-α)-六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-醇向攪拌的(5a’-α,8a’-α,7’-β)-六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-醇(b部分，22.5g,99.4mmol)、三苯基膦(Aldrich,27.7g,104mmol99％)和冰醋酸(6.00ml,104mmol)溶液中，在0℃氮氣下，滴加偶氮二羧酸二乙酯(Aldrich,16.9ml,104mmol,97％),用半小時加完。使生成的淤漿升溫到室溫，再攪拌2小時，然后放入冰箱過夜。將氧化三苯膦和肼二羧酸二乙酯通過抽濾移出。將濾液用10∶1己烷-乙酸乙酯稀釋，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。濃縮并加入更多的己烷剩余的Mitsunobu副產(chǎn)物沉淀。濾液通過一快速硅膠-60(230-400目)柱抽濾，用20％乙酸乙酯-己烷洗脫。將揮發(fā)物蒸發(fā)并且將殘留的油狀物溶解在1∶1四氫呋喃-甲醇(200ml)中，加入1N氫氧化鈉水溶液(50ml)在室溫下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋，用氯仿萃取，將合并的有機層干燥(硫酸鈉)，過濾，濃縮。從己烷-乙酸乙酯中重結(jié)晶得到白色針狀的標題化合物(17.2g,76％),m.p.110℃。計算值C13H22O3:C,68.99；H,9.80.實測值C,69.02；H,9.79.d)(1α,2α,4α)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(5a’-α,7’-α,8a’-α)-六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-醇(C部分，3.00g,13.3mmol)、三苯基膦(Aldrich,4.17g,15.9mmol,99％)、5,6-二氯苯并咪唑(Townsend和Revankar,Chem.Rev.1970,70∶389,和在那里引用作參考的文獻)(2.98g,15.9mmol)于0℃氮氣下(外部冰浴)在元水四氫呋喃(Aldrich Sure Seal,80ml)中攪拌，同時用30分鐘將偶氮二羧酸二乙酯(Aldrich,2.50ml,15.9mmol,97％)在四氫呋喃(20ml)中的溶液加入。將反應物升溫到室溫，攪拌36小時，然后用氯仿(500ml)稀釋，用0.1N氫氧化鈉溶液(100ml)洗。有機層干燥(硫酸鈉)，過濾，并將溶劑在減壓下蒸發(fā)。將殘留膠狀物溶解于四氫呋喃(200ml)和0.1N HCl(20ml)中，并在室溫下攪拌72小時，用硅膠層析板薄層層析，以10％甲醇-氯仿作展開劑顯示大約有10％起始原料存在。另加入20ml 0.1N的鹽酸并繼續(xù)攪拌24小時。用1N氫氧化鈉將pH調(diào)到6-7，將溶液減壓濃縮，與乙醇共蒸發(fā)，得到一種固體(用硅膠60通過快速層析法純化)。用5-25％甲醇-氯仿洗脫得到白色固體狀標題化合物(3.17g,76％),mp 192-195℃。計算值C14H16N2O2Cl2:C,53.35；H,5.12,N,8.89,Cl,22.50.實測值C,53.49；H,5.09,N,8.83,Cl,22.57.e)(1α,2α,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二乙基二甲酸酯向攪拌的(1α,2α,4α)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(d部分，2.90g,9.2mmol)溶于無水吡啶(100ml)所得的溶液中加入醋酸酐(4.30ml,46.0mmol)。12小時后，將反應混合物減壓濃縮，與甲苯共蒸發(fā)，得到一種粘稠油狀物。加入乙醇(大約5ml)(外部用冰浴冷卻)然后將反應混合物再與甲苯(2X)共蒸發(fā)直到無乙酸氣味為止。將油狀物重新溶解于氯仿(200ml)中，并依次用0.1NHCl(50ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗。用硫酸鈉干燥有機層，然后通過快速硅膠60層析柱(3×4cm)抽濾，用5％甲醇-氯仿(200ml)洗。在減壓下蒸發(fā)出溶劑得到一種淡棕色膠狀物(3.92g),將該膠狀物溶解在無水四氫呋喃(Aldrich Sure Seal,70ml)中，在氮氣下和攪拌下加熱回流，將N-溴代琥珀酰亞胺(Aldrich,3.28g,18.4mmol)一次性加入?；亓?0分鐘后，用硅膠層析板薄層層析法，2％甲醇-氯仿作展開劑顯示反應完成。將黃色的溶液冷卻到室溫，用氯仿(500ml)稀釋并用飽和碳酸氫鈉溶液(3×100ml)洗。將有機層干燥(硫酸鈉)，過濾，在減壓下濃縮，得到一種棕色膠狀物-通過硅膠60快速層析法純化。用50％乙酸乙酯-己烷洗脫得到一種灰白色的標題化合物(3.22g,75％)tlc顯示為層析均一的，其1H-NMR與下面描述的一致。將此樣品從無水乙醇中重結(jié)晶，得到白色結(jié)晶固體的標題化合物，m.p.107-109℃；質(zhì)譜(Cl/CH4)476.9(63％),478.9(100％),480.9(49％)；1H-NMR(CDCl3,200MHz)δ:8.07,7.97(兩個s,1每個，苯并咪唑CH),5.04(m,1,CHN),4.23(m,4,2CH2OAc),2.61(m,2,環(huán)戊基CH),2.21(m,4,環(huán)戊基CH),2.08(s,6,2OAc).計算值for C18H19BrCl2N2O4:C,45.21；H,4.01,N,5.86,Br,16.71,Cl,14.83.實測值C,45.31；H,4.03,N,5.91,Br,16.66,Cl,14.79.f)(1α,2α,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(1α,2α,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二乙基二甲酸酯(e部分，2.90g,6.06mmol)溶解于1∶1甲醇-乙醇(200ml)中。加入碳酸鈉(640mg,6.06mmol)在水(40ml)中所成的溶液，并將反應混合物在室溫下攪拌反應5小時。然后用冰醋酸將pH調(diào)到5并將溶劑在真空下蒸發(fā)。將殘余固體在水中制成淤漿直到這種固體可以自由流動，然后抽濾并且在真空中干燥過夜，得到一種白色固體狀標題化合物。(2.27g,98％),m.p.190-195℃；質(zhì)譜(Cl/CH4):392.8(60％),394.8(100％),396.8(46％)；1H-NMR(CDCl3,200MHz)d:8.44,8.41(兩個s,1每個，苯并咪唑CH),4.98(m,1,CHN),4.98(bs,2,2OH),3.68(m,4,2CH2OH),2.30-1.95(m,6H環(huán)戊基CH).計算值C14H15BrCl2N2O2:C,42.67；H,3.84,N,7.11,Br,20.28,Cl,17.99.實測值C,42.74；H,3.91,N,7.10,Br,20.23,Cl,17.95.實施例2(1α,2α,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(1α,2α,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(實施例1,500mg,1.27mmol)和環(huán)丙胺(Aldrich,4.30ml,6.34mmol)在無水乙醇(20ml)中的溶液在氮氣下回流4天，用薄層層析(硅膠板，用5％甲醇-氯仿作展開劑)顯示完全轉(zhuǎn)變成低Rf的產(chǎn)物。加入1N氫氧化鈉(1.3ml)并將反應混合物減壓下濃縮。殘留固體用硅膠60層析法純化。標題化合物用10％甲醇-氯仿洗脫，蒸發(fā)溶劑后得一種白色泡狀物(370mg,79％)m.p.190-200℃；質(zhì)譜(Cl/CH4):
370.0(100％),372(67％)；1H-NMR(CDCl3,200MHz)δ:7.79,7.44(兩個s,1每個，苯并咪唑；CH),7.25(bs,1,NH),4.91(t,J=4.3Hz,2OH),4.71(m,1,CHN),3.68(m,4,2CH2OH),2.78(m,1,NCH-c-Pr),2.21-1.95(m,6，環(huán)戊基CH),0,73(m,2,c-PrH),0.56(m,2,c-PrH).計算值C17H21Cl2N3O2:C,55.14；H,5.72,N,11.35,Cl,19.15.實測值C,55.01；H,5.83,N,11.14,Cl,19.02.實施例3(1α,2α,4β)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇a)(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇Mitsunobu反應(Mitsunobu,Synthesis 1981,1-28)、解封和純化按實施例1,d部分中所述進行的一樣，使用(5a’-α,8a’-α,7’-β)-六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-醇(實施例1中b部分，3.21g,14.2mmol)、三苯基膦(Aldrich,4.51g,17.01mmol,99％)、5,6-二氯苯并咪唑(Townsend和Revankar,Chem.Rev.1970,70,389，和在那里引用的參考的文獻)(3.18g,17.0mmol)溶于無水四氫呋喃(60ml)和偶氮二羧酸二甲酯(Aldrich,2.80ml,17.01mmol,97％)溶于四氫呋喃(20ml)的溶液中。獲得標題化合物，是一種白色固體(2.58g,63％),m.p.163℃計算值C14H16N2O2Cl2:C,53.35；H,5.12,N,8.89,Cl,22.50.實測值.C,53.36；H,5.19,N,8.81,Cl,22.40.b)(1α,2α,4β)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二乙基二甲酸酯酰化反應、溴化反應和純化反應按實施例1中e部分所述進行，開始用(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(本實施例a部分，2.50g,7.93mmol)、溶于吡啶(50ml)中的醋酸酐(3.70ml,40.0mmol)，然后用溶于四氫呋喃(70ml)中的N-溴代琥珀酸亞胺(2.82g,15.83mmol)，得到白色固狀標題化合物(3.30g,87％),m.p.125-130℃；1H-NMR(CDCl3,200 MHz)δ:7.99,7.96(兩個s,1每個，苯并咪唑CH).5.36(m,1,CHN),4.12(明顯的d,J=6.1 Hz,4,2CH2OAc),2.88(m,2,2CHCH2OAc),2.41-2.04(m,4,環(huán)戊基CH),2.07(s,6,2OAc).計算值C18H19BrCl2N2O4:C,45.21；H,4.01,N,5.86,Br,16.71,Cl,14.83.實測值C,45.15；H,4.14,N,5.74,Br,16.63,Cl,14.83.c)(1α,2α,4β)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇解封和純化按實施例1中f部分所述進行，開始用(1α,2α,4β)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲二乙酸酯(本實施例b部分，3.15g,6.59mmol)溶于1∶1甲醇-乙醇(260ml)中和碳酸鈉(0.70g,6.59mmol)溶于水(40ml)的溶液并且反應一個小時，得到標題化合物(2.23g,86％),m.p.155-162℃；1H-NMR(CDCl3,200 MHz)δ:7.97,7.88(兩個s,1每個，苯并咪唑CH),5.39(m,1,CHN),4.65(bt,J-1Hz,2,2OH),3.54(m,4,2CH2OH),2.63-2.10(m,6，環(huán)戊基CH).計算值C14H15BrCl2N2O2·0.60 H2O:C,41.16；H,4.10,N,6.86,Br，17.36,Cl,19.56.實測值C,41.18；H,4.04,N,6.87,Br,17.38,Cl,19.59.實施4(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(1α,2α,4β)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(實施例3中c部分，500mg,1.22mmol)溶于環(huán)丙胺(10ml)所得的溶液攪拌并在Parr瓶中加熱(80℃，外部浴溫)12小時。加入1N氫氧化鈉(1.22ml)，在減壓下蒸發(fā)溶劑，然后將生成的固體通過硅膠60快速層析法純化。用2-10％甲醇-氯仿作洗脫劑得到一種灰白色泡沫狀物，將該泡狀物于乙醇-水中作成淤漿并抽濾，得到白色固體狀標題化合物(360mg,80％),m.p.215℃；質(zhì)譜(Cl/CH4):370.0(100％),372.0(69％)；1H-NMR(CDCl3,200MHz)δ:7.49,7.29(每個s,1兩個，苯并咪唑e CH),7.19(bs,1,NH),4.89(m.1.CHN),4.56(bt,J=4.9 Hz,2,2OH),3.57-3.38(m,4,2CH2OH),2.76(m,1,NCH-c-Pr),2.01(m,6，環(huán)戊基CH),0.73(m,2,c-PrH),0.56(m,2,c-PrH).計算值C17H21Cl2N3O2:C,55.14；H,5.72,N,11.35,Cl,19.15.實測值C,55.37；H,5.81,N,11.12,Cl,18.87.實施例5(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(1α,2α,4β)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(實施例3中c部分，600mg,1.47mmol)和溶于無水乙醇(5ml)的異丙胺(1.80ml,21.9mmol,Fluka)回流3天。再加入1.8ml的異丙胺并繼續(xù)回流24小時。加入1N氫氧化鈉(1.50ml)，將反應物減壓下濃縮并將殘留固體通過硅膠60快速層析法純化。用10％甲醇-氯仿洗脫，并將溶劑蒸發(fā)得到固態(tài)泡沫狀物，將該泡沫物在水中作成淤漿，然后抽濾，得到白色固體狀標題化合物(430mg,79％),m.p.206-209℃；質(zhì)譜(Cl/CH4):
1H-NMR(CDCl3,200 MHz)δ:7.40,7.26(兩個s,1，苯并咪唑 CH),6.67(bd,J=7.5Hz,1,NH),4.97(m,1,CHN),4.58(t,J=5.1Hz,2,2OH),4.03(m,1H,CHNCHMe2),3.59-3.39(m,4,2CH2OH),2.02(m,6，環(huán)戊基 CH),1.24(d,J=6.6Hz,6,2Me).計算值C17H23Cl2N3O3:C,54.85,H,6.23,N,11.29,Cl,19.05.實測值C,54.77,H,6.20,N,11.21,Cl,18.97.實施例6(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇a)N-(3-環(huán)戊烯-1-基)氨基甲酸芐酯將溶于無水苯(360ml)的3-環(huán)戊烯-1-羧酸(Depres和Greene,J.Org.Chem.1962,27:2395-2398)(30.5g,0.272mol)溶液攪拌，同時用20分鐘將二苯基磷酰疊氮物(Aldrich,74.85g,0.272mol,97％)和溶于苯(130ml)的三乙胺(41.7ml,0.299mol)溶液加入。將上述溶液回流2小時，然后加入芐醇(32.4ml,0.313mol)。將反應液加熱回流20小時，冷卻，并在真空下濃縮得到一種棕色油狀物。該油狀物溶于乙酸乙酯(600ml)中所得的溶液用0.5N鹽酸(300ml)洗，后用水(2×350ml)洗，再用飽和碳酸氫鈉(300ml)水溶液洗，干燥(硫酸鈉)。蒸發(fā)得到白色固體標題化合物(41.0g,69％),1H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。將此產(chǎn)物從乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶得到N-(3-環(huán)戊烯-1-基)氨基甲酸芐酯，為無色蠟狀結(jié)晶，m.p.56-57℃。計算值C13H15NO2:C,71.87；H,6.96；N,6.45.實測值C,71.79；H,6.94；N,6.48.b)(1β,3α,4β)-N-(3,4-二羥基-1-環(huán)戊基)氨基甲酸芐酯和(1-a,3-a,4a)-N-(3,4-二羥基-1-環(huán)戊基)氨基甲酸芐酯將N-(3-環(huán)戊烯-1-基)氨基甲酸芐酯(實施例6中a部分，28.0g,0.128mol)、N-甲基嗎啉N-氧化物(Aldrich,25.1ml 60％的水溶液，0.145mol)和四氧化鋨(Aldrich,2.6ml,2.5％叔-丁醇溶液)在丙酮(350ml)中的溶液回流8小時。再加入2.6ml的四氧化鋨溶液并繼續(xù)回流5小時。將反應液在真空下濃縮并將殘留油狀物通過硅膠層析法純化。用10％的甲醇-氯仿洗脫得到含有(1β,3α,4α)-N-(3,4-二羥基-1-環(huán)戊基)氨基甲酸芐酯白色固體(9.2g,28％)的組分，m.p.136-138℃。計算值C13H17NO4·0.20 H2O:C,61.26；H,6.88；N,5.50.實測值C,61.26；H,6.67；N,5.56.繼續(xù)洗脫硅膠柱得到含有標題化合物(4.0g,12％)的一種混合物組分，接著是包含純(1α,3α,4β)-N-(3,4-二羥基-1-環(huán)戊基)氨基甲酸芐酯的組份，為白色固體(7.50g,23％),m.p.105-107℃。計算值C13H17NO4:C,62.15；H,6.82；N,5.58.實測值C,61.98；H,6.97；N,5.51.c)(1α,2α,4β)-4-(4,5-二氯-2-硝基苯胺基)-1,2-環(huán)戊烷二基二乙酸酯于氫氣(45psi)下，將(1β,3α,4β)-N-(3,4-二羥基-1-環(huán)戊基)氨基甲酸芐酯(實施例6中b部分，11.0g,43.8mol)在醋酸(250ml)中的溶液在帕氏振動器上于室溫和10％的鈀-炭(1g)一起振搖1.25小時。將催化劑過濾掉(硅藻土)，并將揮發(fā)物質(zhì)在真空中蒸發(fā)掉。將蒸餾殘余油狀物溶解于干燥的二噁烷(100ml)-N,N-二甲基酰胺(15ml)中，并在氮氣環(huán)境下和無水碳酸鉀粉(24.2g,0.175mol,98％)、1,2,4-三氯-5-硝基苯(Aldrich,10.17g,43.8mmol,97％)一起回流4天。將固體過濾出并將濾液在真空下濃縮得到一種紅色油狀物。將油狀物與吡啶(100ml)-醋酸酐(11ml)在室溫下攪拌24小時。將揮發(fā)物蒸發(fā)掉并將殘留物溶解在氯仿中。上述氯仿溶液先用飽和碳酸氫鈉水溶液洗，然后用飽和氯化鈉水溶液洗，用硫酸鈉干燥。蒸發(fā)出揮發(fā)物后得到黃色固體標題化合物(10.8g,63％)。將上述樣品從硅膠柱上用氯仿洗脫得到標題化合物，黃色結(jié)晶，m.p.164-166℃。計算值C15H16N2O6Cl2:C,46.05；H,4.12；N,7.16；Cl,18.12.實測值C,45.98；H,4.16；N,7.08；Cl,18.16.
d)(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯將(1α,2α,4β)-4-(4,5-二氯-2-硝基苯胺基)-1,2-環(huán)戊烷二基二乙酸酯(實施例6中c部分，10.8g,27.6mmol)、鐵粉(Fisher電解的，94.5％,7.71g,138毫當量)和硫酸亞鐵7水合物(Aldrich,3.84g,13.8毫克當量)溶于3∶1乙醇-水(300ml)所得溶液的混合物在攪拌下一起回流1.5小時。將固體物濾除，濾液在真空下濃縮得到棕色油狀物。將油狀物溶于氯仿(125ml)的溶液與原甲酸三乙基酯(6.9ml,41.4mmol)和甲磺酸(0.18ml,2.76mmol)一起回流1.0小時。用飽和碳酸氫鈉溶液(75ml)洗滌冷卻的溶液然后干燥(硫酸鈉)。將揮發(fā)物蒸發(fā)(減壓)并將殘留的油狀物溶解在干燥的四氫呋喃(150ml)中然后回流，同時將固體N-溴代琥珀酰亞胺(Aldrich,9.82g,52.2mmol)一次性加入。繼續(xù)回流20分鐘。冷卻的反應液用氯仿(200ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液(75ml)洗，然后用水(3×75ml)洗，干燥(硫酸鈉)。在真空下將揮發(fā)物蒸發(fā)并將殘留固體通過硅膠層析法純化。用1％甲醇-氯仿洗脫得到白色固體狀標題化合物，從乙酸乙酯-己烷(6.73g,54％)中結(jié)晶，在DMSO-d6中的1H-NMR與結(jié)構(gòu)相符。從乙醇中重結(jié)晶得到(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯，白色結(jié)晶，m.p.180-182℃。計算值C16H15N2O4Cl2Br:C,42.69；H,3.36；N,6.22；總Cl,23.63.實測值C,42.86；H,3.43；N,6.15；總Cl,23.53.e)(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇將(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯(實施例6中d部分，640mg,1.42mmol)加到由碳酸鈉(150mg)和1∶4∶4水-甲醇-乙醇(27ml)組成的混合物中，將該混合物在室溫下攪拌1.25小時。用冰醋酸中和后，在真空下將揮發(fā)物蒸發(fā)。殘留固體從乙醇-水中重結(jié)晶得到(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇，白色晶體(340mg,65％),m.p.100-105℃；1H-NMR(DMSO-6)δ:7.96和7.89(兩個s,1每個，2芳香的CH),5.4-5.3(m,1,NCH),4.84(d,J=4.3Hz,2,2 OH),4.4-4.3(m,2,2OCH),2.36-2.00(二m,4,2 CH2).計算值C12H11N2O2Cl2Br:C,39.38；H,3.03；N,7.65；總Cl,29.06.實測值C,39.20；H,3.17；N,7.56；總 Cl,28.95.實施例7(1α,2α,4β)-4-[5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇將(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯(實施例6中d部分，600mg,1.33mmol)和環(huán)丙胺(Aldrich,0.92ml,13.3mmol)在無水乙醇(10ml)所得的溶液回流36小時。再加入0.47ml的環(huán)丙胺并繼續(xù)回流16小時。將1N氫氧化鈉(1.3ml)加入到上述冷卻的溶液并將揮發(fā)物于真空下蒸發(fā)。將殘留的褐色油狀物經(jīng)硅膠層析。用5％甲醇-氯仿洗脫，從乙酸乙酯-己烷中結(jié)晶后得白色晶體狀標題化合物(352mg,77％),m.p.235-236℃；1H-NMR(DMSO-d6)6:7.47和7.25(both s,1每個，2芳香的CH).7.30(d,J=2.1 Hz,1,NH),5.15-4.90(m,1,NCH),4.75(d,J=3.5 Hz,2,2OH),4.3-4.2(m,2,2OCH),2.8-2.7(m,1,CH),2.2-1.85(m,4,2CH2),0.8-0.5(m,4，環(huán)丙基).計算值C15H17N3O2Cl2:C,52.65；H,5.01；N,12.28；Cl,20.72.實測值C,52.69；H,5.09；N,12.22；Cl,20.80.實施例8(1α,2α,4β)-4-[5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇將(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯(實施例6中d部分，550mg,1.22mmol)和異丙胺(Fluka,1.04ml,12.2mmol)在2-甲氧基乙醇(15ml)中所得溶液一起回流8小時。將1N氫氧化鈉(1.2ml)加入到冷卻后的反應溶液中并在真空下將揮發(fā)物蒸發(fā)。殘余油狀物經(jīng)硅膠層析。用15％甲醇-氯仿洗脫，從乙酸乙酯-己烷中結(jié)晶后得到標題化合物，為白色晶體(270mg,64％),m.p.200-201℃1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.39和7.21(兩個s,1每個，2芳香的CH),6.84(d,J=7.6Hz,1,NH),5.2-5.0(m,1,NCH),4.75(m,2,2OH),4.3-4.2(m,2,2OCH),4.1-3.9(m,1,CHNH),2.2-1.9(m,4,2CH2),1.22(d,J=6.4Hz,6,2Me).計算值C15H19N3O2Cl2:C,52.33；H,5.56；N,12.21；Cl,20.60.實測值C,52.28；H,5.54；N,12.11；Cl,20.53.實施例9(1α,2α,4β)-4-[5,6-二氯-2-(氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇將(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇(實施例6中e部分，350mg,0.95mmol)和氮雜環(huán)丁烷(Aldrich,250mg,4.4mmol,98％)在無水乙醇(15ml)中所得溶液一起回流45分鐘。將1N氫氧化鈉(1.0ml)加入到冷卻后的溶液中并將揮發(fā)物在真空下蒸發(fā)。殘留固體從乙醇中結(jié)晶得到白色晶體標題化合物(245mg,75％),m.p.247-249℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.56和7.42(現(xiàn)個s,1每個，2芳香的CH)5.0-4.2(m,3,NCH and 2OH),4.3-4.2(m,2,2OCH),4.18(t,J=7.6Hz,4,2CH2N)2.45-1.8(m,6,3CH2).計算值C15H17N3O2Cl2:C,52.65；H,5.01；N,12.28；Cl,20.72.實測值C,52.83；H,5.19；N,12.09；Cl,20.62.實施例10(1α,2α,4β)-4-[5,6-二氯-2-(叔-丁基氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇將(1α,2α,4β)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯(實施例6中d部分，750mg,2.00mmol)在叔丁胺(Aldrich，10ml)中的溶液在攪拌在Parr瓶中于150℃加熱3天。將1N氫氧化鈉(2.0ml)加入到冷卻的溶液中并在真空下將揮發(fā)物蒸發(fā)。將殘留的棕色油狀物經(jīng)硅膠層析。用乙酸乙酯洗脫從乙醇-水中結(jié)晶后，得到白色結(jié)晶狀標題化合物(380mg,49％),mp 113-116℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.44和7.23(兩個s,1每個，2芳香的CH),6.39(s,1,NH),5.25-5.05(m,1,NCH),4.75(d,J=3.7 Hz,2,2OH),4.3-4.2(m,2,2OCH),2.2-1.9(m,4,2CH2),1.46(s,9,3Me).計算值C16H21N3O2Cl2·1.5H2O:C,49.88；H,6.28；N,10.91；Cl,18.40.實測值C,50.04；H,6.31；N,10.82；Cl,18.17.實施例11(1α,2α,4α)-4-[5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇a)(1α,2α,4α)-4-(4,5-二氯-2-硝基苯胺基)-1,2-環(huán)戊二醇于室溫氫氣環(huán)境中在Parr振搖器上將(1α,3α,4β)-N-(3,4-二羥基-1-環(huán)戊基)氨基甲酸芐酯(實施例6中b部分，7.30g,29.1mmol)在乙醇(250ml)中的溶液與10％鈀-炭(750mg)振搖5.0小時。將催化劑濾除(硅藻土)并將揮發(fā)物在真空下蒸發(fā)。將殘余油狀物溶于無水二噁烷(100ml)-N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中，并在氮氣下與無水碳酸鉀粉(12.0g,87.2mmol,98％)和1,2,4-三氯-5-硝基苯(Aldrich,6.78g,29.1mmol,97％)回流3天。把固體過濾掉并將濾液在真空下濃縮得到一種紅色油狀物。該油狀物經(jīng)硅膠層析。用10％甲醇-氯仿洗脫得到黃色固體標題化合物(4.80g,53％)。從乙酸乙酯中重結(jié)晶得到黃色晶狀標題化合物，mp137-139℃。計算值C11H12N2O4Cl2:C,43.02；H,3.94；N,9.12；Cl,23.09.實測值C,43.21；H,4.01；N,8.99；Cl,22.95.b)(1α,2α,4α)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯將(1α,2α,4α)-4-(5,6-二氯-2-硝基苯胺基)-1,2-環(huán)戊二醇(該實施例中a部分，4.55g,14.8mmol)、鐵粉(Fisher電解的，94.5％,4.36g,74.1毫當量)和硫酸亞鐵7水合物(Aldrich,2.00g,7.40毫當量)在3∶1乙醇一水(300ml)中和3滴濃鹽酸的混合物在攪拌下回流3.0小時。把固體過濾出并將濾液在真空下濃縮為棕色油狀物。該油狀物在氯仿(50ml)中的溶液和原甲酸三乙酯(19.6ml,118mmol)和甲磺酸(0.10ml,1.50mmol)一起回流1.5小時。把揮發(fā)物蒸發(fā)(在真空下)并將殘余油狀物溶解于1N鹽酸(50ml)中，在室溫下攪拌1.0小時。將溶液用1N氫氧化鈉中和，將揮發(fā)物蒸發(fā)，將殘留物溶于5％甲醇-氯仿中，通過硅膠過濾。濾液濃縮為褐色固體，于室溫下將該固體在吡啶(50ml)-醋酸酐(4ml)中攪拌24小時。把揮發(fā)物在真空下蒸發(fā)。殘余油狀物溶于氯仿中。該氯仿溶液用飽和碳酸氫鈉溶液洗然后用水洗，干燥(硫酸鈉)。蒸發(fā)揮發(fā)物后剩下油狀物，將油狀物溶于四氫呋喃(25ml)中并回流。將N-溴代琥珀酸亞胺(2.91g,60.1mmol)一次性加至回流液中。繼續(xù)回流10分鐘。如實施例6中d部分所述進行后處理，得到白色晶體狀標題化合物(2.58g,38％),mp 205-207℃。計算值C16H15N2O4Cl2Br:C,42.69；H,3.36；N,6.22；總Cl,23.63.實測值C,42.63；H,3.30；N,6.16；總Cl,23.66.c)(1α,2α,4α)-4-[5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇將(1α,2α,4α)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯溶液(本實施例中b部分，600mg,1.33mmol)按照實施例8中的步驟轉(zhuǎn)變成標題化合物。從乙醇-水中結(jié)晶得到白色晶狀的標題化合物(200mg,44％),mp 228-230℃；230 ℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.78和7.35(兩個s,1每個，2芳香的CH),7.28(d,J=7.3Hz,1,NH),5.34(d,J=3.7Hz,2,2OH),5.0-4.8(m,1,CHNH),4.0-3.8(m,3,2OCH and NCH),2.3-2.1和2.05-1.9(兩個m,4,2CHs),1.24(d,J=6.5 Hz.6.2Me).計算值C15H19N3O2Cl2·0.25H2O:C,51.66H,5.64；N,12.05；Cl,20.33.實測值C,51.52；H,5.45；N,11.84；Cl,20.44.實施例12(±)-(1α,2β,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯a)(±)-(1α,2β,4α)-1,2-二甲醇環(huán)戊-4-醇按照實施例1中a部分的方法，將(±)-反式-4-氧代-1,2-環(huán)戊烷二羧酸二甲酯(Legraverend等，Heterocycles 1991,32:1785-1792；8.40g,41.9mmol)還原，從乙酸乙酯-甲醇中固化后得到為灰白色固體的標題化合物(5.80g,95％),mp 57-59℃。計算值C7H14O3:C,57.51；H,9.65.實測值:C,57.29；H,9.56.b)(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基二甲基二新戊酸酯將(±)-(1α,2β,4α)-1,2-二甲醇環(huán)戊-4-醇(本實施例a部分，5.40g,17.18mmol)和吡啶(21ml,130mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液冷卻(鹽水/冰浴)并用20分鐘將三甲基乙酰氯(8.10ml,65.13mmol)加進去。將上述溶液攪拌30分鐘，用乙酸乙酯(500ml)稀釋，用0.1NHCl(500ml)洗，然后用水(200ml)洗。將有機層干燥(硫酸鈉)，過濾，在真空中濃縮，得到油狀物，該油狀物通過硅膠60層析純化。用10％乙酸乙酯-己烷洗脫洗去不需要的(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基二甲基三新戊酸酯(2.50g)。繼續(xù)用50％乙酸乙酯-己烷洗脫得到(±)-(1α,2β,4α)-(4-羥基-1,2-亞環(huán)戊基)二甲基二新戊酸酯，為油狀物(5.40g,50％)，使該油狀物按實施例1中d部分中描述的方法和5,6-二氯苯并咪唑(Townsend和Revankar,Chem.Rev,1970,70,389，以及在那里引用的文獻)(3.85g,20.6mmol)反應。該殘余油狀物經(jīng)硅膠層析法，用50％乙酸乙酯-己烷洗脫。濃縮得到標題化合物， 以及30％肼二乙基二羧酸酯(NMR)，通過將混合物溶解于乙醚(200ml)中并用水(5×25ml)洗將其除去。將有機相干燥(硫酸鈉)，在真空中濃縮然后將油狀物從己烷中固化得到標題化合物(5.25g,63％)，為白色固體。將濾液濃縮并再沉淀又得到標題化合物(1.40g,17％),mp 117-119℃。
計算值 C24H32N2O4Cl2:C,59.63；H,6.67；N,5.79；Cl,14.67.實測值C,59.78；H,6.71；N,5.78；Cl,14.46.c)(±)-(1α,2β,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基二甲基二新戊酸酯按照實施例1中e部分中的方法，將(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基二甲基二新戊酸酯(本實施例中b部分，5.07g,10.5mmol)溴化。將粗產(chǎn)物在己烷中研磨得到標題化合物，為灰白色固體(4.99g,85％),mp129-130℃。
計算值C24H31N2O4BrCl2:C,51.26；H,5.56；N,4.98；Br,14.21；Cl,12.61.實測值C,51.18；H,5.57；N,5.03；Br,14.20；Cl,12.60.實施例13(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇a)(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯將(±)-(1α,2β,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯(實施例12中c部分，1.50g,2.67mmol)、環(huán)丙胺(9.0ml,50mmol)在無水EtOH(20ml)中的溶液在氮氣下回流1天。將黃色溶液用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用稀碳酸氫鈉(2×50ml)洗，將有機相干燥(硫酸鈉)，然后在真空下濃縮。將殘余固體在20％乙酸乙酯-己烷中研磨得到標題化合物，為白色結(jié)晶固體(1.31g,94％),mp92-94℃。
計算值C27H37N3O4Cl2:C,60.22；H,6.93；N,7.80；Cl,13.17.實測值C,60.27；H,6.98；N,7.70；Cl,13.15.b)(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯(本實施例中a部分，1.20g,2.23mmol)在0.5N NaOH(40ml)和乙醇(20ml)中回流2小時。將上述黃色溶液用1N NaOH調(diào)到pH為7，濃縮至干，并通過硅膠層析法純化。用10％甲醇-氯仿洗脫得到0.702g標題化合物的三甲基乙酸鹽。將該固體溶解于乙醇(20ml)中，然后通過一個3×1cm Amberlite IRA-400(OH形式)離子交換樹脂(Aldrich)，用50ml乙醇洗脫。濃縮并在水中研磨得到標題化合物(0.260g,31％)，為灰白色固體，mp 229-231℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.50,7.46(兩個s,每個1，苯并咪唑H),7.20(bs,1,NH),4.83(t,J=4.9Hz,1,OH),4.68(t,J=5 Hz,1,OH),4.68(m,1,CHN),3.57-3.33(m,4,2CH2OH),2.76(m,1,CHc-Pr),2.29-1.76(m,6，環(huán)戊基H),0.74,0.56(每個m，每個1,c-PrCH2).
計算值C17H21N3O2Cl2·0.10 EtOH·0.05 H2O:C,54.98；H,5.82；N,11.18；Cl,18.87.實測值C,54.95；H,5.90；N,11.09；Cl,18.91.實施例14(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇a)(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯通過實施例13中a部分的方法，使(±)-(1α,2β,4α)-[4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯(實施例12中c部分，1.00g,1.78mmol)與異丙胺反應并從乙酸乙酯-己烷中固化以后得到標題化合物，為白色固體(0.95g,98％),mp 140-145℃。
計算值C27H39N3O4Cl2:C,60.00；H,7.27；N,7.77；Cl,13.12.實測值C,59.81；H,7.26；N,7.73；Cl,13.19.b)(±)-(1α,2β,4c)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(±)-(1α,2β,4α)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲基二新戊酸酯(本實施例中a部分，0.84g,1.70mmol)在0.5N NaOH(40ml)和乙醇(30ml)中回流2小時。將上述無色溶液加1N HCl(約20ml)酸化至pH為1，并與水(3X)共蒸發(fā)。過濾并用水洗后，分離為鹽酸鹽的標題化合物，為白色固體(0.60g,78％),mp175-180℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.66(br s,1,NH),7.86,7.63(兩個s，每個1，苯并咪唑H),5.01(m,1,CHN),4.02(m,1,CHMe2),3.59-3.35(m,4,2CH2OH),2.35-1.87(m,6，環(huán)戊基H),1.32(d,J=6.2 Hz,2,2Me).
計算值C17H23N3O2Cl2·1.0 HCl·1.0 H2O:C,47.64；H,6.16；N,9.80；Cl,24.82.實測值C,47.76；H,6.45；N,9.66；Cl,24.57.實施例15(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-4-碘-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇a)(5a’-α,8a’-α,7’-β)六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-基-甲磺酸酯在攪拌下將(5a’-α,8a’-α,7’-β)六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-醇(實施例1中b部分，10.5g,46.4mmol)和三乙胺(9.7ml,65mmol)在無水二氯甲烷(200ml)中的溶液冷卻(冰浴)，同時用10分鐘滴加甲磺酰氯(4.0ml,51mmol,98％)。15分鐘后，上述反應淤漿依次用冰-水混合物(各100ml)、0.5N HCl和鹽水洗。干燥(硫酸鈉)有機層并通過硅膠塞(2×5cm)抽濾，用乙酸乙酯(2×50ml)洗脫。濃縮后得到無色油狀物，放置后固化得到標題化合物，為白色晶狀固體(14.07g,99％),mp 90-94℃。
計算值C14H24O5S:C,55.24；H,7.95；S,10.53.實測值C,55.12；H,7.99；S,10.59.b)(6a’-a,8a’-a,7’-a)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]三氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑于氮氣下向攪拌的5,6-二氯-2-異丙氨基-苯并咪唑(PCT申請?zhí)朑B 95.01597,10.3g,42.2mmol)在無水四氫呋喃(200ml)的溶液中加入叔丁醇鉀(Aldrich,40ml,1M在四氫呋喃中)。將上述棕色溶液加熱到60℃30分鐘，然后將(5a’-α,8a'-α,7’-β)六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7-基-甲磺酸酯(本實施例中a部分，12.9g,42.2mmol)在四氫呋喃(50ml)中的溶液一次性加入(注射器)。將反應混合物攪拌24小時，以氯仿(500ml)稀釋，用水(2×100ml)洗。將有機層干燥(硫酸鈉)并在真空下濃縮得到棕色固體，將該固體經(jīng)硅膠層析法。用10-50％的乙酸乙酯-己烷洗脫得到標題化合物，為灰白色泡沫狀物(16.6g,82％),mp 157-159℃。
計算值C23H31N3Cl2O2:C,55.24；H,7.95；S,10.53.實測值C,55.12；H,7.99；S,10.59.c)(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-4-碘-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇在氮氣下于-78℃(干冰/丙酮)向攪拌的(6a’-α,8a’-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(本實施例中b部分，1.00g,2.21mmol)在無水四氫呋喃(15ml)中的溶液中用5分鐘滴加仲丁基鋰(Aldrich,8.6ml,0.90M在己炕中)。將產(chǎn)生的黃色淤漿攪拌1小時并將溶于四氫呋喃(1ml)的碘溶液(1.75g,7.74mmol)加入。將反應物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)中并用氯仿(2×100ml)萃取。將合并的有機萃取層用稀硫代硫酸鈉水溶液(50ml)洗，干燥(硫酸鈉)，并濃縮至干。通過硅膠60層析純化，以10-50％乙酸乙酯-己烷洗脫得到層析均一的白色固體(0.79g,62％)，它的1H-NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)相符。在四氫呋喃(10ml)和1NHCl(1.5ml)中攪拌解封12小時。抽濾，水洗和干燥后得到標題化合物，為白色固體(0.44g,55％),mp 238-241℃dec.。1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.20(bs,1,NH),7.42(s,1，芳香的CH),5.16(m,1,NCH),5.20-4.00(brd,3,2OH和1 HCl),4.30(m,1,NCH-i-Pr),3.62-3.37(m,4,2 CH2OH),2.52(m,2,CH),2.05(m,4,CH),1.31(d,J=6.4 Hz,6,2Me).
計算值C17H22N3O2Cl2l·1.0 HCl·1.0 H2O:C,36.95 H,4.56；N,7.60；Cl,19.24,l,22.96.實測值C,36.98；H,4.50；N,7.60；Cl,19.24,l,22.90.實施例16(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-4-溴-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇按照實施例15中c部分的方法，將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(1.0g,2.21mmol)鋰化(lithiated)并在-78℃用溴(約0.3ml)終止反應直至反應液顏色不褪去。按所述的方法處理和純化，得到標題化合物，為吸濕性鹽，將其用溶于甲醇中的1N NaOH中和。濃縮，在水中研磨，最后干燥得到標題化合物，為白色固體(0.29g，共35％),mp 195-198℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.30(s,1，芳香的CH),6.87(bd,J=7.6 Hz,1,NH),4.98(m,1,NCH),4.59(bs,2,2OH),4.16(m,1,NCH-i-Pr),3.54-3.35(m,4,2 CH2OH),2.02(m,6,CH),1.26(d,J=6.4 Hz,6,2 Me).
計算值C17H22N3O2Cl2Br:C,45.25 H,4.91；N,9.31；Cl,15.72,Br,17.71.實測值C,45.28；H,4.96；N,9.22；Cl,15.67,Br,17.67.實施例17(1α,2α,4β)-[4,5,6-三氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇按照實施例15中c部分的方法,將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(1.0g,2.21mmol)鋰化，然后在-78℃用六氯乙烷(0.50g)處理。按所述方法處理和純化后得到標題化合物，為白色鹽酸鹽(0.35g，共40％),mp 184-186℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.27(bs,1,NH),7.42(s,1,芳香的CH),5.20(m,1,NCH),4.80-4.00(brd,2OH和1HCl),4.24(m,1,NCH-i-Pr),3.60-3.30(m,4,2CH2OH),2.00(m,6,CH),1.31(d,J=6.4 Hz,6,2Me).
計算值C17H22N3O2Cl3·1.0 HCl·1.2 H2O:C,43.93 H,5.51；N,9.04；Cl,30.51.實測值C,43.99；H,5.86；N,8.98；Cl,30.74.實施例18(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-4-甲基-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中的(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(實施例5,1.10g,3.31mmol)先后用咪唑(0.71g,10.0mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1.10g,6.94mmol,97％)處理，15分鐘后，加入甲醇并在真空下將揮發(fā)物除去。殘留的固體通過硅膠層析純化，用5-20％乙酸乙酯-己烷洗脫，得到易碎的泡沫狀物(1.50g,85％),它通過TLC顯示為均一的，NMR和質(zhì)譜顯示與結(jié)構(gòu)相符。將上述化合物在無水四氫呋喃(15ml)的溶液于-78℃(干冰/丙酮)攪拌并用5分鐘滴加仲丁基鋰(Aldrich,8.9ml,0.90M在己烷中)處理。將產(chǎn)生的淤漿攪拌1小時，用甲基碘(0.5ml)處理15分鐘，然后用1N HCl(8.0ml)終止反應并升溫至室溫。該混合物用氯仿(50ml)萃取，將有機萃取層干燥(硫酸鈉)，并濃縮至干。經(jīng)硅膠層析法純化，以5-50％乙酸乙酯-己烷洗脫得層析均一的棕色油狀物(1.48g,96％),NMR和質(zhì)譜顯示與結(jié)構(gòu)相符。脫甲硅基反應可以通過在四氫呋喃(25ml)和1N HCl(2.5ml)中攪拌24小時完成。濃縮中和后的溶液(1N NaOH)并通過硅膠層析法純化。用10％甲醇-乙酸乙酯洗脫得到標題化合物，為白色固體(0.55g,61％),mp 160-162℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.15(s,1，芳香的CH),6.55(bd,J=7.4 Hz,1,NH),4.96(m,1,NCH),4.58(t,J=5 Hz,2,2OH),4.13(m,1,NCH-i-Pr),3.56-3.39(m,4,2 CH2OH),2.47(s,3,Me),2.50(m,2,CH),2.01(m,4,CH),1.25(d,J=6.4 Hz,6,2 Me).
計算值C18H25N3O2Cl2:C,55.96 H,6.52；N,10.88；Cl,18.35.實測值C,55.87；H,6.52；N,10.84；Cl,18.39.實施例19(±)-(1α,2β,4α)-4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇a)N-(3-環(huán)戊烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯向3-環(huán)戊烯-1-羧酸(J.-P.Depres和A.E.Greene,J.Org.Chem.1984,49∶928-931；29.71g,0.261mol)、三乙胺(36.4ml)在叔丁醇(1L)中的溶液中加入二苯基磷酰疊氮化物(Aldrich,97％,74.0g,0.261mmol)。該溶液保持在60℃4小時。將氯化亞銅(1.3g)加入并在室溫下繼續(xù)攪拌18小時。將揮發(fā)物蒸發(fā)，殘留物溶于二氯甲烷(1250ml)中，用10％碳酸鈉(2×250ml)溶液洗滌并干燥(MgSO4)。將揮發(fā)物蒸發(fā)，將殘留物通過硅膠層析。用氯仿洗脫，從己烷中結(jié)晶得到標題化合物，白色結(jié)晶(22.63g,47％),mp 68-70℃。
計算值C10H17NO2:C,65.54 H,9.35；N,7.64.實測值C,65.53；H,9.40；N,7.59.b)(±)-(1α,2β,4α)-4-(4,5-二氯-2-硝基苯胺基)-1,2-環(huán)戊二醇向溶于二氯甲烷(110ml)的間-氯過苯甲酸(Aldrich,80％,12.98g,60.1mmol)冷卻(冰浴)混合液中加入溶于二氯甲烷(110ml)的N-(3-環(huán)戊烯-1-基)氨基甲酸叔-丁酯(11.0g,60.1mmol)溶液。將該混合物在室溫下攪拌18小時，又加入間-氯過苯甲酸(120mg)并繼續(xù)攪拌2小時。將固體過濾，用二氯甲烷(25ml)洗，并將合并的濾液和洗液與無水氫氧化鈣(Aldrich,98％,4.53g,60.1mmol)一起攪拌4小時。過濾出固體并將濾液濃縮得到白色蠟狀固體。將該固體溶于1N硫酸溶液(120ml)-二噁烷(20ml)中并將該溶液于60℃保持3.5小時。將產(chǎn)生的溶液冷卻，在真空下濃縮到60ml，并通過Amberlite IRA-400(OH形式)離子交換樹脂(500ml)洗滌。用水(800ml)洗脫，并在真空下蒸發(fā)水得到(±)-(1α,2β,4α)-4-氨基-1,2-環(huán)戊二醇，為無色油狀物(6.04g,87％),1H-NMR(DMSO-d6)與結(jié)構(gòu)相符。通過實施例6中c部分描述的方法將該油狀物轉(zhuǎn)變成標題化合物。粗產(chǎn)物通過硅膠墊純化，以10％甲醇-氯仿洗脫并用乙酸乙酯-甲醇結(jié)晶，得到標題化合物，為黃色結(jié)晶(6.34g,34％),mp 154-156℃。
計算值C11H12N2O2Cl2:C,43.02；H,3.94；N,9.12；Cl,23.09.實測值C,43.08；H,3.97；N,9.07；Cl,22.99.c)(±)-(1α,2β,4α)-4-(4,5-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯將(±)-(1α,2β,4α)-4-(4,5-二氯-2-硝基苯胺基)-1,2-環(huán)戊二醇(該實施例中b部分，7.00g,22.8mmol)通過實施例6中所述的方法轉(zhuǎn)變成標題化合物。通過硅膠柱純化，以5％甲醇-氯仿洗脫得標題化合物，為褐色的油狀物(4.68g,55％)。
計算值C16H16N2O4Cl2·0.05 EtOAc·0.25 H2O:C,51.19；H,4.48；N,7.37；Cl,18.65.實測值C,51.12；H,4.46；N,7.42；Cl,18.78.d)(±)-(1α,2β,4α)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯將(±)-(1α,2β,4α)-4-(5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯(該實施例中c部分，4.62g,12.5mmol)按照實施例6中d部分的方法溴化，經(jīng)從乙酸乙酯中固化后得到標題化合物，為白色固體(4.06g,73％),mp 151-152℃。
計算值C16H15N2O4Cl2Br:C,42.70；H,3.36；N,6.22；全Cl,18.05.實測值C,42.73；H,3.39；N,6.15；全Cl,23.60.e)(±)-(1α,2β,4α)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇將(±)-(1α,2β,4α)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二基二乙酸酯(該實施例中c部分，2.009,4.44mmol)按照實施例6中e部分的方法，可以轉(zhuǎn)變并從水中固化后得到標題化合物，為白色固體(1.33g,82％),mp 230-235℃dec.。1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.92,and 7.96(兩個s,1每個，2芳香的CH),5.61(d,J=2.6 Hz,1,OH),5.40-5.20(m,1 NCH),5.11(d,J=2.2 Hz,1,OH),4.104.0(m,2,2OCH),2.70-2.30(m，重疊溶劑，2CH),2.05-1.85(m,2,2CH).
計算值C12H11N2O2Cl2Br:C,39.38；H,3.03；N,7.65；全Cl,29.06.實測值C,39.43；H,3.07；N,7.59；全Cl,29.03.實施例20(±)-(1α,2β,4α)-4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇將(±)-(1α,2β,4α)-4-(2-溴-5,6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇(實施例19中e部分，400mg,1.09mmol)和異丙胺(Fluka,0.92ml,10.9mmol)在乙醇(10ml)-甲氧基乙醇(5ml)中的溶液回流24小時。再加入異丙胺(1.84ml)并繼續(xù)回流48小時。將1N氫氧化鈉(1.1ml)加入到冷卻的溶液中并在真空下將揮發(fā)物去除。殘余的白色固體經(jīng)硅膠層析。用10％甲醇-氯仿洗脫，從水中分離得到(±)-(1α,2β,4α)-4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-環(huán)戊二醇，為白色固體(294mg,77％),mp 198-200℃。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.84，和7.36(兩個s,1每個,2芳香的CH),7.17(d,j=2.5Hz,1,NH),5.82(d,J=2.5 Hz,1,OH),5.20-5.00(m,1 NCH),4.99(d,J=2.5 Hz,1,OH),4.10-3.95(m,3,2OCH和CHNH),2.60-2.40(m,重疊溶劑,2CH),1.22(d,J=6.5 Hz,6,2CH3)
計算值C15H19N3O2Cl2Br·0.3H2O:C,51.53；H,5.65；N,12.02；全Cl,20.28.實測值C,51.45；H,5.61；N,12.02；全Cl.20.28.實施例21(1α,2α,4β)-[4-(4-二甲基甲酰胺-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇按照實施例15中c部分的方法，將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(1.0g,2.21mmol)鋰化，然后在-78℃用二甲基氨基甲酰氯(0.35ml,3.80mmol)處理。0.5小時后，將反應物用1N HCl中和到pH為7，然后在水和乙酸乙酯之間分配。將有機層干燥(硫酸鈉)。濃縮并從乙酸乙酯中沉淀得到封閉的中間體，為白色固體(0.94g)，該固體可以直接用1N HCl(1.5ml)和四氫呋喃(15ml)按以前描述的方法去保護。將中和(1N NaOH)后的溶液濃縮并通過硅膠層析法純化。用10％甲醇-氯仿洗脫得到為白色泡沫狀物的標題化合物(0.42g，其71％),mp＞250℃，分解；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.29(s,1，芳香的CH),6.74(d,J=7.6 Hz,1,NH),5.20(m,1,CHN),4.59(t,J=4.9 Hz,2OH),3.34,2.76(每個s，每個3,2Me),2.00(m,1,CH),1.24,1.22(每個d,J=6.5,6.4 Hz,2Me).計算值C20H28N4O3Cl2·0.40 H2O:C,53.31；H,6.44；N,12.43；Cl,15.74.實測值C,53.27；H,6.42；N,12.42；Cl,15.89.實施例22(1α,2α,4β)-[4-(4-羧基-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇按照實施例15中c部分的方法，將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(1.0g,2.21mmol)在-78℃下鋰化，攪拌0.5小時，然后于-78℃將二氧化碳(利用干冰升華并通過氯化鈣干燥管通入)通入反應液中2小時。將產(chǎn)生的淤漿小心(CO2放出)調(diào)pH到1(冰/1NHCl)，用二氯甲烷萃取，并濃縮至干。按實施例19中描述的方法將粗的羧酸去保護，濃縮，并在Lichroprep RP-18反相硅膠(40-63μm,50g)柱上純化，用10％甲醇-水洗脫得到標題化合物(0.50g,50％)，為易碎的固體，mp＞250℃(分解)；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.00(s,1，芳香的CH),6.35(d,J=7Hz,1,NH),4.95(m,1,CHN),4.65(bs,2OH),4.05(m,1,CHN),3.60-3.00(m,4,2CH2OH),2.10-1.80(m,6,CH),1.20(d,J=6.5Hz,6,2Me).
計算值C18H22N3O4Cl2Na·1.10 H2O:C,47.19；H,5.32；N,9.17；Cl,15.48；實測值C,47.46；H,5.25；N,9.13；Cl,15.12.實施例23(1α,2α,4β)-[4-(4-氟-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇按照實施例15中c部分的方法，將(6a’-α,8a'-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(1.0g,2.21mmol)鋰化，然后用N-氟苯磺酰亞胺(0.70g,2.21mmol,Allied Signal Corp.)反應，并攪拌1小時。將反應混合物中和至pH 7(1N HCl)，濃縮至干，然后用硅膠層析純化。用二氯甲烷洗脫，得到0.70g(6a’-α,8a’-α,7’-α)-4-氟-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑和初始原料2∶1的混合物。將該混合物按照實施例20中描述的方法去保護，然后用乙酸酐(1.5ml)和吡啶(20ml)攪拌過夜?；?。按照實施例1中e部分描述的方法處理，層析，用20％乙酸乙酯-己烷洗脫除去低Rf值的4-H-苯并咪唑。依照實施例1中f部分描述的方法進行去酰化。粗產(chǎn)物經(jīng)層析，用10％甲醇-氯仿洗脫，從乙醇-水中結(jié)晶得到標題化合物，為白色結(jié)晶固體(0.140g，共15％),mp 209-211℃；1H-NMR(DMSO-d6)5:7.18(s,1，芳香的CH),6.81(bd,J=7.4Hz,1,NH),4.98(m,1,NCH),4.58(t,J=5Hz,2,2OH),4.07(m,1,NCH-i-Pr),3.58-3.32(m,4,2CH2OH),2.02(m,6,CH),1.25(d,J=6.4Hz,6,2Me).
計算值C17H22N3O2Cl2F:C,52.32 H,5.68；N,10.77；Cl,18.17.實測值C,52.38；H,5.72；N,10.68；Cl,18.09.實施例24(1α,2α,4β)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇(6a’-α,8a’-α,7’-α)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑依照實施例15中c部分的方法，將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(0.50g,1.05mmol)在四氫呋喃(7ml)中鋰化，然后用溴化銅(Ⅰ)(0.100g,0.11mmol)處理。將上述黑色反應混合物用異戊二烯溴(0.60ml,5.55mmol)處理并在-78℃下攪拌5小時,TLC(硅膠板，用50％乙酸乙酯-己烷展開)表示有大約10％初始原料存在。將反應混合物中和到pH為7，用乙酸乙酯萃取，硫酸鈉干燥，濃縮至干。硅膠層析純化，用20％乙酸乙酯-己烷洗脫得到(6a’-α,8a’-α,7’-α)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑，為白色固體(0.40g,74％),mp141-143℃。
計算值C27H37N3O2Cl2:C,64.02；H,7.36；N,8.30；Cl,14.00.實測值C,64.12；H,7.43；N,8.25；Cl,13.92.b)(1α,2α,4β)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇按照在實施例20中描述的方法將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(0.300g，實施例27,a部分)去保護。硅膠層析純化，用10％甲醇-氯仿洗脫，得到標題化合物，為白色固體(0.140g,65％),mp90-92℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.20(s,1芳基-H),6.56(d,J=7.3 Hz,1,NH),4.97(m,1,CHN),4.72,4.50(每個bs，每個1,=CH2),4.58(t,J=5.10Hz,2OH),4.04(m,1,CHN),3.68-3.42(m,4,2CH2OH),3.68(bs,2,CH2),2.03(m,6,CH),1.74(s,3,CHMe),1.25(d,J=6.4Hz,6,2Me).
計算值C21H29N3O2Cl2·0.30 H2O:C,58.41；H,6.91；N,9.73；Cl,16.42.實測值C,58.41；H,6.88；N,9.77；Cl,16.48.實施例25(1α,2α,4β)-[4-(2-甲基-1-丙基)-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇將(6a’-α,8a’-α,7’-α)-[4-(2-甲基-1-丙烯基)-5,6-二氯-1-[六氫螺(環(huán)己烷-1,3’-1H-環(huán)戊[e][1,3]二氧雜庚因)-7’-基]-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑(0.40g，實施例28中a部分方法制得)溶解于乙醇(25ml)中，用10％鈀-炭(60mg)處理，然后在Parr振搖器上于40psi壓力下氫化反應12小時。將催化劑在減壓下通過硅藻土過濾掉。所得無色濾液濃縮至干并按實施例20中描述的方法解封。經(jīng)硅膠層析，以10％甲醇-氯仿洗脫并從乙醇-水中重結(jié)晶得到標題化合物，為白色固體(0.160g,51％),mp100-102℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.16(s,1，芳基-H),6.51(d,J=7.3Hz,1,NH),4.96(m,1,CHN),4.58(t,J=5.0 Hz,2OH),4.58(m,1,CHN),3.68-3.42(m,4,2CH2OH),2.87(d,J=7 Hz,2,CH2CHMe2),2.18-1.95(m,7,CH),1.25(d,J=6.7Hz,6,2Me),0.89(d,J=6.6 Hz,6,2Me).
計算值C21H31N3O2Cl2·1.0H2O:C,56.50H；7.45；N,9.41；Cl,15.88.實測值C,56.48；H,7.44；N,9.26；Cl,15.76.實施例26片劑以下制劑A、B和C是通過將含有povidone溶液的組分進行濕法制粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片而制備。制劑Amg/片活性組份 250乳糖B.P. 210Povidone B.P. 15羥乙酸淀粉鈉 20硬脂酸鎂 5500制劑Bmg/片活性組份 250乳糖B.P. 150AvicelpH 101 60Povidone B.P. 15羥乙酸淀粉鈉 20硬脂酸鎂 5500制劑Cmg/片活性組份 100乳糖B.P. 200淀粉 50Povidone5硬脂酸鎂4359下面制劑D和E是將混合的組份直接壓片制成。在制劑E中的乳糖是直接壓制型(Dairy Crest-“Zeparox”)。制劑Dmg/片活性組份250預先凝膠化的淀粉NF 15 150400制劑Emg/片活性組份250乳糖B.P.150Avicel 100500制劑F(控釋制劑)該制劑是通過將含有Povidone溶液的組份進行濕法制粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓制而制備。
mg/片活性組份500羥丙基甲基纖維素112(Methocel K4M Premium)乳糖B.P.53Povidone B.P. 28硬脂酸鎂7700藥物大約在6-8小時時開始釋放，12小時以后釋放完畢。實施例27膠囊制劑制劑A膠囊制劑是通過上述實施例1中制劑D中的活性成份混合并裝入由兩部分組成的硬明膠膠囊制成。用相似的方法制備制劑B(見下)。制劑Bmg/膠囊活性組份250乳糖B.P.143羥乙酸淀粉鈉25硬脂酸鎂2420制劑Cmg/膠囊活性組份250大粒凝膠4000 B.P. 350600制劑C膠囊的制備是通過熔化大粒凝膠4000B.P.，接著將活性組份分散于熔化物中，然后把熔化混合物填充入由二部分組成的硬明膠膠囊中而得。制劑Dmg/膠囊活性組份 250卵磷脂 100花生油 100450制劑D膠囊的制備是通過將活性組份分散于卵磷脂和花生油中并將分散物填入軟的、有彈性的明膠膠囊中而得。制劑E(控釋膠囊)以下控釋膠囊制劑的制備是通過使用一種擠壓機將組份a、b和c擠壓在一起，隨后在球型模具中擠壓成型并干燥。將干燥后的小丸包上釋放控制膜(d)，然后填充于由兩部分組成的硬明膠膠囊內(nèi)。
mg/膠囊(a)活性組份 250(b)微晶纖維素125(c)乳糖B.P. 125(d)乙基纖維素13513實施例28注射用制劑制劑Amg活性組份 200鹽酸溶液0.1M或氫氧化鈉溶液0.1M適量到pH為 4.0到7.0無菌水適量到 10ml
將活性組份溶解在大部分水中(35℃-40℃)，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)pH值在4.0和7.0之間。用水加入達到所需體積，通過無菌微孔濾器過濾到無菌的10ml琥珀色管制瓶中(類型1)并經(jīng)無菌密封封口。制劑B活性組份 125mg無菌的、無熱源的、pH為7的磷酸鹽緩沖液，適量加到 25ml實施例29:肌肉內(nèi)注射劑活性組份 200mg苯甲醇0.10gGlycofurol 75 1.45g注射用水加適量到 3.00ml將活性組份溶解于glycofurol中。然后加入苯甲醇并溶解，加水到3ml。將混合物通過一個無菌微孔過濾器過濾并封入無菌的3ml琥珀色管式瓶中(類型1)。實施例30糖漿劑活性組份 250mg山梨醇溶液1.50g甘油 2.00g苯甲酸鈉 0.005g香料，peach 17.42.31690.0125ml純水適量到5.00ml
將活性組份溶解在由甘油和大部分純水組成的混合液中。然后將苯甲酸鈉水溶液加入到上述溶液中，接著加入山梨醇溶液，最終加入香料。加入純凈水到所需體積并混合均勻。實施例31栓劑mg/膠囊栓劑活性組份 250硬脂肪，B.P.(WitepsolH15-Dynamit Nobel)17702020將五分之一的Witepsol H15在一個帶蒸汽套的平鍋中于45℃(最高)熔化。把活性組份通過一個200μM的濾網(wǎng)過濾并在用裝有切割頭的Silverson混合下加到熔化的基質(zhì)中，直到均勻分散為止。保持混合物溫度在45℃，將剩余的Witepsol H15加到混懸劑中并攪拌保證均一混合。將全部混懸物通過一個250μm的不銹鋼篩子過篩，并不斷地攪拌，冷卻到40℃。在38-40℃，將混合好的2.02g混合物填入合適的2ml的塑料模具中。將該栓劑冷卻到室溫。實施例32陰道栓劑mg/陰道栓活性組份 250脫水右旋糖 380馬鈴薯淀粉 363硬脂酸鎂 71000將上述組份直接混合并通過把混合好的成分直接壓制而制備陰道栓。實施例33抗病毒活性(a)CMV測定人類巨細胞病毒(HCMV)是利用MRC5(人類胚胎的肺)細胞單層在多孔碟上進行測定的。使用的是標準CMV株AD169。化合物的活性是通過空斑減少試驗測定，其中用HCMV混懸物感染細胞單層，然后用營養(yǎng)的羧甲基纖維素以膠的形式涂層保證病毒沒有擴散整個培養(yǎng)基。將已知摩爾濃度范圍的化合物結(jié)合在營養(yǎng)物質(zhì)涂層中。在每一藥物濃度下的空斑數(shù)是以對照物的百分比表示，并畫出劑量-效應曲線。(b)細胞毒性細胞毒性是用細胞抑制測定評價將生長于96-孔微滴定平皿上的Vero細胞暴露于不同稀釋度的藥物，并且細胞生存性是利用每天在同樣的培養(yǎng)基上對四唑每天(trtrazolium day)(MTT)的吸收進行測定的。在96小時細胞的生存性50％受到抑制所需的濃度稱為CCID50。
權(quán)利要求
1．式(Ⅰ)化合物和其幾何異構(gòu)體或混合物以及其生理官能衍生物
其中R1代表H、C1-4烷基和C3-5環(huán)烷基；R2代表H、C1-4烷基；或R1和R2與氮一起形成一個4或5元的雜環(huán)；R3代表BR4或R4，其中B代表一個橋基-C(O)NH-、-C(O)NC1-4烷基或-C(O)O-和R4代表H、C1-4烷基、C2-6鏈烯基或鹵素(優(yōu)選為氟)；和每個n獨立選自0、1或2(優(yōu)選為0或1)的整數(shù)。
2．權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物，其中R1為環(huán)丙基和R2為H。
3．權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物，其中R1或R2為H和另一個R1和R2基團代表異丙基。
4．權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物，其中R1或R2為H和另一個R1或R2基團代表叔丁基。
5．按照權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物，其中R1和R2和氮一起形成一個氮雜環(huán)丁烯基(azetidenyl)。
6．按照權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物，其中R3為F和n為0或1。
7．按照權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物，其中R3為C1-4烷基或C2-6鏈烯基和n為0或1。
8．按照權(quán)利要求1到6的任何一項的式(Ⅰ)化合物，為1α,2α,4β或1β,2β,4α幾何形式。
9．按照權(quán)利要求6的式(Ⅰ)化合物，選自(1α,2α,4β)-4-[5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1b,2b,4a)-4-[5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1b,2b,4a)-4-[5,6-二氯-2-(氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；和(1b,2b,4a)-4-[5,6-二氯-2-(叔丁基氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-1,2-環(huán)戊二醇；(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；(1α,2α,4β)-[4-(4-氟-5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基)-1,2-亞環(huán)戊基]二甲醇；
10．按照權(quán)利要求1到9任何的一項的式(Ⅰ)化合物用于治療中。
11．對包括人在內(nèi)的感染的哺乳動物病毒感染的癥狀或后果的預防或治療的方法，該方法包括用按照權(quán)利要求1到9的任何一項的式(Ⅰ)化合物的有效治療劑量來治療所述動物。
12．權(quán)利要求1至9的任一項的式(Ⅰ)化合物在生產(chǎn)用于治療或預防病毒感染的藥物中的應用。
13．藥用制劑，它包括權(quán)利要求1至9任一項的式(Ⅰ)化合物和藥學上可接受的載體。
14．生產(chǎn)權(quán)利要求1所定義的式(Ⅰ)化合物或其生理上官能衍生物的方法，所述方法包括(A)使式(Ⅱ)化合物
(其中R1、R2和R3與上述定義相同)與式(Ⅲ)化合物或其保護形式反應
(其中L為離去基團和n與上述定義相同)；(B)使式(Ⅳ)一個化合物(其中n和R3與上述定義相同)或其被保護形式與一種或多種合適的試劑反應，并/或在一定條件下將式(Ⅳ)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槭?Ⅰ)化合物；
(C)使式(Ⅴ)化合物或其被保護形式(其中L1為離去基團，優(yōu)選為鹵素，例如Cl、Br、F和I,R3和n與上述定義的相同)反應
15．式(Ⅴ)化合物
其中L1代表鹵素；R3代表I、Cl、Br、F、CH3或H,n為0、1或2的整數(shù)。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)的苯并咪唑衍生物,其中:R
文檔編號C07D235/24GK1212683SQ97192658
公開日1999年3月31日 申請日期1997年1月3日 優(yōu)先權(quán)日1996年1月5日
發(fā)明者S·M·達魯格, M·W·安德森 申請人:葛蘭素集團有限公司